芪玉三龙汤降低肺癌荷瘤小鼠程序性死亡蛋白1及配体(PD-1/PD-L1)的水平

目的研究芪玉三龙汤在Lewis肺癌小鼠体内的抑瘤效应及对共刺激分子程序性死亡蛋白1及配体(PD-1/PD-L1)表达的影响。方法采用Lewis肺癌细胞株培养移植法建立肺癌荷瘤小鼠模型,荷瘤成功后随机分为模型组、化疗组、中药高、中、低剂量组、联合组,每组8只;实验第11天开始中药低、中、高剂量组小鼠分别按(20.12、40.24、80.48)g/(kg·d)灌胃给药,化疗组按照0.4 m L顺铂腹腔注射给药,联合组以高剂量中药灌胃和顺铂腹腔注射联合给药,模型组按照等量生理盐水给药,1次/d,连续给药10 d;检测各组荷瘤小鼠肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线;称取瘤质量,计算抑瘤率;实时定量PCR和Western blot法分别检测荷瘤小鼠脾脏PD-1及肿瘤组织PD-L1的mRNA和蛋白水平。结果与模型组比较,中药高剂量组能够抑制肺癌移植瘤生长,抑瘤率为23.86%,联合组与化疗组抑瘤率相当;中药高剂量组能明显降低脾脏组织PD-1 mRNA及PD-1蛋白表达,抑制肿瘤组织PD-L1 mRNA及蛋白表达。联合组PD-1、PD-L1蛋白水平明显低于化疗组,但对其他指标的交互作用无统计学意义。结论芪玉三龙汤能通过降低PD-1/PD-L1水平温和抑制肺癌移植瘤生长。     

T-bet基因转染对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的： 观察气道内T-bet基因转染对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法: C57BL/6小鼠40只,随机分为4组,每组10只,分别为正常对照组（A组）、哮喘模型组（B组）、空质粒干预组(C组) 和T-bet质粒干预组(D组)。卵白蛋白(OVA) 抗原溶液腹腔注射致敏,滴鼻造模。正常对照组用生理盐水代替OVA,空质粒干预组和T-bet质粒干预组OVA激发48 h前,分别经鼻滴入50 μg空质粒和重组T-bet质粒。观察各组实验小鼠的肺组织炎症以及BALF中各类炎症细胞以及IL-4、IFN-γ水平的变化。 结果: Western blotting检测发现,小鼠气道转染pcDNA3-T-bet质粒48 h后肺组织T-bet蛋白表达显著增加。pcDNA3-T-bet质粒转染能较好抑制给药后48 h OVA激发的哮喘小鼠气道炎症（包括炎症细胞浸润,上皮细胞损伤、黏液分泌、血管壁水肿及管腔缩窄）;下调小鼠BALF中Th2因子IL-4并上调Th1因子IFN-γ水平。 结论: 气道内转染T-bet质粒能有效改善哮喘小鼠的气道炎症。     

芒见赛保总萜对H_(22)肝癌细胞移植瘤小鼠Th1/Th2漂移及Bax/Bcl-2表达的影响

目的探讨芒见赛保总萜对H_(22)肝癌细胞移植瘤小鼠Th1/Th2漂移及Bax/Bcl-2表达的影响。方法昆明种小鼠皮下接种H_(22)肝癌腹水建立荷瘤动物模型,观测小鼠的一般状况、体质量变化、抑瘤率及脏器指数,ELISA法检测血清及脾脏组织中Th1(IL-2、IFN-γ)及Th2(IL-4、IL-10)型细胞因子水平,免疫组化法检测肿瘤组织中Bax和Bcl-2蛋白表达水平,HE染色观察肿瘤组织及肝脏的病理变化。结果 100~400 mg/kg芒见赛保总萜可明显改善H_(22)肝癌移植瘤小鼠一般状况,抑制肿瘤生长,升高血清及脾脏IL-2水平,降低IFN-γ、IL-4、IL-10、IFN-γ/IL-4比值,改善Th1/Th2漂移状态,增强肿瘤组织中Bax表达,并抑制Bcl-2表达从而升高Bax/Bcl-2比值,缓解肿瘤及肝脏组织的病理学变化。结论芒见赛保总萜可明显抑制小鼠H_(22)肝癌的生长,改善小鼠血清及脾脏Th1/Th2漂移,提高肿瘤组织Bax/Bcl-2比值可能是其抗肿瘤的作用机制之一。     

痰热清注射液可增强Lewis肺癌化疗小鼠的免疫功能

目的研究痰热清注射液对Lewis肺癌化疗模型小鼠免疫功能的影响,探讨该药对肺癌小鼠的免疫调节作用。方法构建小鼠Lewis肺癌模型,分为模型对照组、单独痰热清治疗组、单独化疗组、联合痰热清化疗组,另设正常对照组。每组8只。取各组小鼠外周血后,引颈处死小鼠,取瘤组织、股骨、脾脏和胸腺用于后续实验。观察各组小鼠瘤组织质量、体积,流式细胞术检测各组瘤细胞凋亡水平及瘤组织CD3+T细胞、CD3-NK1.1+细胞浸润情况,HE染色观察胸腺组织结构,计算胸腺指数,并检测外周血淋巴细胞计数及股骨有核细胞总数、MTT法检测脾细胞毒性T细胞(CTL)杀伤活性。反转录PCR技术检测小鼠瘤组织表达γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA的水平。结果化疗后,联合痰热清化疗组小鼠胸腺指数、外周血淋巴细胞计数及股骨细胞总数均明显高于单独化疗组。化疗后,联合痰热清组小鼠瘤组织CD3+T细胞及CD3-NK1.1+细胞浸润程度均明显强于单独化疗组。化疗后,联合痰热清组小鼠瘤组织表达IFN-γ及TNF-αmRNA水平明显高于单独化疗组,脾CTL杀伤活性明显高于单独化疗组。结论痰热清注射液对肺癌化疗造成的机体的免疫功能损伤有明显保护作用,并对机体抗肿瘤免疫力有明显的促进作用。     

γ-促分泌酶抑制剂阻断Notch信号通路对毛细支气管炎模型大鼠气道炎症的影响

为研究γ-促分泌酶抑制剂阻断Notch信号对毛细支气管炎(简称毛支)模型大鼠气道炎症反应的影响,建立毛支大鼠模型并且尾静脉注射γ-促分泌酶抑制剂(MW167)。采用HE染色法观察肺组织病理改变,ELISA方法检测血浆中IL-4、INF-γ的水平,real-time PCR检测肺组织和外周血单个核细胞中IL-4mRNA、IFN-γmRNA的表达,Western blotting检测肺组织中NICD、GATA-3、T-bet的蛋白表达。结果显示,MW167注射组较RSV毛支组病理学改变有所减轻;MW167注射组血浆中IL-4水平较RSV组降低,IFN-γ水平增高;肺组织及外周血单个核细胞IL-4mRNA在MW167注射组表达减弱,IFN-γmRNA表达增强;Notch信号和GATA-3表达降低,T-bet表达增强。以上结果提示静脉注射γ-促分泌酶抑制剂能够抑制毛支模型大鼠的气道炎症,可能对毛支有潜在的治疗价值。     

山仙颗粒对Lewis肺癌荷瘤小鼠抗肿瘤免疫力及外周血中IFN-γ、TNF-β、IL-10的影响

目的:观察山仙颗粒对Lewis肺癌细胞增殖的影响及对Lewis肺癌荷瘤小鼠抗肿瘤免疫力及免疫微环境的影响,以探究山仙颗粒抑瘤及提高机体抗肿瘤免疫力的分子机制,为其临床应用提供深层次的理论依据。方法:腋下皮肤移植Lewis肺癌细胞建立小鼠荷瘤模型,分为空白组、模型组、化疗组和山仙颗粒组;通过对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织称重并计算抑瘤率,采用免疫组织化学法检测脾脏组织中淋巴细胞CD、CD8表达情况,采用CCK-8法检测淋巴细胞对Lewis肺癌细胞增殖的影响,采用ELISA法检测外周血中IFN-γ、TNF-β与IL-10的变化。结果:(1)山仙颗粒组对Lewis肺癌的抑瘤率为45.99%,显著高于化疗组(P0.05);(2)小鼠淋巴细胞可抑制Lewis肺癌细胞的增殖,并与淋巴细胞浓度和作用时间呈正相关;且脾脏组织中CD4~+T细胞、CD4~+/CD8~+比值及淋巴细胞对Lewis肺癌细胞的抑制率,模型组和化疗组显著低于空白组(P0.05),山仙颗粒组显著高于模型组和化疗组(P0.05),而山仙颗粒组与空白组比较无显著差异(P0.05);(3)模型组和化疗组小鼠外周血中的IFN-γ和TNF-β显著低于空白组(P0.05)、而IL-10显著高于空白组(P0.05),山仙颗粒组小鼠外周血中的IFN-γ、TNF-β显著高于模型组和化疗组(P0.05),而IL-10显著低于模型组与化疗组(P0.05);山仙颗粒组小鼠外周血中的IFN-γ、TNF-β、IL-10与空白组比较无明显差异(P0.05)。结论:山仙颗粒能明显抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织的生长,并具有提高小鼠脾脏指数、增强T淋巴细胞活性、使外周血中的IFN-γ、TNF-β上调而IL-10下调,提示山仙颗粒的抗肿瘤作用可能通过调节CD4~+T淋巴细胞含量、CD4~+/CD8~+、Th1/Th2比值,恢复肿瘤患者免疫功能稳态,提高机体免疫力、加强免疫监视功能有关。     

黄芪多糖联合顺铂对小鼠Lewis肺癌移植瘤Caspase-3、Smac/Diablo表达的影响

目的观察黄芪多糖(APS)及联合顺铂(DDP)对小鼠Lewis肺癌(LLC)移植瘤凋亡蛋白Caspase-3、Smac/Diablo表达的影响,探讨黄芪多糖抗肿瘤的机制。方法 90只C57BL/6 J小鼠,随机分为9组,正常组、模型组、APS低、中、高剂量组、DDP组、联合低、中、高剂量组,每组10只。除正常组外,其余80只均接种肺癌移植瘤细胞(1×1010/L)于右前肢腋窝皮下,制造模型为荷瘤小鼠。制造模型次日起,治疗组的小鼠给予腹腔注射0.3 ml药物。顺铂每周注射1次,其余药物每日1次,正常组和模型组注射等体积生理盐水,连续20 d,于第21天处死。肿瘤组织进行HE染色并行病理学观察;免疫组织化学染色和图像分析方法检测移植瘤细胞中的Caspase-3及Smac/Diablo的表达。结果荷瘤小鼠在APS(高)、联合(中)、联合(高)组的体质量变化,具有统计学意义。与模型组小鼠比较,肿瘤组织的病理组织学HE显示,APS(高)联合顺铂组的肿瘤细胞坏死最为明显;免疫组织化学法表明,治疗组的肿瘤组织中Caspase-3、Smac/Diablo蛋白表达水平均升高,联合(高)组升高最明显。结论 APS及联合化疗药物DDP能抑制小鼠Lewis肺癌细胞的生长,其机制可能与升高Caspase-3、Smac/Diablo的表达有关。     

益气活血解毒方对小鼠Lewis肺癌生长转移及血管生成的作用

目的：研究益气活血解毒方对小鼠Lewis肺癌生长及自发性肺转移的作用并探讨其作用机制。方法:复制小鼠Lewis肺癌模型并随机分组,腹腔注射给药 10 d 后，观察抑瘤率，HE染色观察瘤组织病理学变化，免疫组化法检测瘤组织增殖细胞核抗原（PCNA）的表达；给药 20 d 后，观察肺转移瘤结节数、瘤组织微血管密度（MVD），免疫组化法和ELISA法分别检测瘤组织及血清血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果:益气活血解毒方能减少小鼠Lewis肺癌肿瘤重量和肺转移灶数，高低剂量(24 mg·kg^-1·d^-1,12 mg·kg^-1·d^-1)抑瘤率分别为48.29%、37.26%，肺转移结节数分别为1.67、3.50，对照组为6.44；并能抑制肿瘤细胞PCNA的表达，降低肿瘤组织微血管密度,抑制肿瘤细胞及血清中VEGF的表达。结论:益气活血解毒方能抑制小鼠Lewis肺癌的生长与转移,其机制可能与抑制VEGF表达,减少肿瘤血管生成有关。     

淫羊藿苷抑制β-catenin 和NF-κB p65 的活性对小鼠胰腺癌皮下移植瘤生长和运动的调节

目的:研究淫羊藿苷调控小鼠胰腺癌皮下移植瘤生长和运动的机制。方法:建立BALB/c小鼠皮下胰腺癌移植瘤模型后,分别给予生理盐水(对照组)、10 mg/kg淫羊藿苷(低剂量组)、20 mg/kg淫羊藿苷(中剂量组)、40 mg/kg淫羊藿苷(高剂量组)、5 mg/kg阿霉素(阿霉素组)腹腔给药干预,干预25 d后取出瘤体,检测瘤体重量和体积,并根据小鼠存活情况绘制生存曲线;TUNEL染色观察瘤组织凋亡情况,免疫组化检测Ki67、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白阳性表达率;qRT-PCR检测瘤组织中生长和运动标记分子基因相对表达情况,Western blot检测Wnt/β-catenin和核因子κB(NF-κB) p65信号通路关键蛋白表达情况。结果:与对照组相比,中、高剂量淫羊藿苷及阿霉素干预后,移植瘤的重量、体积,瘤组织中Ki67、VEGF的阳性表达率,Ki67、VEGF、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的mRNA相对表达量,β-catenin蛋白表达量、NF-κB p65蛋白磷酸化水平均显著降低(P0.05),小鼠的25 d存活率、瘤组织细胞凋亡率以及Caspase-3的mRNA相对表达量均显著升高(P0.05)。结论:淫羊藿苷可能通过抑制β-catenin和NF-κB p65的活性下调增殖及运动相关基因表达,上调凋亡相关基因表达从而调节小鼠胰腺癌皮下移植瘤的生长和运动。     

WWOX基因调控Lewis肺癌细胞免疫抑制效应研究

目的：探讨WWOX基因调控Lewis肺癌细胞免疫抑制效应。方法：将已构建的真核表达载体pCDNA4.0/myc-WWOX转染到Lewis肺癌细胞中,采用MTT法检测转染前后肿瘤细胞培养上清对鼠脾细胞增殖的影响;半定量RT-PCR法检测肿瘤生长相关因子mRNA的表达。体内肿瘤局部注射pCDNA4.0/myc-WWOX质粒,计算抑瘤率并采用MTT法检测NK、CTL杀伤活性和淋巴细胞增殖能力。结果：WWOX基因转染细胞的培养上清对鼠脾细胞的增殖抑制作用与对照组比较显著下降（P〈0.05）;WWOX基因转染后TGF-β、VEGF、FasL三种肿瘤生长相关因子的mRNA表达降低;WWOX基因体内注射后能够抑制肿瘤生长,抑瘤率可达71%;NK、CTL的杀伤活性和淋巴细胞转化能力与对照组比较,具显著差异（P〈0.05）。结论：WWOX基因转染Lewis肺癌细胞具有抑瘤作用与免疫抑制效应,提示WWOX基因可能通过降低肿瘤生长相关因子的mR-NA表达、促进淋巴细胞增殖、提高NK和CTL的杀伤活性,实现其对Lewis肺癌细胞免疫抑制效应的调控。     

三氧化二砷对MRL/lpr狼疮鼠T-bet/GATA3信号通路的影响

目的:本文旨在探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)对MRL/lpr狼疮鼠T-bet/GATA3信号通路的影响及其作用机制。方法:将20周龄MRL/lpr狼疮鼠和正常C57BL/6J小鼠随机分组,分别接受ATO(0.4mg·kg~(-1)·d~(-1))和同体积生理盐水(NS)治疗2个月,分离脾脏淋巴细胞,然后用实时荧光定量PCR法检测T-bet、GATA3、IFN-γ、IL-4的mRNA水平及T-bet/GATA3 mRNA的比值,Western blot法检测T-bet和GATA3的蛋白表达,ELISA法检测血清中IFN-γ和IL-4的浓度。结果:(1)MRL/lpr狼疮鼠NS组T-bet、IFN-γ的mRNA及蛋白表达、Tbet/GATA3 mRNA比值均高于C57BL/6J小鼠NS组(P0.05),而GATA3、IL-4的mRNA及其蛋白表达均低于C57BL/6J小鼠NS组(P0.05);(2)在MRL/lpr狼疮鼠中,与NS组相比,ATO组T-bet、IFN-γ的mRNA及蛋白表达、T-bet/GATA3 mRNA比值均下降(P0.05),而2组中GATA3、IL-4的mRNA及蛋白表达无明显差异;(3)在C57BL/6J小鼠中,NS组和ATO组之间以上指标均无显著性差异。结论:ATO可能通过影响MRL/lpr狼疮鼠Tbet/GATA3信号通路,降低T-bet表达,从而减少Th1型细胞因子IFN-γ的表达和分泌。     

白三烯受体拮抗剂下调OX40L调控Th9细胞因子改善过敏性哮喘小鼠气道重塑和炎症

目的 探讨白三烯受体拮抗剂对过敏性哮喘小鼠气道重塑的改善作用及可能机制.方法 30只SPF级BALB/c小鼠随机分成对照组、模型组及孟鲁司特组,每组10只.HE染色观察肺组织形态学变化;Masson染色观察肺组织气道纤维化;ELISA检测支气管肺泡灌洗液IL-4、IFN-γ、IL-9和OVA特异IgE含量;Western blot检测肺组织OX40L蛋白表达;Western blot和qRT-PCR检测肺组织TRAF6、IL-9和IL-9R蛋白及mRNA表达.结果 与对照组相比,模型组小鼠肺组织形态学病理变化明显,纤维化增加,支气管肺泡灌洗液IL-4、IL-9和OVA特异IgE含量增加,IFN-γ含量降低,OX40L、TRAF6、IL-9和IL-9R表达水平升高.孟鲁司特改善肺组织形态,降低肺组织气道纤维化,降低支气管肺泡灌洗液IL-4、IL-9和OVA特异IgE含量,增加IFN-γ含量,降低OX40L、TRAF6、IL-9和IL-9R表达水平.结论 白三烯受体拮抗剂改善过敏性哮喘小鼠气道重塑和炎症,其作用机制可能与调节OX40L和Th9细胞相关因子表达有关.     

健脾除痰解毒方通过PD-1/PD-L1通路平衡Th1/Th2漂移而增强Lewis肺癌小鼠免疫功能

目的：探讨健脾除痰解毒方（JCJF）增强Lewis肺癌小鼠免疫功能是否与其通过程序性死亡受体1(PD-1)/程序性死亡受体配体1(PD-L1)通路平衡Th1/Th2细胞相关。方法：取C57BL/6J小鼠60只并建立Lewis肺癌模型，按随机数字表法分为模型（model）组，顺铂（DDP）组，低、中、高剂量JCJF(L-JCJF、M-JCJF和H-JCJF)组，以及H-JCJF+DDP组，每组10只；另取10只健康C57BL/6J小鼠作为空白组。各组小鼠均给予相应处理，连续治疗14d。处死小鼠后取小鼠瘤体和脾脏，计算抑瘤率和脾脏指数；HE染色观察小鼠肿瘤组织和肺组织的形态学变化；TUNEL法检测小鼠肿瘤细胞凋亡；免疫组化染色检测肿瘤组织PD-L1蛋白表达；ELISA法检测小鼠血清干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)、IL-10和IL-13含量；RT-qPCR检测肿瘤组织PD-1、PD-L1、Bax和Bcl-2的mRNA表达；Western blot检测肿瘤组织PD-1、PD-L1、Bax、Bcl-2、IL-10和IL-13蛋白表达。结果：与model组相比，H-JCJF+DD...     

心房钠尿肽下调呼吸道合胞病毒毛细支气管炎小鼠肺组织T-bet水平

目的研究T-bet在呼吸道合胞病毒毛细支气管炎小鼠肺组织中的表达及心房钠尿肽刺激下T-bet的变化。方法建立毛细支气管炎小鼠模型,观察心房钠尿肽的变化;同时利用肺组织病理学、ELISA法和实时定量PCR法检测心房钠尿肽干预后气道炎症浸润、T-bet mRNA及蛋白的表达和IFN-γ等的变化。结果与正常对照组相比,呼吸道合胞病毒组小鼠肺组织中心房钠尿肽水平明显升高;而经鼻吸入心房钠尿肽可使气道炎症细胞浸润加剧,T-bet及IFN-γ表达水平均降低;而利用心房钠尿肽拮剂预处理后,心房钠尿肽的上述效应可被明显逆转。结论心房钠尿肽在毛细支气管炎肺组织中存在一定量的表达,同时可下调T-bet水平。     

Survivin-siRNA真核重组质粒对前列腺癌移植瘤的抑制作用

 目的：探讨survivin-siRNA真核重组质粒对前列腺癌移植瘤的抑瘤效应,并分析相关机制。方法：体外培养前列腺癌DU145细胞,将细胞注射到裸鼠背部皮下,待移植瘤直径达到8 mm时将瘤无菌取出,分成直径约2 mm的瘤块,手术植入另外的裸鼠皮下,将survivin-siRNA质粒或scrambled siRNA对照质粒电转染进行治疗,描记移植瘤生长曲线,并计算抑制率;通过HE染色、免疫组化染色及TUNEL染色观察survivin-siRNA对移植瘤影响。结果：成功构建裸鼠前列腺癌移植瘤模型。与mock和scrambled siRNA组相比,survivin-siRNA抑瘤率分别为两对照组的61.81%和62.87%;免疫组织化学染色发现：survivin-siRNA质粒明显抑制细胞内survivin表达;TUNEL染色证实治疗组肿瘤细胞凋亡明显增加。结论：重组质粒survivin-siRNA明显抑制DU145细胞移植瘤的生长,抑制内源性 survivin 蛋白的表达并促进细胞凋亡,针对survivin靶点的基因治疗前景广阔。     

大蒜新素治疗小鼠巨细胞病毒性心肌炎作用研究

目的探讨大蒜新素对小鼠巨细胞病毒(MCMV)性心肌炎治疗作用及其抗CMV机制. 方法 60只BALB/c小鼠随机分成大蒜新素治疗组(20只)、安慰剂组(20只)和正常对照组(20只).大蒜新素治疗组接种MCMV K181后24 h开始用大蒜新素一般剂量(25 mg/kg)腹腔注射,每天1次,共14 d;安慰剂组和正常对照组仅用等量生理盐水.各组分别于治疗后第3、5、7、14天各处死5只小鼠,观察小鼠心肌组织病理损害;用双抗体夹心ELISA法检测小鼠心肌组织细胞因子IFN-γ表达水平;用RT-PCR方法检测小鼠脾核转录因子T-bet mRNA表达强度. 结果 MCMV感染下调小鼠T-bet mRNA和TH1类细胞因子IFN-γ的表达(P＜0.01);大蒜新素能诱导MCMV性心肌炎模型小鼠转录因子T-bet mRNA和细胞因子IFN-γ的表达显著增加(P＜0.01),并显著改善MCMV感染小鼠心肌组织病理损害(P＜0.05). 结论大蒜新素通过上调转录因子T-bet mRNA表达进而促进TH1类细胞因子IFN-γ分泌,诱导和促进TH1优势应答反应,增强机体特异性细胞免疫功能而发挥抗MCMV作用.     

BALB/c小鼠哮喘进展过程中T-bet和GATA3的表达变化

目的:初步探讨转录因子T-bet和GATA3在小鼠哮喘模型哮喘进展过程中的改变及其意义.方法:18只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组和药物组(地塞米松组),每组各6只.采用Western blot法检测各组小鼠肺组织T-bet和GATA3的表达,同时运用流式细胞仪检测小鼠脾细胞胞内细胞因子白介素4(IL-4)和干扰素γ(IFN-γ)的表达.结果:哮喘组与正常对照组相比,药物组与哮喘组相比,肺组织T-bet和GATA3均有明显改变(P＜0.01).哮喘组T-bet明显减低,而GATA3明显升高;地塞米松治疗后,T-bet和GATA3均明显减低,后者减低更为明显.流式细胞仪分析显示:哮喘组CD4 T细胞细胞内IL-4/IFN-γ的比值显著高于对照组(P＜0.01);经地塞米松处理后的哮喘小鼠CD4 T细胞细胞内IL-4/IFN-γ的比值显著降低(P＜0.01).结论:转录因子T-bet和GATA3与哮喘进展密切相关,调控它们的表达,可以改变IL-4/IFN-γ比值,纠正哮喘的Th2漂移,可能成为哮喘治疗的新靶点.     

人源食管鳞状细胞癌移植瘤模型的建立及其增殖信号通路特征

目的:构建人食管鳞状细胞癌组织来源的移植瘤模型,并了解其病理学特征和增殖相关的信号通路活化情况。方法:将人食管癌组织移植于重度联合免疫缺陷(SCID)小鼠皮下,待移植瘤长成后对其进行鼠间连续传代。观察第1、第2、第3代移植瘤的生长特性。并对患者肿瘤组织、第1代和第3代移植瘤进行HE染色和CK5/6、p63、p40免疫组织化学染色分析。Western blot实验检测4例所建立的移植瘤中m TOR、p-m TOR、p70S6K、pp70S6K、Akt1、p-Akt(Ser473)、Erk1/2和p-Erk1/2的表达情况。结果:成功建立移植瘤模型,移植瘤生长稳定并能连续传代。各移植瘤组织病理组织类型和CK5/6、p63、p40表达阳性与患者肿瘤组织一致。而在不同病人来源的移植瘤组织中信号转导通路蛋白的活化程度差异有统计学意义。结论:成功建立了人食管鳞状细胞癌组织来源的食管癌移植瘤模型,初步论证该模型能够反映患者的病理特征。     

连翘苷对Lewis肺癌VEGF和内皮抑素表达的影响

 目的: 探讨连翘苷对Lewis肺癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成抑制因子内皮抑制素(endostatin)蛋白表达的影响。方法: 免疫组化染色检测临床收集的正常肺部组织、癌旁组织和肺癌组织样本中VEGF和endostatin的蛋白表达。设空白对照组10只,同时于40只小鼠右肢腋窝皮下接种Lewis瘤细胞,随机分为模型组、连翘苷低剂量组、连翘苷中剂量组和连翘苷高剂量组,每组10只。模型组每天1次灌胃等体积无菌水;连翘苷低、中剂量组每天灌胃5、10 g/kg连翘苷1次;高剂量组每天灌胃10 g/kg连翘苷2次。给药20 d后取肺部组织进行HE染色和免疫组化染色检测肿瘤组织形态学与肺部组织中VEGF和endostatin的蛋白表达。 结果: 临床样本中,与正常组织和癌旁组织相比,肺癌组织中的VEGF呈高表达,endostatin呈低表达。连翘苷随剂量增加可显著减少Lewis肺癌小鼠肿瘤体积和瘤组织密度;给予不同剂量连翘苷后,VEGF在肺癌组织中表达显著低于模型对照组,而endostatin表达则明显高于模型对照组。结论: 连翘苷通过下调VEGF的表达、上调endostatin的表达而发挥抑制肺部肿瘤发展的作用。     

携带pGRIM-19-si-survivin共表达质粒的减毒沙门菌对前列腺癌移植瘤的体内抑制作用

目的:探讨人减毒沙门菌携带pGRIM-19-si-survivin共表达质粒对人前列腺癌皮下移植瘤生长的抑制作用及相关机制。方法:复制裸鼠前列腺癌皮下移植瘤模型,通过腹腔注射携带共表达质粒的减毒沙门菌进行治疗,实时监测肿瘤体积;运用免疫组织化学染色法、RT-PCR法和TUNEL法检测携带pGRIM-19-si-survivin共表达质粒的减毒沙门菌对肿瘤抑制作用的相关机制。结果:与psi-survivin或pGRIM-19单基因治疗对照组比较,携带pGRIM-19-si-survivin共表达质粒减毒沙门菌组肿瘤体积明显缩小,其缩小率分别约为2.36和3.02倍;肿瘤组织内survivin mRNA及蛋白表达明显下降(P0.05),GRIM-19 mRNA及蛋白表达明显增高(P0.05),凋亡相关蛋白Bcl-xL、Stat3、cyclin D1和c-Myc的mRNA表达明显降低(P0.05),血管内皮生长因子(VEGF)mRNA及Ki67蛋白表达降低而caspase-3 mRNA表达明显上调(P0.05),同时细胞凋亡明显。结论:携带pGRIM-19-si-survivin共表达质粒的减毒沙门菌明显抑制裸鼠前列腺癌皮下移植瘤的生长,其发生机制与促进细胞凋亡及抑制肿瘤细胞增殖有关。