SPNS2在肝细胞性肝癌中的表达及其与上皮间质转化的关系

目的 探讨鞘氨醇-1-磷酸转运体(SPNS2)在肝细胞肝癌(HCC)中的表达及其与上皮细胞间质转化(EMT)之间的相关性.方法 收集10例HCC新鲜临床标本和70例HCC手术标本石蜡切片(包括癌组织和对应癌旁组织)及其临床相关病理资料,检测SPNS2及EMT的两个主要标志物N-钙黏蛋白(N-cadherin)、E-钙黏...     

肝细胞肝癌的上皮间质转化机制研究进展

肝细胞肝癌的病死率在全球恶性肿瘤中居第5位[1-2],全球每年新增肝细胞肝癌患者约为626 000例,约占全球癌症发病率的5%。我国每年约有110 000例死于肝细胞肝癌,肝细胞肝癌的病死率在我国恶性肿瘤中居第二位[3],肝细胞肝癌切除率<     

高尔基体蛋白73在原发性肝癌中的诊断价值

目的评价分析原发性肝癌（PHC）患者血清高尔基体蛋白73（GP73）的变化规律,探讨GP73和甲胎蛋白（Are）联合检测对原发性肝癌诊断和高危人群普查的意义。方法采用酶联免疫法检测70例原发性肝癌、40例肝硬化、40例肝炎患者的血清GP73、AFP水平,并与60名健康对照者进行比较。结果原发性肝癌组血清GP73的含量与肝硬化组、肝炎组及健康对照组比较,差异有统计学意义（U值分别为ii4．6、157．5、170．9,P〈O．01）,各组血清AFP的含量差异亦有统计学意义（u值分别为355．7、392．2、393．1,P均〈O．61）。通过ROC曲线确定诊断原发性肝癌的临界值：GP73为123．2pg／L,AFP为10．6la,g／L。这两个临界值下原发性肝癌组患者血清GP73、AFP单项检测的敏感度分别为64．3％和55．7％,特异度分别为92．1％和91．4％,二者联合检测的敏感度可达80％,特异度（90％）维持在较高水平。结论GP73蛋白作为一种新的诊断原发性肝癌的肿瘤标志物,具有很好的敏感度和特异度。血清GP73和AFP联合检测可有效提高原发性肝癌诊断,为原发性肝癌的诊断和普查提供了一种新的敏感、特异、简便快捷的方法。     

高尔基体糖蛋白73在肝癌中的表达及其影响因素分析

目的观察高尔基体糖蛋白73（Golgi protein 73,GP73）在肝细胞癌中的表达水平,分析影响其表达的相关因素。方法选取肝细胞癌、肝硬化、乙型肝炎患者及正常体检人群为研究对象,分别纳入肝细胞癌组（n=67）、肝硬化组（n=20）、乙型肝炎组（n=20）和正常对照组（n=20）。收集各组血清标本并用ELISA法检测GP73的表达水平,比较肝细胞癌组GP73表达水平与其他三组的差异。以GP73表达中位数将肝细胞癌组分为高表达和低表达亚组,分析影响GP73表达水平的相关因素。结果肝细胞癌组GP73表达最低13.8 ng/ml,最高1 128.2 ng/ml,中位表达173.1 ng/ml。将肝细胞癌组GP73表达水平分别与另外三组进行比较,肝细胞癌组GP73表达高于肝硬化组、HBV肝炎组或正常对照组（P〈0.05）。根据GP73表达中位数将肝细胞癌患者分为低于173.1 ng/ml（n=33）、超过173.1 ng/ml（n=34）两个亚组,两组患者在是否合并肝硬化、肿瘤分化程度方面差异具有统计学意义（P〈0.01）,而在年龄、TNM分期、肿瘤大小、AFP表达水平、远处转移方面差异无统计学意义（P〉0.05）。结论肝细胞癌患者血清GP73水平显著高于正常人群以及乙型肝炎、肝硬化患者;GP73表达水平与肿瘤分化程度、肝硬化有关。     

高尔基体蛋白GP73在肝癌诊断中的意义

目的 通过定量技术检测患者血清中高尔基体蛋白73（GP73）的含量,并对比甲胎蛋白AFP含量,探讨GP73在肝癌患者血清中的临床诊断意义。方法 收集肝癌患者、肝炎肝硬化以及正常健康人员血清样本,分别采用双抗体夹心酶联免疫定量和电化学发光法来检测GP73和甲胎蛋白AFP。结果 （1）在120例肝癌标本中,GP73的阳性率为70.00%,AFP的阳性率35.83%, 两者差异有显著性（χ2=28.18,p<0.01）;（2）在非肝癌患者人员中,GP73的诊断特异性为93.14%（190/204）,AFP的诊断特异性为85.27%（176/204）;（3）ROC曲线分析显示,GP73和AFP的曲线下面积分别为0.8775和0.682。结论 GP73用于诊断肝癌效果明显,可以显著提高肝癌诊断的灵敏度和特异性,而且GP73受炎症影响较小。     

上皮间质转化与肝癌微环境变化的关系

通过对上皮间质转化理论基础的回顾,探讨上皮间质转化、间质上皮转化与肝脏纤维化及肝癌干细胞转化的关系,从而寻找肝癌干细胞的相关基因、抗体标记物及关键通路,这不仅有利于肝细胞癌分期的诊断,提示预后,更为寻找医治肝癌的方法提供更多的研究方向。     

维甲酸相关孤儿核受体-γ蛋白在肝细胞癌组织中的表达及其与上皮-间质转化的关系研究

目的 探讨维甲酸相关孤儿核受体-γ(retinoid-related orphan receptor-γ, ROR-γ)与肝细胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC）临床病理特征及人肝癌细胞系HepG2上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）的关系,并探讨其作用机制。方法 选取2016年6月至2020年5月赤峰学院附属医院90例肝癌组织及56例癌旁正常组织石蜡标本、20例肝癌组织及癌旁正常组织新鲜术后标本,采用免疫组织化学法和蛋白质印迹法（Western blotting）检测ROR-γ在肝癌及癌旁正常组织中的表达。将ROR-γ小干扰RNA转染至HepG2细胞,采用Western blotting检测ROR-γ、Smad2以及EMT标志物（E-cadherin、vimentin）蛋白表达水平。结果 免疫组织化学染色和Western blotting结果显示,与癌旁正常组织比较,肝癌组织中ROR-γ蛋白阳性表达率显著升高（71.1%比42.9%）,差异有统计学意义（P<0.05）,且ROR-γ蛋白阳性表达...     

肝癌标志物高尔基体蛋白73基因在杆菌中的表达

目的 克隆、表达和鉴定肝癌标志物高尔基体蛋白73 (GP73)基因序列(1028～1327 bp).方法 应用Biosun生物学软件分析GP73全序列,预测其抗原表位,将GP73蛋白基因克隆到表达载体PGEX-4T-2上,构建重组表达质粒PGEX-4T-2/GP73,转化大肠杆菌BL21,异丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃...     

高尔基体蛋白73及甲胎蛋白在原发性肝癌中的诊断意义

目的研究高尔基体蛋白73(Golgi protein 73,GP73)、甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)单独及联合使用在原发性肝癌中的诊断意义.方法选择我院2011年4月-2012年10月门诊、住院患者和健康体检人群,分别用酶联免疫吸附法和化学发光免疫分析法检测47例原发性肝癌、45例肝硬化、387例乙肝携带者、528例健康对照组血清GP73与AFP水平,分析两指标各组间差别,绘制其诊断原发性肝癌的ROC曲线.结果原发性肝癌、肝硬化、乙肝携带者、健康对照组GP73分别为174.22±119.22、127.98±39.71、74.51±40.13、47.08±22.75ng/ml,各组间均存在显著差异.原发性肝癌、肝硬化、乙肝携带者、健康对照组AFP中位数分别为27、3.2、2.8、2.6ng/ml,原发性肝癌组高于其他各组,其他各组间无统计学差异.GP73诊断原发性肝癌ROC曲线的曲线下面积、敏感度、特异度、Youden指数分为别0.819、0.574、0.966、0.540;AFP分别为0.825、0.745、0.846、0.591.两者平行联用敏感度、特异度、Youden指数分别为0.851、0.815、0.666;序贯联用以上指数分别为0.362、0.990、0.352.结论 GP73、AFP两者平行联用敏感度0.851,特异度0.815,对诊断HCC有较好的诊断性能.     

Versican与胃癌上皮-间质转化相关蛋白的表达及意义

目的 探讨胃癌组织中Versican与上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达及其相关性,并分析其临床意义。方法 用免疫组织化学EliVision法和qRT-PCR检测胃癌组织和相应癌旁正常胃黏膜组织中Versican、E-cadherin和N-cadherin蛋白和mRNA的表达情况,分析上述蛋白表达与胃癌临床病理特征的关系及蛋白之间的相关性,利用Kaplan-Meier法评估Versican蛋白表达与胃癌患者预后的关系,用COX比例风险模型分析影响胃癌患者的预后因素。结果 胃癌组织中Versican和N-cadherin蛋白表达的阳性率显著高于癌旁胃黏膜(P<0.001),而E-cadherin蛋白表达的阳性率显著低于癌旁胃黏膜(P<0.001)。qRT-PCR结果显示,胃癌中Versican和N-cadherin mRNA水平高于癌旁胃黏膜,E-cadherin mRNA水平低于癌旁胃黏膜(P<0.05)。Versican...     

AIP1在肝细胞癌中的表达及其与EMT的相关性研究

目的:研究肌动蛋白相互作用蛋白1(AIP1)在人肝细胞癌(HCC)中的表达情况,并探究其表达与上皮间质转化(EMT)的相关性.方法:选取6个肝癌细胞系和正常的肝细胞系L02,以及40对HCC组织和配对的癌旁非瘤肝组织标本,通过qRT-PCR检测AIP1 mRNA的表达,western blot检测AIP1蛋白的表达,最后采用免疫组织化学染色(IHC)验证组织中AIP1的表达并分析其表达与EMT标志物的关系.结果:肝癌细胞系中AIP1的mRNA和蛋白表达水平都显著高于正常肝细胞系L02.同样在新鲜冰冻的组织标本中,肝癌组织中AIP1的mRNA和蛋白表达都显著高于相应的癌旁非瘤肝组织,且通过IHC得到了进一步的证实.最后,IHC结果发现AIP1的上调可能与肝癌的EMT现象相关.结论:AIP1在肝癌中的表达发生上调,并可能通过促进肝癌的EMT而促进肝癌的侵袭转移.     

血清中磷酯酰肌醇蛋白聚糖-3及高尔基体蛋白-73异常表达对肝癌的诊断价值

目的 :探究肝组织及外周血磷酯酰肌醇蛋白聚糖-3(phosphatidylinositol proteinglycan 3,GPC3)及高尔基体糖蛋白-73(Golgi protein 73,GP73)高表达对肝癌的诊断价值。方法 :用ELISA法检测39例肝癌患者及31例肝硬化患者外周血GPC3及GP73浓度,RT-PCR法检测两组患者肝组织中GPC3 m RNA及GP73 m RNA表达水平,比较研究肝癌及肝硬化患者外周血、肝组织中GPC3及GP73的表达差异,分层分析此两种蛋白表达与肝癌不同临床分期、病理分级的相关性。结果:肝癌组外周血GPC3、GP73浓度分别为(16.81±0.56)μg/L、(115.92±7.01)ng/ml,肝硬化组外周血GPC3、GP73浓度分别为(7.41±0.25)μg/L、(64.63±3.07)ng/ml,肝癌组外周血GPC3、GP73浓度均显著高于肝硬化组(P<0.001)。GPC3值为9.3μg/L时诊断肝癌的灵敏度和特异度分别为89.74%和96.77%,阳性预测值97.20%,阴性预测值88.20%;GP73截断值为77.68 ng/ml时,其诊断肝癌的灵敏度92.31%,特异度83.87%,阳性预测值87.80%,阴性预测值89.70%。肝癌组GPC3 m RNA和GP73 m RNA相对表达量分别为8.91±3.70、68.41±32.86,肝硬化组GPC3 m RNA和GP73 m RNA相对表达量分别为3.04±0.58、2.32±0.25,肝癌组GPC3 m RNA、GP73 m RNA表达均高于肝硬化组(P均<0.05)。上述结果可知肝癌患者癌组织GPC3、GP73 m RNA表达水平与外周血相应蛋白浓度一致。肝癌患者中外周血GP73、GPC3蛋白浓度及组织m RNA表达水平与年龄、性别、肿瘤大小及肝癌临床分期间无统计学意义;而肝癌患者GPC3表达与病理分级间存在统计学差异,病理分级为3级的肝癌患者GPC3表达水平低于1~2级患者。结论:GP73、GPC3在肝癌患者中表达明显增高,且灵敏度高于AFP,而特异度与其相当,有望成为一种新的、较好早期诊断HCC的血清标志物;另外,GPC3表达对肝癌细胞的分化程度有一定的指示作用。     

高尔基蛋白73单克隆抗体在肝细胞肝癌诊断中的价值

目的 自制高尔基蛋白73(GP73)单克隆抗体并检测其诊断肝细胞肝癌(HCC)的敏感性和特异性.方法 自行制备GP73单克隆抗体,作为一抗用Western blot方法检测59例HCC患者和31名健康对照者血清中GP73蛋白的表达情况,并对结果进行半定量分析,确定对照组人群的正常基线水平.将此结果同多克隆抗体的检测结果及甲胎蛋白(AFP)的诊断结果进行比较.结果 使用单克隆抗体检测健康人群的血清GP73水平为1.2(0.9-1.7)相对单位(RU),HCC患者血清GP73水平为5.7(2.5-7.8) RU,显著高于对照组水平(P<0.001);多克隆抗体检测结果显示,HCC患者血清GP73水平与对照组相比[7.8 (3.0-12.4) RU比1.1 (1.0-2.0) RU]亦显著增高(P<0.001).GP73单抗诊断HCC的敏感性和特异性分别为84.7%和93.5%,对比多抗的敏感性(78.0%)和特异性(93.5%),前者敏感性有所增高;同组患者采用AFP诊断HCC的敏感性和特异性分别为67.8%和74.2%,均低于GP73单抗.Logistic回归分析显示,GP73 单抗的优势比(OR)为7.18,而GP73多抗的OR为1.51.结论 单克隆抗体可以有效地检测肝癌患者血清GP73水平,比AFP具有更高的敏感性和特异性;可能优于目前使用的GP73多克隆抗体的检测.这一结果为用自制单抗进一步开发酶联免疫方法检测奠定了基础.     

肝癌组织GP73过表达及血GP73异常对肝癌的诊断价值

目的：分析肝癌（HCC）组织及外周血高尔基体糖蛋白-73（GP73）表达对肝癌的诊断价值。方法：以Western Blot法检测肝癌组织GP73表达;收集肝病患者外周血标本,以酶联免疫吸附法检测GP73水平。结果：肝癌、癌旁组织GP73均有表达,但癌组织GP73蛋白条带灰度均值为480.7,明显高于癌旁（209.0,t=6.453,P〈0.001）。外周血GP73水平,正常对照组（28.83±21.00）ng/mL,慢性肝炎组（49.86±40.46）ng/mL,肝硬化组（62.30±56.30）ng/mL和肝癌组（87.25±78.41）ng/mL,肝癌组明显高于对照组和良性肝病各组（P〈0.05）;肝癌患者血GP73表达与HBV感染、伴肝外转移密切相关（P〈0.05）,与血AFP呈显著正相关（r=0.961,P〈0.05）;经临床综合评价,受试者工作特征曲线下面积AFP为0.877,GP73为0.931,且两者对肝癌具有互补诊断价值。结论：GP73过表达与肝癌发展密切相关,它的定量检测有助于肝癌的诊断与鉴别。     

微小RNA 30c表达与肝癌临床病理特征及预后的关系

目的 研究hsa-miR-30c的相对表达量与肝癌患者病理因素的关系及对患者生存预后的影响.方法 收集2008-2010年中南大学湘雅医院普外科住院肝癌患者的手术切除样本共计30例.逆转录实时定量聚合酶链反应检测样本中hsa-miR-30c的相对表达量.Kaplan-Meier生存曲线进行预后分析.结果 hsa-miR-30c表达量与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤分化程度及T分期无关(P＞0.05),但在淋巴结受累组hsa-miR-30c表达明显下调,均值为(0.226±0.071),而无淋巴结受累组为(0.891±0.154),差异有统计学意义(P=0.010).hsa-miR-30c低表达组增加了淋巴结转移的风险,调整后的风险比O(R)=5.09,95％CI:1.19～23.72(P =0.030).生存分析表明,11例hsa-miR-30c低表达者中位生存时间(8.00±1.76)个月,低于19例hsa-miR-30c高表达组的(14.00±5.18)个月,差异有统计学意义(P=0.004),提示hsa-miR-30c低表达组预后不良.结论 hsa-miR-30c的相对表达水平与肝癌的患病风险及预后相关.hsa-miR-30c的相对表达量作为肝癌诊断与预后的新型标志还需要进一步的系统研究.     

高迁移率族蛋白A2 与原发性肝细胞癌患者 临床病理特征及其预后的关系

目的 探讨高迁移率族蛋白A2（HMGA2）表达与原发性肝细胞癌患者临床病理特征及其预后 的关系。方法 选取2010 年1 月—2013 年1 月在西南医科大学附属医院肝胆外科行手术切除的肝细胞癌患 者120 例。以免疫组织化学法检测患者手术切除标本的癌组织、癌旁组织及正常肝组织中HMGA2 的表达, 记录患者临床病理特征并随访。统计分析HMGA2 阳性表达与患者临床病理特征的关系,以及对患者预后的 影响。结果 免疫组织化学结果发现,HMGA2 阳性表达呈棕黄色或棕褐色颗粒,主要定位于肿瘤细胞的细 胞核。肝癌组织HMGA2 阳性率比正常肝组织和癌旁组织高（P <0.05）。HMGA2 阳性表达率在临床分期、 有肝门淋巴结转移及肝内转移肝细胞癌患者中较高（P <0.05）。多因素Logistic 回归模型结果显示,临床分期、 肝门淋巴结转移及肝内转移均是影响HMGA2 阳性表达的独立危险因素（P <0.05）。两组患者的3 年生存率 比较,差异有统计学意义（P <0.05）。结论 HMGA2 阳性患者预后明显较差,HMGA2 可作为判断肝细胞癌 患者预后的一个潜在指标。     

新的肝癌血清标记物GP73在肝癌诊断中的初步研究

目的 初步探讨蛋白组学结果获得的GP73在以乙肝为基础的HCC中的敏感性和特异性.方法 本研究共收集173例血清,其中健康人99例,非肝病患者12例,HBV携带者25例,肝癌患者37例.采用Western印迹方法检测各组人群血清中GP73蛋白的表达,并定量分析结果;确定对照组人群的正常基线水平;采用电化学发光法检测相应人群血清中AFP的量.计算GP73在诊断HCC的敏感性和特异性,并与AFP结果进行对比.同时检测了少量的HCC患者的围手术期GP73的表达,其他肝脏良、恶性病变GP73的表达和GP73同HCC大小分级间的关系等.结果 正常人群和非肝病患者的GP73水平相当(P=0.2925),可共同作为对照组.肝癌组血清GP73水平与对照组及乙肝携带者组相对值相比显著增高(40.36±64.43 vs 2.80±5.19和7.82±10.72,P=0.0015和0.0058).GP73诊断HCC的敏感性达到76.9%,特异性达到92.8%,与本组患者AFP的敏感性(48.6%)相比,前者有显著增高.有限的病例还提示,GP73在HCC患者术后1周内仍维持在一定水平上,而术后1年半～2年下降明显,可能提示了GP73蛋白在血中的降解情况;GP73在其他肝脏良性疾病中不增高;在胆管细胞型肝癌中,有部分(4/6)增高,增高程度介于肝癌组和HBV携带者组之间;与肿瘤大小和分级没有明显关联.结论 国内初步研究揭示GF73在以乙肝为基础的HCC患者中的高敏感性,它有可能成为我国临床上一个新的更有效的肝癌标记物.     

血清高尔基体糖蛋白-73检测对肝癌的诊断价值

目的研究血清高尔基体糖蛋白-73（GP-73）对肝癌的诊断价值。方法时间分辨荧光免疫检测法（TR-FIA）检测79例肝癌、47例肝硬化、30例慢性肝炎及28名正常人血清中GP-73浓度,分析GP-73阳性率与肝癌大小及门脉转移的关系;同步比较GP-73浓度与γ-谷氨酰转移酶同工酶Ⅱ（GGT-Ⅱ）、甲胎蛋白（AFP）诊断肝癌的灵敏度及特异度,探讨三者对肝癌的联合诊断价值。结果肝癌组血清GP-73浓度明显高于肝硬化组、慢性肝炎组及正常对照组（均P〈0.05）。根据ROC曲线,当界值为78.1 ng/L时,曲线下面积为0.814,GP-73对肝癌诊断敏感度及特异度分别为73.4%和79.0%。肝癌患者GP-73阳性率与肿瘤大小及有无门脉转移无相关性;血清GP-73、GGT-Ⅱ及AFP之间无相关性,联合检测三项指标可将诊断敏感度提高至96.3%。结论联合检测GP-73、GGT-Ⅱ和AFP可提高肝癌定性诊断水平。