血管内皮细胞产生一种新的强效血管收缩肽

一种内皮细胞产生的21个氨基酸残基的血管收缩肽——内皮素(endothelin)经分离已获得。实验证明,内皮索是迄今为止所知的最强的血管收缩物质之一,内皮素原前体的互补DNA的克隆和序列表明,具活性的内皮素经一不寻常的蛋白水解过程产生,是一组神经毒素的部分类似物,提示内皮素是     

血管内皮素和血管紧张素Ⅱ释放的相互关系

为探讨血管内皮素(ET)和血管紧张素Ⅱ(AⅡ)释放的相互关系,本工作用放射免疫方法测定离体灌流大鼠主动脉的ET和AⅡ的释放,发现EF或AⅡ呈剂量依赖地促进主动脉条释放AⅡ或EF。缺氧可显著地促进ET和AⅡ的释放,而ET或AⅡ抗血清明显地抑制缺氧所致的AⅡ或ET的释放。临床观察发现血管紧张素转换酶抑制剂—巯甲丙脯酸治疗原发性高血压,有效地降低病人血浆ET水平。结果提示:血管AⅡ和ET的释放间存在着相互促进的正反馈关系。     

降钙素基因相关肽对内皮素释放的影响

本实验在大鼠的整体及离体血管条上观察了降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）对内皮素（ＥＴ）释放的影响。结果表明：ＣＧＲＰ静脉注射（５μｇ／ｋｇ）能明显降低大鼠内毒素血症时血浆ＥＴ含量，ＣＧＲＰ孵育（１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ）离体的大鼠主动脉血管条能有效地抑制凝血酶（ｔｈｒｏｍｂｉｎ）引起的ＥＴ释放，但是ＣＧＲＰ静注及孵育不影响血浆ＥＴ的基础含量及离体血管条ＥＴ的基础释放。结果提示ＣＧＲＰ能抑制病理条件下ＥＴ的     

血管内皮细胞释放的血管活性物质之间的相互作用

血管内皮细胞释放多种血管活性物质，它们的活性特别是它们之间的相互作用决定血管口径的变化。本文综述血管内皮细胞释放的血管活性物质之间的相互关系，探讨不同血管活性物质对血管口径及血管阻力的影响。     

血管内皮细胞NO合成与释放的信号转导

在血管内皮细胞的功能活动中,G蛋白在其信号转导过程中起着重要作用.多种自身活性物质、循环激素均能通过激活血管内皮细胞膜上的G蛋白控制内皮细胞合成与释放NO进而调控血管平滑肌细胞的各种功能.G蛋白表达量及功能的异常与动脉粥样硬化、高脂血症等心血管疾病有着密切的关系.     

发现一种具有生长激素释放活性的新肽

三十多年前Harris首次提出下丘脑神经细胞分泌的化学物质调节垂体前叶功能的假说。最近,发现一种肽能特异地强烈刺激生长激素(GH)分泌,该肽不象促甲状腺释放激素(TRH)、促性腺激素释放激素(GnRH)、促皮质激素(CRH)和生长素释放抑制因子那样来源于下丘脑,而得自两例病人的胰腺肿瘤。其中1例有垂体肿大,经蝶鞍作手     

血管活性物质对人内皮细胞C-型利钠利尿肽合成和释放的影响

目的:在培养的人内皮细胞上观察内皮素(ET)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和同型半胱氨酸(Hcy)对C-型利钠利尿肽(CNP)生成和释放的影响,以探讨CNP生成和释放的机制。方法:人内皮细胞培养;CNP放免测定。结果:ET、AngⅡ均可刺激内皮细胞CNP的生成,10^-9、10^-8、10^-7mol/L的ET和AngⅡ分别使细胞CNP含量较对照组高1%(P＞0.05),49%(P＜0.05),117%(P＜0.01)和137%(P＜0.01),165%(P＜0.01),201%(P＜0.01),大剂量ET、AngⅡ可刺激CNP的释放。Hcy对内皮细胞CNP的生成没有影响,但10 ^-9、10^-8、10^-7mol/LHcy可使其释放增加17%(P＞0.05),84%(P＜0.01)和555%(P＜0.01)。结论:ET、Ang和Hcy可调节CNP的释放和/或生成。     

人胚胎脐血管内皮细胞中几种生物活性肽的发育研究

人胚胎脐血管内皮细胞中几种生物活性肽的发育研究（第三军医大学组织学胚胎学教研室重庆６３００３８李泽桂，姚忠祥，蔡文琴，孙榆）近年，内皮细胞单纯作为血管衬里的概念已被各种实验资料所更新。研究结果表明，内皮细胞具有复杂的合成和代谢功能，已成为心血管、肿瘤...     

血管活性肽在人胚胎脐血管内皮细胞中的发育

为说明人脐血管内皮细胞在胚胎发育过程中就可能合成和分泌多种血管活性物质。用免疫组织化学技术对不同发育时期人胚胎脐血管内皮细胞生长抑素、内皮素、神经肽Ｙ和５－羟色胺进行定性定位研究。结果显示：ＳＳ出现于胚胎第８周；５－ＨＴ出现于胚胎１２周；ＮＰＹ出现于胚胎第１６周；ＥＴ出现于胚胎第２０周。     

尼古丁对血管内皮细胞释放t-PA及PAI-1的影响

目的: 研究尼古丁对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)释放组织型纤溶酶原激活物(t-PA)和纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的影响。方法: HUVECs培养后接种于24孔培养板中,随机分为对照组及实验组,分别进行以下实验。(1)以0.1、1、10、100 μmol/L 尼古丁孵育HUVECs,12 h后收集各组上清液;(2)以100 μmol/L尼古丁与HUVECs孵育0、4、6、8、12 及24 h,收集各组上清液。采用ELISA法测定各组t-PA和PAI-1的浓度。结果: HUVECs与不同浓度尼古丁孵育12 h后,100 μmol/L尼古丁组PAI-1蛋白较对照组明显增加(P<0.01);0.1、1及10 μmol/L尼古丁组PAI-1蛋白与对照组比较,均无显著差异(均P>0.05);各浓度组t-PA蛋白与对照组比较,均无显著差异(均P>0.05)。HUVECs 与100 μmol/L的尼古丁分别孵育4 、6 、8 、12 及24 h,各组PAI-1蛋白均较对照组明显升高(P<0.05),且其升高呈时间依赖性;各组t-PA与对照组比较,均无显著差异(均P>0.05)。结论: 尼古丁可抑制HUVECs的纤溶活性,对内皮细胞具有损伤作用。     

肺血管内皮细胞对交感神经末梢去甲肾上腺素释放的影响

ｃＧＭＰ升高抑制肾上腺能神经末梢释放去甲肾上腺素（ＮＥ），内皮细胞释放的舒张因子（ＥＤＲＦ）增加ｃＧＭＰ，故其对交感神经ＮＥ的释放可能有调节作用。本文观察去内皮细胞或抑制ＥＤＲＦ合成后肺血管对跨膜交感神经刺激（ＴＮＳ）的反应及对２－〔１４Ｃ〕－ＮＥ的摄取和释放。利用磨擦损伤内皮细胞后或使用ＬＮＭＭＡ抑制ＥＤＲＦ合成后，肺血管对ＴＮＳ刺激的反应明显增加，尤以低频率刺激为甚。肺血管对２－〔１４Ｃ〕－Ｎ     

血管内皮细胞生长因子表位肽体外抗肿瘤作用研究

目的:研究筛选血管内皮细胞生长因子(VEGF)不同表位肽抗肿瘤及抗血管新生效用。方法:构建4种不同的pCANTAB5-E/VEGF表位肽载体,将VEGF表位肽通过噬菌体展示技术展示于噬菌体表面,MTT法检测VEGF噬菌体表位肽对黑色素瘤细胞(B16)、人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)增殖的影响,Transwell小室检测其对B16F10细胞迁移的影响,ECMgel检测其对HUVEC成管的影响。结果:筛选出VEGF的4种(VSB、VNB、VEB、VTB)表位肽中,VNB对HUVEC细胞增殖的抑制率达到64.8%,VEB、VTB对B16的增殖抑制率分别为75.7%和66.5%。4株表位肽对高转移细胞B16F10迁移抑制率均超过80%。结论:筛选得到的4株VEGF表位肽对黑色素瘤细胞、血管内皮细胞的增殖、迁移和成管有抑制作用,通过分析其表位区段后可制备成小分子多肽,为今后抗肿瘤多肽药物和疫苗的研发奠定基础。     

丹参对氧自由基损伤的离体肺动脉内皮细胞释放内皮素和前列环素的影响

近年研究表明，氧自由基参与急性或慢性肺损伤。血管内皮细胞受损，血管舒缩因子的合成释放异常，可能参与某些呼吸系统疾病的发病过程。本文通过体外细胞培养，研究了丹参对自由基损伤的肺动脉内皮细胞释放内皮素（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ，ＥＴ）和前列环素（ｐｒｏｓｔａ...     

侧脑室注射8肽胆囊收缩素对大鼠胰腺蛋白质释放的影响

胆囊收缩素是一种脑肠肽。已知8肽胆囊收缩素(CCK-8)在脑内许多区域存在,但它对胰腺外分泌的中枢作用迄今未见报导。本研究用CCK-8注入清醒大鼠测脑室,观察CCK-8对胰腺分泌的影响。实验在27只清醒大鼠进行,在测脑室埋藏一金属套管并装上胃和胰腺慢性瘘管以及颈静脉插管,胰液通过慢性胰腺瘘管收集。在静脉恒流灌注促胰液素     

脂多糖诱导对内皮细胞释放内皮细胞微粒的影响

目的探讨脂多糖刺激对内皮细胞释放内皮细胞微粒(EMP)的影响。方法取人脐静脉内皮细胞培养,分为正常对照组(无脂多糖诱导)和不同浓度脂多糖(浓度分别为0.1、1.0、10.0、20.0μg/m L)组,脂多糖诱导24 h后收集细胞培养液并消化内皮细胞制成细胞悬液。离心法提取细胞培养液内的EMP,加入特异性荧光抗体(anti-CD31-CFS、anti-CD51-PE、anti-CD54-FITC、antiCD144-PE、anti-CD62E-APC)。采用流式细胞仪检测脂多糖诱导内皮细胞释放荧光标记EMP的变化以及内皮细胞的凋亡率。对数据行方差分析、t检验、Dunnett-t检验。结果对照组和0.1、1.0、10.0、20.0μg/m L脂多糖组CD31~+EMP数量水平分别为(1.23±0.43)×10~6、(1.92±0.64)×10~6、(2.55±0.78)×10~6、(3.96±0.78)×10~6、(6.96±1.80)×10~6,组间比较差异有统计学意义(F=5.83,P0.05),CD31~+EMP占总体EMP的比值分别为(4.57±1.33)%、(5.92±1.24)%、(6.93±1.61)%、(7.44±1.09)%、(13.44±3.39)%,组间比较差异有统计学意义(F=3.43,P0.05)。与对照组比较,10.0、20.0μg/m L脂多糖组CD31~+EMP数量水平明显升高,差异均有统计学意义(t=-3.06、-3.61,P值均小于0.05);20.0μg/m L脂多糖组CD31~+EMP数量水平高于0.1、1.0μg/m L脂多糖组,差异均有统计学意义(P值均小于0.05)。CD31~+EMP占总体EMP的比值20.0μg/m L脂多糖组高于对照组和0.1μg/m L脂多糖组,差异均有统计学意义(P值均小于0.05)。对照组和0.1、1.0、10.0、20.0μg/m L脂多糖组CD54+EMP数量水平分别为(4.70±1.01)×10~6、(9.20±3.34)×10~6、(8.83±1.70)×10~6、(17.18±3.78)×10~6、(17.73±4.98)×10~6,组间比较差异有统计学意义(F=3.35,P0.05)。与对照组比较,10.0、20.0μg/m L脂多糖组CD54+EMP数量水平明显升高,差异均有统计学意义(t=-3.19、-3.00,P值均小于0.05)。对照组和0.1、1.0、10.0、20.0μg/m L脂多糖组CD144~+EMP数量水平分别为(3.93±1.22)×10~6、(6.80±1.36)×10~6、(8.03±2.53)×10~6、(17.22±4.52)×10~6、(11.05±5.80)×10~6,组间比较差异有统计学意义(F=3.17,P0.05)。10.0μg/m L脂多糖组CD144~+EMP数量水平高于对照组及0.1、1.0μg/m L脂多糖组,差异均有统计学意义(P值均小于0.05)。20.0μg/m L脂多糖组CD62E+EMP数量水平为(2.95±0.26)×10~6,明显高于对照组(1.26±0.26)×10~6,差异有统计学意义(t=-4.45,P0.05)。各组内皮细胞凋亡率比较差异无统计学意义(F=0.17,P0.05)。结论脂多糖损伤内皮细胞可表现为表达特异性标记的EMP的大量释放,可能是脓毒症内皮细胞损伤机制之一。     

一种国产胃泌素释放肽前体化学发光免疫试剂的性能验证

目的 胃泌素释放肽前体(progastrin- releasing peptide,proGRP)是鉴别小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)与非小细胞肺癌(non- small cell lung cancer,NSCLC)及其他良性肺部疾病的重要标志物。长光华医研发生产了proGRP化学发光免疫分析试剂(chemiluminesent immunoassay,CLIA),厂家声明,该试剂精密性<10%,检出限为5pg/mL,回收率在±10%之间,参考区间为<65pg/mL,线性范围为15~3000pg/mL,血清与血浆相关性良好,血清稳定性可达96 h,与Roche电化学发光法proGRP试剂相关性良好。在此对该试剂进行了性能验证。方法 采取美国临床实验室标准化协会(CLSI)文件推荐的方法及美国病理家协会CAP要求,对该国产proGRP检测试剂盒及配套仪器AE- 180检测系统进行精密度、分析灵敏度、回收率、线性范围、参考区间、血清血浆一致性及血清稳定性进行性能验证,并跟罗氏e601系统平行检测199例包括健康体检样本、小细胞肺癌、非小细胞肺癌及良性肺部疾病样本,比较2种检测系统结果的一致性。结果 该国产化学发光proGRP精密性良好,批内变异系数在2.8%~3.2%,总变异系数为4.3%~5.2%;检出限为5pg/mL;回收率在90.6%~105.2%;参考区间为<65 pg/mL;线性范围为15~3000 pg/mL;血清与EDTA血浆相关性良好;血清稳定性可达96 h;与Roche电化学发光法检测结果相关系数为0.99,斜率和截距分别为0.9889和1.28 pg/mL,相关性良好。结论该国产CLIA 法检测proGRP 性能参数和厂商声明一致,其性能可以满足临床要求。     

从噬菌体7肽库中筛选的哇巴因结合肽对血管内皮细胞的保护作用

目的:寻找与哇巴因高亲和力结合并抑制其生物功能的相关小分子肽,为治疗原发性高血压提供新策略.方法:以哇巴因为筛选分子,应用M13噬菌体呈现随机7肽库进行筛选.经过3轮生物淘筛,并通过ELISA法鉴定,对噬菌体阳性克隆ssDNA电泳鉴定和基因测序分析.委托合成筛选获得哇巴因结合肽,采用放射配基受体结合法检测其结合活性;MTT法检测血管内皮细胞的增殖抑制率,Hoechst33342/PI双荧光染色检测细胞形态学变化;利用RT-PCR和细胞免疫荧光检测钠泵α1、β1的表达水平;荧光探针检测细胞内游离Na+浓度变化.结果:筛选获得14个阳性克隆,基因测序显示:哇巴因结合肽一致率达64.3%(9/14).委托合成肽(Arg-Cys-Met-Thr-Ser-Arg-Ser).放射性配基受体结合法检测显示,合成的哇巴因结合肽能够与哇巴因结合.哇巴因结合肽+哇巴因的EAhy926细胞组增殖抑制率小于哇巴因组(P<0.05);Hoechst33342/PI双荧光染色显示细胞死亡数量减少;RT-PCR和免疫细胞化学检测钠泵α1、β1亚单位转录和翻译水平,显示哇巴因结合肽能拈抗哇巴因所引起钠泵α1亚单位表达的上调、β1亚单位的下调作用;荧光探针显示哇巴因结合肽能够拮抗哇巴因对钠泵的抑制作用.结论:哇巴因特异性结合肽能够阻抑哇巴因对血管内皮细胞的抑制增殖和诱导死亡作用,为研究哇巴因与钠泵的相互作用机制及进一步研究抗哇巴因的分子药物奠定基础.     

血管内皮细胞与血小板聚集、释放和超微结构变化的相互关系研究

实验用培养的牛主动脉内皮细胞(EC)在体外条件下与采自兔血的富含血小板血浆(PRP)孵育,观察EC对血小板聚集的影响,用生物发光法测定血小板聚集时ATP的释放量,并观察这一反应过程中血小板的超微结构变化。结果表明血小板聚集强度与加入的EC量呈负相关性,且血小板ATP释放量和形态学变化与聚集程度相符合,即随血小板聚集受抑,其变形减轻,颗粒物质及ATP释放减少。形态观察中发现血小板对EC的粘附及颗粒释放现象,即使在血小板聚集完全为EC抑制时仍可见这一现象,其机理尚不明了。