无创性延迟肢体缺血预适应保护糖尿病大鼠缺血／再灌注心肌

目的：研究无创性肢体缺血预适应（NDLIP）对糖尿病（DM）大鼠心肌缺血／再灌注（I／R）损伤的影响。方法：大鼠经尾静脉一次性注射链脲佐菌素（STZ）造成急性DM模型后,被随机分为I／R、心脏缺血预适应（CIP）和NDLIP三组。NDLIP组连续3d经历左后肢缺血预适应。第4天,各组动物均经历I／R损伤,CIP组于缺血前行心肌缺血预适应。连续监测血压和心电图变化,观察NDLIP对DM大鼠I／R损伤后心肌电生理功能、心肌梗死范围和心肌酶学的影响,并测定心肌组织中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）活性及丙二醛（MDA）含量。结果：成模动物表现出血糖明显升高,体重下降（P〈0．01）。与I／R组比较,NDLIP及CIP组ST一段抬高幅度降低,室早和室速出现时间推迟,持续时间缩短,室性心律失常发生率降低（P〈0．05）,心肌梗死范围缩小（P〈0．01）,心肌细胞乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）及其同工酶（CK—MB）的释放减少（P〈0．05,P〈0．01）,心肌SOD、GSH—Px活性升高（P〈0．01）,MDA含量减少（P〈0．05,P〈0．01）。结论：NDLIP可减轻DM大鼠I／R后心肌细胞损伤,从而减少心肌酶漏出、改善心脏生理功能,具有与CIP程度相当的心脏保护作用,其机制与调节心肌氧化．抗氧化系统功能平衡有关。     

粉防己碱预处理减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤的机制研究

目的研究粉防己碱（tetrandrine,TET）预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤的预防作用及其机制。方法大鼠肝脏左中叶缺血50 min,再灌注24 h后处死（I/R组）,TET＋I/R组缺血前30 min腹腔注射TET（50 mg/kg）,余同I/R组。大鼠处死前采血检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）,天门冬氨酸氨基转移酶（AST）,乳酸脱氢酶（LDH）,取缺血肝组织进行超氧化物歧化酶（SOD）,一氧化氮（NO）,丙二醛（MDA）,湿重干重（W/D）比检测和组织学检查。结果I/R组血清ALT,AST和LDH升高,组织MDA水平,W/D比值也明显升高,SOD活性和NO含量下降。在TET＋I/R组,血清ALT,AST,LDH,以及组织W/D比值较I/R组降低,SOD活性和NO含量升高。此外,TET＋I/R组大鼠血清ALT,AST,组织MDA和W/D比值较假手术组升高,SOD活性和NO含量降低.组织学检查显示TET＋I/R组肝损害减轻。结论TET能减轻但不能防止肝I/R损伤的发生,减少脂质过氧化物产生是TET抗I/R损伤的原因之一。     

前列腺素E_1预处理对异丙肾上腺素性心肌损伤的保护作用

目的　探讨前列腺素E1(PGE1)预处理对急性心肌梗塞的早期和延迟保护作用。方法　ivPGE1(2 5mg·kg-1和15 0mg·kg-1)对大鼠进行预处理 ,分别于预处理后 2 0min或 2 4hip异内肾上腺素 (80mg·kg-1)造成急性心肌梗塞 ,于ip异丙肾上腺素后 2 4h取出心脏、匀浆 ,测定其丙二醛(MDA)含量 ,谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)活性 ,总超氧化物歧化酶 (T SOD)和锰 超氧化物歧化酶 (Mn SOD)活性。结果　心肌梗塞模型组心肌MDA含量明显上升 ,GSH Px活性降低 ,T SOD和Mn SOD活性增高。与模型组比较 ,两剂量PGE1预处理后 2 0min及 2 4h的各组均明显降低梗塞心肌的MDA含量 (P <0 0 1)和T SOD、Mn SOD活性 (均P<0 0 1) ,提高GSH Px活性 (P <0 0 1)。结论　前列腺素E1预处理具有预适应性早期和延迟心肌保护作用。     

恩施板党提取液对心肌缺血再灌注损伤酶活性的影响

目的观察恩施板党提取液对家兔心肌缺血再灌注（I/R）损伤后酶活性的影响,探讨其对I/R损伤心肌的可能保护机制。方法选取健康家兔30只,随机分为提取液组、模型组及对照组,每组10只,造模前提取液组于耳缘静脉注射板党根提取液,对照组与模型组行生理盐水腹腔注射。建立家兔在体I/R损伤模型,以缺血（I）40min、再灌注（R）50min为观察点,采用硫代巴比妥酸显色法检测MDA含量,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（SOD）,二硫代二硝基苯甲酸法测定谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）,乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）采用国际临床化学联合会（IFCC）推荐的方法检测。对比3组GSH-PX、SOD、MDA、LDH、CK、Ca2＋-ATPase及Na＋-K＋-ATPase水平。结果模型组血清、心肌组织中MDA水平高于对照组,GSH-PX、SOD水平均低于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.01）;提取液组血清、心肌组织的GSH-PX、SOD、MDA水平均优于模型组,差异均有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。模型组LDH、CK活性高于对照组（P〈0.01）,Ca2＋-ATPase和Na＋-K＋-ATPase水平明显低于对照组（P〈0.01）;提取液组LDH、CK及ATP酶活力水平均优于模型组,差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论恩施板党提取液可通过影响心肌I/R损伤后酶活性水平而保护I/R损伤后的心肌组织。     

无创性延迟肢体缺血预适应对大鼠脑缺血再灌注皮层的保护作用

目的：研究无创性延迟肢体缺血预适应（NDLIP）对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法：通过连续3d,每天1次3个循环左后肢无创性5min缺血、5rain再灌注,建立NDLIP模型。实验分4组：假手术组（sham）、缺血再灌注组（I／R）、早期脑缺血预适应＋I／R组（ECIP＋I／R）、NDLIP＋I／R组。观察其对脑缺血／再灌注的神经缺损症状,脑梗死范围,超氧化物歧化酶（SOD）,谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）活力,黄嘌呤氧化酶活力（XOD）,丙二醛（MDA）含量影响。结果：与I/R组相比,ECIP＋I／R组及NDLIP＋I／R组缺血1h,再灌注24h后评分有非常显著的降低;脑梗死范围显著减小。与I／R组比较,ECIP＋I／R组和NDLIP＋I／R组的T-SOD和Mn—SOD活力、GSH—PX活力均升高;XOD活力明显降低,MAD含量明显减少;ECIP＋I／R组和NDLIP＋I／R组间差异无统计学意义。结论：NDLIP可降低I／R对神经的损伤、减小脑梗死范围、提高脑组织抗氧化能力,减少I／R对脑组织的损伤。     

预适应对肢体缺血再灌注后骨骼肌细胞凋亡的影响

目的观察大鼠肢体缺血再灌注（LIR）后骨骼肌细胞的凋亡情况及缺血顸适应（IPC）对其影响。方法实验用雄性Wistar大鼠24只,随机分为对照（Control）组、缺血再灌注（IR）组和缺血预适应（IPC＋IR）组,每组8只。分别测定血浆乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）的含量;观察骨骼肌组织中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-P。）、还原型谷胱甘肽（GSH）、Ca^2＋、Na^＋-KtATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶的含量变化及Caspase-3和骨骼肌凋亡指数（AI）。结果IPC＋IR组较IR组,血浆LDH、CK、ROS、MDA及骨骼肌组织中Ca^2＋含量下降,骨骼肌组织中GSH-Px、GSH、Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶水平升高,Caspase-3及骨骼肌AI下降。结论IPC可能通过减少自由基生成和提高自由基清除酶的活性、降低钙超载、抑制骨骼肌Caspase-3蛋白的表达,从而抑制大鼠LIR后骨骼肌细胞凋亡。     

Netrin-1对活体大鼠心肌缺血再灌注损伤影响的实验研究

目的：研究Netrin-1对活体大鼠心肌缺血再灌注损伤（Ischemia reperfusion injury,I/R）的影响及机制。为临床上提供体外循环（Cardiopulmonary bypass,CPB）下心肌保护新的策略。方法雄性Spraghe-Dawley（SD）大鼠20只,体重450-500g,随机分成2组,体外循环预充液中添加Netrin-1（10只）[I/R＋Netrin-1组],体外循环预充液中不添加Netrin-1（10只）[I/R组]。建立无血预充大鼠深低温停循环（Deep hypothermic circulatory arrest,DHCA）的心肌缺血再灌注的模型。实验结束2h后处死大鼠留取心脏标本。在CPB前、CPB75min （复温后15min）,CPB后2h留取大鼠动脉血测定心肌损伤指标[心肌肌钙蛋白I （cTn I）和心型脂肪酸结合蛋白（HFABP）]。实验结束取大鼠心脏标本用TUNEL法检测心肌细胞凋亡;用Western-blot法测定局部心肌组织直肠癌结肠癌缺失基因（Delete in colorectal carcinoma gene,DCC）蛋白指标。大体光镜下观察心脏组织病理形态学改变;大鼠CPB 前、CPB 15min、CPB 45min （停循环15min）以及 CPB 90min （复温30min）监测血气分析。结果 I/R＋Netrin-1组较I/R组：血清中心肌肌钙蛋白I（cTn I）和心型脂肪酸结合蛋白（HFABP）含量明显减少;心肌缺血再灌注后心肌凋亡明显减少27.5%（P〈0.05）;DCC表达增加（P〈0.05）。HE染色镜下观察发现I/R＋Netrin-1组心肌细胞损伤程度明显减轻。结论Netrin-1对心肌缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与DCC有关。     

氟伐他汀预处理对缺血再灌注的大鼠心肌细胞Fas蛋白表达及心室重塑的影响

目的研究氟伐他汀预处理对缺血-再灌注损伤大鼠心肌细胞Fas蛋白表达及心室重塑的影响。方法将30只SD大鼠随机分成氟伐他汀组（Flu组）、缺血-再灌注组（I/R组）及缺血-预适应组（IPC组）,每组10只。分别用20mg/kg.d氟伐他汀、生理盐水灌胃给药。2周后均经历缺血-再灌注损伤。观察心室重塑和心肌细胞形态,并测定Fas蛋白阳性细胞OD值和心肌细胞凋亡指数。结果 IPC组及Flu组心肌细胞损伤及心室重塑程度明显减轻。Flu组、IPC组Fas蛋白阳性细胞OD值分别为0.20±0.07、0.27±0.11,与I/R组Fas蛋白阳性细胞OD值0.36±0.15比较,P〈0.05;Flu组、I/R组细胞凋亡指数分别为（26.66±9.94）%、（34.45±16.27）%,与I/R组（65.52±20.39）%比较,P〈0.01;而Flu组、IPC组Fas蛋白阳性细胞OD值、细胞凋亡指数比较,P〉0.05。结论氟伐他汀预处理能有效的通过Fas/FasL系统抑制缺血-再灌注损伤的细胞凋亡过程从而保护心肌细胞。     

1-（2，6-二甲基苯氧基）-2-（3，4-二甲氧基苯乙氨基）丙烷盐酸盐对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用

研究1-（2,6-二甲基苯氧基）-2-（3,4-二甲氧基苯乙氨基）丙烷盐酸盐（DDPH）对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法：采用Langendorff大鼠离体心脏灌流技术,结扎冠状动脉前降支（LAD）40min,复灌120min后复制出大鼠离体心脏缺血再灌注损伤模型,观察DDPH对大鼠离体心脏左心室功能、心肌梗死范围、脂质过氧化及超微结构损伤的影响。结果：DDPH能显著改善大鼠离体心脏左心室功能,明显缩小心肌梗死范围,能显著提高大鼠心肌组织中超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）活性,降低心肌脂质过氧化代谢产物丙二醛（MDA）含量,减少心肌超微结构损伤。结论：DDPH对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤有保护作用,其作用机制可能与抑制氧自由基的生成和脂质过氧化作用有关。     

短期禁食对大鼠心肌缺血／再灌注心律失常及心肌能量代谢的影响

目的：观察短期禁食（STF）对大鼠心肌缺血/再灌注（I/R）心律失常及心肌能量代谢的影响。方法：80只SD大鼠,随机分为对照组、I/R组、STF组、胺碘酮组、联合应用组。采用结扎冠状动脉左前降支30min,再灌注120min,建立心肌I/R模型。监测标准肢体Ⅱ导联心电图（ECG）,记录缺血期间室性心律失常（VA）的发生情况。实验结束取心肌,提取线粒体,测定线粒体细胞色素氧化酶（COX）及H＋-ATPase活性,采用HPLC法测定心肌组织中高能磷酸化合物ATP、ADP和AMP的含量,以试剂盒测定心肌组织Na＋/K＋-ATPase、Ca2＋/Mg2＋-ATPase活性,观察STF对心肌的保护作用,并与胺碘酮作比较。结果：与I/R组比较,STF组室性早搏（VPC）出现时间明显推迟（P〈0.01）,持续时间明显缩短（P〈0.01）,室性心动过速（VT）和心室纤颤（VF）发生率都明显降低（P〈0.05）;I/R组COX和H＋-AT-Pase活性、心肌腺苷酸含量、ATPase的活性均显著降低（P〈0.01）,STF可使上述各种酶的活性及心肌腺苷酸的含量有所提高（P〈0.01）。以STF与胺碘酮联合应用对心肌的保护作用最为显著。结论：STF具有抗大鼠心肌I/R心律失常的作用,其机制可能与改善心肌组织的能量代谢有关。     

无创肢体缺血预处理快速相与延迟相叠加对大鼠皮瓣缺血再灌注损伤的影响

目的：探讨无创肢体缺血预处理快速相与延迟相叠加对大鼠皮瓣缺血再灌注（IR）损伤的影响。方法选择200～300 g健康雄性SD大鼠48只,将其随机分成单纯IR组、快速相（EPC）组、延迟相（DPC）组、EPC与DPC叠加（EDPC）组,每组各12只。通过实验设计建立动物模型,观察对比各组皮瓣IR后血清LDH、MDA、GSH-Px、SOD变化情况以及皮瓣存活率。结果 EDPC组的MDA、LDH含量明显低于其他3组（P＜0.05）,而GSH-Px、SOD及皮瓣成活率明显高于其他3组（P＜0.05）。结论无创肢体缺血预处理快速相与延迟相叠加对大鼠IR皮瓣具有保护作用且优于单一的快速相或延迟相的作用。     

预处理对肝脏的保护作用

目的　评价缺血预处理 (IPC)对大鼠肝脏的保护作用。方法　在原位灌注的大鼠肝脏缺血再灌注模型上观察 IPC的保护作用。结果　预处理可阻止血清丙氨酸转氨酶 (AL T)、天冬氨酸转氨酶 (AST)、乳酸脱氢酶 (L DH)及脂质过氧化物 (L PO)水平增高 ,而使组织超氧化歧化酶 (SOD)保持在较高水平。结论　缺血预处理对大鼠肝脏有保护作用     

缺血预处理对鼠肝细胞缺血再灌注损伤的影响

目的探讨缺血预处理对肝组织的保护作用及肝组织耐受缺血的安全时限。方法将42只SD大鼠分为实验组、对照组和假手术组(SO组),实验组和对照组再依3个不同时限(40、50、60min)各分IR40、IR50、IR60及IPC+IR40、IPC+IR50、IPC+IR60亚组。检测各组大鼠超氧化物歧化酶(SOD)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、丙二醛、丙氨酸氨基转移酶(ALT)的含量,并行肝组织光镜、电镜观察。结果对照组SOD水平低于SO组,TNF-α、ALT及MDA水平高于SO组,差异均有统计学意义(P<0.05)。实验组ALT、MDA水平和IPC+IR60亚组TNF-α水平均高于SO组,差异均有统计学意义(P<0.05);除IPC+IR60亚组TNF-α、MDA水平与IR60亚组比较差异无统计学意义(P>0.05);IPC+IR组其余亚组SOD、TNF-α、ALT及MD水平与IR组各相应亚组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论缺血预处理可明显减轻肝组织缺血再灌注所致肝损伤;预处理后肝门阻断50min可能是SD大鼠肝组织能耐受缺血的较安全时限。     

异氟烷预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤的线粒体机制探讨

目的 探讨异氟烷预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤的作用及机制.方法 健康雄性SD大鼠75只,随机分为5组：假手术组（S组）,不阻断肝门血供;缺血再灌注组（I/R组）,肝脏缺血60 min,再灌注120 min;异氟烷预处理组（ISO组）,ISO预处理30 min;环胞菌素A（CsA）＋ISO组,CsA 50 mg/kg 腹腔内注射,30 min后同ISO组;CsA组,I/R前30 min CsA 50 mg/kg 腹腔内注射.各组大鼠于再灌注2 h后迅速断头处死,摘取肝组织分离线粒体,进行线粒体游离钙、MPTP含量检测.结果 线粒体游离Ca2＋浓度I/R组明显高于S组和ISO组（P〈0.05）;而CsA＋ISO组明显高于ISO组（P〈0.05）;CsA组与I/R组间差异无统计学意义.I/R组ΔS值与S组和ISO组相比明显降低,即MPTP开放程度明显增加（P〈0.05）,I/R组与CsA组和CsA＋ISO组ΔS之间比较,差异无统计学意义;与ISO组相比,CsA＋ISO组的ΔS值明显降低,即MPTP开放程度明显增加（P〈0.05）.结论 异氟烷预处理对肝脏缺血再灌注损伤具有一定程度的保护作用,这种作用可能与抑制MPTP开放,防止了线粒体Ca2＋超载有关.     

大鼠急性肾缺血再灌注时心肌细胞氧化损伤及瑞芬太尼的干预作用

目的观察大鼠急性肾缺血再灌注时心肌细胞氧化损伤以及瑞芬太尼预处理对氧化损伤的干预作用。方法建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型。将54只Wistar大鼠随机分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、瑞芬太尼预处理组(R组)。Sham组只结扎单侧肾脏,另一侧只穿线不结扎;I/R组结扎右侧肾脏,动脉夹夹闭左侧肾蒂45min后开放,于再灌注30min、1、2、3h处死大鼠;R组为缺血前以1μg·kg-1·min-1微泵输注瑞芬太尼30min进行预处理,余同I/R组。分别检测各组大鼠心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量及谷胱甘肽过氧物酶(GSH-Px)活力变化。结果I/R组、R组与Sham组相比,心肌组织MDA含量升高,SOD、GSH-Px活力降低,且在1、2、3h时间点,差异均有统计学意义(P<0.05)。R组与I/R组比较,心肌组织MDA含量降低,SOD、GSH-Px的表达增高,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论大鼠急性肾缺血再灌注可造成心肌细胞氧化损伤,而瑞芬太尼预处理可起到一定的保护作用。     

果糖二磷酸钠镁对心肌细胞缺氧复氧损伤修复作用的体外研究

目的:体外研究果糖二磷酸钠镁对缺氧/复氧(H/R)心肌细胞损伤的修复作用及其机制。方法:采用原代培养4d的心肌细胞建立H/R损伤模型,分为H/R组和H/R+果糖二磷酸钠镁高、中、低浓度(4.8、2.4、1.2mg·mL-1)组,另取正常细胞设为正常对照组。加入相应药物处理后分别测定各组细胞中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CPK)活性及细胞内游离钙浓度([Ca2+]i),并用透射电镜观察细胞超微结构的变化。结果:与H/R组比较,果糖二磷酸钠镁组能显著降低细胞中LDH、CPK、[Ca2+]i水平(P<0.01或P<0.05),减轻细胞超微结构的损伤。结论:果糖二磷酸钠镁对H/R损伤的心肌细胞具有修复作用,其作用可能与降低钙超载有关,且具有浓度依赖性。     

丹参素配伍川芎嗪对大鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的研究丹参素配伍川芎嗪对大鼠局灶性脑缺血的保护作用。方法采用线栓法制备SD大鼠永久性大脑中动脉阻塞（permanent middle cerebral artery occlusion,pMCAO）模型。实验SD大鼠随机分为6组,分别为假手术组、模型组、丹参素组（1.2 mg·kg-1）、川芎嗪组（60mg·kg-1）、丹参川芎嗪注射液组[（1.2mg丹参素＋60mg川芎嗪）kg-1]、尼莫地平注射液组（1.2mg·kg-1）。造模24 h后,测定神经行为学评分、脑组织含水量、脑梗塞体积、血清中超氧化物歧化酶（SOD）活性和兴奋性氨基酸谷氨酸（Glu）含量,并进行组织病理学检查。结果与模型组相比,丹参素组、川芎嗪组、丹参川芎嗪注射液组大鼠的神经行为明显改善,脑含水量和脑梗塞体积显著降低（P〈0.05或0.01）,血清中SOD活性升高,Glu含量降低（P〈0.05或0.01）,HE染色显示组织间隙较小,病理损伤小于模型组。丹参川芎嗪注射液组保护作用最优,说明两单味药配伍使保护作用增强。结论丹参素配伍川芎嗪对大鼠局灶性脑缺血有协同的保护作用。     

MAPK信号通路在异氟烷心肌保护效应中的作用

目的探讨有丝分裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号通路是否参与异氟烷对心肌保护效应。方法原代培养乳鼠离体心肌细胞,建立缺氧/复氧(H/R)损伤模型,随机分为6组,正常组(N组)、缺氧/复氧组(H/R组)、H/R+1MAC异氟烷组(F组)、H/R+1MAC异氟烷+15μmol/LSB203580组(SB组)、H/R+1MAC异氟烷组+20μmol/L PD98059组(PD组)和H/R+1MAC异氟烷+10mmol/L SP600125(SP组)。各组取细胞培养上清液测定LDH活力与cTnI含量,心肌细胞匀浆后测定SOD活力与MDA含量;用倒置显微镜观察心肌细胞生长特性及形态的变化。结果与N组比较,各组的LDH、MDA、cTnI均升高(P<0.05),SOD下降(P<0.05)。与H/R组比较,各组的SOD下降(P<0.05),LDH、MDA、cTnI升高(P>0.05),与F组比较,SB、PD、SP组的LDH、MDA、cTnI均升高(P<0.05),SOD降低(P<0.05)。结论异氟烷对原代培养心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用可能与其激活MAPK信号通路有关。