非套管法大鼠异体原位单肺移植动物模型的建立

 目的 建立稳定的大鼠非套管法异体原位左肺移植模型。方法 使用250~350 g Sprague Dawley（SD）大鼠进行实验,采用显微外科技术,分别连续缝合支气管和肺动、静脉,建立大鼠异体原位左肺移植模型。观察大鼠存活时间,移植肺脏血管、支气管吻合口通畅性。结果 10只接受左肺移植的受体大鼠均成功脱离呼吸机,供肺冷缺血时间约40 min,热缺血时间约40 min,总手术时间约130 min。解剖后检查示各吻合口均通畅。结论 非套管法大鼠原位左肺移植模型具有稳定、可靠、接近临床肺移植的优点。     

改良三袖套吻合法建立大鼠左肺原位移植模型及其鉴定

目的对三袖套吻合法建立的大鼠肺移植模型进行改进,建立操作简便和稳定有效的大鼠左肺原位移植模型。方法在预实验的基础上,对三袖套吻合法建立的大鼠肺移植模型进行以下改进:供体采用胸骨正中切口,经肺动脉圆锥处进行低压肺灌注;制作"袖套"时用无损伤血管夹固定套管尾部;套入"袖套"时用无创显微心耳钳钳夹住左肺门,在不离断"病肺"的情况下完成吻合;完善呼吸道管理流程。以手术成功率、手术时间、移植肺功能、肺组织病理学改变等对模型进行评估。结果完成大鼠左肺原位移植10例,手术成功率80%。供肺灌洗到获取时间为(12±2)min,体外套管时间为(18±3)min,吻合时间为(31±3)min。移植肺再灌注15 min的氧合指数显著高于单肺通气30 min(P<0.05)。移植肺再灌注2 h后的病理学改变符合典型的缺血-再灌注损伤特征。结论成功改进了大鼠左肺原位移植模型,该模型稳定有效且操作简便。     

改良三袖套吻合法建立大鼠左肺原位移植模型及其鉴定

目的对三袖套吻合法建立的大鼠肺移植模型进行改进,建立操作简便和稳定有效的大鼠左肺原位移植模型。方法在预实验的基础上,对三袖套吻合法建立的大鼠肺移植模型进行以下改进:供体采用胸骨正中切口,经肺动脉圆锥处进行低压肺灌注;制作袖套时用无损伤血管夹固定套管尾部;套入袖套时用无创显微心耳钳钳夹住左肺门,在不离断病肺的情况下完成吻合;完善呼吸道管理流程。以手术成功率、手术时间、移植肺功能、肺组织病理学改变等对模型进行评估。结果完成大鼠左肺原位移植10例,手术成功率80%。供肺灌洗到获取时间为(12±2)min,体外套管时间为(18±3)min,吻合时间为(31±3)min。移植肺再灌注15 min的氧合指数显著高于单肺通气30 min(P<0.05)。移植肺再灌注2 h后的病理学改变符合典型的缺血-再灌注损伤特征。结论成功改进了大鼠左肺原位移植模型,该模型稳定有效且操作简便。     

SD大鼠左肺移植模型的建立与改进

目的改进大鼠原位左肺移植技术,建立快速、安全、可重复性强的大鼠肺移植动物模型的方法。方法SPF级健康雄性SD大鼠90只,体质量300~350g。其中60只作为供、受体,受体略大于供体,供、受体间体质量差不超过20g,运用三袖套法吻合左肺动、静脉及支气管以建立大鼠左肺移植模型,移植成功后的受体在48h后取肺静脉血进行血气分析(PO2、PCO2);30只为对照组,肺静脉取血进行血气分析。观察记录大鼠肺移植供肺获取、套管及受体移植时间;移植肺血液循环及膨胀情况;移植肺与对照组血气分析结果比较。结果完成大鼠肺移植手术30例,成功27例,失败3例(肺静脉撕裂1例,脱机失败1例,肺动脉扭转1例)。大鼠供肺获取时间为(13.5±2.0)min,供肺套管时间为(15.5±2.5)min;游离大鼠受体左侧肺门部动、静脉及支气管并套线、结扎时间为(19.2±2.0)min;吻合时间为(18.5±4.0)min。在先开放肺动脉血流,接着开放肺静脉血流后,移植的左侧肺叶颜色均匀一致的红润,左肺血流得到充分的灌注,静脉充盈良好,回流畅通;恢复机械通气后,27例移植肺膨胀良好。左肺移植成功48h后,肺移植大鼠右侧肺门夹闭5min后PO2为(7.88±0.84)kPa,PCO2为(6.67±1.09)kPa;对照组大鼠夹闭右侧肺门5min后肺静脉PO2为(8.55±0.97)kPa,PCO2为(6.20±0.88)kPa。2组PO2比较差异有统计学意义(P<0.05),PCO2比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论改进后的肺移植技术可为大鼠肺移植的相关研究提供稳定、可靠及可重复的动物模型。     

大鼠同种异体左肺原位移植模型的方法改进

目的建立一种更简单有效的大鼠左肺原位异体移植模型。方法持续供肺肺动脉低压灌注4℃的低钾右旋糖苷(LPD)液,采用连续外翻法褥式缝合吻合支气管膜部、肺静脉、肺动脉,快速建立大鼠左肺原位移植模型。结果60只SD大鼠接受左肺移植,平均吻合时间(36.2±9.6)min,手术成功率91.7%。术后抗免疫治疗,1周存活率为70.9%;2周存活率为50.9%;4周存活率为21.8%。术后肺动脉栓塞1例,死于术后第3天,余所有受体大鼠没有发现吻合口狭窄及栓塞。结论该新的模型对于研究肺移植供肺保护、缺血再灌注损伤以及急、慢性排斥反应等近远期的相关问题,具有简单可靠、存活时间长的优点。     

大鼠同种异体左肺原位移植模型的改进

目的探讨建立更简单有效、安全可靠的大鼠肺移植模型。方法将40只SD大鼠随机分为供、受体两组,沿用袖套法进行肺动、静脉的吻合,内支架进行支气管重建,采取先吻合静脉后气管、动脉的序贯式方法。结果20只接受移植手术顺利完成吻合;20只供肺手术顺利,供肺获取及套管用时(35±5)min,吻合时间(38±4)min,其中两只因肺静脉不畅致移植肺迅速水肿,一只肺膨胀不佳。动脉及气管未发现异常。病理切片显示肺组织结构基本正常。结论经改进后的大鼠肺移植模型明显提高了成功率,降低了操作难度。     

改良Heron法建立大鼠颈部心脏移植模型

目的:对Heron法建立心脏移植模型的手术方法进行改良,建立更合理、符合实验需要的心脏移植模型.方法:对Her-on法进行改良,将受体右颈外静脉套管插入供心右肺动脉,右颈总动脉套管插入供心主动脉,环扎固定,供心左肺动脉结扎,从而建立改良的大鼠颈部心脏移植模型.结果:单人操作连续进行正式试验52次,移植成功50次,成功率96.2%.全组受体无手术死亡,无吻合口漏血、血液回流障碍.每例手术总时间需50～60 min;受体血管套管准备时间为(18士3)min;供心摘取时间为(10士1)min;颈部移植时间为(6士1)min;冷缺血时间为(16士1)min.结论:改良Heron法建立大鼠颈部心脏移植模型,无需显微外科操作,是一种更合理、实用、稳定可靠和易于复制的器官移植研究动物模型.     

快速法切取供肝及改良袖套技术在大鼠肝移植中的应用

目的以二袖套法为基础,探讨影响大鼠原位肝移植手术成功的关键因素,并进行改良。方法采用“快速法”切取供肝;改良套管技术;预防腹腔出血等方法对220例大鼠行原位肝移植手术。结果供体手术时间(21.6±1.95)min,供肝修整时间(23.1±1.61)min,受体手术时间(48.1±2.63)min,无肝期为(15.9±2.26)min。手术成功率为94.1%,1周存活率为88.5%,3个月存活率为80.7%。结论利用改良方法能够简化手术过程,提高手术成功率和生存率。     

乌司他丁对大鼠单肺移植后缺血再灌注损伤的作用

目的研究乌司他丁(UTI)在大鼠原位异体左肺移植模型中对供肺缺血再灌注损伤的治疗作用。方法16只接受原位异体左肺移植的SD大鼠随机分为2组,每组8只。对照组受体在供肺通气和再灌注开始时静脉注射生理盐水,UTI治疗组大鼠也在供肺通气和再灌注开始时接受UTI10 000U/kg,静脉注射。2h再灌注后取供肺肺静脉血测血气,处死动物,取部分供肺行组织学观察,其余部分保存于液氮中,测量供肺干湿重比,提取肺匀浆,测量髓过氧化物酶浓度(MPO),细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的mRNA表达和IL-8浓度。结果在UTI组,供肺肺静脉血气示PaO2/FiO2显著高于对照组[(38.62±0.75)kPavs(31.57±1.85)kPa,P<0.05)],移植肺干湿重比[(4.74±0.28)vs(5.00±0.12),P<0.05]、ICAM-1mRNA表达和MPO[(0.63±0.23)vs(0.84±0.22),P<0.05]浓度均低于对照组,病理示治疗组组织损伤轻于对照组。但治疗组IL-8[(173.43±27.64)vs(76.22±12.42),P<0.001]浓度显著高于对照组。结论UTI对大鼠单肺移植模型中移植肺的缺血再灌注损伤有保护作用。     

大鼠异体肾移植动物模型的建立

目的:建立稳定的大鼠异体肾移植模型,为开展肾移植研究奠定良好的实验基础。方法:采用Wistar和SD大鼠,血管吻合采用供受体腹主动脉和下腔静脉端侧连续缝合,尿路重建采用供受体输尿管端端吻合,建立大鼠异体肾移植模型,观察和比较同系移植组与异系移植组大鼠间异体肾移植后的存活情况及术后并发症和肾脏免疫病理损害情况,并对模型制备作出客观评价。结果:手术总时间平均为(108±15)min,手术成功率为83.33%(25/30)。同系移植组大鼠平均存活时间(9.1±0.8)d。异系移植组大鼠平均生存时间为(6.27±0.3)d,术后第3天有明显的病理损害。结论:此模型有较高的成功率,并发症发生率低,符合肾移植实验研究的需要。     

改进的大鼠原位肝移植术与相关手术技巧

目的：改进大鼠原位肝移植的手术方式，并总结出相关手术技巧。方法：用改进的二袖套法共建立160例大鼠原位肝移植模型。术中门静脉、肝下下腔静脉用袖套法吻合，肝上下腔静脉用缝合法吻合，胆管内支架法完成胆道重建。结果：采用改进的二袖套法进行大鼠原位肝移植，平均供体手术时间46min，修整供肝时间24min，受体无肝期21min，肝上下腔静脉缝合时间13min，门静脉套管时间3min，肝下下腔静脉套管时间4min．胆管插管时间3min。术中和术后24h内主要死亡原因是气胸、麻醉意外、出血，手术成功率92．5％。存活超过24h者，主要死亡原因为感染、胆道梗阻以及移植肝功能失活。结论：制作大鼠原位肝移植模型需要娴熟的显微外科基本功和耐心细致的手术操作。改进的二袖套法具有无肝期短、手术成功率高的优点，是建立该模型的理想术式。     

大鼠原位肝移植及术后肝细胞超微结构观察

用５１只Ｗｉｓｔａｒ大鼠建立了新的大鼠原位肝移植手术模型,手术成功率为９２．１％,周存活率为８６．２７％。手术要点是术前供肝冷灌注;受体肝只建立门静脉血供,静脉吻合分别采用“双袖套”式吻合和“８”字外翻缝合;胆管重建采用单管支架总胆管对端吻合法。移植术后肝细胞超微结构动态观察表明：术后２周是控制免疫排斥反应的关键时期,术后８周实验鼠产生免疫耐受性,移植肝脏成活。     

端端吻合技术建立SD-Wistar大鼠肾移植模型

目的 采用端端吻合技术建立稳定的SD-Wistar大鼠肾移植模型。方法 SPF级雄性SD及Wistar大鼠各60只,供体采用SD大鼠,受体采用Wistar大鼠,取左肾作为供肾,受体切除左肾进行原位肾移植,并保留自身右肾,供体肾动脉、肾静脉及输尿管均与受体Wistar大鼠进行端端吻合,管腔均采用间断缝合。结果 本实验每例SD-Wistar肾移植模型总手术时间约为105.54±20.63min,血管吻合时间约为20.42±5.81min,输尿管吻合时间约为5.21±2.42min。移植肾的热缺血时间约为11.24±3.52s,冷缺血时间约为40.35±8.52min。本组共进行SD-Wistar肾移植模型60例,术中发现肾动脉血栓形成2例;术后24h内死亡1例,成功率达95.00%。结论 采用端端吻合技术可成功建立SD-Wistar大鼠肾移植模型。     

大鼠原位异体胃移植模型的实验研究

目的应用显微外科技术,建立大鼠原位异体胃移植模型.方法70只SD大鼠,行35例次的胃移值手术.供体手术,先切除脾脏,经腹主动脉行原位胃冷灌洗.将胃及其所属血管,包括腹腔干和门静脉干等一并切取.受体手术,先切除胃和脾脏,分别行供、受体间门静脉的端侧吻合,供体腹腔干与受体胃左动脉的端端吻合,然后开放血流.再行供体和受体十二指肠间端端吻合,贲门与食管端端吻合.结果在施行的35例手术,后20例中有16例成功,成功率为80%.最长存活者达3个月.结论成功地建立了大鼠原位异体胃移植类型.该模型可用于腹部多脏器移植中移植胃的相关研究及全胃切除术后代胃的研究.     

左髂静脉压迫综合征的外科治疗

目的 探讨对左髂静脉压迫综合征患者外科处理的适应证、手术方法和围手术期的处理经验。方法 左下肢静脉曲张或慢性肿胀46例,行介入治疗32例,进腹行髂静脉松解、右髂动脉后置吻合8例,髂静脉病变段切除、人工血管原位移植6例,同时或二期手术处理大隐静脉及股静脉瓣膜41例。急性左下肢深静脉血栓形成36例,取栓后行左髂静脉病变段切除、人工血管原位移植25例,髂一下腔静脉搭桥11例。随访6～66个月。结果 无手术死亡和急性肺动脉栓塞发生。效果良好。结论 左髂静脉病变是左下肢静脉曲张或肿胀和急性左下肢深静脉血栓形成的重要原因,应尽早处理。介入治疗或外科手术治疗能取得良好的效果。     

成人间活体肝移植研究

目的探讨提高成人间活体肝移植存活率的手术方法。方法2005年3月至6月,我院施行了13例成人间右半肝活体肝移植,术中采用了改良的手术技术包括右肝静脉的重建,肝中静脉分支的搭桥,肝动脉搭桥及改进的胆道重建技术。结果全组供体无严重并发症及死亡;受体发生并发症4例．其中包括肝动脉栓塞、胆漏、右膈下脓肿及肺部感染各1例。1例再移植因术后肺部感染,并发多器官功能衰竭（MOF）死亡。13例行右肝静脉与下腔静脉（IVC）直接吻合,其中5例加行右肝下静脉重建．另5例采用自体大隐静脉搭桥行肝中静脉分支与IVC重建,保证了右肝的流出道通畅。移植物与受体重量比（GRWR）为0．72％～1．24％,其中9例〈1．0％,2例〈0．8％,无小肝综合症发生。结论采用改进的手术技术,特别是肝静脉流出道的充分重建可有效的避免小肝综合症,从而使活体右半肝移植成为比较安全的手术。     

豚鼠至大鼠异种小肠移植模型的建立

目的建立袖套法豚鼠至大鼠异种小肠移植模型,初步观察异种小肠移植超急性排斥反应的过程。方法行异种异位全小肠移植,移植小肠肠系膜上动脉（腹主动脉）与受体肾以下腹主动脉作端侧吻合,切除受体左肾,移植小肠肠系膜上静脉（门静脉）与受体左肾静脉行袖套吻合。结果共实施异种小肠移植40例,成功34例,供受体手术时间平均为150min,血管吻合成功率达90％。再灌流后15～20min移植小肠发生超急性排斥反应,表现为移植小肠变黑,肠蠕动停止,失去活力。结论袖套法豚鼠至大鼠异种小肠移植模型具有操作简便、静脉吻合口并发症少的优点,是研究异种小肠移植较好的模型。     

Surgical techniques of arterialized orthotopic liver transplantation in rats

Background  Recently, much attention has been paid to hepatic artery reconstruction in rat liver transplantation, which can prevent bile duct ischemia and preserve better liver structure. In this study, three methods of graft arterialization, including sleeve, cuff, and stent anastomosis, were conducted and the results were compared.
Methods  Orthotopic liver transplantation (OLT) with rearterialization was conducted in 90 rats, which were divided into sleeve, cuff, and stent groups (n=30 in each). Ninety-six rats received OLTs with standardized two-cuff technique without rearterialization as a control. The sleeve technique included an end-to-end anastomosis between the donor common hepatic artery and recipient proper hepatic artery, or between the donor celiac artery and recipient common hepatic artery. Cuff technique involved an anastomosis between the donor common hepatic artery and recipient common hepatic artery. In the stent technique, the recipient hepatic artery and donor hepatic artery were connected using an intraluminal polyethylene stent. The arterial anastomosis time and arterial patency rate in each group were recorded. The liver graft survival and bile duct complication rates were measured.
Results  The total surgical time of OLT with rearterialization was (118.3±12.9) minutes in the sleeve group, (106.2±11.6) minutes in the cuff, (93.8±10.2) minutes in the stent, and (88.2±9.6) minutes in the control. The corresponding anhepatic phase was (19.6±2.8), (19.2±2.2), (18.6±1.8), and (20.0±2.5) minutes respectively in the sleeve, cuff, stent, and control groups. One-week survival rate was 86.5% in the control, and 86.7% in the groups with rearterialization. No significant difference was detected in the survival rate between them (P>0.05). The incidence of biliary complications in non-rearterialized group (17.7%) was significantly higher than that in the rearterialized group (6.7%, P<0.05). No significant difference was found in the incidence of biliary complications among the three rearterialized groups (P>0.05).
Conclusions  The OLT with rearterialization is more physiological than that without rearterialization, and leads to a lower rate of bile duct complications. Among the three methods of rearterialization, sleeve anastomosis is associated with a higher survival rate, allowing less dissection and less injury to the surrounding tissues.

     

大鼠原位肾移植并发症的防治研究

目的：找到预防大鼠原位肾移植模型建立过程中发生并发症的方法。方法：采用动脉端—侧吻合、静脉袖套吻合、输尿管端—侧吻合的方法进行69次大鼠原位肾移植实验，并分析死亡的原因。结果：共有61只大鼠存活，8只大鼠死于并发症。结论：大鼠肾移植手术的术前准备、术中操作及术后护理对模型的建立有重要影响，采取具体的保护措施可以减少大鼠的死亡率。