木樨草素拮抗庆大霉素耳毒性实验观察

目的：初步了解木樨草素对庆大霉素耳毒性的影响。方法：设庆大霉素组与庆大霉素加不同剂量木樨草素（10mg、20mg）两组，并进行组问比较，观察听性脑干反应（ABR）阈值、眼震电图（ENG）的频率，了解其听功能及前庭功能的变化。结合耳蜗基底膜铺片琥珀酸脱氢酶（SDH）染色方法观察耳蜗形态学变化。结果：听功能检查结果显示．庆大霉素加不同剂量木樨草素组的ABR阈值明显低于庆大霉素组，经统计学处理，差异有显著性。形态学检查结果与听功能检查结果一致。前庭功能检查结果亦发现木樨草素对庆大霉素引起的前庭功能变化有拮抗作用。结论：本实验发现木樨草素对庆大霉素引起的耳蜗和前庭损伤有拮抗作用。     

丹参注射液拮抗庆大霉素耳蜗毒性的实验研究

目的：探讨丹参注射液对庆大霉素（GM）耳蜗毒性的防护作用。方法：选择白色豚鼠40只，随机分成4组（n=10）：正常对照组、GM组、GM＋丹参组和丹参组。GM组腹腔注射硫酸庆大霉素100mg/kg/d，丹参组腹腔注射丹参注射液6g/kg/d，GM＋丹参组同时注射硫酸庆大霉素和丹参注射液，正常对照组注射等量生理盐水，连续用药10d后观察耳蜗的功能与形态。结果：GM＋丹参组豚鼠听功能受损明显轻于GM组，听脑干反应ABR阈值两组比较有显著性差异（P＜0．01），且形态学改变与听阈变化相一致。结论：丹参注射液可有效拮抗GM对豚鼠的耳蜗毒性，这种拮抗作用可能是通过对耳蜗血管纹边缘细胞和毛细胞内线体的保护来实现的。     

N-乙酰半胱氨酸对庆大霉素耳蜗损伤的保护作用

目的通过建立大鼠耳毒性损伤模型,观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对庆大霉素所致耳蜗损伤的保护作用。方法健康Wistar大鼠60只,随机分为正常组、对照组、庆大霉素组、NAC干预-1组、NAC干预-2组。对照组腹腔注射生理盐水120 mg/(kg.d),共14 d;庆大霉素组腹腔注射硫酸庆大霉素120 mg/(kg.d),共14 d;NAC干预-1组在上述剂量腹腔注射庆大霉素前1 h腹腔注射100 g/L的NAC 350 mg/(kg.d),共14 d;NAC干预-2组注射庆大霉素(同庆大霉素组)14 d后再腹腔注射NAC 3 350 mg/(kg.d),共14 d。所有动物在实验前作听性脑干反应(ABR)阈值测定,除正常组外其他组动物分别在全部用药结束后24 h作ABR阈值测定,处死后取听泡,苏木精-伊红染色法观察耳蜗各部的组织学改变;免疫组织化学法检测耳蜗中核因子-κB(NF-κB)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达。结果用药结束后,庆大霉素组ABR阈值与其他组比较差异均有显著性(F=74.77,q=3.28~5.29,P<0.05),NAC干预-2组与其他组比较差异均有显著性(q=2.24~3.28,P<0.05)。庆大霉素组和NAC干预-2组血管纹、螺旋神经节和Corti器毛细胞NF-κB、TNF-α表达增强,与其他组比较差异均有显著性(F=27.47~48.81,q=1.34~4.31,P<0.05)。结论NF-κB和TNF-α可能共同参与了耳蜗药物性损伤过程,NAC可能对庆大霉素所致的耳蜗损伤具有保护作用。     

微泵耳蜗灌注碱性成纤维生长因子对庆大霉素致聋豚鼠的作用

目的 :应用微量渗透泵 (MOP)向豚鼠耳蜗灌注碱性成纤维生长因子 (bFGF) ,观察其对庆大霉素中毒所致耳聋的保护作用。方法 :10只豚鼠分成庆大霉素致耳聋组及正常组 ,于 2组豚鼠右耳耳蜗植入MOP灌注bFGF ,分别于灌注前 ,灌注后 1周、2周测ABR阈值 ,扫描电镜观察耳蜗组织形态。结果 :耳聋组在灌注bFGF后 1周、2周ABR阈值较灌注前降低 (P <0 .0 5 ) ,耳蜗毛细胞形态得以恢复 ;正常组ABR阈值及形态均无明显改变。结论 :MOP持续恒速耳蜗灌注bFGF对耳蜗中毒的毛细胞有修复作用 ,对正常耳蜗功能和形态无影响     

脑活素对豚鼠庆大霉素耳毒性保护作用的研究

目的：旨在观察脑活性能否拮抗庆大霉素素蜗毒性。方法：取听力正常豚鼠50只，随机分为脑活素组10只[肌注脑活素360mg/(kg.d),10ds]；大庆霉素组15只[肌注庆大霉素120mg/(kg.d)10d]；庆大霉素＋脑活素组15只（肌注等量庆大霉素＋脑活素10d)；生理盐水组10只（肌注等量生理盐水10d)。用药前及用药10d并饲养一周测试听性脑干反应（ABR），第17d处死，行左耳耳蜗铺片、右耳石蜡包埋切片，并在光镜下观察内耳病理形态变化，对损失毛细胞进行计数。结果：庆大霉素＋脑活素组ABR阈值明显低于庆大霉素组，耳蜗各回毛细胞平均失率明显低于庆大霉素组。结论：脑活素对庆大霉素所致毒性有明显保护作用。     

血清一氧化氮变化对豚鼠庆大霉素耳毒性作用影响的实验研究

目的:探讨豚鼠血清一氧化氮变化在药物性耳聋过程中的作用机制. 方法:24只健康豚鼠随机均分为正常组、庆大霉素组、庆大霉素加L.精氨酸(全程)组和庆大霉素加L一精氨酸(半程)组.观察各种豚鼠血清中一氧化氮、听觉脑干反应、内耳外毛细胞的形态学变化. 结果:庆大霉素组血清中一氧化氮与正常组差异无统计学意义(P＞0.05);L-精氨酸全程组和半程组治疗后血清中一氧化氮高于正常组和庆大霉素组(P＜0.05～P＜0.01).L一精氨酸组ABR反应阈较庆大霉素组降低(P＜0.05).L-精氨酸组内耳外毛细胞仅有散在损失. 结论:一氧化氮一定量升高对内耳毛细胞有细胞毒性作用,进一步升高则对外毛细胞有保护作用.L-精氨酸治疗能降低ABR阈值,减少外毛细胞损害,对耳蜗有保护作用.     

木樨草素对宫颈癌Hela细胞增殖抑制作用的实验研究

目的 探讨木樨草素对宫颈癌Hela细胞增殖的影响.方法 将宫颈癌细胞株传代培养至对数生长期,分组加入不同浓度的木樨草素,并设空白对照组.用MTT比色法观察木樨草素对体外培养的宫颈癌细胞生长的抑制作用,在光学显微镜下观察细胞形态学变化.结果 MTT比色法测定显示,木樨草素作用于宫颈癌Hela细胞后可以抑制其增殖且呈剂量依赖性.结论 木樨草素能抑制体外培养的宫颈癌Hela细胞的增殖.     

热休克蛋白70的诱导表达对豚鼠耳蜗听功能的影响

目的探讨热休克蛋白(heat shock protein,HSP)70的诱导表达对豚鼠耳蜗听功能的影响。方法将经白噪声预刺激(100 dB SPL,45 min)诱导耳蜗产生HSP70的豚鼠与无预刺激的正常豚鼠同时暴露于强噪声(125 dB SPL,90 min)中,观察强噪声刺激后不同时间的听性脑干反应(ABR)阈值。结果100 dB SPL的白噪声能诱导耳蜗HSP70的表达。强刺激后12 h,两组间ABR阈值无显著差异(P>0.05);强刺激后60 和108 h,预刺激组的ABR阈值均低于无预刺激组(P<0.01)。在预刺激组内,108 h ABR阈值低于60 h ABR阈值(P<0.05),而在无预刺激组内,108和60 h ABR阈值无显著差异(P>0.05)。结论经预刺激诱导耳蜗产生的HSP70对豚鼠耳蜗听功能具有保护作用。     

地塞米松对内毒素介导的豚鼠耳蜗损伤的改善作用

目的:探讨地塞米松对内毒素(LPS)诱导的中耳炎所致豚鼠耳蜗组织损伤的改善作用.方法:选用耳廓反射灵敏的豚鼠45只,随机分为3组:正常对照组(15只),内毒素组(15只):双侧听泡各灌注50μl LPS(1g/L);地塞米松治疗组(15只):双侧听泡各灌注50μl LPS后,再灌注地塞米松50μl(1g/L).所有动物测试听性脑干反应(ABR)测听,并测定耳蜗组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力和耳蜗组织中一氧化氮(NO)含量,同时观察耳蜗组织形态学变化.结果:内毒素组ABR Ⅰ波潜伏期、Ⅱ波潜伏期及阈值较其余2组有增大趋势,且其Ⅲ波潜伏期较其余2组延长(P＜0.05);内毒素组耳蜗组织中SOD活力较其余2组降低(P＜0.05),NO含量较其余2组升高(P＜0.05);内毒素组耳蜗底转内、外毛细胞纤毛出现明显的倒伏、脱落、排列紊乱,外毛细胞纤毛损伤从内排到外排逐渐加重,并可见内、外毛细胞纤毛缺失.地塞米松治疗组耳蜗损伤及生化检查结果均较内毒素组轻.结论:地塞米松对内毒素诱导的中耳炎所致耳蜗组织结构和功能损伤具有较好的改善作用.     

高丽红参对庆大霉素引起的耳毒性的保护作用及其机制

[目的]探讨高丽红参对庆大霉素引起的耳毒性的保护作用及其机制.[方法]取8周龄SD雄性大鼠分为对照组和实验组,对照组大鼠左耳鼓膜内注射给予庆大霉素(剂量20μL,质量浓度为0.5 mg/L,每2 d给药1次,共7次),实验组大鼠在注射给予庆大霉素7 d前开始灌胃给予高丽红参粉溶液(剂量为2 mL,质量浓度为500 mg/kg,每日给药),7 d后开始注射给予庆大霉素,方法与剂量与对照组相同.注射给予庆大霉素前和实验第1,8,15,22,30 d时分别行耳前庭功能和听力功能检查.第30 d检查结束后取大鼠耳蜗前庭器行固定,用扫描电子显微镜和激光共聚焦显微镜观察耳蜗毛细胞、球囊斑和椭圆囊斑毛细胞的形态学变化并进行分析.[结果]实验组实验各时间点时的听力下降幅度均低于对照组,但两组间差异均无统计学意义(P>0.05).前庭功能检查及头偏实验结果显示,对照组注射给予庆大霉素1 d后4只大鼠出现严重头偏(>40℃),3只出现中度头偏(10℃～40℃),而实验组均未出现(P<0.01);提尾实验结果显示,对照组注射给予庆大霉素后4只大鼠出现不能控制的头旋转,而实验组大鼠均未出现(P<0.05);游泳实验结果显示,对照组5只及实验组1只大鼠出现游泳时间延长,两组间差异无统计学意义(P>0.05).扫描电子显微镜和激光共聚焦显微镜检查结果显示,对照组与实验组耳蜗毛细胞和球囊斑/椭圆囊斑毛细胞计数间差异均有有统计学意义(P<0.01).[结论]高丽红参对庆大霉素引起的耳前庭功能损伤具有保护作用,其机制认为可能与保护毛细胞免受损伤和促进毛细胞增殖有关系.     

前庭诱发电位监测庆大霉素前庭毒性

目的 利用听学脑干诱发电位（ＡＢＲ）和前庭诱发电位（ＶｓＥＰｓ）监测庆大霉素耳毒性。方法 将４０只杂色豚鼠随机分成４组,每组１０只。４组动物分别为肌肉注射庆大霉素组、肌肉注射生理盐水对照组、连续鼓室内滴注庆大霉素组和鼓室内滴注生理盐水对照组。用药前后连续监测ＡＢＲ及ＶｓＥＰｓ,待其有明显变化时,将动物全麻处死取听泡,火棉胶包埋切片,光镜观察病理变化。结果 肌注组１０只动物在２１ｄ时,ＶｓＥＰｓ消失     

D-甲硫氨酸对庆大霉素耳毒性保护作用的研究

目的：探讨D－甲硫氨酸对庆大霉素耳毒性的保护作用。方法：30只豚鼠分为生理盐水对照组、庆大霉素组及D－甲硫氨酸加庆大霉素联合用药组。采用听觉脑干诱发电位（ABR）及耳蜗铺片技术，观察研究耳毒性及D－甲硫氨酸的保护作用。结果：联合用药组动物各频率阈移均比单独使用庆大霉素组显著降低,且耳蜗组织学检查显示其毛细胞缺失明显轻于庆大霉素组。结论：使用庆大霉素的同时联合应用D－甲硫氨酸可有效减少庆大霉素的耳毒性。     

腺伴随病毒携带神经营养因子-3对庆大霉素致聋豚鼠耳蜗的保护作用

目的 探讨采用腺伴随病毒(AAV)携带神经营养因子-3(NT-3)对庆大霉素(GM)致聋豚鼠的局部基因治疗及其对耳蜗功能及形态的保护作用.方法 选用18只杂色健康豚鼠,用GM按80 mg/kg·d连续肌肉注射4 d后随机分为3组:AAV-NT-3治疗组(A组)7只,AAV对照组(B组)7只,GM对照组(C组)4只.A、B组动物在埋植微量渗透泵后继续肌肉注射GM 10 d,C组动物继续注射GM 10 d.AAV-NT-3及空白AAV载体滴度均为1.1×1010pfu/ml.对A、B两组注射GM前及术后10 d、C组注射GM后14 d进行听性脑干反应测听(ABR)及畸变产物耳声发射(DPOAE)测定.而后将动物麻醉处死取听泡,行基底膜铺片和毛细胞计数,计算外毛细胞损失率.结果 实验组与对照组相比听功能(ABR及DPOAE)及耳蜗毛细胞生存率均有显著性差异(P＜0.05).结论 腺伴随病毒介导NT-3转基因治疗可用于保护受氨基甙类药物损害的豚鼠听功能和耳蜗毛细胞;在行局部耳蜗转基因治疗中应严格遵循无菌原则.     

Attenuation of cisplatin induced ototoxicity by sound preonditioning through NO pathway

Objective：To explore the protective effect of sound preconditioning against ototoxicity induced by cisplatin and its possible mechanism with respect to the nitric oxide （NO） pathway. Methods： Albino guinea pigs were divided into silent control, CDDP,sound preconditioning and sound preconditioning＋CDDP groups. The animals of the CDDP group were injected with cisplatin intravenously 8 mg/kg b.w. The animals in the sound preconditioning were exposed to white noise at 85dB SPL, 5h/d, for 10 d （sound preconditioning）. The animals in the sound preconditioning＋CDDP group were treated with sound preconditioning first and then administrated with cisplatin intravenously 8 mg/kg b.w. Hearing thresholds of auditory brainstem responses （ABRs） of all animals were measured to evaluate hearing function. Hair cell loss was estimated via surface preparation. Cochlear tissue was assayed for measurement of NO level and immunohistochemistry method was used for inducible nitric oxide synthase （iNOS） analysis. Results： There was no significant difference between the silent control and sound preconditioning animals with respect to either functional or histological measures. Among the animals in the CDDP group, there was a significant elevation of threshold at the high test frequencies after administration compared with the silent control group （P〈0. 05）. Morphological examination showed that there was obvious loss of the OHC, especially in the third row of the basal turn. The NO level and immunoreactivity to iNOS in this group were higher and more intensive than those of the silent control group （P〈0. 05）. The ABR thresholds in the sound preconditioning ＋ CDDP group were much lower than those of the CDDP group （P〈0.05）. Slight sporadic loss of OHC was found in this group. The immunoreactivity to iNOS and the level of NO in cochlea decreased significantly compared with the CDDP group （P〈 0. 05）. Conclusion： It is suggested that sound preconditioning, to some extent, provides protective effect against ototoxicity of cisplatin. The excess synthesis of NO induced by the over-expressed of iNOS may be involved in the CDDP induced ototoxicity. The possible mechanism is related to suppression of the NO pathway.     

阿米卡星对豚鼠耳蜗毛细胞的损伤作用

目的研究阿米卡星（amikacin,AMK）在不同给药时间内对豚鼠耳蜗毛细胞的损伤作用,探讨AMK的耳毒性。方法豚鼠随机分为对照组、AMK3d组、AMK7d组和AMK11d组。采用异硫氰酸四甲基罗丹明标记的鬼笔环肽荧光染色方法,并结合听脑干反应（auditory brainstem response,ABR）测试,观察用药前后耳蜗毛细胞形态及听功能的改变。结果AMK首先损伤耳蜗底回的外毛细胞,并且随着给药时间延长,损伤逐渐向顶回发展,外毛细胞缺失明显增多,而AMK对内毛细胞的损伤要轻于外毛细胞。听功能改变与形态学变化基本一致。结论AMK可损伤豚鼠耳蜗毛细胞,导致听功能下降。     

针刺防治GE对豚鼠内耳损害的实验研究

目的 观察针刺对庆大霉素（ＧＥ）耳中毒豚鼠的防治作用。方法 用脑干听觉诱发电位（ＢＡＥＰ）和组织化学方法,检测动物耳聋程度及听神经功能的变化和耳蜗毛细胞酶活性的改变。结果 电针能降低ＧＥ引起的ＢＡＥＰ反应阈的上升幅度,降低ＢＡＥＰ波峰潜伏期及波间期的延长;能保护毛细胞线粒体呼吸酶的活性,维持毛细胞溶酶体的完整性。结论 针刺能降低ＧＥ的耳毒性。保护毛细胞线粒体酶的活性,维持溶酶体的完整性,保证毛细胞     

硫代乙酰胺致大鼠肝性脑病模型的量-效关系

目的 :探讨不同剂量硫代乙酰胺 (TAA)致大鼠肝性脑病 /轻微型肝性脑病 (HE/MHE)的量 -效关系。方法 :设立 3个TAA剂量组 ,分别以 2 0 0、2 5 0、35 0mg/(kg·d)剂量的TAA隔日行腹腔内注射 ,共 2次 ,建立不同剂量TAA致大鼠肝性脑病的动物模型 ,1d后进行检测脑干听觉诱发电位 (BAEP)和门静脉血浆内毒素 ,血氨 ,肝功能 ,肝脏病理等指标。结果 :不同剂量TAA组的大鼠在HE/MHE发生率 ,肝性脑病分级评分 ,内毒素 ,血氨 ,肝功能和肝脏病理变化等方面均差异显著 (P <0 .0 5 ) ,TAA剂量越大 ,内毒素和血氨水平越高 ,肝功能损害和肝脏病理变化越明显 ,HE/MHE发生率和肝性脑病分级评分越高 ,存在明显的量 -效关系。结论 :TAA致大鼠肝性脑病模型具有显著的量效关系 ,其中 2 0 0mg/(kg·d)剂量TAA为制备MHE模型的适宜剂量。     

丹参注射液对庆大霉素耳中毒豚鼠耳蜗NOS活性的影响

目的探讨丹参注射液（SalviaMiltiorrhiza,SM）对庆大霉素（gentamicin,GM）耳毒性损伤的保护作用。方法制备豚鼠药物中毒性耳聋模型，应用NADPH-黄递酶（NADPH-diaphorase,NADPH-d）组织化学染色及图像分析技术，并结合听性脑干反应（auditorybrainstemresponse,ABR）测试，观察SM对GM耳中毒豚鼠耳蜗一氧化氮合酶（nitricoxidesynthase,NOS）活性的影响及其与听阈的关系。结果SM+GM组耳蜗NOS活性和ABR阈值均明显低于GM组（P<0.01）；且ABR阈值与NOS活性变化高度相关（r     

庆大霉素给药间隔与豚鼠耳、肾毒性的关系

目的 :研究庆大霉素 (Gen)单剂量和多剂量给药与耳、肾毒性作用之间的相关性。 方法 :32只豚鼠随机分成生理盐水对照 (C)组、单剂量 (S)组 (Gen,12 0 m g/ kg,1次 / d)、多剂量 (M)组 (Gen,6 0 m g/ kg,2次 / d)。应用 SC-声刺激器、听觉脑干诱发电位 (ABR)检测及对耳蜗、近端肾小管上皮细胞的线粒体、肾小球基底膜等电镜观察 ,研究豚鼠电生理和组织学改变。应用荧光偏振免疫法检测不同时间血液中及实验后期外淋巴液中的药物浓度。结果 :生理测定 (如耳廓反射、ABR)、病理切片和电镜扫描观察表明 :(1)与 C组相比 ,S组和 M组均造成一定程度的耳、肾损伤 ,M组的毒性明显大于 S组 (P<0 .0 5 ) ,但随着用药天数的增加 ,S组动物的毒性逐日增强。 (2 ) S组与 M组动物 10 h后血清 Gen浓度分别为 3.0 4和 3.5μg/ m l,而同一时间测得的外淋巴液中浓度分别高达 2 6 .42和 2 6 .3μg/ ml。 结论 :Gen用药初期每天多剂量给药的毒性明显大于每天单剂量给药