脂多糖诱导的急性炎症小鼠模型血清促炎因子与抑炎因子表达研究

目的:探讨脂多糖(LPS)诱导的急性炎症小鼠模型血清促炎因子、炎性因子表达情况。方法:将120只健康雄性ICR小鼠随机分为空白组、A组、B组和C组，各30只。分别给予A组、B组和C组小鼠经腹腔注射2、4 mg/kg和6 mg/kg LPS 0.9%氯化钠溶液，给予空白组小鼠等体积0.9%氯化钠溶液。建模成功后断头处死小鼠采集血液样本后检测血清中促炎因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-18]、抑炎因子(IL-4、IL-10、IL-13),取肾脏和肺脏采用TUNEL染色法检测细胞凋亡情况，采用Western blot技术检测肾脏和肺脏组织中核因子-κB(NF-κB)、磷酸化NF-κB(pNF-κB)、Toll样受体4(TLR4)相对表达水平。结果:A组、B组和C组小鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18、IL-4、IL-10、IL-13水平以及肺和肾脏组织细胞凋亡比例均显著高于空白组(均P<0.05)。随着LPS注射浓度增加，小鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18、IL-4、IL-10、IL-13水平以及肺和...     

不同浓度硼替佐米对K562／DNR细胞株NF—κB，IκB及P-gp表达的影响

目的：观察不同浓度硼替佐米（商品名万珂,PS-341）对柔红霉素（DNR）诱导的K562耐药细胞株（K562／DNR）核因子-κB（NF—κB）、抑制蛋白κB（IκB）及P-糖蛋白（P—gp）表达的影响,探讨PS-341逆转耐药的分子机制．方法：四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT法）进行耐药细胞株和PS-341细胞毒性的判定．以100mg／LDNR单用或联合应用0．4,4,40μg／LPS-341作用于K562／DNR36h,检测各组NF-κB,IκB及P—gp表达情况,并测定NF—κB活性,检测各组细胞凋亡率．结果：与阴性对照组相比,DNR可诱导NF—κB表达上调、IκB表达下调、P-gp表达上调;加用PS-341可显著抑制NF—κB表达,同时使IκB表达增加、P—gp表达下降,上述作用随PS-341浓度增加而增强．NF—κB活性（％）检测示：DNR组为25．9±2．5,DNR＋0．4μg／LPS-341组为20．3±2．0,DNR＋4μg／LPS-341组为6．1±2．5,DNR＋40μg/LPS-341组为4．6±1．6,加入PS-341后,NF—κB活性受抑,该作用随PS．341浓度增加而增强．细胞凋亡率（％）检测结果示：DNR组为22．5±4．6,DNR＋0．4μg／LPS-341组为31．0±5．2,DNR＋4μg／LPS-341组为43．6±7．7,DNR＋40μg/LPS．341组为56．0±9．3,加入PS-341后可提高DNR引起的细胞凋亡率,该作用随PS-341浓度的增加而增强．结论：PS-341可逆转白血病细胞耐药,该作用呈浓度依赖性．     

肿瘤坏死因子α中和抑制脂多糖诱导小鼠急性呼吸窘迫综合征肺组织细胞凋亡的机制探讨

目的 探讨肿瘤坏死因子α（ TNF-α） 中和抑制脂多糖（ LPS） 诱导小鼠急性呼吸窘迫综合征（ ARDS） 肺组织细胞凋亡的机制。方法 小鼠随机分为对照组、LPS 组和TNF-α中和组。采用LPS（ 5 mg/kg） 气道雾化造小鼠ARDS 模型, TNF-α中和组在滴入LPS 前24 h 腹腔注射依那西普（ 0. 4 mg/kg） , 滴入LPS 2 h 后收集标本。PCR 检测各组肺组织核转录因子κB（ NF-κB） p65、Bax、Bcl-2的表达水平,Western blot 检测NF-κB p65 和Erk1 /2 及二者磷酸化、Bax、Bcl-2 的蛋白水平; 测量各组肺组织干湿重比; HE 染色观察各组肺组织病理改变, 采用肺损伤半定量评分评估肺组织损伤程度。结果 LPS 组肺组织NF-κB 及Erk1 /2 活化水平升高、Bcl-2 与Bax 比降低（ P 〈0. 05） 。TNF-α中和能明显降低ARDS小鼠肺组织NF-κB 活化水平, Bcl-2 与Bax 比值升高。TNF-α中和组小鼠肺组织湿干重比及肺损伤半定量评分较LPS 组显著降低（ P 〈0. 05） 。结论 TNF-α中和抑制脂多糖诱导小鼠ARDS肺组织损伤, 其机制与抑制Erk1/2、NF-κB 活化, 上调Bcl-2/Bax 比值, 最终减少细胞凋亡密切相关。     

Ghrelin在重症急性胰腺炎并发肾损伤中的作用

目的探讨Ghrelin在重症急性胰腺炎（SAP）并肾损伤中的作用以及外源性褪黑素对其的影响。方法 72只大鼠随机分为对照组（C组,n=24）、SAP组（A组,n=24）和褪黑素干预组（M组,n=24）。A组分3次腹腔内注射6%L-精氨酸（L-Arg）1.5g·kg^-1·次^-1建立SAP模型;C组同法注射等量生理盐水;M组于首次注射L-Arg前0.5h腹腔内注射1%褪黑素50μg/kg。各实验组大鼠于末次腹腔内注射后6h、12h和24h分批处死。光镜下对胰腺和肾组织进行病理学评分,用血清淀粉酶试剂盒测定血清淀粉酶,用ELISA检测血清IL-6,应用RT-PCR检测肾脏Ghrelin及NF-κB p65mRNA表达。结果 A组各时点胰腺及肾脏病理评分、血清淀粉酶及IL-6、肾脏NF-κB p65mRNA表达均较C组显著升高（P〈0.05）,而同时点Ghrelin mRNA表达较C组明显降低（P〈0.05）;M组各时点胰腺及肾脏病理评分、血清淀粉酶及IL-6、肾脏NF-κB p65mRNA表达均较A组显著降低（P〈0.05）,而同时点Ghrelin mRNA表达较A组升高（P〈0.05）。结论 Ghrelin在急性胰腺炎并肾损伤时的表达可能与病变严重程度有关。外源性褪黑素可能通过抑制NF-κB p65的表达而减轻急性胰腺炎并肾损伤,并可能使Ghrelin在肾脏中表达增多。     

槲皮素通过抑制TLR4/NF-κB通路缓解脂多糖诱导的急性肾损伤

目的分析槲皮素对脂多糖诱导小鼠急性肾损伤的保护作用,并初步探讨其机制。方法将40 只BALB/c小鼠随机分 为4 组：对照组（无脂多糖及槲皮素）,脂多糖组（15 mg/kg 脂多糖）,低剂量组（25 mg/kg 槲皮素+15 mg/kg 脂多糖）,高剂量组 （50 mg/kg槲皮素+15 mg/kg脂多糖）。槲皮素予以胃灌注预处理,1次/d,连续3 d,对照组同时予以相同体积的生理盐水。最后 1次灌胃后1 h予以腹腔注射15 mg/kg的脂多糖,脂多糖干预24 h后结束实验,处死小鼠。观察小鼠肾脏组织病理变化和血肌 酐、尿素氮评估肾脏损伤情况,ELISA 法检测血清中TNF-α、IL-1β、IL-6 的表达情况,Western blot 检测肾脏胞浆中TLR-4、 MyD88、TRAF-6以及核内NF-κB p65蛋白的表达。结果槲皮素可以降低脂多糖诱导的急性肾损伤的肌酐、尿素氮水平以及肾 脏损伤的评分（P<0.05）,降低血清中TNF-α、IL-1β、IL-6的表达（P<0.05）,槲皮素抑制肾脏组织中TLR4、MyD88、TRAF-6及核 内NF-κB p65蛋白的表达（P<0.05）。结论槲皮素预处理可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路保护脂多糖诱导的小鼠急性肾损伤。     

姜黄素对睡眠剥夺小鼠认知功能的改善作用及其机制

目的：研究姜黄素对睡眠剥夺小鼠认知功能和海马组织中Toll样受体4/核转录因子κB （TLR4/NF-κB）通路的影响,探讨姜黄素治疗睡眠剥夺的机制。方法：将100只小鼠随机分为对照组,模型组,低、中和高剂量姜黄素组,每组20只。除对照组外,其他各组小鼠采用改良多平台水环境睡眠剥夺法建立睡眠剥夺模型;建模后,低、中和高剂量姜黄素组小鼠分别腹腔注射5、10及20 mg·kg^-1姜黄素,每天1次,共3 d。Morris水迷宫实验测定各组小鼠学习记忆能力,旷场实验测定小鼠垂直得分和水平得分,ELISA法检测各组小鼠海马组织中白细胞介素1β（IL-1β）和白细胞介素6（IL-6）水平,Western blotting法检测各组小鼠海马组织中TLR4和NF-κB p65蛋白表达水平,RT-PCR法检测各组小鼠海马组织中IL-1β、IL-6、TLR4和NF-κB mRNA表达水平。结果：与模型组比较,各剂量姜黄素组小鼠逃避潜伏期缩短（P<0.05）,停留原平台象限时间延长（P<0.05）,穿越原平台次数增加（P<0.05）,旷场实验垂直得分和水平得分降低（P<0.05）,小鼠海马组织中IL-1β、IL-6、TLR4和NF-κB P65蛋白表达水平均降低（P<0.05）,小鼠海马组织中IL-1β、IL-6、TLR4和NF-κB mRNA表达水平降低（P<0.05）,且呈剂量依赖性。结论：姜黄素可能通过抑制TLR4/NF-κB通路改善睡眠剥夺小鼠的认知功能。     

α-硫辛酸对小鼠急性胰腺炎NF-κB活性影响的实验研究

目的观察α-硫辛酸对小鼠急性胰腺炎NF-κB活性的影响，探讨其对急性胰腺炎的保护作用及机制。方法选用健康昆明种小鼠96只，随机分为对照组、模型组和干预组。采用腹腔内注射L-精氨酸法建立小鼠急性胰腺炎模型，于术后第6、12、24、48小时分批处死小鼠，取胰腺组织进行病理评分，并测定胰SOD、MDA活性；免疫组化法检测胰腺细胞NF-κB活化情况。结果α-硫辛酸干预治疗后NF-κB活化被抑制（P〈0．05）；SOD上升，MDA降低（P〈0．05）；胰腺病理评分也降低（P〈0．05）。结论α-硫辛酸可抑制急性胰腺炎时胰腺细胞NF-κB活化，其机制可能是硫辛酸能改善胰腺氧化应激状态，从而减轻胰腺的病理损害。     

阿米福汀对小鼠放射性肺损伤的防护作用研究

目的 探讨阿米福汀（Amifostine,AMI）对小鼠放射性肺损伤（RILI）的防护作用机制。方法 将24 只雌性C57BL/6J 小鼠随机分为对照组、单纯照射组、AMI 组。用直线加速器6MV-X 射线单次12Gy 照射小鼠全肺,照射前30 min 腹腔注射AMI,对照组和单纯照射组注射同等剂量的生理盐水。照射14 d 后,留取小鼠肺组织标本,采用苏木精- 伊红染色法（HE）观察病理改变;酶联免疫吸附法（ELISA）检测支气管肺泡灌洗液中白介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子-β1（TGF-β1）表达水平;凝胶电泳迁移实验检测核转录因子-κB（NF-κB）活性;免疫组织化学法观察NLRP3 蛋白的表达和定位;实时荧光定量聚合酶链反应检测肺组织中NLRP 3 和IL-1β mRNA 的表达;Western blot 检测NF-κB p65、NLRP3、IL-1β 蛋白的表达。结果 照射后第14 天,AMI 组与单纯照射组比较,AMI 组肺组织急性炎症反应减轻;AMI 组支气管肺泡灌洗液中IL-6、TNF-α 水平下降,TGF-β1 水平升高（P <0.05）;AMI 组肺组织中NF-κB 活性下降（P <0.05）;AMI 组肺组织中NLRP3 蛋白表达下降（P <0.05）;AMI 组NLRP3 和IL-1β mRNA 表达下降（P <0.05）;AMI 组NF-κB p65、NLRP3、IL-1β 蛋白表达下降（P <0.05）。结论 AMI 可能通过抑制辐射引起的NF-κB 激活,进而抑制NLRP 3 基因的转录和表达,抑制炎症因子的释放,减轻RILI。     

PDTC联合泰素帝对SGC-7901人胃癌细胞抑制效应及其机制

目的研究PDTC合并泰素帝对SGC-7901人胃癌细胞的抑制效应及其机制。方法应用MTT法观察PDTC及泰素帝对SGC-7901细胞的增殖抑制效应,采用流式细胞术检测不同处理后SGC-7901细胞凋亡率的变化,采用实时荧光定量PCR法测定c-IAP2及XIAP基因表达的改变,采用Western印迹法检测NF-κB P65、I-κB蛋白表达的改变。结果 PDTC组、泰素帝组及联合用药组的细胞活力都明显比对照组降低（P〈0.05）,与相应的泰素帝组相比,联合用药组降低明显（P〈0.01）;PDTC、泰素帝及联合用药组的凋亡率高于对照组（P〈0.01）,联合用药组细胞凋亡率明显升高,达到29.37%,与泰素帝及PDTC单药组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）;PDTC组XIAP及c-IAP2 mRNA表达较对照组下降,泰素帝组XIAP及c-IAP2 mRNA表达较对照组升高,联合用药组XIAP及c-IAP2 mRNA表达较对照组、泰素帝组明显下降（P〈0.01）;泰素帝处理后胞核NF-κB P65含量增加（P〈0.01）,而PDTC联合作用后胞浆及胞核NF-κB P65含量较泰素帝组及对照组明显降低（P〈0.01）。结论泰素帝与PDTC均能抑制SGC-7901细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与PDTC可拮抗泰素帝的NF-κB激活、抑制其下游凋亡抑制蛋白基因表达有关。     

核转录因子-κB在急性肺损伤小鼠中的动态表达

目的 研究核转录因子-κB(NF-κB)在脂多糖诱发的急性肺损伤小鼠中的动态表达情况.方法 健康纯种昆明鼠25只,随机分为5组,包括正常对照组(腹腔注射等量生理盐水),4组LPS组(腹腔注射LPS).LPS组在腹腔注射脂多糖后的不同时间点(1、3、9、12h)处死小鼠,检测相关指标.通过动脉血氧分压(PaO2)检测肺功能;普通光镜观察HE染色肺组织的病理变化;Western blotting和免疫组化法检测NF-κB p65在蛋白水平上的表达差异.结果 LPS注射后1h,PaO2明显下降并有炎症反应的病理变化;小鼠肺组织中的NF-κB p65呈双峰表达,峰值分别为1h和9h. 结论 NF-κB在脂多糖所致急性肺损伤的炎症反应中发挥着重要作用.     

促红细胞生成素预处理对重症急性胰腺炎促炎抗炎失衡的影响

目的评估促红细胞生成素(EPO)预处理对重症急性胰腺炎促炎抗炎失衡的干预效果及探讨其可能机制。方法健康雄性SD大鼠随机分成3组:假手术(SO)组、重症急性胰腺炎(SAP)组和EPO预处理组,每组各30只。SAP组和EPO组建立逆行胆胰管注射3.5%牛黄胆酸钠法(1 ml/kg)SAP模型,EPO组建模前1 h予静脉注射促红细胞生成素(3000 U/kg,1000 U/ml),而SO组和SAP组予静脉注射等体积生理盐水。术后第1、3、6、12、24小时取血清和胰腺标本。检测血清淀粉酶活性;ELISA法检测血清IL-18水平,放射免疫法检测血清IL-10水平。免疫荧光法检测胰腺组织核因子-kappaB转运激活情况;胰腺组织石蜡切片HE染色,进行胰腺病理学评分。结果与SAP组相应时点比较,EPO组核因子-kappaB激活率(除12 h外)显著降低(P<0.05);血清淀粉酶活性显著降低,3、6、12 h(P<0.05);血清IL-18水平显著降低,3、6、24 h(P<0.05),血清IL-10水平无明显降低;病理总评分降低,6、12、24 h(P<0.05)。结论 EPO预处理可通过抑制核因子-kappaB激活,减少促炎细胞因子产生,而对抗炎细胞因子影响不明显,进而调控促炎-抗炎失衡状态,改善SAP病情。     

重症急性胰腺炎大鼠肝损伤机制及褪黑素保护

目的 观察重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肝组织核因子κB表达活性与肝脏损伤的关系,探讨褪黑素(Mel)在大鼠急性胰腺炎肝脏损伤中的保护作用.方法 SD大鼠随机分为重症急性胰腺炎(SAP)组,Mel干预(Mel)组及假手术(Sham)组,各32只.分别于造模成功后4、12、24、48 h处死大鼠,各时点各组8只.血样检测血清淀粉酶及丙氨酸氨基转移酶(ALT),ELISA法检测血清肿瘤坏死因子(TNF)α的含量,免疫组化evision二步法检测肝脏组织核因子κB的表达,缺口末端标记技术(TUNEL法)检测肝脏细胞凋亡情况,留取肝组织苏木精咿红染色下观察肝组织病理变化.结果 4 h点Sham组、SAP组、Mel组TNF-α表达量差异均无统计学意义(pg/ml:161±9、166±14、161±4、均P>0.05),SAP组淀粉酶、ALT、TNF-α表达量和核因子κB活性及肝细胞凋亡指数各时点均高于Sham组(均P<0.05),并随着时间推移逐渐升高,于24 h达高峰(24 h点SAP组和Sham组核因子κB活性和肝细胞凋亡指数分别为62.8±4.4 vs 7.8±0.6,22.33±2.43 vs 0.81±0.16,均P<0.05),此时肝组织病理损伤以肝细胞凋亡为主;至48 h,SAP组核因子κB活性和肝细胞凋亡指数(30.5±2.1、11.67±0.55)较24 h有所下降,而血清TNF-α、淀粉酶及ALT的含量[(342±10)pg/ml、(3357±117)U/L、(574±32)U/L]仍继续升高,同时肝组织病理出现大片出血坏死及炎细胞浸润.Mel组上述指标各时间点均低于SAP组(均P<0.05),但高于Sham组(均P<0.05);Mel组相应各时点病理损伤亦较SAP组轻.结论 肝组织核因子κB的活化介导了重症急性胰腺炎肝脏损伤.Mel可抑制核因子κB活性和TNF-α表达,减轻了肝细胞凋亡和坏死,减轻了急性胰腺炎的肝脏损伤.     

谷氨酰胺对重症胰腺炎大鼠血清细胞因子水平的影响

目的探讨谷氨酰胺对重症急性胰腺炎大鼠TNF—a、IL-6、IL-10水平的影响。方法54只大鼠分3组：谷氨酰胺（Gln）治疗组,重症胰腺炎（SAP）组,对照（NC）组,每组18只。顺行穿刺注射4％牛磺胆酸钠制作SAP模型。Gin组自阴茎背静脉注射Gin,SAP组与NC组注射生理盐水。比较3组3、6、12h腹水量,血清淀粉酶水平,细胞因子水平及组织病理学评分。结果SAP组腹水、血清淀粉酶、病理学评分、TNF—a,IL-6与NC组各时段比较均升高,差异有统计学意义;IL-10水平在3h较NC组升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。Gln组腹水、血清淀粉酶、病理学评分3h和6h时段均较SAP组降低,差异有统计学意义（P〈0．05）;TNF—a,IL-6水平较SAP组各时段均降低,差异有统计学意义（P〈0．05）;IL-10水平3h低于SAP组,差异有统计学意义（P〈0．05）,6h和12h无显著变化。结论谷氨酰胺可调节细胞因子水平,减轻胰腺组织的病理学损害,对SAP有治疗作用。     

PS-341对人大肠癌细胞LoVo,SW480中NF-κB、uPA表达的影响及其与侵袭力的关系

目的 观察人大肠癌细胞LoVo、SW480中真核细胞转录因子-κB(NF-κB)、尿激酶型血浆纤溶酶原激活因子(uPA)的表达差异及硼替佐米(bortezomib,PS-341)对其表达的影响及其与侵袭力的关系.方法 实验分为4组:对照组(无血清)、血清组(10%FCS)、PS-341组[10%FCS +PS-341(...     

促红细胞生成素对新生儿坏死性小肠结肠炎的炎症干预研究

目的 分析促红细胞生成素(erythropoietin，EPO)治疗新生儿坏死性小肠结肠炎(NEC)的临床疗效，基于Toll样受体(TLR)4/NF-κB信号通路分析其可能作用机制。 方法 选择2016年8月—2018年8月温州市中心医院诊断为坏死性小肠结肠炎的患儿共94例，随机数字法分为对照组和观察组，其中对照组42例、观察组52例，对照组给予标准医学治疗方案，观察组联合应用重组EPO肌注治疗，剂量为200 IU/kg，每周2次，疗程为1周。比较2组患儿并发症发生率和病死率，治疗前后血清TNF-α和IL-6水平，TLR-4和NF-κB mRNA表达水平。 结果 对照组患儿有21例发生相关并发症，其中败血症7例、急性肠穿孔6例、感染性腹膜炎6例、其他2例。观察组有15例，其中败血症5例、急性肠穿孔5例、感染性腹膜炎4例、其他1例，观察组患儿并发症发生率和病死率均显著低于对照组(均P＜0.05)。观察组治疗后血清TNF-α和IL-6水平显著低于干预前，且明显低于对照组(均P＜0.05)。观察组血清TLR-4和NF-κB mRNA表达水平显著低于干预前，且明显低于对照组(均P＜0.05)。 结论 EPO可能通过TLR-4/NF-κB信号通路，减轻炎症反应TNF-α和IL-6表达水平，进而改善NEC临床症状和预后。      

蛋白酶体抑制剂PS-341对白血病细胞株SHI-1的生长抑制作用研究

目的探讨蛋白酶体抑制剂PS-341对膜连蛋白急性单核细胞白血病细胞株SHI-1的抑制作用。方法台盼蓝拒染法观察不同浓度PS-341对SHI-1细胞活力的影响，用异硫氰酸荧光黄（Annexin—V—FITC）、碘化丙啶（PI）检测60nmol／L浓度PS-341处理0、6、12、24h时的SHI-1细胞凋亡率，并用流式细胞仪检测细胞周期。结果PS～341呈时间和剂量依赖性抑制SHI-1细胞活力；60nmol／L浓度PS-341在0、6、12、24h诱导SHI-1细胞凋亡率分别为4．2％、8．5％、13.7％和30．1％；流式细胞仪检测显示，60nmol／L浓度PS-341处理SHI-1细胞0、6、12、24h，G1期的细胞比例分别为46．0％、30．0％、14．3％和0.8％，G2/M期的细胞比例分别为160％、25．5％、49．4％和69．0％。结论PS-341可以抑制SHI-1细胞生长，并能诱导其凋亡，使SHI-1细胞停留在G2/M期。     

乌司他汀对内毒素休克兔肿瘤坏死因子-a与白介素6及核转录因子-κB的影响及其剂量关系

目的观察内毒素（ET）致兔感染性休克血浆中肿瘤坏死因子-a（TNF-a）、IL-6和肺组织核转录因子-κB（NF-κB）水平变化,探讨不同剂量乌司他汀对感染性休克的保护机制。方法将50只日本长耳大白兔随机分为内毒素致伤空白组（空白组）,地塞米松（DXM）干预组（DXM组）及3种不同剂量乌司他汀（UTI）干预组（U1、U2、U3三个亚组）。用ET（2mg/kg）一次性静脉注射复制兔感染性休克模型,达休克标准后空白组应用0.9%氯化钠溶液2ml,DXM组用DXM（1mg/kg）、U1组用UTI（2.5&#215;10^4U/kg）、U2组用UTI（5.0&#215;10^4U/kg）、U3组用UTI（10.0&#215;10^4U/kg）分别溶于2ml0.9%氯化钠溶液静脉注射进行干预,检测休克0h和干预后1、2、4、6、12h血浆中TNF-a、IL-6水平,观察肺组织免疫组化NF-κB的表达变化。结果5组兔达感染性休克标准时血浆中的TNF-a、IL-6水平比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）,兔休克后不同干预时间点TNF-a、IL-6的水平在UTI组与空白组及DXM组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）;NF-κB在肺组织的表达空白组最高,U3组最低,差异有统计学意义（P〈0.05）。TNF-a、IL-6的水平及NF-κB表达在U1、U2、U3组间差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论UTI可通过抑制NF-κB信号转导通路抑制TNF-a、IL-6的表达,剂量越大,作用越明显。     

Relationship between Carbachol Hyperstimulation-Induced Pancreatic Acinar Cellular Injury and Trypsinogen or NF-κB Activation in Rats in vitro

The relationship between M3 cholinergic receptor agonist (carbachol) hyperstimulationinduced pancreatic acinar cellular injury and trypsinogen activation or NF-κB activation in rats was studied in vitro. Rat pancreatic acinar cells were isolated, cultured and treated with carbachol, the active protease inhibitor (pefabloc), and NF-κB inhibitor (PDTC) in vitro. Intracellular trypsin activity was measured by using a fluorogenic substrate. The cellular injury was evaluated by measuring the leakage of LDH from pancreatic acinar cells. The results showed that as compared with control group, 10-3 mol/L carbachol induced a significant increase of the intracellular trypsin activity and the leakage of LDH from pancreatic acinar cells. Pretreatment with 2 mmol/L pefabloc could significantly decrease the activity of trypsin and the leakage of LDH from pancreatic acinar cells (P ＜0.01) following the treatment with a high concentration of carbachol (10-3 mol/L) in vitro. The addition of 10-2 mol/L PDTC didn't result in a significant decrease in the activity of trypsin and the leakage of LDH from pancreatic acinar cells treated with a high concentration of carbachol (10-3 mol/L) in vitro (P＞0.05). It was concluded that intracellular trypsinogen activation is likely involved in pancreatic acinar cellular injury induced by carbachol hyperstimulation in vitro. NF-κB activation may not be involved in pancreatic acinar cellular injury induced by carbachol hyperstimulation in vitro.     

CaMK Ⅱ在小鼠重症急性胰腺炎胰腺损伤中的作用

目的 观察钙调素依赖蛋白激酶（CaMK Ⅱ）在重症急性胰腺炎（SAP）小鼠胰腺组织中的表达情况,并探讨其抑制剂KN93对SAP胰腺损伤的保护作用和机制。方法 36只健康雄性C57小鼠随机分为假手术组、SAP组、KN93组、SAP组+KN93组,9只/组。于造模后24 h收集血清和胰腺组织;采用HE染色观察胰腺组织病理改变;Elisa检测血清脂肪酶、淀粉酶活性以及炎性因子变化情况;免疫印迹法检测CaMK Ⅱ、p-CaMK Ⅱ、p-NF-κB、MAPK、p-MAPK在小鼠胰腺组织中的表达变化。 结果 与假手术组比较,SAP组p-CaMK Ⅱ、p-NF-κB、p-MAPK表达水平升高（P<0.05）。KN93干预后,SAP小鼠胰腺组织病理损伤减轻,血清脂肪酶、淀粉酶以及炎性因子（TNF-α、IL-6）水平降低（P<0.05）,同时NF-κB、ERK和MAPK蛋白磷酸化也降低（P<0.05）。结论 CaMK Ⅱ蛋白在SAP疾病胰腺组织活性升高,CaMK Ⅱ抑制剂KN93能有效减轻SAP小鼠胰腺损伤和炎症程度,其机制可能与ERK/MAPK信号通路有关。