Increased early activation of CD56dimCD16dim/- natural killer cells in immunological non-responders correlates with CD4+ T-cell recovery

BackgroundNatural killer (NK) cells play a critical role in suppressing human immunodeficiency virus-1 (HIV-1) infection, but knowledge on whether and how NK cells affect immune reconstitution in HIV-1-infected individuals who receive antiretroviral therapy (ART) is limited.MethodsWe performed a case-control study with 35 healthy individuals and 66 HIV-1-infected patients including 32 immunological non-responders (INRs) with poor CD4⁺ T-cell recovery (<500 cells/μL after 4 years of ART) and 34 immunological responders (IRs) with improved CD4⁺ T-cell recovery (>500 cells/μL after 4 years of ART). NK cell phenotype, receptor repertoire, and early activation in INRs and IRs were investigated by flow cytometry.ResultsA significantly higher proportion of CD56^dimCD16^dim/- NK cells was observed in INRs than IRs before ART and after 4 years of ART. The number of CD56^dimCD16^dim/- NK cells was inversely correlated with CD4⁺ T-cell counts in INRs before ART (r = –0.344, P = 0.050). The more CD69-expressing NK cells there were, the lower the CD4⁺ T-cell counts and ΔCD4, and these correlations were observed in INRs after ART (r = –0.416, P = 0.019; r = –0.509, P = 0.003, respectively). Additionally, CD69-expressing CD56^dimCD16^dim/- NK cells were more abundant in INRs than those in IRs (P = 0.018) after ART, both of which had an inverse association trend towards significance with CD4⁺ T-cell counts. The expression of the activating receptors NKG2C, NKG2D, and NKp46 on CD56^dimCD16^dim/- NK cell subsets were higher in IRs than that in INRs after 4 years of ART (all P < 0.01). Strong inverse correlations were observed between CD69 expression and NKG2C, NKG2A^-NKG2C⁺, NKG2D, and NKp46 expression on CD56^dimCD16^dim/- NK cells in INRs after ART (NKG2C: r = –0.491, P = 0.004; NKG2A^-NKG2C⁺: r = –0.434, P = 0.013; NKG2D: r = –0.405, P = 0.021; NKp46: r = –0.457, P = 0.008, respectively).ConclusionsINRs had a larger number of CD56^dimCD16^dim/- NK cells characterized by higher activation levels than did IRs after ART. The increase in the CD56^dimCD16^dim/- NK cell subset may play an adverse role in immune reconstitution. Further functional studies of CD56^dimCD16^dim/- NK cells in INRs are urgently needed to inform targeted interventions to optimize immune recovery.     

抑郁症患者自然杀伤细胞活性的研究

目的　探讨抑郁症患者自然杀伤 (NK)细胞的数目和活性。方法　对 4 6例符合国际疾病分类法单相抑郁症的患者及 4 6名健康对照者 ,收集其外周血单个核细胞 ,用流式细胞仪分析技术和酶释放试验 ,检测NK细胞亚群及活性 ;同时对抑郁症组患者在治疗后进行淋巴细胞亚群及活性的再检测 ,并作治疗前后的比较。结果　抑郁症患者NK细胞亚群治疗前为 9 7%± 5 6 % ,治疗后为11 0 %± 5 5 % ,明显低于健康对照组 (P <0 0 1) ,该组NK细胞活性 (效应细胞和靶细胞之比分别为2 0 :1和 10 :1)亦明显低于健康对照组 (P <0 0 1) ,经治疗后NK细胞亚群与治疗前比较差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ,NK细胞活性与治疗前比较差异有显著意义 (P <0 0 1)。结论　抑郁症可改变机体NK细胞的数目和活性 ,治疗后可增加NK细胞活性 ,但不能增加其数目     

T淋巴细胞亚群和NK细胞对非霍奇金淋巴瘤患者疗效的预测价值

目的:探讨T淋巴细胞亚群和NK细胞对非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者疗效的预测价值.方法:选取本院收治的NHL患者120例为NHL组,另选同期体检人群60例作为对照组.所有NHL患者均单用化疗.于化疗前及化疗后1个月,检测T细胞及NK细胞水平.结果:化疗前,NHL组CD3+、CD4+细胞比例及CD4+/CD8+比值均明显低于对照组,CD8+、CD25+、CD4+ CD25+ Treg及NK细胞比例均明显高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05);化疗后,CD4+细胞比例、CD4+/CD8+比值较化疗前明显升高,CD4+ CD25+ Treg比例明显降低,与对照组比较差异具有统计学意义(P＜0.05);不同临床分期及临床结局的NHL患者化疗前T细胞及NK细胞比例比较,差异具有统计学意义(P＜0.05);临床分期越高、疗效越差,CD3+、CD4+细胞比例及CD4+/CD8+比值越低,CD8+、CD25+、CD4+CD25+ Treg及NK细胞比例越高.结论:NHL患者外周血中T细胞及NK细胞与NHL存在密切关联,有望通过动态监测NHL患者外周血中T细胞及NK细胞水平来观察疾病发展及化疗的效果,指导临床治疗.     

EB病毒阴性的侵袭性NK细胞白血病1例报道并文献复习

目的通过报道1例EB病毒阴性的侵袭性NK细胞白血病(ANKL)患者诊治,以提高对该病的认识。方法对1例新近诊断的EB病毒阴性的ANKL患者的临床资料进行分析,并复习国内外相关文献。结果该病临床表现为持续高热及肝、脾、淋巴结肿大;外周血、骨髓涂片大颗粒淋巴细胞增多;免疫表型CD2(+)、表面CD3(―)、胞质CD3(+)、CD56(+)、CD57(―);TCR基因、IgH基因重排均为阴性。结论 ANKL恶性度高,病情发展呈高度侵袭性,对化学治疗反应差,易并发感染,预后极差,需研究新的治疗方案。     

深圳部分吸毒人群HIV感染者HIV-1分子流行病学调查

目的对深圳市2008年吸毒人群进行HIV-1分子流行病学调查研究,了解本地区吸毒人群HIV-1流行情况、亚型种类、毒株来源、变异情况等,为预防和控制HIV在吸毒人群中的流行提供有价值的资料。方法收集深圳市2008年份吸毒人群HIV-1抗体阳性样本21例,应用巢式聚合酶链式反应（nested—PCR）技术,对该样本膜蛋白基因（env基因）和核心蛋白（gag基因）进行扩增,并对其各基因区核苷酸序列进行测定和分析。结果21例HIV-1阳性样本中共存在CRF01-AE 1种重组毒株以及A11种亚型,其在所有分析样本中的比例分别为90．5％和9．5％;其中12份Env基因样本中,10份为CRF01-AE重组亚型,与国际参考株01AE．TH．90．CM240最近,基因离散率为（9．910±2．432）％,组内离散率为（12．747±3．066）％;2份为A1亚型,与国际参考株a1．gu.92．92ug037最近,基因离散率为（17．15±0．354）％,组内基因离散率0．900％。21份Gag基因样本中,19份为CRF01-AE重组亚型,与国际参考株01AE．TH．90．CM240最近,基因离散率为（5．083±1．341）％,组内离散率为（6．072±1．968）％;2份A1亚型,与国际参考株01ae．en．97．97cngx2f最近,基因离散率为（11．550±0．636）％,组内离散率为2．200％。结论2008年深圳地区HIV-1抗体阳性吸毒人群中HIV-1流行株以CRF01-AE重组亚型为主,并首次在深圳地区吸毒人群中发现A1亚型。     

Combination strategies of immunotherapy in non-small cell lung cancer: facts and challenges

Immunotherapy has dramatically altered the treatment of non-small cell lung cancer. Currently, the emergence of combination strategies in immunotherapy has brightened the prospects of improved clinical outcomes and manageable safety profiles in the first/second-line settings. However, sub-optimal response rates are still observed in several clinical trials. Hence, alternative combination models and candidate selection strategies need to be explored. Herein, we have critically reviewed and commented on the published data from several clinical trials, including combined immunotherapy and chemotherapy, anti-angiogenic agents, epidermal growth factor receptor/anaplastic lymphoma kinase tyrosine kinase inhibitors, radiotherapy, and other immune checkpoint inhibitors.     

曲古抑菌素A对外周血自然杀伤细胞活性和功能的影响

目的探讨曲古抑菌素A（TSA）对正常人外周血自然杀伤细胞(NK)活性和功能的影响。方法从正常人外周血单个核细胞（PBMCs）分离淋巴细胞（PBLs）（主要包括T细胞和NK细胞）或纯化NK细胞。体外应用白介素 2（IL 2）诱导PBLs 72?h产生淋巴因子激活的杀伤（LAK）细胞。将PBLs, LAK或NK细胞进行体外培养,给予不同浓度的TSA处理12、24、48?h。流式细胞术检测NK细胞和T细胞的凋亡;采用51Cr释放试验检测NK细胞的杀伤功能。结果TSA以剂量和时间依赖方式诱导PBLs和LAK细胞凋亡,TSA处理组淋巴细胞及LAK细胞凋亡百分率明显高于对照组（P＜0.05）;TSA同样可诱导静止期NK细胞的凋亡,0.1?μmol/L TSA作用于NK细胞24?h后,36%NK细胞凋亡,显著高于未处理组（P＜0.05）;0.1?μmol/L TSA作用于NK细胞１2?h后,其杀伤白血病细胞的能力明显低于对照组（P＜0.01）。结论TSA能够诱导人外周血静止期NK细胞及LAK细胞发生凋亡,并影响NK细胞的细胞毒作用。     

CD4^＋ iNKT细胞在实验性变应性鼻炎发病中的作用

目的探讨实验性变应性鼻炎发病过程中CD4^＋iNKT细胞浸润情况。方法将30只C57BL/6小鼠随机分为变应性鼻炎组（A组）和对照组（B组）。比较2组小鼠变应性鼻炎症状评分、鼻黏膜嗜酸粒细胞（EOS）计数、鼻黏膜组织形态,免疫酶标技术检测各组鼻黏膜CD4^＋ iNKT细胞的浸润,流式细胞技术（FCM）检测鼻腔黏膜中的CD4^＋ iNKT细胞。并进行比较分析。结果（1）A组症状评分（7.3±1.0）分较B组（0.7±0.6）分明显增高（P〈0.01）。（2）A组EOS计数（7.5±1.2）个/HP较B组（0.4±0.5）个/HP明显增高（P〈0.01）。（3）HE染色见A组纤毛结构大量脱落,组织水肿,小血管增生,黏膜上皮下固有层EOS、淋巴细胞浸润;B组纤毛结构完整,无明显EOS浸润。（4）A组鼻黏膜下有多量的CD_4和NK1.1双阳性染色细胞,即CD4^＋ iNKT细胞;B组仅见少量的CD4^＋细胞。（5）A组鼻黏膜CD4^＋ iNKT细胞阳性率（72.6%±7.9%）明显高于B组（0.49%±0.01%）（P〈0.01）。结论变应性鼻炎小鼠鼻腔黏膜有大量的CD4^＋ iNKT细胞浸润,其数量远远超过CD4^＋T细胞。     

CIK细胞免疫治疗对消化系统晚期恶性肿瘤患者的生活质量及免疫状态的影响

目的 评估细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)治疗晚期消化系统恶性肿瘤对患者生活质量及免疫功能的影响.方法 选择2010年1月至2014年12月武汉市五医院肿瘤中心治疗的64例晚期消化系统肿瘤患者,采用自体单采CIK细胞回输治疗,评估治疗前后患者的生活质量(KPS评分、睡眠、疼痛、饮食)、辅助检查(肿瘤标志物、肝功能、肿瘤大小、腹腔积液)及淋巴细胞亚群状况,并观察治疗的毒副作用.结果 64例患者CIK细胞治疗后的KPS评分、睡眠、疼痛、饮食、肿瘤标志物水平有改善,与治疗前比较差异均有统计学意义(P<0.05);患者的肝功能,肿瘤大小、腹腔积液、淋巴细胞亚群治疗后无明显改善,与治疗前比较差异均无统计学意义(P>0.05);11例次出现寒颤发热等不良反应.结论 CIK治疗晚期消化系统恶性肿瘤,毒副作用小,可以一定程度的改善患者KPS评分、睡眠、疼痛、饮食及肿瘤标志物水平.肝功能、肿瘤负荷、腹腔积液、免疫功能状态在治疗后无明显获益.     

人鼻咽癌细胞株CNE2对NK细胞KIR/NKG2D受体的免疫编辑作用及其对NK细胞杀伤功能的影响

目的 探讨NK细胞与表达NKG2D配体的人鼻咽癌细胞株CNE2混合培养后4、24、48h时KIR、NKG2D的变化及其对NK细胞杀伤CNE2细胞活性的影响.方法 PCR-SSP法检测CNE2细胞HLA-A、B、Cw表型、NK细胞KIR表型(选择3例健康者为试验对象),流式细胞仪检测对照组(新鲜分离的NK细胞)KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1、NKG2D的表达情况.IL2组(IL2培养的NK细胞)、CNE2组(CNE2、IL2、NK细胞混合培养)培养后4、24、48 h时KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1、NKG2D的表达情况,LDH释放法测定IL2组及CNE2组培养24 h后的NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性.结果 CNE2细胞表面HLA-A、B、Cw表型为A2,24;B18,35;Cw4,7.3例健康者均表达KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1.CNE2组4、24、48 h时KIR2DL1、KIR2DL3表达较对照组、IL2组明显升高(P＜0.01),NKG2D表达较对照组、IL2组明显降低(P＜0.01),KIR3DL1表达与对照组、IL2组相比无明显变化(P＞0.05).IL2组4、24、48 h时KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1及NKG2D表达与对照组相比无明显变化(P＞0.05).IL2组、CNE2组培养24 h后的NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性在效靶比10∶1时分别为(26.%±1.47)%和(2.74±1.64)%,两者相比差异有统计学意义(P＜0.01);效靶比20∶1时分别为(35.74±3.59)%和(4.57±2.41)%,两者相比差异有统计学意义(P＜0.01).结论 NK细胞与NKG2D配体阳性的肿瘤细胞持续性接触,下凋NK细胞表面NKG2D表达,上调NK细胞表面与HLAⅠ类分子相结合的KIR表达,导致NK细胞对靶细胞杀伤活性减低.本研究阐明了编辑后的NK细胞杀伤活性减低的分子基础,同时提示阻断HLAⅠ类分子与KIR的结合或者增强NK细胞表面NKG2D的表达将有利于提高NK细胞杀伤肿瘤细胞的活性.     

免疫活性地龙肽的制备及其对小鼠NK细胞活性的影响

目的:提取低分子量免疫活性地龙肽,并就其对自然杀伤(NK)细胞活性的影响进行体外研究。方法:采用粗分离、凝胶过滤层析和阴离子交换层析等方法分离纯化地龙肽;采用乳酸脱氢酶法测定NK细胞活性。结果:用凝胶过滤层析分离得到地龙肽T(分子量8000～20000,含有7种蛋白)。用离子交换层析又将地龙肽T分为A、B两部分,地龙肽A由5种蛋白组成,其中有4种分子量在13000以下;地龙肽B仅由一种蛋白构成,分子量约11000;地龙肽A和T可明显提高NK细胞的活性;地龙肽A、B和T皆可减弱环磷酰胺和地塞米松的免疫抑制作用,提高NK细胞的杀伤率。结论:地龙肽T、A单独应用即可以增强NK细胞的活性,并与IL-2具有协同作用;地龙肽T、A和B还可以拮抗地塞米松、环磷酰胺等免疫抑制剂。     

同步放化疗对食管癌患者T淋巴细胞亚群及自然杀伤细胞的影响

目的：观察同步放化疗对食管癌患者T淋巴细胞亚群及自然杀伤（NK）细胞的影响。方法：选取85例食管癌患者设为食管癌组,并随机分为单纯放疗组（单放组）40例和同步放化疗组45例,另随机选取同期健康体检者40例设为对照组。单放组采用单纯放射治疗,同步放化疗组加用顺铂20mg·m-2·d-1＋紫杉醇40mg·m-2·d-1。结果：食管癌组T淋巴细胞总量（T总）、辅助性T细胞（Th）、抑制性T细胞（Ts）比例及Th/Ts与对照组比较,差异均具有统计学意义（P〈0.01）;NK细胞比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。同步放化疗组治疗有效率明显高于单放组,差异具有统计学意义（P〈0.05）。治疗后两组T总、Th比例及Th/Ts均明显升高,Ts比例明显降低,差异具有统计学意义（P〈0.01）;NK比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;组间比较,同步放化疗组T总、Th比例及Th/Ts均明显高于单放组,差异具有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。结论：食管癌患者细胞免疫功能低下,同步放化疗较单纯放疗能明显提高其T总、Th比例及Th/Ts值,改善免疫功能。     

我国人类免疫缺陷病毒-1主要流行株外膜蛋白基因V3-V4区及其临近区域的特征性氨基酸分析

目的鉴定我国HIV-1主要流行毒株亚型的env,V3-V4区及其临近区域的特征性氨基酸,并阐明其在追踪传染源和研究疫苗中的作用。方法应用nested—PCR对157份来自我国12个省份的HIV-1毒株env区序列进行扩增,并使用ABI377型测序仪测序,然后应用BLAST、GCG、MEGA和VESPA等生物学软件或程序对env基因V3-V4区及其临近区域序列进行基因型鉴定、系统树分析及特征性氨基酸鉴定。结果157份样本包括54份B′(34．40％)、61份B′／C(38．85％)和42份CRF01-AE(26．75％)毒株。系统树分析结果显示,B′亚型毒株序列均与B．CN．RL42十分接近,B′／C毒株主要与97CN54A和97CNGX6F聚成一簇。而CRF01—AE序列与THCM240和97CNGX2F聚在一起．而且分别聚成明显不同的两个亚组。特征性氨基酸分析发现,我国B′和B′／C毒株分别具有8个保守的特征性氨基酸,而且与代表株的相同位点氨基酸基本一致。而CRF01-AE重组毒株具有11个保守的特征性氨基酸,其中有9个位点与97CNGX2F和TH.CM240不一致。包括这9个特征性氨基酸的样本主要来自除云南省以外的其他省份。结论目前流行于我国的B′和B′／C毒株具有单一的共同传染源,而CRF01-AE毒株可能是通过不同输入源或不同传播途径先后从泰国传入我国的。这将对我国艾滋病防治策略的制定和正在进行的疫苗研究具有重要的指导意义。     

R5 to X4 coreceptor switch of human immunodeficiency virus type 1 B’ and B’/C recombinant subtype isolates in China

The chemokine receptors CCR5 and CXCR4 play an important role as coreceptors for human immunodeficiency virus type 1 （HIV-1） entring into cells. HIV-1 isolates can be distinguished by the chemokine coreceptors. Nonsyncytium inducing （NSI）, macrophage tropic viruses utilizing CCR5, are called R5 viruses; syncytium inducing （SI） isolates use CXCR4 and known as X4 viruses. R5 viruses generally are associated with latent stage of infection and X4 viruses with later,     

子宫内膜异位症患者腹腔液对正常自然杀伤细胞活性的抑制及与白介素-6、前列腺素的关系

目的　探讨子宫内膜异位症 (EM)患者的腹腔液 (PF)对自然杀伤 (NK)细胞的作用 ,以及与腹腔液中白细胞介素 6 (IL 6 )、前列腺素 (PGs)的关系。方法　采用乳酸脱氢酶 (LDH)释放法测定与EM患者PF共同孵育后正常人血NK细胞活性的变化。放免法测定腹腔液中PGs和IL 6的含量。结果　在作用 2h时 ,非EM患者和EM患者的PF对正常人外周血NK细胞活性的抑制率分别为 (37.1± 18.9) %和 (6 5 .2± 2 1.8) %,两者相比 ,差异具有显著性 (P <0 .0 1)。抑制率与EM临床分期呈正相关 (r=0 .6 0 2 3,P <0 .0 5 )。延长PF与淋巴细胞的作用时间 ,则PF对NK细胞活性的抑制率也随之升高。EMⅠ Ⅱ期的患者PF的IL 6含量 (0 .6 1± 0 .47)μg/L明显高于对照组 (0 .43± 0 .39) μg/L ,差异具有显著性 (P <0 .0 1) ,Ⅲ Ⅳ期组 (0 .49± 0 .36 ) μg/L与对照组相似 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。PF中IL 6的含量与其对NK细胞活性的抑制率之间差异无显著性 (r=0 .2 38,P >0 .0 5 )。EM患者PF中PGE2 和PGF2a含量均明显升高 ,其中Ⅰ Ⅱ期患者PF对NK抑制率与PGE2 含量呈正相关 (r=0 .5 13,P <0 .0 5 ) ;与PGF2α呈正相关 (r =0 .42 5 ,P <0 .0 5 )。结论　EM患者的PF对NK细胞活性具有明显的抑制作用 ,Ⅰ Ⅱ期患者PF中PGs的增高对NK活性的     

NKG2D配体在耐药鼻咽癌细胞的表达及其对NK细胞杀伤活性的影响

目的 探讨NKG2D的主要活化性配体在鼻咽癌亲本细胞CNE2和多药耐药细胞CNE2/DDP的表达及其对自然杀伤(NK)细胞杀伤活性的影响.方法 流式细胞仪检测NKG2D的主要活化性配体MHC-Ⅰ类链相关蛋白A和B(MICA、MICB)、UL16结合蛋白1-3(ULBP1、ULBP2、ULBP3)在CNE2、CNE2/DDP细胞的表达情况;PCR-SSP法检测CNE2、CNE2/DDP细胞HLA-A、B、Cw分型和NK细胞KIR分型;LDH释放法测定5例健康者的NK细胞在不同效靶比时对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性;效靶比20∶1时观察不同单抗对NK细胞杀伤CNE2、CNE2/DDP细胞活性的阻断作用.结果 CNE2、CNE2/DDP细胞HLA分型为A2,24,B18,35,Cw4,7;5例健康者的NK细胞表达KIR2DL1,KIR2DL3,KIR3DL1,KIR3DL2与CNE2、CNE2/DDP细胞表面的HLA-I类分子之间存在错配.CNE2、CNE2/DDP细胞均表达NKG2D的配体MICA、MICB、ULBP2,均不表达ULBP1、ULBP3;CNE2细胞MICA、MICB的表达率与CNE2/DDP细胞相比差异有统计学意义(P＜0.01).效靶比5∶1、10∶1、20∶1、30∶1时NK细胞对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性分别是(10.50±2.17)%、(4.98±0.95)%;(27.68±1.47)%、(15.48±2.10)%;(36.99±3.13)%、(28.46±4.30)%;(55.00±2.20)%、(40.95±2.21)%.在各效靶比时NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性与CNE2/DDP细胞相比差异有统计学意义(P＜0.01);效靶比20∶1时anti-MICA、anti-MICB、anti-ULBP2单抗可明显抑制NK细胞对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性,与阻断前相比差异有统计学意义(P＜0.05);anti-ULBP1、anti-ULBP3单抗不能阻断NK细胞对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性.结论 NKG2D的主要活化性配体MICA、MICB在CNE2、CNE2/DDP细胞的表达差异与NK细胞的杀伤活性有关,肿瘤细胞在发生多药耐药的同时获得了免疫逃避能力.     

HIV-1 假病毒的构建及对人原发性渗出性淋巴瘤细胞系的感染研究

目的:分离、克隆水泡性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)的包膜糖蛋白(VSV-GP)编码基因,包装人类免疫缺陷病毒1型human immunodeficiency virus-1,HIV-1)假病毒,并研究其对人原发性渗出性淋巴瘤细胞系 BCBL-1 细胞的感染状况.方法:根据GenBank登记的VSV-GP基因核苷酸序列设计1对PCR引物,其5'端分别引入HindⅢ和BamH Ⅰ酶切位点.以质粒 pHCMV-G为模板,PCR扩增VSV-GP基因,经双酶切后定向克隆进真核表达载体 PcDNA3.1( )中,构建重组真核表达质粒 pVSV-GP.重组质粒经酶切鉴定、核酸序列测定和分析后与含包装和复制功能缺陷的 HIV-1 基因组重组质粒 pNL4-3.Luc.R-E-共转染人胚肾HEK 293T细胞.收获细胞进行Western blot,检测HIV-1 p24蛋白的表达;收获HIV-1假病毒感染 BCBL-1 细胞,进行虫荧光素酶(Luciferase)报告基因活性检测以及用ELISA的方法检测感染后细胞上清中 HIV-1 p24蛋白的含量.结果:PCR分离、克隆的 VSV-GP 序列全长1 536 bp,序列经过核酸分析证实;Western blot在 HIV-1 p24 蛋白预期位置检测到特异性条带;HIV-1 假病毒感染 BCBL-1 细胞后上清可以检测到HIV-1 p24蛋白,并且测得 Luciferase 活性值较对照组显著增高(P<0.05).结论:成功包装了 HIV-1 假病毒,并且该病毒可以感染 BCBL-1细胞.     

黏膜NK/T和成熟T细胞淋巴瘤MMP9表达及其与EBV感染的关系

目的 探讨MMP9在黏膜NK/T和成熟T细胞淋巴瘤的表达及其与EBV感染的关系.方法 用免疫组化SP法和原位杂交法检测59例黏膜NK/T以及成熟T细胞淋巴瘤MMP9和EBER表达情况,统计MMP9表达与EBV感染的关系.结果 黏膜NK/T和成熟T细胞淋巴瘤MMP9和EBER阳性率分别为83.05%和72.88%,EBER阳性率与组织学类型有关(P＜0.01);MMP9和EBER表达与临床分期和生存期均无显著性关系(P＞0.05),MMP9表达与EBV感染无明显相关性(P＞0.05).结论 黏膜NK/T和成熟T细胞淋巴瘤发生与EBV感染密切相关,它可能通过间接上调MMP9等癌基因的表达而促进肿瘤的发生和发展.防治EBV感染有助于预防淋巴瘤的发生和发展.     

HAART治疗对HIV-1感染者树突状细胞数量与表型及功能的影响

在1996年温哥华第10届国际艾滋病大会上,美籍华裔科学家何大一报道采用高效抗逆转录病毒疗法(highly active anti-retrovirial therapy,HAART)进行抗病毒治疗,显示艾滋病的治疗已进入HAART时代。目前认为HAART治疗可抑制人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)-1复制、缓解病情、减少机会性感染和肿瘤的发生、延长患者生存期,但不能彻底治愈艾滋病。早期的免疫学研究中,人们主要关注于HIV-1特异性免疫,但随