贝伐单抗抑制兔角膜碱烧伤新生血管的实验研究

目的 通过点眼和结膜下注射贝伐单抗两种不同的给药途径,抑制兔角膜碱烧伤后的新生血管,探讨该药的这两种给药方式的疗效.方法 普通白色家兔50只,取2只为正常对照组,其余48只右眼碱烧伤后随机分为三组,每组16只:A组为碱烧伤对照组,B组为点眼组,用贝伐单抗(5mg/ml)点眼,3次/d,C组为结膜下注射组,用贝伐单抗(2.5mg/0.1ml)结膜下注射.在不同的时间点(第1、4、7、14d)测量角膜新生血管的生长情况及免疫组化检测角膜血管内皮生长因子(vascular endothelialgrowth factor,VEGF)蛋白的表达.结果 B、C组的CNV相对于A组得到明显抑制,CNV的长度和面积及vEGF蛋白的表达差异有统计学意义,而B组和C组之间没有明显差异.结论 两种用药方法对于抑制角膜新生血管没有明显差异.     

贝伐单抗抑制兔角膜碱烧伤新生血管的实验研究

目的通过点眼和结膜下注射贝伐单抗两种不同的给药途径,抑制兔角膜碱烧伤后的新生血管,探讨该药的这两种给药方式的疗效。方法普通白色家兔50只,取2只为正常对照组,其余48只右眼碱烧伤后随机分为三组,每组16只：A组为碱烧伤对照组,B组为点眼组,用贝伐单抗（5mg/ml）点眼,3次/d,C组为结膜下注射组,用贝伐单抗（2.5mg/0.1ml）结膜下注射。在不同的时间点（第1、4、7、14d）测量角膜新生血管的生长情况及免疫组化检测角膜血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）蛋白的表达。结果 B、C组的CNV相对于A组得到明显抑制,CNV的长度和面积及VEGF蛋白的表达差异有统计学意义,而B组和C组之间没有明显差异。结论两种用药方法对于抑制角膜新生血管没有明显差异。     

贝伐单抗抑制碱烧伤角膜新生血管的实验研究

目的 评价结膜下注射贝伐单抗(bevacizumab)对大鼠碱烧伤角膜新生血管化的影响.方法 将22只成年雄性Wistar大鼠,碱烧伤诱导单眼角膜新生血管模型后随机分为两组:实验组和对照组.实验组(10眼)给予贝伐单抗原液(25me/ml)0.02 ml结膜下注射,对照组(10眼)给予结膜下注射等量生理盐水,两组给药时间均为碱烧伤第1天、第3天及第5天,每日1次,共3次.分别采用宏观测量新生血管长度、生长速度及新生血管化面积,显微镜下微血管计数方法研究角膜新生血管形成及抑制情况.结果 实验组新生血管生长速度较对照组慢[(1.05±0.62)mm/d vs(2.87±0.34)mm/d,P<0.05];新生血管化面积实验组较对照组小[(30.5±18.8)% vs (57.5±11)%,P<0.05];微血管计数实验组较对照组少,差异均具有统计学意义(1.86±1.54 vs 8.51±2.33,P<0.05).结论 贝伐单抗可抑制大鼠碱烧伤角膜新生血管的增殖.     

贝伐单抗对体外培养翼状胬肉成纤维细胞增殖抑制作用的实验研究

目的研究贝伐单抗(bevacizumab)对人翼状胬肉成纤维细胞(HPFs,Human Pterygium Fibroblasts,HPFs)增殖抑制作用。方法人翼状胬肉切除后进行体外培养,将其传代第4代～第6代时,分别不同浓度的贝伐单抗(6.25mg/mL、12.5mg/mL、25mg/mL)处理48h,设对照组,采用噻唑蓝比色法(MTT)检测不同浓度贝伐单抗对体外培养的HPFs增殖的抑制率;免疫组织化学技术检测HPFs增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果 MTT结果显示,贝伐单抗组HPFs可见不同程度的抑制作用,PCNA阳性表达率有不同程度的下降,浓度越高抑制作用越明显,且不同浓度各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。对照组对HPFs无明显抑制作用,各用药组与对照组差异有统计学意义(P<0.05)。结论贝伐单抗对HPFs的增殖有明显抑制作用,并与药物剂量和作用时间有相关性。     

贝伐单抗对大鼠角膜新生血管的抑制作用

目的:观察贝伐单抗对大鼠角膜新生血管模型的抑制作用。方法:雄性SD大鼠16只(16眼),AgNO3烧灼角膜诱导新生血管生成,并随机分为实验组(10只眼)和对照组(6只眼)。烧灼第2 d,实验组予贝伐单抗(25μg/mL)点眼,对照组予NS点眼,两组给药6次/d,共14 d。实验末,拍摄大鼠角膜照片,计算新生血管覆盖面积占角膜总面积的百分比,同时制备眼球组织石蜡切片,苏木精-伊红染色,光镜下观察角膜组织病理学改变。结果:实验组角膜新生血管覆盖率平均值为(19.7±6.5)%,对照组(72.3±11.3)%(P<0.01);光镜下实验组角膜内皮完整,基质无明显水肿。结论:在雄性SD大鼠模型中,25μg/mL贝伐单抗可有效抑制角膜新生血管的形成和发展。     

重组内皮抑素抑制兔角膜新生血管的实验研究

目的:探讨重组内皮抑素(Endostatin)对碱烧伤诱导的兔角膜新生血管(corneal neovasculariza-tion,CNV)的抑制作用。方法:选取新西兰大白兔18只,采用碱烧伤法制备兔CNV模型,随机分为3组,每组6只12眼。2个实验组分别以10μg/ml和50μg/ml重组内皮抑素点眼,对照组用生理盐水点眼。定期摄相,采用计算机图像分析系统比较CNV生长面积。结果:与对照组相比,2个实验组自第7 d开始CNV平均生长面积明显减少(P<0.05),经角膜组织病理学检查,新生血管明显稀少,但炎性细胞成分及浸润程度与对照组相似。结论:10、50μg/ml重组内皮抑素具有明显抑制角膜新生血管生长的作用,无毒副作用,为临床防治CNV提供了一种新的途径。     

球后Tenon囊下注射Bevacizumab对豚鼠脉络膜新生血管的抑制作用研究

目的比较Bevacizumab(贝伐单抗)球后Tenon囊下注射和玻璃体腔注射对氪激光诱导的豚鼠脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)生成及发育的影响。方法随机数字表法将30只豚鼠右眼建立CNV模型后分为激光组、Tenon囊下组、玻璃体腔组,每组各10只。激光组仅进行光凝处理,Tenon囊下组和玻璃体腔组光凝后分别予以球后Tenon囊下和玻璃体腔注射Bevacizumab,21 d后全部行右眼吲哚菁绿血管造影(indocyanine green angiography,ICGA)、眼底彩照及HE染色观察。结果 ICGA检查,各组激光斑CNV发生率分别为激光组(65.0%)、Tenon囊下组(58.0%)、玻璃体腔组(55.0%);Tenon囊下组和玻璃体腔组CNV渗漏面积均比激光组减少(P0.01),且两组之间差异无统计学意义(P0.05);HE染色CNV最大中央厚度与ICGA检查趋势一致。结论 Bevacizumab能够抑制氪激光诱导的豚鼠CNV的发育,Bevacizumab球后Tenon囊下注射和玻璃体腔注射疗效相近,为CNV的治疗提供了新思路。     

肝素抑制碱烧伤后兔角膜新生血管的研究

目的 观察在活体状态下不同浓度肝素对兔角膜新生血管(CNV)的抑制作用,探讨其作用机制是否与碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)有关.方法 将20只健康新西兰白兔随机分为4组:对照组与肝素A、B、C组(肝素浓度:A组25 g/L、B组50 g/L、C组100 g/L),每组5只.建立双眼角膜碱烧伤模型后每组每天滴抗生素眼药水,隔天球结膜下注射相应浓度药物,记录角膜新生血管生长情况;28 d后处死并摘除眼球进行碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)免疫组织化学染色.结果 肝素A、B、C组与对照组比较,CNV面积差异均有统计学意义(均P<0.05).肝素A、B、C组间比较,肝素浓度越高,CNV面积越小(P<0.05)、数量越少(P<0.05)、bFGF含量越少)(P<0.05).结论 肝素可以有效抑制碱烧伤后兔CNV的增生,其浓度与其对兔CNV的抑制效果呈正比关系.碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在CNV形成中发挥作用,其含量变化与CNV数量平行.     

重组人内皮抑素两种给药途径抑制角膜新生血管的实验研究

目的:研究重组人内皮抑素(recombinant human endostatin,rHES,恩度)两种给药途径对碱烧伤诱导大鼠角膜新生血管的抑制作用. 方法:48只Wistar大鼠随机分为4组:A组(12只眼),对照组,不做处理;B组(12只眼),角膜碱烧伤后球结膜下注射生理盐水0.05ml,隔日1次;C、D组(各12只眼),右眼角膜碱烧伤后分别应用100mg/ml重组人内皮抑素点眼,4次/日和球结膜下注射0.05ml,隔日1次治疗.观察各组角膜新生血管的生长情况,免疫组化检测VEGF蛋白的表达.结果:C组、D组在碱烧伤后各时间点新生血管面积均小于B组,C组、D组与B组新生血管面积的差异有统计学意义(P<0.05);D组较C组对新生血管的抑制作用略强,差异无统计学意义(P>0.05).碱烧伤后第16天免疫组织化学检查显示除C组与D组间,其余各两两比较VEGF蛋白量差异有统计学意义,C组与D组VEGF蛋白量差异无统计学意义(P>0.05).结论:点眼和球结膜下注射重组人内皮抑素(恩度)即均可有效抑制CNV.     

肺积汤对Lewis肺癌裸鼠移植瘤中新生血管的影响

目的 观察肺积汤对Lewis肺癌移植瘤中新生血管的影响，并探讨其机制，为中医中药在抑制肺癌生长及转移的临床应用提供实验基础和理论依据。方法 BALB/c雄性裸鼠30只，制作Lewis肺癌模型，随机数字表法随机分为3组，对照组（NS组：0.9%NS 0.4ml/只，灌胃，qd）；中药组（生药含量1g/ml： 22.2mg/kg，调整至0.4ml/只，灌胃，qd）；贝伐单抗组（贝伐单抗15mg/kg，调整至0.2ml/只，腹腔注射，biw），给药21天后处死，收集血清、皮下瘤。HE染色观察皮下瘤血管情况，免疫组化法检测皮下瘤微血管密度（MVD）、血管内皮生长因子-A（VEGF-A）的水平；ELISA法测定血清中VEGF-A水平。结果（1）一般情况：相对于对照组，中药组及贝伐单抗组瘤重小[(6.15±1.49)g，(4.32±0.77)g比（7.92±1.09）g，P均<0.05]，瘤体积小[(3.73±1.06) cm3，(2.36±1.99）cm3比(6.15±1.49) cm3, P均<0.05]；且中药组裸鼠较贝伐单抗组未出现明显恶病质表现。（2）HE染色：中药组及贝伐单抗组皮下瘤细胞变性坏死较少，散在红细胞少。（3）免疫组化：中药组及贝伐单抗组MVD小[(18.39±1.21), (17.40±0.8)比( 27.40±10.12) , P<0.05]；VEGF-A表达低[(3.35±1.151), (3.22±1.10)比(6.98±1.74), P<0.05]，但中药组与贝伐单抗组组间差异小，无统计学意义（P>0.05）。（4）ELISA：中药及贝伐单抗可下调血清VEGF-A表达[(115.38±9.15)，(106.21±3.15)比(130.63±4.51), P均<0.01]。结论 （1）肺积汤能抑制皮下瘤生长，延缓恶病质发生；（2）肺积汤能下调组织及血清VEGF-A的阳性表达，降低微血管密度，维持血管稳态。（3）肺积汤抑制肿瘤生长及转移，可能与下调促血管生长因子表达，抑制肿瘤血管新生有关。     

二十碳五烯酸对大鼠角膜新生血管血管内皮生长因子及其受体表达的抑制作用

目的 探讨二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid, EPA)对大鼠角膜新生血管(corneal neovascularization, CNV)血管内皮生长因子(VEGF)及其受体Flk-1表达的影响及作用机制.方法 78只SD大鼠按随机数字表法分为碱烧伤0.02 mg EPA治疗组(A组, 24只)、碱烧伤0.03 mg EPA治疗组(B组, 24只)、碱烧伤对照组(C组, 24只)、正常组(D组, 6只), 除正常组外,均选用右眼制作碱烧伤模型.A、B、C组碱烧伤后立即分别球结膜下注射0.02 mg/0.04 ml EPA、0.03 mg/0.04 ml EPA、0.04 ml生理盐水.每日裂隙灯显微镜下观察角膜水肿、新生血管情况.碱烧伤后1、4、7、14 d,用免疫组织化学方法检测角膜新生血管内皮细胞CD34表达,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白印迹法分别检测角膜VEGF的mRNA表达及Flk-1的蛋白表达.结果 碱烧伤7 d和14 d,角膜新生血管相对面积A组:(15.80±6 43)%、(11.06±2.14)%, B组:(16.10±7.41)%、(11.06±2.51)%,均显著少于C组:(84.74±7.77)%、(89.63±7 50)% (P<0.05).碱烧伤后7 d,C组CD34在CNV内皮细胞强阳性表达,A、B组未见CNV内皮细胞,CD34无表达.C组Flk-1蛋白及VEGF的mRNA表达,碱烧伤后1 d最高,持续高表达至4 d,随后逐渐下降.碱烧伤4 d,A、B组VEGF的mRNA表达及Flk-1的蛋白表达显著低于C组(P<0.05).结论 EPA能通过VEGF途径,抑制VEGF及其受体Flk-1的表达,从而显著抑制角膜新生血管的生长.     

Bevacizumab(Avastin)抑制兔眼角膜新生血管的实验研究

目的:观察Bevacizumab(Avastin) 球结膜下注射对兔眼角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)模型的治疗作用。方法:新西兰大白兔48只,随机分为正常对照组(A组,3只)、模型组(B组,9只)和Bevacizumab(Avastin)治疗组(C组,36只),C组又再次分为4组:1 d小剂量治疗组(C1组,9只),1 d大剂量治疗组(C2组,9只),14 d小剂量治疗组(C3组,9只),14 d大剂量治疗组(C4组,9只)。B组和C组采用角膜缝线法制备CNV模型,C组分别在相应时间点眼球结膜下注射Bevacizumab(25 mg/ml),小剂量组0.1 ml,大剂量组0.2 ml。术后每天观察兔眼角膜CNV生长情况并计算其面积,且于建模后7、14、28 d分别拍照记录,免疫组化方法检测各组角膜组织中VEGF的表达情况,ELISA法检测房水内VEGF含量。结果:CNV生长情况:7、14、28 d C1和C2组均较Ｂ组明显减轻(P<0.01),28 d时C3、C4组较B组明显减轻(P<0.01);28 d时C1组较C3组明显减轻(P<0.01),C2组较C4组明显减轻(P<0.01)。角膜组织中VEGF表达和房水中VEGF含量:B组随时间推移逐渐增高,且与CNV面积大小呈正相关(P<0.01);7、14、28 d 时,C1、C2组均低于B组(P<0.01);28 d时C3、C4组均低于B组(P<0.01);28 d时C1组低于C3组(P<0.01),C2组低于C4组(P<0.01)。C1和C2组之间以及C3和C4组之间在CNV面积、角膜和房水中VEGF水平方面均无显著差异。结论:球结膜下注射Bevacizumab可抑制CNV生长,且早期用药比晚期用药疗效更加显著,Bevacizumab的作用可能与其下调角膜组织VEGF的表达及房水中的VEGF含量有关。     

Bevacizumab联合曲安奈德玻璃体腔注射治疗脉络膜新生血管

目的观察Bevacizumab联合曲安奈德（TA）玻璃体腔注射治疗脉络膜新生血管（CNV）的近期疗效和安全性。方法收集2008年4月至2010年1月在我院确诊有CNV的21例（42眼）,右眼（21眼）定为对照组,行Bevacizumab玻璃体腔注射（0.1ml）,左眼（21眼）定位观察组,行Bevacizumab联合曲安奈德玻璃体腔注射（Bevacizumab和TA各0.05ml）。同一患者的左右眼同一时间进行治疗,每4周进行一次重复治疗,共4次;在第12周时,对比观察治疗前后两组最佳矫正视力变化的差异、CNV病灶渗漏情况以及黄斑区视网膜厚度变化的差异。结果两组治疗前后最佳矫正视力变化的差异无统计学意义（P〉0.05）。两组治疗前后CNV病灶渗漏情况的差异无统计学意义（P〉0.05）。对照组中,OCT显示黄斑区视网膜水肿在治疗后有14眼完全消退,5眼明显轻,2眼无明显变化。观察组中,20眼水肿完全消退,1眼明显减轻。两组治疗前后黄斑视网膜水肿的差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论 Bevacizumab联合曲安奈德（TA）玻璃体腔注射可以安全有效地治疗CNV,减轻黄斑视网膜水肿,延缓视力下降。     

诺帝滴眼液对碱烧伤诱导角膜新生血管的抑制作用

目的 观察自制诺帝滴眼液（Nordy eye drop）对Long．Evans大鼠角膜碱烧伤后新生血管（CRNV）有无抑制作用及其对正常角膜有无毒副作用。方法 采用0．025％、0．1％两个不同浓度诺帝滴眼液滴眼21d,通过裂隙灯、光镜、电镜观察检测诺帝滴眼液的毒副作用。建立角膜碱烧伤后角膜新生血管模型,0．025％、0．1％两个不同浓度诺帝滴眼液4次／d滴眼治疗,0．1％地塞米松磷酸钠滴眼液作为阳性对照、空白溶液作为阴性对照,观察诺帝治疗效果。结果 诺帝滴眼液滴眼21d后观察正常大鼠,无畏光、结膜充血等刺激症状,组织学检查显示结构正常,未见炎性细胞浸润。大鼠角膜碱烧伤后1d时仅见角膜缘血管网扩张,3d时新生血管长入,7～14d达高峰,14d时治疗组和地塞米松组新生血管开始退化;比较各组CRNV面积与角膜面积的比值,治疗组和阳性对照组均小于阴性对照组并有非常显著性差异（P〈0．01）。治疗组与阳性对照组间、0．025％与0．1％治疗组间均无显著性差异（P〉0．05）。结论 0．025％、0．1％的诺帝滴眼液局部滴眼无明显毒副作用,并且对CRNV有显著抑制作用。     

Bevacizumab玻璃体腔注射联合复合式小梁切除术全视网膜光凝治疗新生血管性青光眼临床观察

目的：观察玻璃体腔注射Bevacizumab联合复合式小梁切除术,全视网膜激光光凝综合治疗新生血管性青光眼的临床疗效。方法：对21例21只眼药物不能控制的新生血管性青光眼,先行玻璃体腔注射Bevacizumab0.1ml（2.5mg）,7～10d后行复合式小梁切除术,前房形成稳定后行全视网膜激光光凝。结果：平均随访11个月,17例视力无变化,4例视力稍有提高,虹膜新生血管注药后16例3d消失,5例新生血管变细,5～7d消失。1、3、6个月平均眼压为（16.70±2.01）mmHg、（17.20±1.85）mmHg、（20.50±2.03）mmHg,与术前相比眼压降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。其中,19例眼压在正常范围,2例加点噻吗心胺眼液眼压接近正常。所有患者头痛、眼胀痛症状消失。结论：Bevacizumab在新生血管青光眼治疗中具有积极的作用,Bevacizumab玻璃体腔注射联合复合式小梁切除术全视网膜激光光凝为临床治疗新生血管性青光眼提供了新的切实有效的综合治疗方法。     

Bevacizumab抑制人肝癌细胞及其移植瘤的生长

目的探讨Bevacizumab对肝癌细胞株HepG2及荷肝癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法不同浓度Bevacizumab处理HepG2细胞48 h后,MTT法检测Bevacizumab对细胞增殖的抑制作用,设不加药物的HepG2细胞为对照组。建立荷肝癌细胞株HepG2裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为Bevacizumab组和空白对照组,观察用药前后肿瘤大小,计算抑瘤率;应用免疫组化计算肿瘤微血管密度。结果 Bevacizumab可抑制HepG2细胞增殖;与空白对照组比较,Bevacizumab可延缓移植瘤的生长,MVD值明显降低(P=0.000)。结论 Bevacizumab可直接抑制肝癌细胞株HepG2的增殖;Bevacizumab主要通过抑制新生血管的形成而抑制移植瘤的生长。     

Long-term effect of prophylactic laser treatment for bilateral soft drusen

Background  Large drusen is a known risk factor for the development of late complications of age-related macular degeneration (AMD) and drusen reduction has been found by our previous study. To prospectively evaluate the efficacy and safety of prophylactic laser treatment in Chinese patients with bilateral soft drusen, we examined the structure and function of the macula 8 years after treatment.

Methods  Ten patients with more than 10 soft drusen (>125 mm) and best corrected visual acuity ≥20/25 in each eye participated in the study. One eye, with relatively more drusen, was exposed to an argon laser (514 nm) to achieve a barely visible retinal lesion. The contralateral eye was used as a control. Fluorescein angiography, Amsler tests, Fourier-domain optical coherence tomography and visual evoked potential tests were carried out 8 years later.

Results  No choroidal neovascularization was seen in the laser-treated eyes or control eyes. There were no significant differences in visual acuity or P100 latency and amplitude between the laser treated eyes and contralateral eyes (t=1.685, 1.184; P >0.05). The thickness of the retinal pigment epithelium of the treated eyes was less than that of the contralateral eyes (t=–4.540; P <0.05). The full retinal thickness in treated eyes was slightly, but insignificantly, reduced relative to contralateral eyes (t=–1.746; P >0.05).

Conclusions  The treatment was associated with a reduction in retinal pigment epithelium thickness elevation compared with the contralateral eyes. Macular function was not impaired. (ChiCTR-TNRC-00000221)

     

射频消融联合表阿霉素对兔肝VX2肿瘤微血管密度和细胞增殖的影响

目的探讨射频消融联合表阿霉素对兔肝VX2肿瘤微血管密度和细胞增殖的影响。方法制作兔肝VX2肿瘤模型,采用射频消融、局部注射表阿霉素和两者联合的治疗方式,运用免疫组织化学SABC法检测治疗后肿瘤组织中CD31标记的微血管密度(microvessel density,MVD)和增殖细胞核抗原(PCNA)。结果射频消融联合表阿霉素治疗组MVD和PCNA较单纯射频消融组和单纯药物组明显降低,有显著性差异(P<0.05)。结论射频消融联合表阿霉素治疗能较好的抑制肿瘤血管生成和肿瘤细胞增殖。     

用苹果辅助逆转大鼠肝纤维化的实验性研究

目的:研究苹果对实验性肝纤维化大鼠的辅助逆转作用,并探讨其对肝纤维化的影响机制.方法:雄性SD大鼠42只分为正常组、CCl4肝纤维化模型组、自然恢复组、丹芍化纤治疗组、丹芍化纤+苹果试验组.除正常组以外,其余大鼠均采用CCl4、饮酒、高脂低蛋白饮食等复合因素刺激制备大鼠肝纤维化模型共8周.确认造模成功后再将剩余模型组大...     

不同手术方式治疗晚期新生血管性青光眼的临床研究

目的:比较不同手术方式治疗晚期新生血管性青光眼的临床疗效。方法:将46例晚期新生血管性青光眼患者随机分成2组。A组23例采用睫状体及周边视网膜冷凝术,B组23例采用睫状体及周边视网膜冷凝术联合小梁切除自体巩膜条引流术。术后随访 6~12个月,观察2组患者术后眼压、虹膜新生血管、眼球外形及并发症等情况。结果:2组患者眼压控制率和虹膜新生血管消退率及眼球萎缩率差异均有统计学意义（P<0.05~P<0.01）。结论:睫状体及周边视网膜冷凝术联合小梁切除自体巩膜条引流术治疗晚期新生血管性青光眼的疗效确切,不仅能长期有效地控制眼压,而且能很好地保留眼球外观,且术后并发症少。