甘草总黄酮清除羟自由基作用的体外实验探讨

甘草总黄酮对Fenton反应生成的·OH具有较强的直接清除作用 ,该作用明显优于甘露醇 ,其清除·OH的IC50 是甘露醇的 1/2 5 5 ,其抑制·OH生成的IC50 是甘露醇的 1/139。结果提示了甘草总黄酮有可能作为一种新的天然抗氧化剂。     

几种清热养阴类天然药物清除超氧阴离子自由基的作用

清热养阴类药物对超氧阴离子自由基的作用如何 ?我们得用ＥＰＲ波谱技术来研究常用清热养阴类药物对Ｏ2 · 的清除作用。本法采用ＤＭＳＯ碱性有氧体系产生Ｏ2 · ,分别入麦冬、生地、玄参、天花粉、石膏的提取液 ,用ＥＰＲ方法直接观察加入的天然药物对模型体系中产生Ｏ2 · 量的变化情况。1　器材与方法1.1　试剂　氢氧化钠 (Ａ .Ｒ ,上海试剂三厂产品 )。二甲基亚砜 (Ｃ .Ｐ ,上海硫酸厂产品 )。经重蒸后 ,用0 .4ｎｍ分子筛除水。用ＥＲ2 0 0Ｄ -ＳＲＣ型电子顺磁共振仪 ,用ＥＲ4 111ＶＴ变温装置 (德国Ｂｒｕｋｅｒ公司产品 )检测量的变…     

庆大霉素引起内耳组织自由基增加的直接证据

目的　探讨庆大霉素体内注射与耳蜗组织自由基含量的关系 .方法　用电子顺磁共振法 (electron paramagneticresonance,EPR)直接检测正常的和注射庆大霉素后豚鼠耳蜗组织羟自由基含量 ,并比较其含量的变化 .结果　正常情况下豚鼠耳蜗组织存在一定量的羟自由基 ,其相对值为 0 .13±0 .0 1,当体内注射庆大霉素后 ,耳蜗组织羟自由基含量相对值为 0 .2 8± 0 .0 0 ,比前者增加 110 % ,两者比较有显著差异 (P<0 .0 5 ) .结论　 EPR检测动物耳蜗组织自由基含量是一种直接、有效的方法 ,庆大霉素体内注射后可引起豚鼠耳蜗组织羟自由基含量显著增加     

某些癌症和老年病患者血液自由基含量的检测

本研究应用电子顺磁共振（ＥＳＲ）技术了几种癌症和老年性疾病患者以及健康人血液自由基的含量。结果表明，这些患者血液自由基水平明显高于健康人（Ｐ＜０．０５），其中高脂血症和肺癌患者高于其它类型患者；其余依次是直肠癌、肝癌、糖尿、乳腺癌，而高血压及冠心病患者则低于其它类型病人，说明了自由基代射在多种癌和老年病的发生中起着重要作用。因此，进一步研究自由基代谢变化的规律在阐明病理发生机制和为正确指导临床防治     

甘草渣中大量黄酮类化合物的分离及甘草的综合开发研究

经煎煮过的甘草饮片和提取甘草膏、甘草甜素制品后的甘草渣中含有大量的黄酮类化合物，其量超过甘草甜素1倍以上。作者提供分离这些黄酮类化合物，并回收木质素和纤维素的工艺方法，为甘草的综合利用开发研究打下基础。     

沙枣花中黄酮类化合物对羟基自由基的清除研究

目的 自由基是造成人体过早衰老的主要原因之一，多数黄酮类化合物能清除自由基，但沙枣花中黄酮类化合物的生物作用迄今未见报道。方法 本文根据Fenton方法建立产生羟基自由基的模型，采用分光光度法进行跟踪分析，利用沙枣花的提取液中的功能成分黄酮类化舍物对羟基自由基进行了清除试验研究。结果 在12．5μg／ml～100μg／ml范围内，浓度与清除效率呈正相关。结论 结果表明，沙枣花中的黄酮类化舍物对羟基自由基有着较好的清除效率。     

新疆甘草药渣总黄酮提取工艺研究及其含量测定

目的优化新疆甘草药渣总黄酮提取工艺。方法利用紫外分光光度法,以甘草苷为标准品,制作标准曲线,在紫外区335nm处对黄酮含量进行测定,以黄酮含量测定值为指标,考察溶剂浓度(A)、料液比(B)、提取温度(C)和提取时间(D)4个因素对总黄酮提取率的影响。结果根据单因素及正交试验分析确定优化的甘草药渣总黄酮提取工艺条件为A3B2C3D2,即95%的乙醇、料液比1∶15、提取温度90℃、提取时间为2h。结论该提取工艺对甘草药渣总黄酮提取率较高。     

甘草查尔酮抗脂质过氧化及自由基的实验研究

应用比色法测定脂质过氧化物研究甘草查尔酮的抗脂质过氧化作用。并用电子自旋捕集技术检测其对超氧阴离子自由基及羟自由基的清除作用。实验表明，ＬＣ５０－２００ｍｇ／Ｌ时，可明显抑制家兔脑组织在温育下引起的丙二醛升高，ＬＣ２００ｍｇ／Ｌ对Ｆｅｎｔｏｎ反应生成的ＯＨ＾－清除率达６８．３％，而对黄嘌呤黄嘌呤氧化酶系统生成的Ｏ＾－２清除率仅为１１．４％。     

甘草黄酮对肺部炎症小鼠细胞因子表达和氧化反应的调节作用

目的 研究甘草黄酮对抗内毒素脂多糖 (LPS) 诱导小鼠肺部炎症的作用机制。方法 小鼠气管内滴入 LPS 或生理盐水,6 或 24 h 后取支气管肺泡灌洗液 (BALF) 和肺组织,测定 BALF 中的白细胞总数和中性粒细胞以及超氧化物歧化酶 (SOD) 活性,测定肺组织的含水量和病理变化,测定肺组织匀浆和 BALF 中的髓过氧化物酶 (MPO) 活性、肿瘤坏死因子-α (TNF-α) 和白细胞介素-1β (IL-1β) 的 mRNA 表达以及 TNF-α 蛋白水平。结果 白细胞计数、肺含水量测定和肺组织病理检查等指标显示,小鼠气管内滴入 LPS 引起严重的肺部炎症。甘草黄酮给药后能预防 LPS 引起的这些变化。甘草黄酮能明显减少 BALF 中的总白细胞和中性粒细胞的数目,升高 SOD 活性。甘草黄酮能明显降低肺组织中的 MPO 活性,抑制 TNF-α和 IL-1β mRNA 的表达,抑制 TNF-α蛋白水平。结论 甘草黄酮能改善 LPS 引起的小鼠肺部炎症,其抗炎作用可能与抑制细胞因子的表达和调节氧化/抗氧化反应有关。     

不同产地冬虫夏草清除羟自由基作用的研究

目的 比较不同产地冬虫夏草对羟自由基的清除作用。方法 采用邻二氮菲-Fe^2 氧化法检测不同产地冬虫夏草水提液对H2O2／Fe^2 体系产生的羟自由基的清除作用。结果 来自西藏那吐地区、云南滇西北地区和四川川西北地区的冬虫夏草均对Fenton反应产生的羟自由基有显著或极显著的清除作用，且来自不同微生态环境的样品之间的清除作用差异比来自不同主产区样品之间的清除作用差异更明显。结论 冬虫夏草水提液有明显地清除羟自由基的作用，且微生态环境对该作用有较大的影响。     

甘草黄酮对大鼠实验性糖尿病的预防作用

目的 研究甘草黄酮(LF)对高脂高糖饮食结合一次性小剂量腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)所致糖尿病大鼠高血糖与高血脂的预防作用,探讨其可能的作用机制.方法 将实验大鼠随机分成4组:正常对照组(control)、正常给药组(CLF)、模型组(model)和预防给药组(PLF).control组和CLF组以普通饲料饲养,model与PLF组以高脂高糖饲料饲养;同时,CLF组与PLF组以剂量为300 mg/(kg body·d)的LF灌胃,control组与model组以溶剂(1,2-丙二醇)灌胃.六周后,model组和PLF组一次性小剂量腹腔注射STZ(35mg/kg).6天后检测实验大鼠体重、空腹血糖(FBG),甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和总抗氧化能力(T-AOC);取肝脏、肾脏、肾周脂肪、双侧附睾脂肪和大网膜脂肪称重;计算大鼠的肝指数、肾指数及脂体比.结果 LF显著抑制了PLF组大鼠的FBG、TG、TC、LDL-C和肝体比的升高,显著提高了T-AOC,并显著抑制了PLF组大鼠体重和脂体比的下降.结论 LF可有效预防大鼠实验性糖尿病的发生.     

甘草黄酮类化合物对CDK1的抑制活性及体内外抗肝癌活性

探讨甘草黄酮类化合物对细胞周期依赖性蛋白激酶(CDK1)的抑制活性及抑制肝肿瘤细胞Bel-7402活性。采用CDK1和CCK-8试剂盒分别测试甘草黄酮类化合物对CDK1的抑制活性和对肝癌Bel-7402细胞的体外增殖抑制活性。构建肝癌Bel-7402裸鼠皮下肿瘤模型,并将小鼠随机分为3组:灌胃给药组、阳性药物组和空白对照组,连续灌胃给药18 d,每隔1天记录实验小鼠的体重、肿瘤大小变化。结果表明,甘草黄酮类化合物对CDK1/cyclin B均展现出了抑制活性,尤其是异甘草素对CDK1/cyclinB的抑制活性(IC₅₀=0.05±0.005 μmol/L)是阳性药物夫拉平度(IC₅₀=0.29±0.230 μmol/L)的近6倍;通过分子对接研究发现,异甘草素在CDK1中能够与氨基酸残基K33、E81、L83、S84、D86、D149形成6个氢键,而阳性药物夫拉平度仅与氨基酸残基E81、L83、S84、Q132、D149形成5个氢键;体外抗肿瘤活性研究表明,甘草黄酮类化合物对Bel-7402有较强的抑制作用,其中异甘草素对Bel-7402(IC₅₀=0.7±0.11 mol/L)展现出了最强的抑制活性,是阳性药物夫拉平度(2.4±0.34)mol/L的3倍。动物体内研究表明,异甘草素的LD₅₀为4.38 mg/kg,并能够有效抑制肝癌Bel-7402细胞的增长。     

平阳霉素与 Fe~(2+)反应产生·OH的自旋共振研究

运用电子自旋共振（ＥＳＲ）自旋捕获技术检测到平阳霉素与Ｆｅ２＋在有氧条件下产生的羟自由基（·ＯＨ）的信号。这是首次用ＥＳＲ证明该体系可生产·ＯＨ，为进一步研究平阳霉素毒性的自由基机理提供了一个重要的实验证据。     

不同水解方法对葡萄酒厂废渣中齐墩果酸含量的影响

目的：考察不同水解方法对葡萄酒厂废渣中OA含量的影响。方法：采用未水解法、酸解法、酶解法、酶解法＋酸解法4种方法对葡萄榨汁后废渣进行处理，采用醇提法提取出其中的齐墩果酸，并进行含量测定和比较。结果：优选的水解方法为酶解法。结论：所建立的水解方法稳定、可靠，适合于工业生产。     

HPLC法测定甘草抗血栓滴丸中甘草酸和甘草苷的含量

目的 探讨建立甘草抗血栓滴丸中甘草酸和甘草苷的HPLC含量测定方法.方法 采用HPLC法,使用phenomenex-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),甘草酸流动相为甲醇∶0.2 mol/L醋酸铵溶液∶冰醋酸(67∶33∶1),检测波长254 nm,柱温为室温;甘草苷采用乙腈:0.5%冰醋酸(20∶80)为流动相,检测波长276 nm,柱温为室温.二者流速均为1.0 ml/min,采用外标法定量测定.结果 甘草酸在36.35～363.50μg/ml范围内呈良好线性关系(r=0.999 7);甘草苷在1.12-22.30μg/ml范围内呈良好线性关系(r＝0.999 8);甘草酸和甘草苷的平均回收率分别为100.84%和99.95%,其RSD值分别为2.20%和2.23%.结论 HPLC该方法操作简便、准确,线性相关系数良好,且稳定性和重复性好,适用于甘草抗血栓滴丸中甘草酸和甘草苷的含量测定.     

maFGF对慢性衰老大鼠肝组织ATP酶、SOD活力及丙二醛和羟自由基水平的影响

目的探讨改构型酸性成纤维细胞生长因子(maFGF)对衰老大鼠肝组织中ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)、羟自由基(OH.)水平的影响。方法采用皮下注射D-半乳糖建立衰老大鼠模型,将其随机分为衰老模型组、生理盐水对照组和maFGF治疗组。另10只不给任何药物,正常饲养,作为正常对照组。测定各组肝组织中Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶和SOD活力以及MDA、OH.水平。结果衰老模型组大鼠肝组织Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶和SOD活力均显著降低,MDA和OH.基含量均升高(P<0.05);maFGF治疗组大鼠肝组织Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶和SOD活力均显著升高,MDA和OH.含量均降低(P<0.05)。结论 maFGF通过降低自由基,提高ATP酶活力和抗氧化能力而对衰老大鼠有保护作用。     

煎炸油中自由基的电子自旋共振(ESR)研究

用ESR法测定了三种煎炸油(豆油、菜油、棉籽油)中的自由基。结果表明,炸油中自由基浓度随油温的升高和加热时间的增长而增加,在200℃左右自由基浓度激增。煎炸油中自由基寿命相当长。