人巨细胞病毒检测在临床中的应用

本文利用ＰＣＲ法对１３１例骨髓移植供受体进行了人巨细胞病毒的检测。其中，９８例供体阳性率为５７％，３３例移植前受者阳性率为７５．８％，移植后人巨细胞病毒感染呈上升趋势，结果表明在免疫低下或免疫抑制的患者中，人巨细胞病毒的检测对患者的早期诊断早期治疗都十分重要。     

巨细胞病毒感染实验室检查的临床意义

１ 引 言 巨细胞病毒感染是由人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）引起。当ＨＣＭＶ侵入人体后，不论是在宿主体内复制还是在体内潜伏，均称为巨细胸病毒（ＣＭＶ）感染。ＣＭＶ感染大多在幼年时期发生。据我国１项资料显示，１岁至３岁组幼儿ＣＭＶ感染率８３．２％，４岁至７岁组８３．７％，８岁至１４岁组为８７．３％，成人组高达９５％。国外资料显示：ＨＣＭＶ感染无季节性，受年龄、地理环境、文化背景、经济状况和生育状况的影响。发达国家中、上阶层ＣＭＶ感染率为４０％至 ６０％，下层为 ８０％以上，而发展中国家则达 ９５％以上。婴儿可…     

骨髓移植患者血及尿中巨细胞病毒感染核酸标志物的检测

目的　为骨髓移植患者寻找较好的诊断和治疗巨细胞病毒（ＣＭＶ） 感染的分子生物学依据。方法　用聚合酶链反应（ＰＣＲ） 方法测尿中ＣＭＶＤＮＡ,逆转录（ＲＴ）ＰＣＲ 法测血中ＣＭＶ即刻早期抗原（ＩＥ）ｍＲＮＡ。结果　在被测的２７ 例患者１０３ 份标本中,发现１０ 例ＣＭＶ 感染者的尿ＣＭＶＤＮＡ 及血ＩＥ ｍＲＮＡ 几乎同时阳转。在连续使用抗病毒药甘昔洛瓦（ＤＨＰＧ） 治疗的６ 例患者中,ＩＥ ｍＲＮＡ 约一周左右阴转,而ＤＮＡ 约２０ 天左右阴转。结论　ＣＭＶＩＥｍＲＮＡ 可能反映病毒即刻早期转录的停止,对临床抗病毒治疗可能是一个较好的参考指标。     

不同标本巨细胞病毒检测在诊断小儿人巨细胞病毒感染中的应用

目的：探讨尿液、淋巴细胞和母乳的 HCMV-DNA 检测以及血清 HCMV-IgM 检测在小儿人巨细胞病毒（HCMV）感染诊断中的意义。方法用实时荧光定量 PCR检测189例疑似HCMV感染患儿尿液、淋巴细胞和母乳的HCMV-DNA ,用化学发光法检测其血清HCMV-IgM ,并分年龄分性别对其阳性率进行分析比较。结果新生儿组母乳HCMV-DNA阳性检出率（60.3％）显著高于尿液（5.2％, P〈0.001）和淋巴细胞（12.1％,P〈0.001）,也显著高于血清 HCMV-IgM 阳性率（3.4％,P〈0.001）;婴儿组母乳（48.1％）与尿液（55.0％）HCMV-DNA 阳性率差异无统计学意义（P〉0.05）,但两者均显著高于淋巴细胞 HCMV-DNA 阳性率（22.1％, P〈0.001）和血清 HCMV-IgM 阳性率（24.4％, P〈0.001）;婴儿组的尿液 HCMV-DNA、血清 HCMV-IgM 阳性率均显著高于新生儿组（ P〈0.01）;两组各指标男女阳性率差异均无统计学意义（ P〉0.05）;母乳 HCMV-DNA 阳性率与尿液、淋巴细胞 HCMV-DNA 阳性率及血清 HCMV-IgM 阳性率均呈显著正相关（r ＝0.630,P ＝0.000;r ＝0.413,P ＝0.000;r ＝0.341,P ＝0.000）。结论联合尿液、淋巴细胞HCMV-DNA 和血清HCMV-IgM 检测有助于患儿HCMV 感染的辅助诊断;在无法联合检测的条件下,婴儿首选尿液 HCMV-DNA 检测可获得较高检出率;母乳 HCMV-DNA检测并正确喂养有助于预防HCMV感染。     

应用聚合酶链式反应诊断婴幼儿巨细胞病毒感染观察

人类巨细胞病毒(HCMV)为DNA病毒,是广泛感染人类的重要病原之一,尤其是胎儿、新生儿、器官移植者和免疫缺陷者感染HCMV可致严重疾患,甚至是死亡的直接原因。由于HCMV感染的诊断手段目前主要依赖血清特异性抗体的测定和病毒分离,而前者可有交叉反应的干扰,后者费时颇长,常需4周左右,致使临床医生对HCMV感染的诊断存     

幼婴严重巨细胞病毒感染2例报告

幼婴严重巨细胞病毒感染２例报告中山医科大学附属第一医院儿科（５１００８０）张红宇杜敏联病例报告例１女，３２天，足月顺产。因生后第１０天起进行性皮肤黄染，大便黄色于１９９５年２月入院。体检：贫血貌。先天愚型面容。皮肤重度黄染。肝肋下６ｃｍ，脾肋下１．５...     

巨细胞病毒感染与早期自然流产的关系

目的：探讨巨细胞病毒（cytomegalovirus,CMV)感染与早期自然流产的关系。方法：采用聚合酶链式反应（PCR）技术，对126例妇女早期自然流产的绒毛组织进行CMV－DNA检测，并以118例健康妇女人工流产的绒毛组织的检测作对照。结果：观察组CMV－DNA阳性率为11．1％，与对照组相比3．4％有显著性差异（P＜0．05）。结论：巨细胞病毒感染是导致早期自然流产的重要原因之一。     

荧光定量PCR检测婴幼儿巨细胞病毒感染情况分析

目的探讨荧光定量PCR(FQ-PCR)方法检测婴幼儿尿液人巨细胞病毒(HCMV)在HCMV感染诊断中的意义。方法采用FQ-PCR检测148例临床疑似HCMV感染婴幼儿尿液中HCMV-DNA水平。同时采用ELISA法检测婴幼儿血清HCMV-IgM抗体。在尿液HCMV-DNA检测阳性患儿中比较血清HCMV-IgM抗体阳性与阴性患儿尿液中HCMV-DNA拷贝数差异。结果 FQ-PCR检测尿液HCMV-DNA的阳性率为35.14%,ELISA检测婴儿血清HCMV-IgM的阳性率为15.54%。两种方法对HCMV感染诊断的阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。在尿液HCMV-DNA检测阳性患儿中,IgM抗体阳性组尿液HCMV-DNA拷贝数显著高于阴性组(P<0.01)。结论 FQ-PCR检测尿液HCMV-DNA是早期诊断婴幼儿HCMV感染的敏感有效的方法。     

邯郸地区黄疸婴儿人类巨细胞病毒感染的调查分析

目的 调查邯郸地区黄疸婴儿人类巨细胞病毒(HCMV)感染的情况,探讨HCMV-DNA感染率是否与性别相关.方法 采用荧光定量PCR方法对190例黄疸婴儿尿液标本进行HCMV-DNA定量检测.结果 在所检测的190例黄疸婴儿中,婴儿尿液HCMV-DNA阳性有96例,感染率为53.2％,其中男婴的阳性率为59.6％,女婴的阳性率为39.5％,阳性率在性别间分布差别有统计学意义(P＜0.05).结论 HCMV是邯郸地区引起婴儿黄疸的最主要原因之一,且HCMV感染率与性别相关.     

聚合酶链反应检测尿内人巨细胞病毒

２７例尿标本同时采用超速离心法，酚氯仿法抽提法、及原尿直接法，然后分别用于人类巨细胞病毒的聚合酶链反应检测。其阳性检出率分别为８５．１９％，５１．８５％和４８．１５％。经配比资料统计学分析表明，超速离心处理的阳性检出率显善高于抽提法和直接法。实验表明，原尿直接法的假阴性十分明显；而酚氯仿抽提处理亦无实际应用价值。唯有超速离心处理法可显著地提高尿巨细胞病毒的检测敏感性。     

小儿巨细胞病毒感染状况分析

目的探讨巨细胞病毒在小儿各年龄段以及在各种疾病中的感染情况。方法对650例来徐州市中心医院就诊疑似巨细胞病毒(HCMV)感染的患儿用聚合酶链反应(PCR)检测尿巨细胞病毒DNA,并有针对性地检测母乳巨细胞病毒DNA含量。结果目标人群中对巨细胞的感染情况:新生儿感染率13.2%,婴儿感染率4.9%,幼儿感染率3.1%,学龄前及学龄期儿童感染率0.9%。新生儿高胆红素血症中HCMV感染率40%,早产儿HC-MV感染率40%,支气管炎HCMV感染率17.2%,肺炎HCMV感染率17.6%,发热HCMV感染率11.3%,白血病HCMV感染率6.7%。新生儿感染者其母亲乳汁中的巨细胞阳性率为95%,婴幼儿感染者其母亲乳汁中的巨细胞感染率为92%。结论新生儿及婴幼儿较易感染巨细胞病毒,并且导致的疾病相对也较严重,特别是在新生儿高胆红素血症中巨细胞病毒的检出率较高,而且绝大多数的感染来自其母亲。     

套式PCR快速诊断新生儿巨细胞病毒感染

套式ＰＣＲ用于检测新生儿及随访ＣＩＤ患儿白细胞及尿中ＨＣＭＶＤＮＡ。两对引物序列取自ＨＣＭＶＩＥＡ基因区，第一对引物扩增７２１ｂｐ片段，第二对引物扩增１６７ｂｐ片段，后者穴居于前者之中，结果３３例可疑新生患儿检出ＣＭＶ感染２１例，７例随访患儿中４例尿或血中仍有ＣＭＶＤＮＡ存在。ＰＣＲ与病毒分离相比，既快速又敏感，尿标本用于ＰＣＲ检测ＣＭＶＤＮＡ较之血本具有检出率高，标本采取及处理均简便的优点。     

尿液上皮细胞中巨细胞病毒载量预测婴儿巨细胞病毒激活感染的价值

目的 探讨尿液上皮细胞(EC)中人巨细胞病毒(HCMV)DNA载量预测婴儿活动性HCMV感染的应用价值.方法 分别收集82例HCMV潜伏感染组和84例活动性感染组婴儿外周血和尿液标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCB)和化学发光免疫分析检测血浆HCMV DNA载量和HCMV IgM/IgG抗体;间接免疫荧光法检测外周血多形核白细胞(PMNLs)中HCMV pp65抗原;UF-100尿沉渣全自动分析仪和FQ-PCR分别做尿液EC计数和HCMV DNA载量检测,并计算尿液EC中HCMV DNA载量.同时,用受试者工作特征曲线(ROC)评价尿液上皮细胞中HCMV DNA载量在婴儿HCMV激活感染诊断中的敏感度和特异度.结果 166例HCMV感染婴儿尿液上皮细胞中HCMV DNA阳性检出率最高,为94.58%(157/166),病毒载量范围为5.67×102-1.31×107拷贝/103EC;不同时段尿液EC中HCMV DNA载量差异无统计学意义(F=0.19,P>0.05);活动性感染组尿液EC中HCMV DNA载量[5.13±0.99(拷贝/103EC,lg)]显著高于潜伏感染组[3.92±0.82(拷贝/103EC,lg),t=8.52,P<0.01];根据ROC曲线,当cut-off值为4.55时,尿液EC中HCMV DNA载量对活动性感染诊断的敏感度和特异度分别为71.4%和75.2%;活动性感染患儿更昔洛韦治疗后尿液EC中HCMV DNA载量显著低于治疗前(t=5.44,P<0.01).结论 尿液EC中HCMV DNA载量用于预测婴儿HCMV活动性感染是一种简便、有效的方法,并能用于治疗监测.     

聚合酶链反应检测尿内人巨细胞病毒

２７例尿标本同时采用超速离心法，酚氯仿法抽提法、及原尿直接法、然后分别用于人类巨细胞病毒的聚合酶链反应检测。其阳性检出率分别为８５．１９％，５１．８５％和４８．１５％。经配比资料统计学分析表明，超速离心处理的阳性检出率显著高于抽提法和直接法。实验表明，原尿直接法的假阴性十分明显；而酚氯仿抽提处理亦无实际应用价值。唯有超速离心处理法可显著地提高尿巨细胞病毒的检测敏感性。     

母乳及婴儿尿液人巨细胞病毒DNA检测在婴儿人巨细胞病毒感染中的应用

目的:定量检测疑似人巨细胞病毒(HCMV)感染婴儿尿液及对应母亲乳汁中HCMV DNA,评估两者在诊断HCMV感染中的价值,并比较两者浓度之间的关系。方法:选取51例疑似HCMV感染的婴儿,收集其新鲜尿液及对应的母亲乳汁,分别用荧光定量聚合酶链式反应法(FQ-PCR)检测HCMV DNA。结果:51例疑似HCMV感染婴儿尿液中,有49例检测出HCMV DNA,阳性率为96.0%(49/51)。51份婴儿母亲乳汁中,有37份检测出HCMV DNA阳性,阳性率为72.5%(37/51)。对37例尿液与乳汁HCMV DNA均为阳性的患儿,分别对尿液与乳汁HCMV DNA浓度取对数,将两者进行相关性分析,结果显示两者之间存在一定的相关性,相关系数为0.332(P<0.05)。结论:婴儿尿液中HCMV DNA检测对于婴儿HCMV的感染具有重要的价值,同时对其母乳HCMV DNA检测,可以发现婴儿尿液和母乳HCMV DNA具有一定的相关性。     

定量PCR法检测人巨细胞病毒感染的研究进展

人巨细胞病毒(HCMV)在人群中感染相当普遍,可引起免疫力低下者复发感染,造成严重的HCMV病。建立快速、灵敏且特异的检测方法,以便及时给予抗病毒治疗,可降低疾病的发生率及严重性。定量PCR具有灵敏、特异、快速、简便、可定量等优点,现已广泛应用于临床HCMV感染性疾病的检测中。该文就不同定量PCR法在检测HCMV感染中的应用及其优缺点作一综述。     

荧光定量聚合酶链反应在患儿巨细胞病毒感染快速检测中的应用

巨细胞病毒 (HCMV)感染分原发性感染、潜伏性感染和激活性感染。患儿HCMV感染多为原发性感染 ,尤其是新生儿HCMV感染主要通过母体在宫内感染引起母婴垂直传播或分娩时通过产道或哺乳期通过乳汁传播婴儿[1] 。HCMV一旦感染终生相伴 ,通常无症状 ,病毒潜伏在宿主细胞中 ,多种诱因可使潜伏的病毒被激活 ,而引发明显的临床症状。小儿先天性或获得性感染HCMV可引起婴儿肝炎综合征、生长发育受阻或中枢神经系统障碍、神经性耳聋等并发症 ,其后果非常严重。HCMV感染的诊断通常检测血清中HCMV IgG和IgM抗体 ,或采用核酸杂交和聚合酶链…     

尿液HCMV-DNA和血清HCMV-IgM检测对婴儿巨细胞病毒感染的诊断价值

目的：探讨尿液人巨细胞病毒‐DNA和血清人巨细胞病毒免疫球蛋白检测在婴儿巨细胞病毒感染中的诊断价值。方法对泉州儿童医院收治的856例巨细胞病毒感染疑似住院患儿,采用化学发光免疫法检测血清人巨细胞病毒免疫球蛋白,采用荧光定量聚合酶链反应法检测尿液中巨细胞病毒载量,并进行统计分析。结果尿人巨细胞病毒‐DNA 和血清人巨细胞病毒免疫球蛋白阳性检出率分别为30．72％和34．93％（ P＞0．05）;不同性别疑似感染率差异无统计学意义（P＞0．05）,不同年龄组人巨细胞病毒免疫球蛋白与人巨细胞病毒‐DNA检测差异有统计学意义（P＜0．01）;不同年龄组荧光定量聚合酶链反应检测差异有统计学意义（P＜0．01）,三个年龄组中＜28 d组阳性率最低,6个月‐1岁组最高。结论尿液人巨细胞病毒‐DNA和血清人巨细胞病毒免疫球蛋白联合检测,有助于人巨细胞病毒感染的诊断。     

荧光定量PCR法在检测246例小儿巨细胞病毒感染中的应用

目的探讨FQ-PCR在诊断小儿巨细胞病毒感染的临床应用价值。方法分别应用血清抗体检测和荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）的方法对患者进行血液和尿液病毒的检测，并对确诊的患者进行母乳CMV病毒的检测。结果在怀疑为活动性CMV感染的169例患儿中，PCR法的阳性检出率为75．1％，血清IgM法为52．1％，两种方法的阳性符合率为86．4％；18例尿液CMV-DNA阳性的患者查出母亲乳汁中CMV-DNA，含量为1．7×10～4．5×10^3copies／ml。结论FQ-PCR可以准确检测患儿体液及血液中的CMV含量，提示体内复制情况，对于临床的诊断和治疗有一定的指导意义。