蛋白非酶糖化抑制剂的中药研究进展

要本文介绍几种治疗糖尿病慢性并发症的中药蛋白非酶糖基化抑制剂．简述了它们的作用机制、应用和开发前号。     

非酶糖化在糖尿病血管病变中的作用

观察糖尿病大鼠主动脉胶原非酶糖基化产物、胶原可溶性及肾脏形态学的变化，病鼠主动脉胶原Amadori产物、AGEs含量均明显增高，酸溶性及胃蛋白酶溶解性下降，不溶性胶原含量增多；病鼠肾小球体积明显增大，系膜区扩大，肾小球基底膜增厚。表明病鼠可能发生了类似早衰的改变，其组织蛋白非酶糖化增加，交联增多，可溶性下降，从而可能促进了糖尿病慢性并发症的发生和发展。     

氨基胍、牛蒡对糖尿病大鼠肾脏组织非酶糖化和细胞凋亡的影响

目的 探讨非酶糖化与糖尿病肾病(DN)的关系,以及非酶糖化抑制剂氨基胍和具有非酶糖化抑制作用的牛蒡干预治疗对DN的治疗作用.方法 雄性Wistar大鼠40只,随机分为4组,正常对照组、糖尿病组、糖尿病氨基胍(100mg·kg-1·d-1)治疗组(氨基胍组)、糖尿病牛蒡(150mg·kg-1·d-1)治疗组(牛蒡组),除正常对照组外,其他3组腹腔注射链脲佐菌素诱发糖尿病.16周后,处死大鼠,分离肾脏,测定组织非酶糖化,取部分肾脏皮质电镜观察细胞凋亡的形态学变化.结果 治疗16周结束时,糖尿病各组大鼠体质量低于正常对照组(P<0.01),糖尿病各组间体质量比较差异无统计学意义(P>0.05);血糖水平均高于正常对照组(P＜0.01);氨基胍组和牛蒡组血糖与治疗前比较,差异无统计学意义(P>0.05);糖尿病组大鼠肾组织肾皮质糖化终产物(AGEs)含量高于正常对照组(P<0.01),氨基胍组和牛蒡组AGEs含量低于糖尿病组(P<0.01),氨基胍组和牛蒡组比较差异无统计学意义(P>0.05).透射电镜下见糖尿病组肾脏肾小管上皮细胞呈典型的凋亡形态学改变,氨基胍组和牛蒡组大鼠肾组织细胞凋亡改变明显减轻.糖尿病组肾小球基底膜增厚,系膜区域扩大.结论 非酶糖化抑制剂氨基胍、牛蒡通过抑制非酶糖化、抑制细胞凋亡,明显改善糖尿病大鼠肾脏结构与功能,延缓DN的发展.     

氨基胍、牛蒡对糖尿病大鼠肾脏组织非酶糖化和细胞凋亡的影响

目的探讨非酶糖化与糖尿病肾病(DN)的关系,以及非酶糖化抑制剂氨基胍和具有非酶糖化抑制作用的牛蒡干预治疗对DN的治疗作用。方法雄性Wistar大鼠40只,随机分为4组,正常对照组、糖尿病组、糖尿病氨基胍(100mg·kg-1·d-1)治疗组(氨基胍组)、糖尿病牛蒡(150mg·kg-1·d-1)治疗组(牛蒡组),除正常对照组外,其他3组腹腔注射链脲佐菌素诱发糖尿病。16周后,处死大鼠,分离肾脏,测定组织非酶糖化,取部分肾脏皮质电镜观察细胞凋亡的形态学变化。结果治疗16周结束时,糖尿病各组大鼠体质量低于正常对照组(P<0.01),糖尿病各组间体质量比较差异无统计学意义(P>0.05);血糖水平均高于正常对照组(P<0.01);氨基胍组和牛蒡组血糖与治疗前比较,差异无统计学意义(P>0.05);糖尿病组大鼠肾组织肾皮质糖化终产物(AGEs)含量高于正常对照组(P<0.01),氨基胍组和牛蒡组AGEs含量低于糖尿病组(P<0.01),氨基胍组和牛蒡组比较差异无统计学意义(P>0.05)。透射电镜下见糖尿病组肾脏肾小管上皮细胞呈典型的凋亡形态学改变,氨基胍组和牛蒡组大鼠肾组织细胞凋亡改变明显减轻。糖尿病组肾小球基底膜增厚,系膜区域扩大。结论非酶糖化抑制剂氨基胍、牛蒡通过抑制非酶糖化、抑制细胞凋亡,明显改善糖尿病大鼠肾脏结构与功能,延缓DN的发展。     

山茱萸醇提液对D-半乳糖致衰大鼠非酶糖化及AR活性的影响

目的：研究山茱萸醇提液对D-半乳糖致衰大鼠体内非酶糖化和醛糖还原酶活性(AR)的影响。方法：本实验以D-半乳糖致衰大鼠为研究对象,分别以大、小剂量的山茱萸醇提液灌胃6周,测定了青年大鼠、致衰大鼠糖化血清蛋白(GSP)、糖化血红蛋白(GHb)、胸主动脉糖基化终末产物(AGE)含量、AR的变化,同时观察不同剂量山茱萸醇提液对致衰大鼠上述指标的影响,结果：致衰大鼠GSP、GHb、AGE含量随龄增加;醛糖还原酶活性增高。山茱萸醇提液可降低GSP、GHb、AEG含量,对醛糖还原酶活性无明显影响。结论：山茱萸醇提液可抑制体内蛋白质非酶糖化,具有一定抗衰老作用。     

非酶糖化抑制剂对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡作用的研究

目的：观察非酶糖化抑制剂-氨基胍(AG)对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法：54只SD大鼠分为12周对照组(8只)，24周对照组(10只)；糖尿病12周组(8只)，糖尿病24周组(10只)；AG治疗12周组(8只)，AG治疗24周组(10只)，观察糖尿病大鼠心肌病变过程中(12周及24周)心脏肥厚、心功能指标及心肌细胞凋亡的改变一结果：链尿佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠12周时出现心功能异常并可见凋亡的心肌细胞，随心衰的加重，24周时凋亡细胞数目明显增多。透射电镜检查，发现糖尿病大鼠左室心肌组织中可见凋亡的心肌细胞(具有凋亡形态学特征)。AG治疗组大鼠心功能和心肌超微结构明显改善，心肌细胞凋亡数目减少、结论：心肌细胞凋亡在糖尿病心肌病发生发展过程中起着重要作用，AG可有效减少心肌细胞凋亡，改善心肌病理形态学异常。     

非酶糖基化抑制剂的体外筛选方法

目的:建立非酶糖基化抑制剂(NEGI)的体外筛选模型并筛选NEGI.方法:依据非酶糖基化(NEG)致衰老假说,用酶基糖基化终产物(AGE)多克隆抗体建立体外NEGI筛选模型.采用竞争性AGE-ELISA方法定量测定AGE的含量.结果:从60余种中草药组分、合成化合物中筛选得到了3种NEGI,AG2070为化学合成的化合物,INEG-1和INEG-2都属于中药多糖,在结构上与其他NEGI都不同.这3种抑制剂在体外实验中均显示出明显的抑制AGE形成的能力.结论:NEGI的体外筛选模型是可行的.     

氨基胍、黄芩苷对糖尿病大鼠组织非酶糖化及视网膜细胞凋亡的影响

目的研究非酶糖化、凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax与糖尿病视网膜病变（DR）的关系,探讨非酶糖化抑制剂氨基胍和具有非酶糖化抑制作用的中药黄芩苷干预治疗,对DR的治疗作用。方法雄性Wistar大鼠40只,随机平均分为4组,正常对照组、糖尿病组、糖尿病氨基胍（100mg／kg&#183;d）治疗组、糖尿病黄芩苷（150mg／kg&#183;d）治疗组,腹腔注射链脲佐菌素（60mg／kg）诱发糖尿病。16周后,处死大鼠,分离主动脉,测定组织非酶糖化,观察视网膜Bcl-2、Bax的表达,电镜观察细胞凋亡的形态学变化。结果①与正常对照组相比,糖尿病组非酶糖化明显升高（P〈0．001）,氨基胍治疗组、黄芩苷治疗组较糖尿病组非酶糖化明显降低（P〈0．01）,而血糖无明显变化;②糖尿病组视网膜Bcl-2蛋白表达明显减少、Bax蛋白表达明显增加．氨基治疗组、黄芩苷治疗组的Bcl-2蛋白表达明显增加、Bax蛋白表达较糖尿病组明显减少;③透射电镜下见糖尿病视网膜组神经节细胞呈典型的凋亡形态学改变,氨基胍治疗组、黄芩苷治疗组大鼠组织细胞凋亡改变明显减轻。结论①非酶糖化通过调节Bcl-2,Bax蛋白的表达诱导细胞凋亡,而参与DR的发生与发展;②非酶糖化抑制剂通过抑制非酶糖化,调节Bax、Bcl-2的表达抑制细胞凋亡,延缓DR的发展;③黄芩苷对非酶糖化抑制作用与典型非酶糖化抑制剂氨基胍相似,且价格低、副作用少,值得临床推荐应用。     

环氧酶选择性抑制剂筛选模型的建立

目的　建立COX1和COX2活性检测模型,为COX2选择性抑制剂的筛选及抗炎作用机制研究提供可靠方法。方法　COX1抑制剂筛选模型用新生小公牛主动脉内皮细胞为酶源,6-keto-PGF_1α的含量变化评价化合物对COX1的抑制作用。COX2抑制剂筛选模型用激活的小鼠腹腔巨噬细胞,PGE₂含量变化评价化合物对COX2的抑制作用。结果　Indomethacin可显著地抑制COX1的活性, Meloxicam可显著地抑制COX2的活性, 其对COX2的选择性抑制作用高于前者。结论　COX1和COX2抑制剂筛选模型可用于COX2选择性抑制剂的筛选和机制研究。     

大鼠非酒精性脂肪性肝炎常用模型探讨

本文主要阐述大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)常用模型,介绍模型的造模方法、效果及优缺点.由于生活方式的改变,NASH发病率呈明显增加趋势,现代医学证实部分NASH可发展为肝纤维化、肝硬化而导致严重后果,许多学者都在着眼于研究NASH的病因学及治疗和预防等,而建立理想的大鼠NASH模型是非常重要的研究工具,本文旨在对常用大鼠NASH模型,着重大鼠营养失调性脂肪肝模型进行探讨及分析.     

大鼠非酒精性脂肪性肝炎模型的建立

目的建立大鼠非酒精性脂肪性肝炎（NASH）模型。方法16只雄性SD大鼠,适应性饲养1周后随机分为对照组和模型组,每组8只,对照组大鼠给予普通饲料喂养,模型组大鼠给予高脂饲料（在普通饲料内添加100g/L猪油、20g/L胆固醇）,12周后处死实验动物,观察2组大鼠体重量、肝脏质重（湿）、血清生化指标（谷丙转氨酶、谷草转氨酶、三酰甘油、游离脂肪酸、肿瘤坏死因子等）及肝细胞脂肪变性程度。结果模型组肝脏质量（湿）显著高于对照组（P〈0.05）;模型组肝细胞变性程度显著重于对照组（P〈0.05）;模型组谷丙转氨酶、谷草转氨酶、三酰甘油都显著高于对照组（P〈0.05）;2组大鼠游离脂肪酸水平差异无统计学意义（P〉0.05）。结论利用高脂饲料喂养的方法成功复制了NASH单纯脂肪性肝炎期模型。     

非诺贝特酯对非酒精性脂肪肝大鼠模型的影响

目的 探讨非诺贝特酯对非酒精性脂肪肝大鼠模型的影响.方法 用高脂乳液制造SD非酒精性脂肪肝大鼠模型,进行随机划分三组,分别是非诺贝特酯组、对照组、易善复组,进行8周治疗后,检测肝组织生化反应和病理学研究.结果 非诺贝特酯对非酒精性脂肪肝大鼠模型的肝脂水平有明显降低的作用,使脂肪变性得到改善.结论 非诺贝特酯对非酒精性脂肪肝大鼠治疗作用明显.     

巴曲酶治疗大鼠耳鸣的实验研究

目的 观察巴曲酶对耳鸣大鼠的治疗作用及其下丘神经递质的影响。方法 采用水杨酸钠腹腔注射诱导联合饮水抑制法建立大鼠耳鸣模型,随机分为模型组、卡马西平组(5 mg/kg)和巴曲酶组(1 BU/kg),另设正常组作为对照。腹腔注射给药15 d后,记录各组饮水抑制率恢复至正常的时间,检测大鼠在不同声音频率(4～28 kHz)下的听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)阈值,分别采用酶联免疫吸附测定和液相色谱液质谱法检测大鼠下丘递质~γ-氨基丁酸(~γ-aminobutyric acid,GABA)、5-羟色胺(5-hydroxytrptamine,5-HT)和乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)的含量。结果 与模型组相比,巴曲酶组饮水抑制率恢复至正常的时间显著延长(P<0.01);在不同声音频率下,巴曲酶组ABR阈值较模型组显著下降(P<0.05或P<0.01);与模型组相比,巴曲酶组下丘GABA和ACh水平均显著升高(P<0.05或P<0.01),5-HT水平则显著降低(P<0.01)。结论 巴曲酶对水杨酸钠...     

氨基胍对糖尿病大鼠心脏功能及心肌超微结构的影响

目的 :探讨非酶糖化抑制剂 氨基胍 (amin oguanidine ,AG)对链尿佐菌素 (streptozotocin ,STZ)糖尿病大鼠心肌的保护作用 ,为糖尿病心肌病的防治提供参考。方法 :建立STZ糖尿病大鼠模型 ,随机分为对照组、糖尿病组和氨基胍治疗组 ,AG剂量为15 0mg·kg-1·d-1。 12周时测定大鼠血清果糖胺含量、心脏重量指数、左室内压最大上升和下降率 (±dp dtmax)值 ,电镜观察心肌超微结构 ,测量心肌毛细血管基底膜厚度。结果 :糖尿病组大鼠血清果糖胺含量、心脏重量指数明显增高 ,±dp dtmax降低 ;超微结构显示心肌肌原纤维排列紊乱 ,线粒体肿胀变性 ,间质胶原增生 ,微血管内皮细胞肿胀、基底膜明显增厚。氨基胍治疗组血清果糖胺含量降低、心脏重量指数明显下降、±dp dtmax 值上升 ,微血管基底膜增厚减轻 ,间质胶原减少 ,心肌细胞超微结构异常减轻。结论 :糖尿病时存在心脏功能异常、心肌肥厚和超微结构的改变 ,早期应用AG在一定程度上可阻抑糖尿病心肌病变的发展。     

源于天然产物的蛋白质非酶糖基化抑制剂研究进展

<正>糖尿病肾病(Diabetic neph ropathy,DN)是常见的糖尿病慢性微血管并发症之一,通常是指由于糖尿病引起的肾小球基底膜增厚,系膜扩张以及胞外基质增生,导致肾小球的高滤过和蛋白尿。早期表现为尿中排出微量白蛋白,继之出现临床     

磷酸二酯酶-5抑制剂及其比较

1引言虽然讨论勃起功能相关主题仍存禁忌,但其程度和范围已大为降低和缩小。这种变化至少在一定意义上应归于1998年引入临床的西地那非（sildenafil）,后者不仅使勃起功能障碍治疗获得一次革命性的进步,而且也大大提高了整个社会和医患双方对此疾病的认识和重视。     

巴曲酶对糖尿病大鼠肾脏保护作用的实验研究

目的研究巴曲酶对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法将Wistar大鼠分为正常组（C）、糖尿病组（M）、治疗1组（T1）、治疗2组（T2）和治疗3组（T3）。除正常组外，其余四组用链尿佐菌素诱导大鼠糖尿病模型，T1、T2和T3组分别于大鼠出现高血糖、尿微量白蛋白及肾脏早期病理改变时给予巴曲酶治疗O实验共进行8周，实验过程中观察大鼠体质量、饮食、饮水量、精神及尿量变化。每2周检测血糖1次，于实验第2周、6周、7周和8周分别用代谢笼收集各组大鼠尿液，测定24：h尿白蛋白排泄量。8周末时，在10％水合氯醛麻醉状态下，腹主动脉取抗凝血和血清，用于测定糖化血红蛋白（HbAlc）、血糖（BS）、血肌酐（ScrJ、l尿素氮（BUN）等指标，并计算血清肌酐清除率（Ccr）。留取单侧肾脏称重，计算肾脏肥大指数（肾重／45质量）。结果4周末发现糖尿病组大鼠肾脏基膜增生系膜区扩大，出现早期。肾脏病理改变。2、6、7、8周糖尿病组大鼠24h尿白蛋白排泄量明显高于健康对照组（P〈0．01），给予巴曲酶治疗后，白蛋白排泄较糖尿病组明显降低（P〈0．01或0．05）。8周末发现糖尿病大鼠Scr、BUN、HbAlc、肾脏指数均较健康对照组明显升高（P〈0．01或0．05），Ccr较健康对照组明显降低（P〈0．01），症状均有所缓解（P〈0．01或0．05）。结论巴曲酶可能具有改善糖尿病大鼠肾小球滤过率，降低糖化血红蛋白水平，有利于控制血糖，阻断糖尿病大鼠肾脏病变发展的作用。