常染色体隐性遗传性远端肾小管酸中毒患儿ATP6V0A4和ATP6V1B1基因突变分析

目的 分析常染色体隐性遗传性远端肾小管酸中毒(rdRTA)患儿ATP6V0A4和ATP6V1B1基因的突变,进行基因型和表型的相关性研究.方法 PCR扩增基因组DNA,直接测序分析来自3个家系3例患儿的ATP6V0A4和ATP6V1B1基因的突变位点,选取不相关的100例健康人作为对照.结果 1例患儿携带ATP6V0A4基因的1个新的纯合无义突变(p.R194X);1例患儿携带ATP6V1B1基因1个新的杂合无义突变(p.R114X)和1个已经报道过的杂合突变p.I386fsX441;第3例患儿未发现以上2个基因的突变.结论 对中国rdRTA患者基因突变分析有利于了解该类疾病的基因型和表型的相关性,增强临床医生对该类疾病的认识和治疗.     

ATP6VOA2基因变异影响弹性纤维合成的机制研究进展

皮肤松弛症（congenital cutis laxa,CL）是一类因体内弹性纤维合成或分泌异常而导致身体各部位皮肤呈早衰样病变的疾病.皮肤松垂、弹性缺失和以面部为主的身体各部位皮肤出现与年龄不符的衰老征象是该病最主要的临床表现.CL多为遗传性,国内外也有重症感染或炎性疾病后出现获得性皮肤松弛的病例报道[1-2].目前,遗传性CL依照基因突变位点及遗传方式不同可分为5型：常染色体显性遗传性,突变定位在编码弹性蛋白的ELN基因;伴性遗传性,突变定位在Xq13.3上的ATP7A基因;常染色体隐性遗传Ⅰ型,该型由Fibulin5或Fibulin4突变引起;常染色体隐性遗传ⅡA型,主要由ATP6V0A2突变导致;常染色体隐性遗传ⅡB型,突变主要定位在PYCR1基因上[3-4].     

导致家族性血尿的 COL4A4基因遗传变异分析

目的:通过对1个家族性血尿家系进行遗传变异筛查,为家族性血尿病变提供遗传线索和证据。方法:本研究纳入的研究对象为1个4代含20名成员的家族性血尿家系。对该家系进行临床资料和实验室检查结果的收集和整理,留取家系中11名成员的外周血并用盐析法提取DNA用于遗传分析。首先选取包括先证者在内的3名家系成员进行全外显子组测序,根...     

汉族人群白细胞介素-6基因多态性与骨关节炎易感性的相关性研究

目的:探讨汉族人群骨关节炎易感性与白细胞介素(IL)-6基因启动子区-174G/C基因多态性的相关性。方法:选取青岛大学附属医院2012年3月至2013年3月收治的膝关节内外侧间隙高度差1.5 mm以上、Kellgren-Lawrance评分为3~4分的汉族原发性膝关节骨关节炎患者448例,招募汉族528例健康志愿者作...     

ATP6V1H基因在骨代谢中的作用

骨质疏松是临床常见的骨科疾病之一,能够导致多种并发症,该疾病致病因素较多,最新研究发现ATP6V 1H是导致骨质疏松发生的新型基因,并很有可能成为未来药物治疗骨质疏松症的新靶点,其编码的蛋白是囊泡型ATP酶的H亚基.本文介绍了H亚基的生物学结构和特性,总结了因ATP6V1H部分缺失引起人体及动物模型如斑马鱼、小鼠骨量减...     

CYP1A2基因多态性与前列腺癌的相关性研究

目的:评价CYP1A2基因单核苷酸多态性(SNPs)与前列腺癌分期分级的相关性。方法:对253例良性前列腺增生(BPH)患者与206例去势前列腺癌患者CYP1A2基因中rs2069514-3859(A>G)位点及rs2069525-1707(C>T)位点进行基因测序,并对各基因表型与前列腺癌的分期分级相关性进行统计学分析。结果:BPH及去势前列腺癌患者的两种CYP1A2单核苷酸多态性的发生率无明显差异(P>0.05),其基因多态性与前列腺癌的病理分期均无相关性(P>0.05);但rs2069525-1707(C>T)中含C等位基因型的前列腺癌Gleason评分多在7分以下(P=0.030,OR=4.658,95%CI:1.222～17.754)。结论:CYP1A2基因的SNPs与前列腺癌的病理分级之间可能有一定的相关性,但其发生机制及临床意义有待进一步证实及研究。     

胃癌中Syndecan-1、CD44V6的表达及其临床意义

我们应用SP免疫组织化学方法,研究12 4例胃癌标本石蜡切片的Syndecan 1和CD44V6表达情况,旨在探讨它们对胃癌进展程度和对预后的影响。一、材料与方法1.组织材料:收集本院1986～1996年间手术切除的胃癌标本12 4例,均经甲醛固定,石蜡包埋,每例选择有代表性的组织蜡块进行连续切片,分别供苏木素 伊红(HE)染色和SP免疫组织化学染色。2 .临床资料:本组12 4例胃癌中,男性94例,女性3 0例;年龄2 5～79岁,平均年龄5 6.5岁;按WHO1997年胃癌分类标准:乳头状腺癌2 2例,管状腺癌5 5例,低分化腺癌3 1例,印戒细胞癌10例,黏液腺癌6例;高、中分化癌83…     

成骨不全合并脑动脉粥样硬化-家系报告

目的 分析1例IV型成骨不全(osteogenesis imperfecta, OI)且伴有全身多处动脉粥样硬化家系的临床表型并明确其致病基因,文献复习成骨不全症和动脉粥样硬化的关系。方法 收集先证者的临床资料,对患者的血标本进行全外显子组测序,并对患者的几个患病家属和健康家属的唾液标本进行sanger验证。结果 先证者因发作晕厥,体检发现驼背和O型腿,既往有双腿反复脆性骨折的病史,颈胸腰椎正侧位X片提示有侧弯和前凸畸形,骨密度检测提示骨量减少,因其亲属也有易骨折的病史,呈常染色体显性遗传模式(AD),考虑可能为“IV型成骨不全症”。影像学检查提示全身多处血管动脉粥样硬化,右冠状动脉起始部稍细小。经全外显子组测序,在与患者临床表型相关的COL1A2基因(AD)检出了致病的杂合变异c.3159+2 T>A,家系验证呈家系共分离。携带该致病基因的家族成员的骨骼病情严重程度存在明显轻重差异。经文献复习,成骨不全症通过多种途径因素和动脉粥样硬化有一定的联系。结论 本家系为COL1A2基因杂合变异(c.3159+2 T>A)导致的成骨不全症,这是新报告的位点。成骨不全症与早发动脉粥样...     

常染色体隐性遗传Alport 综合征一家系COL4A3及COL4A4基因突变分析

目的 通过对有近亲婚配史的Alport综合征一家系Ⅳ型胶原α3和α4链的 COL4A3/COL4A4 基因分析，明确常染色体隐性遗传Alport综合征的基因突变,为该病的基因诊断和家系遗传咨询提供更为全面的理论基础｡ 方法 PCR扩增先证者DNA COL4A3/COL4A4 基因的共98个外显子，经直接测序，寻找突变位点，对有意义的突变经限制性内切酶AvaⅡ酶切在家系中分析验证｡ 结果 在该患者中共发现1个错义突变和10个序列变异｡其中在COL4A3 基因上发现一个位于42号外显子上的错义突变 G3725A,导致蛋白质Gly1242Asp的突变｡错义突变在患者中是纯合子，携带者中是杂合子，其他正常家系成员及筛查100条正常人染色体，未发现该突变｡10个序列变异为单核苷酸多态性改变｡ 结论 报道了一个国内较少见的常染色体隐性遗传Alport 综合征家系，同时经基因突变筛查发现Ⅳ型胶原α3链的一个新的致病性的基因突变｡     

散发性肝外胆管癌中RASSF1A基因启动子甲基化状态的研究

目的　检测肝外胆管癌组织中RASSF1A基因启动子甲基化及各CpG位点甲基化发生率。方法　采用甲基化特异性聚合酶链反应 (MS PCR)和半巢式PCR对RASSF1A基因启动子区域进行扩增 ,并对扩增产物克隆测序。结果　在全部 48例肝外胆管癌组织中 ,RASSF1A基因启动子区域存在CpG位点甲基化现象的共 2 8例 ,16个CpG位点甲基化平均发生率为 42 .45 % ,明显高于对照组 (χ2 =11.77,P <0 .0 1)。结论　RASSF1A基因启动子区域CpG岛甲基化是RASSF1A失活的主要机制 ,在肝外胆管癌的发生过程中发挥重要作用。     

COL1A1新发突变致儿童成骨不全症 1 例报道并文献复习

目的分析一例I型成骨不全症(osteogenesis imperfecta,OI)患儿的临床特点,并研究患者及其家系的基因突变情况及致病性鉴定。方法详细询问病史,分析骨转换指标、骨密度、骨骼X线特点。采用高通量测序法,对患儿骨病检测包225个相关致病基因各外显子编码区域的序列变异情况进行检测分析,采用PCR结合Sanger测序的方法验证突变位点变异情况。结果骨标志物提示高转换水平,影像学提示骨量低下,四肢长骨纤细、骨皮质变薄,基因检测发现患儿COL1A1基因编码区杂合变异c.2911_2912insAG(p.G971Efs*138),经Mutation Taster预测显示为致病性突变。先证者母亲、父亲以及妹妹均未携带该突变基因。结论发现了OI患者COL1A1基因新的突变位点c.2911_2912insAG(p.G971Efs*138),丰富了中国人OI群体COL1A1基因致病突变谱。     

人微管蛋白辅助因子A基因shRNA表达质粒的构建及鉴定

目的:构建针对微管蛋白辅助因子A(TBCA)基因的shRNA载体并进行鉴定。方法:针对人TBCA基因mRNA序列,设计合成编码shRNA的两条寡核苷酸链,经退火形成发卡寡核苷酸模板片段,经双酶切克隆至pSilencer2.0-U6-neo和pGCsi-U6-neo-GFP载体,进行酶切测序鉴定,脂质体转染后进行western blot测定。结果:酶切测序证实成功构建干扰质粒,脂质体转染786-0细胞系后24小时可见绿色荧光蛋白。Western blot证实TBCA表达量降低。结论:成功构建了针对TBCA基因shRNA表达载体,为下一步进行RNAi的相关研究奠定了基础。     

国人黑斑息肉病LKB1基因胚系突变的检测

目的　研究国人家族性黑斑息肉病患者LKB1基因胚系突变情况。　方法　对确诊的4个黑斑息肉病家系取血 ,提取基因组DNA ,用PCR方法扩增每个家系中 2例患者和 1名正常成人的LKB1的 9个外显子 ,以单链构象多态性方法检测 ,对可疑突变者测序。无异常的家系再对全部编码序列测序。　结果　 4个家系中 2个家系有第 84 2位胞苷酸 (C)缺失 ,引起LKB1基因移码突变 ,产生截短蛋白。另 2个家系未见LKB1外显子序列异常。　结论　LKB1基因胚系突变是本病重要的分子遗传学基础 ,第 84 2位C缺失可能是具有中华民族特点的突变热点和始祖突变。     

12例Gitelman综合征患者表型及基因型分析

目的 回顾性分析Gitelman综合征患者的表型及SLC12A3基因型特点,为进一步认识该病提供新的证据.方法 对2019年1月至2020年12月在空军军医大学第一附属医院就诊,且临床和基因检查明确确诊为Gitelman综合征的患者及其家系成员进行临床特征和基因变异分析.先收集患者临床资料,采用高通量测序筛查基因变异,...     

家族性乳腺癌易感基因-1突变的研究

为搞清我国乳腺癌易感基因的突变状况，我们采用聚合酶链反应-单链构像多态性分析（PCR-SSCP）、正反双向测序方法对天津市肿瘤医院1997至2003年家族性乳腺癌家系进行了BRCA1基因检测。现将结果报道如下。     

多囊卵巢综合征伴胰岛素抵抗患者肠道菌群分析

目的 基于16SrRNA高通量测序技术对多囊卵巢综合征(PCOS)伴胰岛素抵抗(IR)患者肠道菌群的结构特征进行分析.方法 选择2019年7月至2020年6月期间就诊于青岛大学附属烟台毓璜顶医院的新发PCOS女性,根据稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)分为IR-PCOS组(n=11)和NIR-PCOS组(n=10...     

家族遗传性股骨头缺血性坏死致病基因筛查与相关性研究

目的探讨COL2A1基因突变位点与家族遗传性股骨头缺血性坏死发生的相关性。方法对7例家族遗传性股骨头缺血性坏死患者外周血中COL2A1基因直接测序,确定致病相关突变位点。对家系其他成员(37人)和对照组(50名健康志愿者)采用聚合酶链式反应对突变区扩增,对突变区测序,确定其表型-基因型。对已确诊患者基因突变情况与临床特征进行相关性分析。结果家族遗传性股骨头缺血性坏死患者COL2A1基因存在2个突变位点,分别是p.Gly1170Ser、p.Gly717Ser。在家系非确诊37例样本中,13例出现p.Gly1170Ser突变,9例出现p.Gly717Ser突变。在健康志愿者50例样本中,3例出现p.Gly1170Ser突变,4例出现p.Gly717Ser突变。p.Gly1170Ser位点突变者较p.Gly717Ser突变位点者股骨头缺血性坏死出现年龄更早,发现时更严重,发病至就诊间隔时间更短。结论 COL2A1基因的p.Gly1170Ser、p.Gly717Ser突变与家族遗传性股骨头缺血性坏死有密切联系,可作为此类疾病筛查的参考指标。     

湖北地区育龄人群中叶酸代谢通路关键酶基因非编码区功能位点的多态性分析

目的:调查湖北地区育龄汉族人群中叶酸代谢通路关键酶基因非编码区功能位点的多态性分布情况.方法:选取2020年4月至2021年3月于本院进行孕前与孕期检查的790例受检者为研究对象,利用Sanger测序法对MTR基因(rs28372871和rs1131450)、MTRR基因(rs326119)以及CBS基因(rs2850...     

Cav-1 mRNA、S100A4 mRNA 和 CD31 的表达与前列腺癌转移及生存率关系的研究

目的 研究前列腺癌组织中Cav-1 mRNA、S100A4 mRNA和CD31的表达,探讨其与前列腺癌转移及生存率的关系. 方法 选取2004年1月至2006年5月行前列腺癌根治术切除的癌组织标本42例和癌旁组织12例.患者年龄58 ～ 86岁,平均(71.6±7.6)岁.Gleason评分≤6分17例,7分12例,≥8分13例.TNM分期:T116例,T29例,T311例,T46例.骨转移8例,无骨转移34例.术前PSA＜4μg/L 4例,4～ 10 μg/L 10例,＞10 μg/L 28例.12例前列腺癌旁组织作为对照组,取自距离肿瘤1 ～2 cm或另一叶(镜下验证无癌细胞)的正常前列腺组织.采用原位杂交法检测42例前列腺癌切除标本和12例癌旁组织中Cav-1 mRNA、S100A4 mRNA的表达;用CD31标记血管内皮细胞,计数肿瘤组织的微血管密度( microvessel density,MVD);结合临床资料分析三者与前列腺癌Gleason评分、TNM分期、PSA值及有无骨转移等特性的关系. 结果 前列腺癌组织中Cav-1 mRNA 和S100A4 mRNA阳性表达率分别为35.7％ (15/42)和47.6％ (20/42),癌旁组织分别为0和8.3％(1/12),各组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).Cav-1 mRNA和S100A4 mRNA阳性表达率均与前列腺癌Gleason评分、TNM分期及骨转移呈正相关.Cav-1 mRNA、S100A4 mRNA阴性表达者MVD分别为(62.8±10.4)/mm2和(63.3±12.0)/mm2,阳性表达者分别为(83.5±6.7)/mm2和(77.9±11.0 )/mm2,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).Cav-1 mRNA表达阳性组和阴性组5年生存率分别为46.7％ (7/15)、85.2％ (23/27),组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).S100A4 mRNA表达阳性组和阴性组5年生存率分别为50.0％ (10/20)、90.9％( 20/22),组间比较差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 Cav-1 mRNA和S100A4 mRNA阳性表达、MVD增高可能与前列腺痛进展、骨转移有关.Cav-1、S100A4均可能促进前列腺癌微血管形成,导致癌细胞骨转移,降低患者生存质最和生存率.     

多发性内分泌腺瘤病1型伴基因新突变1例MDT讨论

目的 总结1例多发性内分泌腺瘤病1型(MEN-1)患者的临床表现、发病机制、诊断及治疗经验,以提高对MEN-1的认识.方法 回顾性分析青岛大学附属烟台毓璜顶医院(我院)收治的1例存在基因新突变的MEN-1患者的临床诊治资料.结果 患者为1例73岁女性,以"腹痛、腹泻"4d就诊于我院,经多学科协作团队讨论后,行胰腺、肾上...