益智健脑颗粒对AD大鼠学习记忆及海马CA1区ChAT和TrkA表达的影响

阿尔茨海默病（AD）是一种进行性神经退行性病变，以记忆和认知功能障碍为主要Il缶床表现，严重危害老年人健康和生命。目前AD病因和病理机制尚未完全明了，更无确切疗效的药物，寻找确能根治AD药物已成为当今国际热点课题之一。本文从实验角度初步探讨益智健脑颗粒对AD的疗效和作用机制，现介绍如下。     

益智健脑颗粒水提浓缩液对P8系快速老化小鼠内嗅区组织差异蛋白质表达的影响

目的分析益智健脑颗粒水提浓缩液(Yizhi Jiannao Granule Concentration Fluid,YJGCF)干预前后P8系快速老化小鼠(senescence accelerated mouse P8,SAMP8)内嗅区组织的差异蛋白质表达,从蛋白质组学水平探讨中药益智健脑颗粒水提浓缩液治疗阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)的作用机制。方法 6月龄SAMP8随机分为治疗组、模型组和对照组,每组10只。模型组不予处理,让其自由饮水,治疗组以YJGCF灌胃(0.3g/d),对照组以等剂量双蒸水灌胃。8周后、应用双向凝胶电泳技术分别分离3组SAMP8内嗅区组织总蛋白,得到差异蛋白质点,通过质谱分析得到相应肽质量指纹图谱,经蛋白质数据库查询,鉴定差异蛋白质点。结果治疗组与模型组存在32个差异点,初步鉴定了NADH脱氢酶铁硫蛋白6、Rho-GDP解离抑制因子α、β2珠蛋白、磷酸甘油酸激酶等14个差异蛋白质,其功能涉及线粒体能量代谢、氧化应激、神经元功能等方面。结论 YJGCF可调节SAMP8内嗅区组织的多种蛋白质表达,提示该药具有多靶点治疗的作用,且可能通过改善线粒体功能障碍、抗氧化应激、抑制神经细胞凋亡、保护神经元等途径来实现其治疗AD的作用。     

益智健脑颗粒治疗阿尔茨海默病临床研究

目的：观察益智健脑颗粒治疗阿尔茨海默病（AD）的临床疗效。方法：将6f）例AD患者,随机分为治疗组、对照组各3f）例。治疗组用益智健脑颗粒治疗,对照组用多奈哌齐治疗,疗程均12周。观察2组治疗前后简易精神状态量表（MMSE）、日常生活总量表（ADL）评分及血清中同型半胱氨酸浓度。结果：治疗组、对照组总有效率分别为80.0%、73．3％,2组比较,差异无显著性意义（P〉0．05）,治疗前2组MMSE、ADL积分比较,差异均无显著性意义（P〉0．05）;2组治疗后比较,差异均无显著性意义（P〉0．05）。治疗后2组MMsE积分升高,ADL积分下降,与治疗前比较,差异均有显著性意义（P〈0．05）,治疗前2组同型半胱氨酸浓度比较,差异无显著性意义（P〉0．05）。治疗组治疗后的同型半胱氨酸浓度明显降低,与治疗前比较,差异有显著性意义（P〈0.05）;而对照组下降不明显（P〉0．05）。结论：益智健脑颗粒能改善AD患者的认知功能,其机制可能与降低血清中同型半胱氨酸水平有关．     

针刺结合益智健脑颗粒治疗阿尔茨海默病疗效观察

目的:观察针刺结合益智健脑颗粒对阿尔茨海默病的临床疗效及对患者智能状况、日常生活和社会活动能力的影响.方法:将84例患者随机分3组,各28例.针药组采用针刺百会、四神聪、大椎、关元等穴结合益智健脑颗粒治疗;中药组单用益智健脑颗粒治疗;西药组口服盐酸多奈哌齐(安理申)治疗.评价和比较各组治疗12周前后及组间简易精神量表(MMSE)、日常生活能力表(ADL)等神经量表评分以及临床疗效.结果:针药组、中药组及西药组治疗后MMSE、ADL评分均较前有改善,但针药组的效果更好,差异有统计学意义(P<0.05).针药组总有效率为85.7%,优于中药组的71.4%和西药组的67.9%.结论:针刺结合益智健脑颗粒治疗阿尔茨海默病能显著改善患者智能状况,提高日常生活和社会活动能力,疗效优于单用益智健脑颗粒和西药安理申治疗.     

益智健脑颗粒对阿尔茨海默病患者外周血清中IL-1β与TNF-α表达的影响

目的:探讨益智健脑颗粒对阿尔茨海默病(AD)患者外周血清中IL-1β与TNF-α表达的影响。方法:严格按照配对的原则选择AD患者及健康老人,应用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISE)检测IL-1β与TNF-α表达的水平。结果:血清IL-1β含量AD组与正常对照组比较,差异有显著性(P0.05);血清TNF-α含量AD组高于正常对照组,但差异无显著性(P0.05);中药组治疗前后IL-1β比较,P0.05,TNF-α治疗前后比较,P0.05;西药组治疗前后IL-1β比较,P0.05,TNF-α治疗前后比较,P0.05;中药组与西药组比较差异无显著性意义(P0.05)。结论:(1)AD患者血清IL-1β、TNF-α水平高于正常老年人,这可能与AD脑内炎症反应有关;(2)益智健脑颗粒可通过抑制细胞炎性因子而对AD患者发挥其治疗作用。     

益智健脑颗粒提高轻度认知障碍患者智能水平的研究

目的：观察益智健脑颗粒对轻度认知障碍（mild cognitive impairment,MCI）的疗效。方法：筛选50例MCI患者,随机分为治疗组（25例）和对照组（25例）,治疗组予中药治疗,对照组给予安慰剂,服药16周,分别测定两组治疗前后简易智力状态量表（MMSE）总分及成人韦氏记忆测验记忆商（MQ）。结果：MCI患者的记忆商（MQ）较健康人明显降低（P〈0.01）,用药后,治疗组的MQ较其用药前明显提高（P〈0.01）,且较对照组提高明显（P〈0.05）;随访1年,治疗组未发生不良反应,对照组有3例MCI患者转化为痴呆。结论：益智健脑颗粒能改善MCI患者的记忆功能,且有防治MCI向痴呆发展的作用。     

健脑益智汤对类阿尔茨海默病大鼠学习记忆的影响和机制

目的　观察健脑益智汤对类阿尔茨海默病（AD）大鼠学习记忆的影响,并探讨其可能的作用机制。 方法　老年大鼠侧脑室注射聚集态的Aβ25 35建立复合式类AD大鼠模型,分为模型组、盐酸多奈哌齐组〔0.525 mg/（kg·d）〕、健脑益智汤小剂量组〔10.6 g/（kg·d）〕、健脑益智汤中剂量组〔21.2 g/（kg·d）〕和健脑益智汤大剂量组〔42.4 g/（kg·d）〕,治疗21天,并且采用Morris水迷宫测试各组大鼠学习记忆能力,并检测血清乙酰胆碱酯酶（AchE）、丁酰胆碱酯酶(BchE)。 结果 盐酸多奈哌齐组,健脑益智汤小剂量组、中剂量组和大剂量组逃避潜伏期均较模型组减少 (P<0.01,P<0.05);而健脑益智汤小、中及大剂量组与盐酸多奈哌齐组比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。健脑益智汤大、中剂量组对AchE、BchE活性虽有降低的趋势,但与盐酸多奈哌齐组比较,差异无统计学意义（P>0.05）;并且对类AD大鼠学习记忆能力的改善作用二者也无明显差别。结论 健脑益智汤可以通过对胆碱酯酶活性影响,进而改善类AD大鼠的学习记忆能力。     

天芪益智颗粒对快速老化小鼠学习记忆和中枢神经递质的影响

目的:研究天芪益智颗粒对快速老化小鼠学习记忆能力和脑组织内中枢神经递质的影响。方法:以自然老化小鼠SAMR 1为对照组,将快速老化小鼠SAMP 8随机分为拟阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型组、石杉碱甲组、天芪益智颗粒高、中、低剂量组,每组10只,连续灌胃给药60 d。实验结束次日,采用筑巢实验、避暗实验和Morris水迷宫测试各组小鼠的学习和记忆能力。采用高效液相色谱法检测各组小鼠脑组织中去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)的含量。结果:与对照组比较,模型组小鼠筑巢实验得分明显降低(P<0.05);避暗实验的步入潜伏期显著缩短(P<0.01),错误次数明显增多(P<0.05);水迷宫定位巡航实验的逃避潜伏期明显延长(P<0.05),空间探索实验的穿越目标象限平台次数显著减少(P<0.01)。与模型组比较,天芪益智颗粒中剂量组的筑巢实验得分明显增高(P<0.05);高剂量组的避暗实验步入潜伏期显著延长(P<0.01),错误次数明显减少(P<0.05);高、中剂量组在空间探索实验中穿越目标象限平台的次数明显增多(P<0.01,P<0.05);中剂量组在水迷宫定位巡航实验中的逃避潜伏期明显缩短(P<0.05),同时,天芪益智颗粒组脑组织中的NE和5-HT含量明显升高(P<0.05)。结论:天芪益智颗粒能够改善快速老化小鼠的学习和记忆能力,其机制可能与调节脑组织内中枢神经递质NE和5-HT的含量相关。     

益智健脑颗粒对老年大鼠空间学习记忆及中枢胆碱能系统的影响

目的:观察益智健脑颗粒对老年大鼠空间学习记忆及中枢胆碱能系统的影响。方法:以自然衰老大鼠为研究对象,通过Morris水迷宫实验、尼氏染色及免疫组织化学等方法的检测,观察益智健脑颗粒对老年大鼠空间学习记忆、基底前脑胆碱能神经元及海马CA1与CA3区和第一躯体感觉区(S1Tr)M1受体阳性神经元的影响。结果:与老年对照组相比,益智健脑颗粒(10g/kg)治疗组平均逃避潜伏期至第四天两者有极显著差异,其空间探索实验中穿越平台次数及潜伏期呈极显著性差异;在内侧隔核(MSN)与斜角带核(VDB)内,胆碱能神经元数目增多,两者有显著性差异,在Meynert核(NBM)内有极显著性差异;海马区与大脑皮质神经元、M1受体阳性神经元数目有所增加,且在CA1与CA3区和S1Tr内有极显著性差异。结论:益智健脑颗粒能改善自然衰老大鼠空间学习记忆能力,机制可能是通过增强基底前脑胆碱能神经元Ch AT的表达水平,提高乙酰胆碱合成量,海马及大脑皮质胆碱能毒蕈碱M1受体表达水平上调则可接受更多来自基底前脑的投射,触发受体后效应,进而对衰老大鼠中枢胆碱能系统具有一定的保护作用。     

针刺对快速老化痴呆小鼠SAMP8海马脂筏蛋白质组的影响

目的:通过检测针刺后快速老化痴呆小鼠SAMP8海马脂筏蛋白质组的改变,阐述针刺治疗阿尔茨海默病的可能机理。方法:以SAMP8为研究对象,将其分为SAMP8组和针刺组,SAMR1为正常对照,DTT提取法提取海马脂筏,采用HPLC MS/MS shotgun analysis进行蛋白质鉴定,通过GO和KEGG分别对已鉴定蛋白质进行功能和信号分析。结果:SAMR1组鉴定出467种蛋白质,SAMP8组445种蛋白质,共有蛋白质为339种,SAMR1组独有蛋白质119种,SAMP8组106种。经针刺治疗后,SAMP8组独有的92种蛋白质经针刺后消失,103种蛋白质为针刺特异募集,其中36种同时出现于SAMR1组。对103种蛋白质进行功能分析发现主要与跨膜运输、结合、生物合成和细胞器组装等有关,信号途径主要参与核糖体、糖酵解/糖生成等。结论:针刺对脂筏募集蛋白质种类具有良性调节作用,针刺可能通过对特异性蛋白质的募集以达到治疗AD的目的。     

天芪益智颗粒对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力和突触功能的影响

[目的]研究天芪益智颗粒对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力及脑内突触素、微管相关蛋白-2(MAP-2)表达的影响。[方法]采用侧脑室注射Aβ_(1-42)的方法建立动物模型,将90只SD大鼠随机分成模型组、假手术组、阳性药组(石杉碱甲)、天芪益智颗粒高、中、低剂量组,每组15只。连续给药30 d后,通过避暗实验评价大鼠的学习记忆能力,采用Western Blot方法测定大鼠脑内突触素、MAP-2。[结果]与模型组相比,天芪益智颗各剂量组大鼠潜伏期长于模型组(P0.01),错误次数小于模型组(P0.01)。模型组大鼠脑内突触素、MAP-2表达低于假手术组(P0.01),天芪益智颗粒各剂量组突触素、MAP-2表达高于模型组(P0.01)。[结论]天芪益智颗粒能改善阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力,改善突触功能。     

电针对SAMP8小鼠海马线粒体呼吸链功能的影响

目的:从线粒体角度探讨电针治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法:选取8月龄SAMP8小鼠12只,随机分为模型组6只,电针组6只,另选取6只8月龄的SAMR1小鼠为对照组。电针组电针"百会""大椎""肾俞""太溪"穴,每日1次,每次20min,10次为一疗程,共治疗3个疗程;其他两组不做治疗干预,只进行相同方式、相同时间和相同程度的抓取和小鼠固定器固定。疗程结束后,采用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,分光光度法检测海马线粒体呼吸链酶复合物的活性,反相高效液相色谱法检测细胞三磷酸腺苷(ATP)水平。结果:与对照组相比,模型组小鼠平均逃避潜伏期明显延长,原平台象限停留时间缩短,海马线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ活性降低,细胞ATP含量减少;模型组比较,电针组平均逃避潜伏期缩短,原平台象限停留时间延长,海马线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ活性升高,细胞ATP含量增加。结论:电针能够提高小鼠海马线粒体呼吸链酶复合物活性及细胞ATP含量,改善线粒体功能,可能是治疗AD的机制之一。     

早期电针干预对SAMP8小鼠学习记忆能力和海马磷酸化Tau蛋白水平的影响

目的:探讨早期电针"百会""大椎""肾俞"穴对快速老化小鼠(SAMP8小鼠)学习记忆能力和海马磷酸化Tau蛋白表达的影响,为临床电针治疗阿尔茨海默病(AD)时间点的选择提供参考。方法:将36只3月龄SAMP8小鼠随机分为模型组、3月龄电针组、9月龄电针组,每组12只;以12只同龄正常老化SAMR1小鼠作为空白对照组。3月龄电针组及9月龄电针组分别于小鼠3月龄及9月龄时予电针"百会""大椎""肾俞"穴治疗(连续波,2 Hz,1.5～2 mA),20 min/次,每日1次,8 d为一疗程,疗程间隔2 d,共治疗3个疗程。每组小鼠在水迷宫检测学习记忆能力结束后统一于10月龄取材;免疫组织化学法、免疫蛋白印迹法(Western blot)检测小鼠海马磷酸化Tau蛋白的表达,实时荧光定量PCR法检测小鼠海马Tau mRNA表达。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.01),原平台象限停留时间较短,跨越平台次数减少(P<0.01),海马磷酸化Tau蛋白及Tau mRNA表达较高(P<0.01);与模型组比较,3月龄电针组及9月龄电针组小鼠逃避潜伏期缩短(P...     

电针对SAMP8小鼠海马线粒体呼吸链功能的影响

目的:从线粒体角度探讨电针治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制.方法:选取8月龄SAMP8小鼠12只,随机分为模型组6只,电针组6只,另选取6只8月龄的SAMR1小鼠为对照组.电针组电针“百会”“大椎”“肾俞”“太溪”穴,每日1次,每次20 min,10次为一疗程,共治疗3个疗程;其他两组不做治疗干预,只进行相同方式、相同时间和相同程度的抓取和小鼠固定器固定.疗程结束后,采用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,分光光度法检测海马线粒体呼吸链酶复合物的活性,反相高效液相色谱法检测细胞三磷酸腺苷(ATP)水平.结果:与对照组相比,模型组小鼠平均逃避潜伏期明显延长,原平台象限停留时间缩短,海马线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ活性降低,细胞ATP含量减少;与模型组比较,电针组平均逃避潜伏期缩短,原平台象限停留时间延长,海马线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ活性升高,细胞ATP含量增加.结论:电针能够提高小鼠海马线粒体呼吸链酶复合物活性及细胞ATP含量,改善线粒体功能,可能是治疗AD的机制之一.     

音乐电针对SAMP8小鼠行为学及大脑皮层NEP、IDE表达的影响

目的：探讨音乐电针治疗阿尔茨海默病（AD）的可能作用机制。方法：将SAMP8小鼠随机分为模型组、药物组和音乐电针组,SAMR1小鼠作为正常组。药物组给予盐酸多奈哌齐0.92mg/kg灌胃给药;音乐电针组电针＂百会＂、＂印堂＂穴20min后,点刺＂水沟＂穴。采用Morris水迷宫测定小鼠学习记忆能力,免疫组化法检测小鼠大脑皮层NEP及IDE的表达。结果：音乐电针改善模型小鼠学习记忆能力与药物比较,无显著性差异（P〉0.05）,并能显著提高大脑皮层NEP及IDE表达（P〈0.05）。结论：音乐电针具有改善AD学习记忆障碍的作用,其机制可能与促进Aβ降解酶表达有关。     

不同电针刺激对SAMP8小鼠学习记忆能力及大脑皮层APP、ApoE mRNA表达的影响

目的：探讨脉冲电针和音乐电针治疗阿尔茨海默病（AD）的可能作用机制,并比较两种电针的疗效差异。方法：将SAMP8小鼠随机分为模型组、脉冲电针组和音乐电针组,SAMR1小鼠作为正常组。两电针组均给予电针百会穴、印堂穴20min后,点刺水沟穴。治疗结束后,以Morris水迷宫测定小鼠学习记忆能力,实时荧光定量PCR法测定小鼠大脑皮层中APP、ApoE mRNA表达量。结果：与模型组比较,音乐电针组、脉冲电针组逃避潜伏期分别在第4天、第5天明显下降（P〈0．05）,目标象限游泳时间均增加（P〈0．05）;脉冲电针组、音乐电针组大脑皮层APP mRNA表达量均显著下降（P〈0．05）。结论：脉冲电针和音乐电针均可改善SAPM8小鼠学习记忆能力;脉冲电针和音乐电针可能通过下调APP mRNA表达发挥抗痴呆作用。     

补肾活血方对SAMP8小鼠学习记忆及海马神经干细胞影响实验研究

目的观察补肾活血方对快速老化SAMP8小鼠行为学及海马内神经干细胞的影响,以期为补肾活血方治疗阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的临床应用提供实验依据。方法7月龄的SAMP8雄性小鼠随机分为3组,分别为模型组、中药组和西药对照组,同月龄的SAMR1小鼠作为正常对照组。中药组按照6 g/kg补肾活血方灌胃给药,西药组给予3 mg/kg的盐酸多奈哌齐灌胃,正常组和模型组小鼠给予同体积的生理盐水灌胃。连续灌胃4周后采用水迷宫、免疫组织化学法和Western Blot法观察小鼠行为学、海马区NeuN和Nestin的表达。结果与正常老化SAMR1小鼠相比,模型组SAMP8小鼠学习记忆能力明显下降,海马组织Nestin和NeuN的表达减少(P<0.05);与模型组相比,给予补肾活血方和盐酸多奈哌齐西药干预后,SAMP8小鼠学习记忆能力有所改善,海马组织内Nestin和NeuN的表达增多(P<0.05);中药组和西药对照组SAMP8小鼠相比,学习记忆、海马组织Nestin和NeuN的表达无显著性差异(P>0.05)。结论补肾活血方通过上调SAMP8快速老化小鼠海马组织Nestin和NeuN的表达,促进神经干细胞的增殖和向神经元分化,从而改善SAMP8小鼠的学习认知记忆能力,对AD起治疗作用。     

肉苁蓉总苷对SAMP8小鼠学习记忆能力及突触可塑性的影响

目的明确不同剂量肉苁蓉总苷(glycosides of cistanche, GCs)灌胃对SAMP8小鼠学习认知功能和突触可塑性的影响。方法 SAMP8小鼠给予不同剂量肉苁蓉总苷[5、10、25、50、100 mg/(kg·d)]连续灌胃30 d。Morris水迷宫检测各组小鼠学习记忆能力;尼氏染色观察海马CA1区细胞形态及完整锥体细胞数目;免疫组化、Western Blot检测小鼠海马突触素(synaptophysin, SYN)、突触后致密物蛋白(post-synaptic density protein 95, PSD-95)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)表达情况。ELISA检测血清睾酮(testosterone, T)、谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase, ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase, AST)含量。结果水迷宫实验结果显示,相较模型组,50 mg/(kg·d)组逃避潜伏期显著缩短(P<0.05);50 mg/(kg·d)组10...