γ射线辐照对红细胞悬液中淋巴细胞杀伤作用的探讨

输血相关性移植物抗宿主病（TAGVHD）一种致命性输血并发症。该病起病突然，不易诊断，进展迅速，疗效较差，因此重在预防。普遍认为γ射线辐照血是预防TA—GVHD的惟一途径。但国内对辐照血尚无统一的标准，笔者对悬浮红细胞的辐照剂量进行了探讨。     

血液辐照指示卡在血液辐照中的应用进展

输血相关性移植物抗宿主病是临床输血中的并发症之一,通过射线辐照灭活全血及成分血制品中的淋巴细胞是预防输血相关性移植物抗宿主病的有效手段。在辐照中应用血液辐照指示卡可有效保证辐射剂量,进而提高输血安全性。目前血液辐照指示卡在发达国家已基本普及,而在我国尚处于推广阶段。本文就血液辐照指示卡在血液辐照中的作用原理、国内外应用情况及推广意义作一综述。     

r射线辐照对血液中电解质浓度变化的影响

输血前对血液制品进行辐照，是预防输血相关移植物抗宿主病（TA—GVHD）惟一可靠的方法，我国的一些血站、医院已开始制备应用，而目前国际上对辐照血尚无统一的标准，由于辐照在有效杀灭淋巴细胞活性的同时，也可能对血液中其他有效成分造成一定的影响，笔者观察了不同剂量的Cs^137γ射线辐照全血后电解质浓度的变化，现将结果报告如下。     

γ射线辐照对T淋巴细胞增殖及活性影响的实验研究

输血相关的移植物抗宿主病 (transfusion associatedgraft versus hostdisease,TA GVHD)是由于在输血过程中输入的血制品中含有免疫活性的T淋巴细胞不能被受者淋巴细胞识别和排斥 ,在受者体内植活、增殖进而攻击和破坏受者体内的细胞和组织而引起的疾病。TA GVHD死亡率极高 ,目前最有效的预防方法是对血制品行γ射线辐照。我们通过体外实验 ,观察不同辐照剂量下T淋巴细胞活化、增殖及细胞因子分泌的变化以及对红细胞、血小板的影响 ,以期选择既能灭活淋巴细胞又能保持其他细胞功能和活力的最佳辐照剂量 ,为临床应用提供实验依据。材料…     

袋血辐照对红细胞诸参数影响的探讨

一定剂量的射线辐照可灭活血液中的淋巴细胞,使其丧失增殖能力,从而有效预防输血相关移植物抗宿主病（TA—GVHD）。由于辐照血液目前尚无公认的统一标准,国内临床上一般都是辐照后立刻使用,但随着辐照血应用量的增大,这种方式已不能满足临床需要。笔者对悬浮红细胞采用γ射线进行辐照,并对辐照后不同保存期的悬浮红细胞诸参数进行检测,以探讨悬浮红细胞的质量变化,现将结果报告如下。     

γ射线辐照对保存血红细胞质量的影响

输血相关的移植物抗宿主病 ( TA- GVHD)的病死率高 ,且缺乏特异的治疗手段 ,目前以预防为主。 γ-射线辐照血液是预防 TA- GVHD的主要方法 ,γ-射线辐照对红细胞的损伤是照射瞬间产生的 ,长时间储存是否会加重其损伤 ,对辐照血的保存期等尚无统一标准 ,美国 FDA血制品建议委员会推荐照射红细胞保存期不超过 2 8d[1] ,而日本对辐射血液的保存期则定为采血后 2 1 d[2 ] ,国内目前尚无标准。笔者对经13 7铯 ( Cs)γ-射线 (照射剂量 2 5Gy)照射后的 ACD- B方、CPD方全血在不同保存时间的理化指标进行了测定 ,现报告如下。材料与方法1…     

紫外线照射对预防TA—GVHD淋巴细胞增殖和混合淋巴细胞培养的影响

目的：消除供血中的淋巴细胞活性是防止输血相关的移植物抗宿（ＴＡ－ＧＶＨＤ）唯一有效的方法，方法：应用０，９０，４５０，９００ｍＪ／ｃｍ＾２短波紫外线（ＵＶＣ）照射正常人外周血，以淋巴细胞增殖和混合淋巴细胞为培养为指标，观察了淋巴细胞活性抑制及消除同种免疫反应的效果，并将其与２５Ｇｙγ射线照射作了对比，结果≥９０ｍＪ／ｃｍ＾２的ＵＶＣ对淋巴细胞的活性有明显的抑制作用，但以４５０ｍＪ／ｃｍ＾２为最佳，     

137Cs γ射线辐照成分血在造血干细胞移植中的应用

【目的】观察输注经^137Csγ射线辐照的成分血预防输血相关性移植物抗宿主病（TA-GVHD）的疗效。【方法】将73例输注经7射线辐照的红细胞悬液共341U（2u／次）；机采血小板167个治疗量（10u／治疗量）的患者输血前后24小时外周血的血红蛋白（Hb）、红细胞计数（RBC）、和血小板计数（PLT）进行比较，并观察输注后1个月患者有无皮肤、骨髓、肝肠等器官及相关脏器受损表现。【结果】输注辐照成分血后24h患者外周血Hb、RBC、PLT较之输血前均明显升高，呈显著差异（P〈0．01）。所有患者均未出现TA—GVHD相关脏器受损表现。【结论】了射线辐照成分血能提高血小板计数和血红蛋白含量，有效预防出血和输血相关性移植物抗宿主病的发生。     

γ-射线辐照对淋巴细胞杀伤效果的研究

目的　确定抑制淋巴细胞增殖所需的最低辐照剂量。方法　分别用 5、15、2 5、35、5 0Gy 5种剂量对血液进行辐照处理 ,然后进行混合淋巴细胞培养 (MLC)及有丝分裂原刺激试验 ,测定3 H掺入量以测定淋巴细胞的残存增殖活性。结果　与未辐照血相比 ,15Gy剂量辐照时 ,对MLC培养的抑制率已达 (96 .4± 2 .0 ) % ,但对PHA刺激和ConA刺激反应的抑制率分别为 (85 .0± 1.7) %和 (86 .5± 5 .1) % ,均低于 95 % ;2 5Gy剂量辐照时 ,对PHA刺激和ConA刺激反应的抑制率分别达 (96 .3± 2 .8) %和 (96 .6± 4 .3) %。结果　 15Gy剂量不足以预防TA GVHD ,最低辐照剂量应为 2 5Gy。     

低剂量碳离子全身辐射对小鼠淋巴细胞增殖及血清干扰素的影响

目的:观察小于0.1Gy剂量碳离子全身辐射引起的小鼠脾淋巴细胞增殖及血清干扰素的变化。方法:实验于2006-11在中国科学院近代物理研究所医学物理实验室进行。①实验过程:取昆明系小鼠30只,采用完全随机设计方法分为5组,每组6只,采用离子束进行全身照射。12C6 离子照射在兰州重离子研究装置(HIRFL)辐照终端进行,照射剂量为0,0.01,0.03,0.05,0.10Gy。麻醉照射后24h,小鼠摘眼球取血。②实验评估:采用ELISA法测定血清γ-干扰素含量,操作严格按试剂盒说明进行。将眼球取血后的小鼠脱颈处死,无菌条件下取出脾脏,常规制备单细胞悬液,采用MTT法检测刀豆蛋白A和脂多糖对脾淋巴细胞的增殖作用。结果:30只小鼠均进入结果分析。①辐射对小鼠血清干扰素的影响:与未照射正常小鼠比较,0.01Gy和0.03Gy碳离子束照射后,小鼠血清中γ-干扰素含量明显增高(P<0.05)。照射剂量继续增大至0.05Gy和0.10Gy时,血清γ-干扰素含量下降。②辐射对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响:与未照射组比较,0.01Gy碳离子束照射可明显促进刀豆蛋白A诱导的T淋巴细胞增殖和脂多糖诱导的B淋巴细胞增殖(P<0.001,P<0.001),其促进作用与0.03Gy组比较,差异有显著性意义(P<0.01)。0.05Gy照射开始抑制脾淋巴细胞增殖指数,当照射剂量增大为0.10Gy时显示出明显的抑制作用。结论:0.01Gy和0.03Gy碳离子束照射能刺激淋巴细胞增殖,并能诱导γ-干扰素活性以增强机体免疫力。     

γ-线照射对人树突状细胞表型及功能的影响

为了了解γ-线照射是否影响体外培养的树突状细胞的表型与功能，利用含rhGM-CSF(800U/ml)和rhIL-4(500U/ml）的RPMI1640培养基从多发性硬化症病人的外周血单个核细胞（PBMNC）中诱生树突状细胞（DC）。在培养的第6天加入5μg/ml的脂多糖继续培养24小时促使DC完全成熟。于第7天收获DC并等分成几部分，一部分未经γ-线照射的DC用作对照组，其他部分的DC分别用25Gy和30Gy剂量的γ射线照射。流式细胞术分析DC的表面分子并测定DC细胞刺激同源T细胞增殖的能力。结果表明，γ-线照射减少树突状细胞CD86，CD80和HLA-DR表达，尤其是CD86分子的表达（P=0.0072）。人DC能有效地刺激同源T细胞的增殖，但是同未经照射的DC相比，照射的DC刺激T细胞增殖的能力显降低。结论：γ-线照射不仅影响DC的表型，而且影响它的功能。     

γ射线辐照单采血小板功能及临床应用研究

目的研究不同剂量辐照灭活淋巴细胞及对血小板活性的影响并观察γ射线辐照单采血小板临床应用效果。方法将单采血小板分装于5个血袋中,分别作为未辐照组（对照组）和25、30、35、40Gy不同剂量辐照组,将上述经辐照前后的血小板标本经淋巴细胞分离液分离出淋巴细胞后,用植物血凝素（PHA）刺激T淋巴细胞,使其转化为淋巴母细胞,经瑞氏染色后用显微镜分别计数转化为母细胞的百分率;用流式细胞仪检测经35Gy剂量辐照后的血小板的CD41a、CD62p;选取40例接受化疗的急性白血病患者,随机分为对照组和治疗组,其中对照组20例,治疗组20例,分别输单采血小板和辐照单采血小板,观察血小板纠正增加指数（CCI）及输注后临床表现。结果剂量为35Gy时,淋巴细胞的转化率为0;35Gyγ射线辐照前后血小板CD41a、CD62p阳性率的比较差异无统计学意义（P〉0.05）;治疗组和对照组血小板输注有效率的比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论适当剂量的辐照可以有效减少血液中有活性淋巴细胞的数量,同时又对血小板的活性没有显著的损伤。     

60^Coγ射线照射对心肌细胞蛋白表达的影响

目的研究60^Coγ射线照射对体外培养的大鼠心肌细胞蛋白表达的影响。方法体外培养新生大鼠心肌细胞,分为未照射组（OGy组）、5Gy、10Gy、20Gy照射组,分别用60^Coγ射线0Gy、5Gy、10Gy、20Gy单剂量照射心肌,在照射后48h：（1）用蛋白检测试剂盒检测各组心肌细胞中的总蛋白含量;（2）用流式细胞仪检测检测各组细胞的细胞周期变化;（3）用带绿色荧光蛋白基因的腺病毒（AdGFP）感染各组心肌细胞,感染后48h用流式细胞仪检测各组心肌细胞中所含的绿色荧光蛋白的平均荧光强度（MFI）,间接比较各组心肌细胞中绿色荧光蛋白的生成量。结果照射后48h,各照射组心肌细胞中的总蛋白含量较未照射组减低,照射组心肌细胞的绿色荧光强度明显弱于未照射组（P〈0．01）,抑制程度与照射剂量呈正相关。结论60^Coγ射线单剂量照射抑制体外培养的心肌细胞的蛋白合成。     

致死剂量γ射线照射小鼠脾淋巴细胞凋亡特征及与Bax和Bcl-XL表达的关系

目的观察致死剂量γ射线照射后小鼠脾淋巴细胞凋亡特征及其与Bax和Bcl—XL表达的关系。方法清洁级C57小鼠225只,随机分为0、6、9、12、15和20Gy6个组,经γ射线全身一次照射,于照射前和照射后6h～28d活杀取材,用原位末端标记法(TUNEL)和Annexin—V流式细胞术(FCM)检测淋巴细胞凋亡和坏死情况,用碱性磷酸酶免疫组化技术检测Bax和Bcl—XL蛋白的表达。结果①各剂量组小鼠外周血白细胞在照射后6h出现一过性升高,以后迅速下降。6Gy照射后7d降至最低,至照射后28d基本恢复到正常水平。②不同剂量照射后6h脾淋巴细胞凋亡率达高峰;照射后6～24h,≤12Gy照射后凋亡率随照射剂量的增加而升高,≥15Gy照射后凋亡率下降。③FCM检测结果证实,6～12Gy照射后6h,脾淋巴细胞凋亡率呈现出量-效关系,≥15Gy照射后凋亡率下降,而坏死率明显升高。DNA凝胶电泳图谱分析支持上述结果。④照射后6h,6Gy照射后脾淋巴细胞Bax蛋白表达增加,至12Gy达峰值,显示出量-效关系;≥15Gy未显示出量-效关系;Bcl—XL蛋白随照射剂量增加而持续降低,在6～12Gy也显示出较好的量-效关系。结论6～12Gy照射后脾淋巴细胞死亡方式以凋亡为主,≥15Gy照射后凋亡与坏死均为淋巴细胞的重要死亡途径。促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl—XL在致死剂量照射引起的淋巴细胞凋亡调控中起重要作用。     

60Coγ照射加深低温保存对大鼠同种带瓣主肺动脉免疫原性的作用

目的本实验应用60Coγ射线照射加液氮深低温保存大鼠同种带瓣主肺动脉（Valvedpulmonary hongraf conduit,VPHC）,并建立大鼠VPHC颈总动脉移植模型,观察不同照射剂量对同种带瓣主肺动脉免疫原性的作用,寻找合适照射剂量,为进一步基础研究及临床应用提供理论依据。方法1月龄雌性Wistar大鼠50只,作为供体,成年雄性赋）大鼠50只,作为受体,随机分为实验对照组（单纯深低温保存组）、300Gy照射组、600Gy照射组、900Gy照射组和1200Gy照射组,另取10只sD大鼠行颈总动脉切断吻合术,作为空白对照组。应用流式细胞术对VPHC移植术后1周、2周、3周受体鼠外周血行CD4＋T细胞及CD8＋T细胞检测。结果600Gy照射组VPHC移植术后1周、2周、3周CD4＋T细胞、cD8＋T细胞百分率及cD4＋／cD8＋与空白对照组相比无显著性差异（P〉0．05）,与实验对照组相比差异显著（P〈0．01）。结论应用60Gy 60Coγ射线对VPHC进行照射在保持VPHC活性的同时明显降低了其免疫原性。     

Effects of X-ray radiation on the rheologic properties of platelets and lymphocytes

BACKGROUND: Blood is often irradiated before transfusion for severely immunocompromised patients to prevent a potentially fatal complication of transfusion-associated GVHD. STUDY DESIGN AND METHODS: This study evaluates the effects of X-ray radiation on platelet and lymphocyte rheology because the ability of these blood cells to deform is vital to their flow throughout the microvascular system. Micropipette aspiration experiments were conducted on platelets and lymphocytes exposed to X-ray radiation doses of 0 (control), 25, and 50 Gy. RESULTS: A significant increase in the Young modulus of elasticity was observed between control platelets and irradiated platelets at 25 Gy (p = 0.02) and 50 Gy (p = 0.03). Percent cell activation increased significantly in 25 Gy-irradiated platelets (p = 0.008). In addition, lymphocytes irradiated at 25 Gy have a higher viscosity than controls (p < 0.02). A significantly larger number of activated cells is found in the 50 Gy-irradiated lymphocyte population (p < 0.04). CONCLUSION: The changes in the deformability and activation of irradiated platelets and lymphocytes may reduce local blood flow and lead to intermittent blockage, which may cause a change of blood flow in microvasculatures.     

泛T淋巴细胞结合照射诱导的再生障碍性贫血小鼠模型的优化

目的:建立适用于研究T淋巴细胞功能的获得性再生障碍性贫血(acquired aplastic anemia,AA)动物模型以及应用于再生障碍性贫血发病机制及治疗研究的动物模型。方法:对X射线联合淋巴细胞注射诱导的获得性再生障碍性贫血小鼠模型进行优化。AA组:富集C57BL/6J小鼠的脾脏泛T细胞,按细胞数5×10⁶/只经尾静脉注射至分别经3、4和5 Gy X射线照射的CB6F1小鼠体内;单纯照射组(total body irradiation,TBI):经尾静脉注射与AA组相同体积的PBS至分别经3、4和5 Gy X射线照射的CB6F1小鼠体内;对照组:经尾静脉注射与AA组相同体积的PBS至CB6F1小鼠体内;检测外周血血常规,计数骨髓有核细胞数,骨髓病理切片检测骨髓造血,流式细胞术检测骨髓T细胞分布比例、骨髓细胞凋亡和脾脏T细胞的分化程度。结果:相较于4、5 Gy照射的AA组,3 Gy照射的AA组生存期明显延长;经3、4、5 Gy X射线照射联合泛T淋巴细胞注射均可成功诱导受体鼠外周血红细胞、白细胞、血小板数严重减少,骨髓有核细胞严重减少,骨髓造血衰竭,骨髓中T淋巴细胞占比明显增加,CD4⁺T和CD8⁺T细胞均增加但以CD8⁺T细胞为主,并促进T细胞从初始T细胞向效应记忆T细胞分化。结论:3、4和5 Gy X射线的照射联合5×10⁶泛T细胞注射均可通过引起T淋巴细胞功能亢进,成功构建AA动物模型;较4、5 Gy照射剂量,3 Gy照射组生存期明显延长,外周血血象与AA临床患者表现更接近。     

人骨髓间充质干细胞对异体B淋巴细胞的免疫调节作用

目的 研究人骨髓问充质干细胞（MSC）体外对B淋巴细胞的免疫调节作用。方法 从人骨髓中分离培养MSC，通过观察细胞形态和流式细胞术检测细胞表面标志进行鉴定。用加速器辐射去除MSC增殖分化能力。检测加入骨髓MSC前后B淋巴细胞增殖能力变化，并对其进行凋亡分析；比较Transwell非接触培养与直接接触培养中，MSC对活化B淋巴细胞增殖的作用；观察骨髓MSC作用前后，活化B淋巴细胞分泌免疫球蛋白IgG、IgA和IgM的能力，以及B淋巴细胞表面免疫分子的表达。结果 ①MSC不能刺激B淋巴细胞增殖；MSC抑制LPS活化的B淋巴细胞增殖，其抑制作用与浓度呈依赖性。②MSC不能诱导B淋巴细胞凋亡；Transwell非直接接触培养组中MSC抑制B淋巴细胞增殖的作用较直接接触培养组的作用弱，提示MSC抑制B淋巴细胞增殖的作用包括物理性接触抑制和非接触抑制。③骨髓MSC抑制活化的B淋巴细胞分泌免疫球蛋白IgG、IgM和IgA；MSC作用下，B淋巴细胞表面HLA-DR、CIMO、CD80和CD86的表达无显著改变。结论 骨髓MSC在体外可抑制B淋巴细胞增殖和分泌功能，具有一定的免疫调节能力。     

100例脊髓血管畸形介入检查或治疗的辐射剂量分析

目的 测量在脊髓血管畸形的介入放射学检查及治疗过程中患者及介入医生所受到的X线辐射剂量；分析影响X线辐射剂量的因素及其减低剂量的途径和方法。方法 应用热释光测量法对我中心近期100例脊髓血管畸形进行介入放射学检查和(或)介入治疗辐射剂量测量。结果 全脊髓血管造影患者皮肤剂量范围0．009～2．032Gy，介入医生所受剂量范围0．225～1．601mGy；进行栓塞治疗时患者皮肤剂量范围2．131～9．874Gy，介入医生所受剂量范围0．307～2．462mGy。结论 全脊髓血管造影是诊断脊髓血管畸形的金标准，并为手术或介入治疗提供重要依据。介入栓塞治疗是治疗脊髓血管畸形的重要而有效的方法之一，但是患者及介入医生所受的X线辐射剂量很大，个别患者可出现急性放射性皮肤红斑、脱发等症状。因此应该采取有效的防护措施来减低X线辐射剂量。     

伽玛刀治疗垂体腺瘤远期疗效观察

目的探讨伽玛刀治疗垂体腺瘤远期肿瘤控制及并发症发生情况。方法 2004年6月2006年12月共158例垂体腺瘤患者接受伽玛刀治疗。伽玛刀治疗边缘剂量12～30Gy,以45%～70%等剂量曲线覆盖肿瘤灶。术后定期对患者进行门诊随访和鞍区增强MRI扫描,记录肿瘤控制及并发症发生情况。结果 131例患者完成随访,平均随访时间49个月。至随访结束,共7例患者肿瘤增大复发。伽玛刀治疗后1、2、3、4及5年肿瘤控制率分别为95.8%、95.8%、95.8%、95.8%及93.9%。46例患者（35.1%）在治疗后出现暂时性头痛和感觉异常,对症处理后缓解;4例患者（3.1%）出现垂体功能低下,接受激素替代治疗。未观察到其他颅神经和血管损害表现。结论伽玛刀治疗垂体瘤远期疗效肯定,并发症轻微,是一种安全可靠的垂体瘤治疗手段。