丹酚酸B对急性心肌缺血／再灌注损伤大鼠心肌保护作用的机制研究

犤目的犦通过观察丹酚酸-B对心肌缺血再灌注损伤大鼠的实验观察探讨其作用机制。[方法]将实验动物分为5组,假手术组、模型组、卡托普利组、复方丹参片组、丹酚酸-B组分别给于不同处理因素。[结果]丹酚酸-B可降低RI大鼠血浆AT-1、ET、TXA2、TNF、Ca2+水平,提高PGI2、SOD水平,明显优于复方丹参片组及模型组(P<0.05)。[结论]丹酚酸-B具有较好的RI心肌细胞保护作用。     

丹酚酸B与三七总皂苷不同配比对大鼠离体心脏冠脉流量的影响*

[目的]探讨丹酚酸B、三七总皂苷协同应用对大鼠离体心脏冠脉流量的影响.[方法]应用均匀设计的方法,将丹酚酸B与三七总皂苷的不同配比设计为6个水平,应用Langendorff系统进行离体心脏恒压灌流,记录6组实验给药前后大鼠的冠脉流量.[结果]丹酚酸B与三七总皂苷在升高大鼠冠脉流量上不存在线性回归关系,6组实验中以1号实验丹酚酸B/三七总皂苷为20mg/30nag升高大鼠冠脉流量最佳.[结论]丹酚酸B、三七总皂苷协同应用对大鼠离体心脏冠脉流量有很大影响.     

丹酚酸B干预大鼠急性心肌梗死后心肌细胞失巢凋亡的研究*

[目的]研究丹酚酸B(Sal B)对急性心肌梗死大鼠心肌细胞失巢凋亡的作用及其分子机制.[方法]结扎冠脉左前降支复制大鼠急性心肌梗死(AMI)模型,实验分为假手术组、模型组和丹酚酸B组,其中丹酚酸B组于术后灌胃120mg/(kg·d),连续给药4周.各组分别于术后1、2、4周,采用放射免疫法检测血浆层黏连蛋白(LN)和Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)的含量;采用Masson染色法检测非梗死区胶原容积分数(CVF);免疫组织化学法检测心肌组织整合素(FAK)和黏着斑激酶的表达;用原位末端标记(TUNEL)法检测心肌细胞的凋亡.[结果]与假手术组相比较,血浆LN、PⅢNP水平均升高(P<0.01),非梗死区CVF升高,整合素和FAK的表达降低,心肌细胞凋亡指数增加(P<0.05).与模型组相比较,血浆LN、PⅢNP水平均有所降低(P<0.01),非梗死区CVF降低,整合素和FAK的表达增加,心肌细胞凋亡指数降低(P<0.05).[结论]丹酚酸B可以减少急性心肌梗死大鼠心肌细胞的失巢凋亡.     

丹酚酸B诱导体外培养大鼠骨髓基质细胞向心肌样细胞分化的研究*

[目的]探讨大鼠骨髓基质细胞的体外培养及丹酚酸B(Salvianolic acid B)诱导其向心肌样细胞分化的可能.[方法]取大鼠股骨及胫骨干骨髓基质细胞(MSCs)培养,保留贴壁细胞进行传代;免疫细胞化学行肌动蛋白抗原、肌钙蛋白T抗原染色;观察丹酚酸B对骨髓基质细胞向心肌细胞分化的影响.[结果]大鼠骨髓基质细胞在形态上呈贴壁集落生长,具有成纤维细胞样外观.丹酚酸B加入5-氮胞苷诱导组后细胞死亡较少,长方形、多角形细胞明显增多.[结论]丹酚酸B能够促进体外诱导骨髓基质细胞向心肌样细胞的分化.     

丹酚酸B、丹参酮ⅡA对动脉粥样硬化家兔血清一氧化氮及甘油三酯的影响*

[目的]观察丹参水溶性成分丹酚酸B和脂溶性成分丹参酮ⅡA对家兔动脉粥样硬化模型血清一氧化氮(NO)及甘油三酯(TG)浓度的影响,以寻找其作用耙点.[方法]复制家兔动脉粥样硬化模型,分别用放射性免疫方法和比色法检测血清NO和TG浓度,观察丹酚酸B和丹参酮ⅡA抗动脉粥样硬化的作用异同.[结果]丹酚酸B和丹参酮ⅡA都能增加动脉粥样硬化家兔血清NO浓度,降低血清TG浓度.但升高NO的作用丹参酮ⅡA优于丹酚酸B;降低TG作用丹酚酸B优于丹参酮ⅡA.[结论]丹参水溶性成分与脂溶性成分都能调节血清NO及TG浓度而达到抗动脉粥样硬化的作用,但具体作用机制有所不同.     

丹酚酸B干预骨髓间充质干细胞移植对AMI大鼠心梗区血管新生的*

[目的]探讨丹参单体丹酚酸B(SalB)干预骨髓间充质干细胞(MSCs)心肌移植及其对大鼠心梗区毛细血管新生的影响.[方法]选用成年近交系Wistar大鼠建立心肌缺血模型.将造模成功的75只大鼠随机分为5组.冠脉结扎术后,联合组给于大鼠SalB并移植MSCs(SalB B组),细胞移植组(B组)移植等量的MSC,中药组给予等量的SalB(SalB组),对照组注射等容积的MSCs完全培养液(S组),模型组(C组).手术后2周,通过心肌组织CD34免疫组化染色,观察丹酚酸B干预MSCs心肌移植对血管新生的影响.[结果]CD34染色示联合组动物心肌梗死区毛细血管密度高于B组和SalB组,且有少数细胞形成血管样结构.[结论]在急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌移植MSCs,通过参与血管形成,改善梗死区的血液供应,是SalB起效的重要物质基础之一,具有良好的开发和应用前景.     

丹酚酸B对被动吸烟大鼠肝损伤的保护作用

[目的] 探讨丹酚酸B对被动吸烟大鼠肝损伤目的保护作用及其机制.[方法] Wistar大鼠,随机分为3组,即正常对照组、炯熏组、丹酚酸B预防组.分别测定3组大鼠血清巾谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及乳酸脱氧酶(LDH)目的含量.同时分析血清及肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)目的活性及丙二醛(MDA)含量目的改变.[结果] 烟熏组与正常对照组相比,大鼠血清中AST、ALT、LDH、MDA及肝组织中MDA含量均显著增加,SOD活性显著降低(P<0.01);经丹酚酸B预处理后,与烟熏组相比,血清中AST、ALT、LDH、MDA含量及肝组织中MDA含量均降低,而SOD活性增高(P<0.05).[结论] 丹酚酸B对被动吸烟大鼠肝损伤有一定目的保护作用,其机制可能主要与抗氧自由基目的损伤有关.     

丹酚酸B/三七总皂苷配伍对心肌梗死大鼠左室结构和功能的影响*

[目的]研究丹酚酸B(Sal B)、三七总皂苷(PNS)对心肌梗死大鼠左室结构和功能的影响,探讨中药组分配伍的作用.[方法]结扎冠脉左前降支复制大鼠心肌梗死模型,假手术组作对照,连续灌胃给药7 d.用彩色超声心动仪观察心脏左室结构和功能变化.[结果]Sal B、PNS以及配伍组可以不同程度地降低左室收缩末期内径(LVDs)、左室收缩末期容积(LVESV),升高左室射血分数(EF)、左室短轴缩短率(FS),配伍组有优于其他中药组的趋势.[结论]Sal B、PNS配伍可以有效改善心肌梗死大鼠的左室结构和功能.     

丹酚酸B滴眼对大鼠糖尿病性白内障的影响

目的 研究丹酚酸B对糖尿病性白内障大鼠模型的形成是否具有抑制作用.方法 经大鼠阴茎背静脉注射链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病大鼠白内障模型眼.实验分为空白组、对照组、模型组和丹酚酸B滴跟组,裂隙灯显微镜照相机记录晶状体变化.6个月后取大鼠晶状体检测超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),丙二醛(MDA)含量.结果 丹酚酸B滴眼组晶状体混浊程度明显低于模型组.丹酚酸B滴眼组与模型组相比晶状体上皮细胞中SOD、GSH-Px活性增高,MDA含量降低.结论 丹酚酸B滴眼可减轻糖尿病大鼠晶状体的混浊程度,可能与丹酚酸B通过抗脂质过氧化作用,提高细胞耐缺氧能力,抑制氧自由基的大量生成来保护晶状体上皮细胞有关.     

复方丹参片对血瘀模型大鼠的实验研究

目的 探讨复方丹参片对血瘀证模型动物相关指标的影响.方法 建立大鼠急性血瘀模型,通过检测血液流变学、血小板聚集以及血栓质量及抑制率评价复方丹参片对血瘀大鼠的作用;建立大鼠动静脉旁路血栓模型,观察复方丹参片对大鼠动静脉旁路血栓的影响.结果 复方丹参片高、中剂量组可以抑制血小板聚集,降低红细胞聚集能力、全血黏度及血浆黏度,增加红细胞的变形能力,延长血浆凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT),降低血浆纤维蛋白原(FIB)含量;低剂量组延长血浆TT.复方丹参片对大鼠动静脉旁路血栓的湿质量及干质量具有明显的降低作用,与模型组比较,差异有统计学意义.结论 复方丹参片具有改善血瘀模型大鼠血液流变性、抑制血小板聚集及血栓形成的作用,对大鼠动静脉旁路血栓也有抑制作用.     

参竹精片对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用

[目的]观察参竹精片对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用。[方法]选用健康雄性SD大鼠60只,随机分为模型组、参竹精片0.36、0.18、0.09 g/kg剂量组和维拉帕米对照组和假手术组,每组10只,各给药组按照设定的剂量灌胃,每日1次,连续7 d,假手术组和模型组给予等量的蒸馏水。给药7 d后,各组大鼠结扎冠状动脉左前降支缺血30 min、再灌注120 min,其中假手术组仅分离冠状动脉左前降支不结扎。观察大鼠心功能指标:左室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)、左心室收缩末期容积(LV Vols)、左心室收缩末期内直径(LVIDs)、左心室舒张末期容积(LV Vold)、左心室舒张末期内直径(LVI Dd);检测血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)含量。[结果]参竹精片0.18 g/kg剂量组可增加LVEF(P0.05)、LVFS(P0.01),降低了血清CK(P0.01);参竹精片0.36 g/kg剂量组降低了LDH(P0.05)、MDA(P0.01),升高了SOD(P0.01)。[结论]参竹精片可以减轻心肌缺血/再灌注过程中的损伤,对心功能具有一定保护作用。     

水飞蓟宾对离体心脏组织缺血再灌注损伤保护作用及机制研究

[目的]探讨水飞蓟宾（SIL）对Langendorff灌流大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机制。[方法]100只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、SIL低[100 mg/（kg·d）]、中[200 mg/（kg·d）]、高[400 mg/（kg·d）]剂量组,各20只;手术前2h灌胃给药,采用Langendorff灌流系统制备大鼠离体心脏灌注模型,模型组与SIL各组灌注K-H液20 min后停灌30 min、然后再灌注60 min后行各指标检测,而正常对照组持续灌注K-H液。测定冠脉流出液心肌酶活性;通过四氮唑（TTC）染色计算心脏组织梗死面积,采用苏木精-伊红（HE）染色对心脏组织进行病理学检查;测定血流动力学指标;测定抗氧化酶活性和丙二醛（MDA）含量;测定心肌组织Na⁺-ATPase、Ca²⁺-ATPase酶活力。[结果]与模型组比较,SIL中、高剂量组心肌酶：谷草转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶MB同工酶（CK-MB）活性显著降低,梗死面积显著降低;病理学检查结果显示：经SIL干预能够明显改善心脏组织病变;血流动力学指标明显改善[心率（HR）、左室收缩压（LVSP）、左室收缩压最大上升速率（+dP/dtmax）、左室舒张压最大下降速率（-dP/dtmin）显著升高,左室舒张压（LVEDP）显著降低];抗氧化酶：超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性显著升高且MDA含量显著降低;Na⁺-ATPase、Ca²⁺-ATPase酶活力显著升高,上述结果差异具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。[结论]SIL对离体心脏缺血再灌注损伤具有一定的抑制作用,其作用机制可能与SIL能够改善血液流变学指标、抑制氧化应激、提高ATP酶活力有关。     

银杏二萜内酯葡胺注射液对离体心脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

[目的]研究银杏二萜内酯葡胺注射液（DGMI）对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其机制。[方法]取120只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、DGMI低（1.5 mg/kg）、中（3 mg/kg）、高（6 mg/kg）剂量组和维拉帕米2.5 mg/kg组（阳性药物对照组）,各20只;手术前2 h,腹腔注射给药,正常对照组和模型组同步给予生理盐水。采用Langendorff灌流系统建立离体心脏灌注模型,正常对照组持续灌注Krebs-Henseleit液（K-H液）,模型组、DGMI各剂量组和维拉帕米组平衡灌注20 min后停灌30 min、再灌注60 min后行各指标检测。测定冠脉流出液心肌酶活性;2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色测定心脏组织梗死面积,苏木精-伊红（HE）染色观察心脏组织病变;测定血流动力学指标;测定心肌组织中抗氧化酶活性以及丙二醛（MDA）含量;测定心肌组织ATPase活力。[结果]与模型组比较,DGMI中、高剂量组和维拉帕米2.5 mg/kg组大鼠血清心肌酶谷草转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸激酶MB同工酶（CK-MB）活性均显著降低（P<0.05或P<0.01）;心脏组织梗死面积显著降低（P<0.01）,心脏组织病变明显改善;明显改善血流动力学指标：心率（HR）、左室收缩压（LVSP）、左室收缩压最大上升速率（+dP/dt_max）、左室舒张压最大下降速率（-dP/dt_min）均显著升高且左室舒张末压（LVEDP）显著降低（P<0.05或P<0.01）;抗氧化酶[超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）]活性显著升高且MDA含量显著降低（P<0.05或P<0.01）;Na⁺-ATPase、Ca²⁺-ATPase酶活力显著升高（P<0.05或P<0.01）。[结论]DGMI可能通过改善血液流变学、降低氧化应激损伤、改善ATPase活力而对大鼠离体心脏表现出一定的保护作用。     

丹酚酸B预处理EPCs联合BMSc移植对AMI大鼠心功能的影响

[目的]通过建立大鼠急性心肌梗死模型,将中药丹酚酸B预处理的内皮祖细胞(EPCs)按不同比例与骨髓基质细胞(BMSc)进行混合后注射至缺血局部,观察细胞移植后大鼠急性心肌梗死模型心功能的改善情况。[方法]应用密度梯度离心法和贴壁筛选法培养、纯化EPCs与BMSCs;采用结扎大鼠左冠状动脉前降支,制作大鼠急性心肌梗死模型。丹酚酸B最佳药物浓度处理的EPCs,以不同比例(1:1,2:1,4:1,8:1)与BMSc混合,在大鼠心肌梗死区周边分5点注射。[结果]各细胞移植组均能不同程度的改善心肌梗死大鼠心室结构,增强心功能。超声心动图结果:同一时间细胞移植组均能不同程度的改善心肌梗死大鼠心室结构,增强心功能,与模型组相比,4:1组、8:1组左室射血分数及心输出量明显升高(P<0.05)。[结论]丹酚酸B预处理的EPCs联合BMSc的移植促进了AMI大鼠左室功能的恢复。     

黄丹化瘀饮对大鼠脑缺血再灌注损伤及脑组织BDNF、VEGF表达的影响

[目的]探讨黄丹化瘀饮对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织脑源性神经生长因子(BDNF)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。[方法]选取SD(雄性)大鼠60只随机分为5组(每组12只):假手术组、模型组、小剂量组[7.20 g/(kg·d)]、中剂量组[14.40 g/(kg·d)]、大剂量组[28.80 g/(kg·d)]。用线栓法制备脑缺血再灌注模型,在缺血2 h后进行再灌注,再灌注后的24 h将大鼠处死。进行神经行为评分(Zea Longa评分法),用免疫组化法、蛋白质印迹法(Western blot)进行BDNF、VEGF及VEGFR-1蛋白表达检测,观察各组BDNF、VEGF、VEGFR-1表达情况。[结果]模型组脑缺血再灌注24 h后脑梗死体积及神经功能评分与假手术组比较,差异有统计学意义(P0.05);中剂量组、大剂量组脑梗死体积及神经功能评分与模型组比较,差异有统计学意义(P0.05);模型组VEGF、BDNF、VEGFR-1蛋白表达明显高于假手术组,差异有统计学意义(P0.05);中剂量组、大剂量组VEGF、BDNF、VEGFR-1蛋白表达明显高于模型组,差异有统计学意义(P0.05);小剂量组与模型组比较,VEGF、BDNF、VEGFR-1蛋白表达差异无统计学意义(P0.05)。[结论]黄丹化瘀饮用于脑缺血再灌注后脑损伤模型大鼠,能通过上调VEGF、BDNF、VEGFR-1蛋白水平发挥神经保护作用。     

首乌丹参方预处理对缺血再灌注损伤大鼠心肌保护作用研究

[目的] 观察首乌丹参方对大鼠缺血再灌注(I/R)损伤心肌梗死范围及血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性以及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影响。[方法] 采用结扎大鼠冠状动脉前降支30min/开放120min,建立心肌I/R模型,通过首乌丹参方预处理,观察I/R大鼠心肌梗死范围,血清乳酸脱氢酶(LDH)、CK、CK-MB活性及SOD、MDA的变化熏同时电镜下观察心肌超微结构变化。[结果] 首乌丹参方高、中剂量组梗死程度明显减轻,梗死区质量占全心脏及左心室的百分比与I/R组比较均有显著性差异(P<0.01雪,以首乌丹参方中剂量组为优;首乌丹参方能够使血清中的SOD值增加(P<0.01),MDA含量有不同程度的降低;能够减少心肌酶的漏出;电镜下I/R组心肌组织严重损伤,首乌丹参方用药后偶见局灶性损伤和毛细血管狭窄,心肌轻度损伤。[结论] 首乌丹参方对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,减少心肌酶漏出、减少自由基损伤是其保护心肌的重要机制之一。     

丹酚酸B对大鼠心肌梗死过程中病理形态学的影响*

[目的]探讨丹酚酸B(Salvianolic acid B,Sal B)治疗大鼠心肌梗死(myocardial infarction,MI)以后的病理形态学变化.[方法]通过结扎冠状动脉左前降支制作大鼠心肌梗死模型,测定各组心肌梗死面积占总面积的百分比,并且对心肌梗死部位成纤维细胞和毛细血管进行计数,观察Sal B对MI的干预作用.[结果]Sal B可以减少心肌梗死面积,促进毛细血管的生长,加速梗死灶的修复.[结论]Sal B可以减轻MI的面积,是中药丹参起效的重要物质基础之一,具有良好的开发及应用前景.     

脑心康片对大鼠脑缺血再灌注损伤后凋亡相关基因Caspase-3表达的影响

[目的]观察脑心康片对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用,进一步探讨其作用机制。[方法]Wistar大鼠雄性70只,按照体质量随机分为7组,每组10只。即脑心康片高剂量组、中剂量组、低剂量组、尼莫地平组、银杏叶片组、模型组和假手术组,分别给等体积生理盐水,各组均连续灌胃给药7d。末次给药30min后,采用大鼠大脑中动脉线栓法制备不完全脑缺血模型,观察脑心康片给药前后大脑中动脉阻塞(MCAO)大鼠神经功能缺损导致的行为学变化;免疫组织化学法检测脑心康片对脑缺血后24、48、72h脑组织半胱氨酰天冬氨酸激酶-3(Caspase-3)蛋白表达的影响。[结果]脑心康片能明显改善脑缺血大鼠的神经功能缺损症状,抑制Caspase-3蛋白的表达。[结论]脑心康片对脑缺血具有保护作用,遵循一定的时效关系和量效关系,其机制可能与脑心康片抑制凋亡相关基因的表达,进而抑制神经元细胞凋亡有关。     

参芪养心颗粒对冠脉结扎致犬急性心肌缺血影响的实验研究

[目的]研究参芪养心颗粒对冠脉结扎致犬急性心肌缺血的影响。[方法]冠脉结扎致犬急性心肌缺血,观察参芪养心颗粒对犬心肌缺血区心外膜电图（N-ST）、冠脉血管阻力（CVR）、心肌血流量（MBF）、心肌耗氧量（MOC）、左心室心肌细胞苏木精-伊红（HE）染色病理变化以及心肌梗死区质量的影响。[结果]与模型对照组比较参芪养心颗粒中剂量组（5.46 g生药/kg）和参芪养心颗粒高剂量组（10.92 g生药/kg）可显著降低犬心肌缺血区N-ST。与模型对照组比较参芪养心颗粒中剂量组（5.46 g生药/kg）和参芪养心颗粒高剂量组（10.92 g生药/kg）可显著降低冠脉血管阻力。与模型对照组比较参芪养心颗粒中剂量组（5.46 g生药/kg）和参芪养心颗粒高剂量组（10.92 g生药/kg）可显著增加犬急性心肌缺血模型的心肌血流量。与模型对照组比较参芪养心颗粒高剂量组（10.92 g生药/kg）可显著降低心肌耗氧量。与模型对照组比较参芪养心颗粒中剂量组（5.46g生药/kg）和参芪养心颗粒高剂量组（10.92 g生药/kg）可显著降低心肌梗死区质量。[结论]参芪养心颗粒对冠脉结扎致犬急性心肌缺血模型具有保护作用。     

针刺对局灶性脑缺血大鼠海马神经元细胞[Ca2+]i的影响

[目的]研究脑缺血不同时点大鼠海马神经元内游离Ca²⁺浓度[Ca²⁺]_i及醒脑开窍针刺对其影响,探讨醒脑开窍针刺法早期干预对脑缺血的治疗作用。[方法]建立大脑中动脉所致局灶性脑缺血(MCAO)模型,采用醒脑开窍针刺法治疗,采用激光扫描共聚焦显微技术动态观察脑组织海马CA1区锥体细胞[Ca²⁺]_i在不同时间点的变化。[结果]与正常组大鼠相比,模型组大鼠脑组织海马CA1区锥体细胞内游离[Ca²⁺]_i(以细胞内Ca²⁺相对荧光强度表示)在局灶性脑缺血1 h时升高,持续升高至缺血24 h时(P<0.05)。假手术组与正常组相比[,Ca²⁺]_i变化差异无统计学意义(P>0.05)。相应时间点非穴位针刺组与模型组[Ca²⁺]_i比较,无统计学意义(P>0.05)。在相应时间点,醒脑开窍针刺组[Ca²⁺]_i低于模型组(P<0.01)。[结论]急性局灶性脑缺血后大鼠海马神经细胞[Ca²⁺]_i随缺血时间的延长而持续升高,提示细胞内钙超载;醒脑开窍针刺组能有效调节缺血区的[Ca²⁺]_i,提示在缺血后针刺治疗效果越早越好,为临床及早应用针刺治疗缺血性脑血管病提供了理论依据。