氟伐他汀预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织TNF-α及IL-10表达的影响

目的观察氟伐他汀预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织肿瘤坏死因子(TNF-α)及白介素-10(IL-10)含量变化,探讨氟伐他汀的脑保护机制。方法实验大鼠随机分为4组:假手术组(Sham组)、脑缺血再灌注组(I/R组)、溶剂对照组(Vehicle组)和氟伐他汀预处理组(Flu组)。线栓法制作大脑中动脉脑缺血再灌注损伤模型,Flu组在模型制备前用氟伐他汀连续灌胃14 d。于缺血2 h再灌注24 h后断头取脑,采用ELISA法、免疫组织化学法和半定量RT-PCR法,检测大鼠脑组织中TNF-α及IL-10表达的变化。结果与Sham组比较,I/R组和Vehicle组脑组织中TNF-α和IL-10的表达明显上调(P<0.05)。与I/R组和Vehicle组比较,Flu组脑组织中TNF-α的表达明显下调,IL-10的表达显著上调(P<0.05)。结论氟伐他汀对脑缺血再灌注损伤的保护作用,其作用机制可能与上调IL-10,下调TNF-α的表达有关。     

缺血预处理对局灶性脑缺血再灌注大鼠顶叶皮层bFGF表达的影响

目的研究脑缺血预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤及脑顶叶皮层碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响。方法线栓法阻塞32只大鼠大脑中动脉15min作为预处理,3天后线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血模型,缺血2h再灌注24h后,缺血再灌注组32只。观察神经功能缺损程度、脑梗死体积、脑含水量、bFGF表达的变化。结果与对照组相比,脑缺血预处理组神经功能缺损评分明显降低(P<0.01),TTC染色显示脑梗死体积明显减小(P<0.01),缺血侧的脑水肿程度明显减轻(P<0.01),免疫组化和Westernblot检测表明脑顶叶皮层缺血周围组织bFGF表达水平明显升高(P<0.01),阳性细胞以神经元和胶质细胞为主。结论预先给予短暂性脑缺血预处理可对脑缺血再灌注损伤起保护作用,bFGF过表达可能是其机制之一。     

L-精氨酸对大鼠局灶性脑缺血再灌注早期炎症损伤研究

目的 探讨一氧化氮（NO）前体L-精氨酸（L-Arg）对大鼠局灶性脑缺血再灌注早期炎症损伤的影响.方法 建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,设立假手术组、缺血组（ischemia/reperfusion,IS组）,L-Arg治疗组（n=10）.L-Arg治疗组于缺血2h再灌注即刻给予L-Arg,缺血组给予生理盐水.将大鼠于缺血再灌注6h后断头取脑,检测脑组织中肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）和白细胞介素10（IL-10）的活性,测定脑组织含水量和脑梗死体积.结果 局灶性脑缺血再灌注大鼠给予L-Arg治疗组TNF-α和IL-6的表达下降,IL-10升高,脑组织含水量及脑梗死面积减少.结论 L-精氨酸可以通过抑制脑组织炎性因子TNF-α和IL-6的表达,上调IL-10的含量来发挥抗炎作用,从而对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤早期产生一定程度的保护作用.     

三七总皂苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注后IL-10及TNF-α表达的影响

目的观察三七总皂苷(PNS)对局灶性脑缺血再灌注后大鼠脑组织白细胞介素-10(IL-10)及肿瘤坏死因子(TNF-α)含量变化的影响,探讨PNS对脑缺血再灌注损伤的保护机制。方法将30只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和PNS组,每组10只。缺血再灌注组采用线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞模型。各组分别于连续灌胃4周,观察3 d后处死取出脑脑织,采用ELISA法、免疫组织化学法和半定量RT-PCR法检测各组缺血区脑组织IL-10和TNF-α表达的变化,并进行大鼠行为能力测试评分。结果与假手术组和缺血再灌注组相比,PNS组术后脑组织中IL-10的表达水平明显增高,TNF-α的表达水平明显下调,PNS组行为能力较缺血再灌注组明显提高。结论三七总皂苷对脑缺血再灌注大鼠的保护作用,其作用机制可能与上调IL-10、降低TNF-α的表达有关。     

Notch-1/NICD信号在普罗布考保护大鼠急性脑缺血后再灌注损伤中的作用

目的:研究普罗布考对大鼠急性脑缺血再灌注损伤后大脑的保护作用及其与Notch--1/Notch胞内域(NICD)蛋白信号通路的关系。方法:SD大鼠随机分为假手术组、缺血组及普罗布考组。采用大脑中动脉闭塞(MCAO)法建立局灶性脑缺血再灌注模型,经普罗布考腹腔注射处理后,采用转角试验判断神经功能,2,3,5-氯化三苯四氮唑(TTC)染色法测量脑梗死体积,干湿法测定脑组织含水量,免疫印迹检测Notch-1和NICID蛋白的表达,免疫酶联反应检测血清中炎症因子白介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果:普罗布考可改善急性脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能,减轻脑水肿;与缺血组相比,普罗布考治疗组Notch-1/NICD蛋白表达降低,IL-8和TNF-α分泌也相应减少。结论:普罗布考可激活Notch-1/NICD信号通路,进而调节IL-8和TNF-α的表达,发挥对急性脑缺血再灌注损伤脑的保护作用。     

辛伐他汀预处理对脑缺血再灌注损伤Bcl-2和Bax表达的影响

目的:探讨辛伐他汀预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法:随机将48只雄性SD大鼠分为4组:空白对照组、假手术组、缺血再灌注组和辛伐他汀预处理组。辛伐他汀预处理组在模型制备前用辛伐他汀20mg/kg连续灌胃10d,1次/d;假手术组及缺血再灌注组用相同体积的等渗盐水连续灌胃10d。以线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,于缺血2h再灌注24h后行5分制神经功能评分,并断头取脑分别测定脑梗死体积、凋亡细胞数及Bcl-2、Bax表达。结果:与空白对照组和假手术组比较,缺血再灌注组和辛伐他汀预处理组神经功能缺损较为严重,脑梗死体积增大,凋亡细胞数目增多,Bcl-2、Bax表达增加(均P0.01)。与缺血再灌注组相比,辛伐他汀预处理组神经功能有不同程度改善,脑梗死体积明显减小,凋亡细胞数及Bax表达降低,Bcl-2表达增高,比较差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:辛伐他汀预处理对大鼠脑缺血再灌注有神经保护作用,其作用机制可能与辛伐他汀上调脑组织中Bcl-2、下调Bax表达,抑制细胞凋亡有关。     

NGF对局灶性脑缺血再灌注后大鼠皮质IL-1β表达的调控作用

目的:探讨外源性神经生长因子(NGF)对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮质白细胞介素1β(IL-1β)表达的影响.方法:线栓法制作大鼠局灶性腩缺血再灌注模型,应用免疫组织化学显色、免疫印迹分析方法,结合图像分析技术检测大鼠缺血侧顶叶皮质 IL-1β蛋白表达变化.结果:假手术组大鼠顶叶皮质IL-1β没有表达,缺血再灌注组顶叶皮质IL-1β蛋白在各时间点明显表达,IL-1β蛋白阳性产物的光密度值高于假手术组;NGF组IL-1β蛋白阳性产物的光密度值低于缺血冉灌注组.结论:脑缺血再灌注损伤后诱导 IL-1β蛋白表达,NGF 明显降低缺血再灌注大鼠顶叶皮质IL-1β蛋白表达,这可能是 NGF发挥神经保护作用的分子机制之一.     

加兰他敏通过激活Nrf2 / ROS 通路缓解大鼠脑缺血再灌注后免疫反应和诱导神经再生相关蛋白的表达

目的:探究加兰他敏(GAL)对大鼠脑缺血再灌注后免疫反应和神经再生的影响。方法:SD大鼠随机分为5组(n=30):健康对照组,假手术组,I/R模型组,I/R加低剂量GAL组,I/R加高剂量GAL组。采用改良线栓法建立I/R大鼠模型。HE检测病理组织变化。免疫组化检测神经丝蛋白200(NF-200)的表达。Western blot检测NF-200、生长相关蛋白43(GAP-43)、排斥导向分子(RGMa)的表达水平。ELISA检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、IL-6、IL-18的含量。Western blot检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)、还原型辅酶氧化还原酶1(NQ01)的表达。试剂盒检测脑组织活性氧(ROS)的含量。结果:I/R模型组与假手术组相比,大鼠CA1区出现明显缺血病变; NF-200密度下降,NF-200蛋白表达显著下调,GAP-43蛋白表达显著下调,RGMa表达显著上调;血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18的含量显著上升; Nrf2、HO-1、NQO-1的表达显著下调; ROS的含量显著上升。GAL加药组与I/R模型组相比,大鼠CA1区缺血病变明显改善; NF-200密度上升,NF-200蛋白表达显著上调,GAP-43蛋白表达显著上调,RGMa表达显著下调;血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18的含量显著降低; Nrf2、HO-1、NQO-1的表达显著上调; ROS的含量显著降低。结论:GAL激活Nfr2/ROS细胞信号通路,缓解大鼠脑缺血再灌注后免疫应激反应,诱导神经再生相关蛋白的表达。     

天麻素对脑缺血再灌注大鼠大脑皮质的影响及可能机制

目的 探讨天麻素对脑缺血再灌注大鼠大脑皮质的影响及抑制MAPK信号通路的可能机制.方法 24只SD大鼠随机分为正常对照组、脑缺血再灌注损伤组、天麻素组,每组8只.各组于再灌注72h后,通过神经功能评分及HE染色观察脑组织损伤情况;湿干重检测脑组织含水率;Western blot检测大鼠脑炎症相关指标IL-1β、NF-κB、TNF-α和通路蛋白p38MAPK、PI3K、p-Akt蛋白表达情况.结果 与对照组相比,损伤组神经功能评分值显著增高,大脑炎症反应加重,脑组织含水率均明显升高,IL-1β、NF-κB、TNF-α、p38 MAPK、PI3K和p-Akt蛋白表达水平上调(P＜0.05).与损伤组相比,天麻素处理后大鼠神经功能评分值显著降低,大脑炎症反应减轻,含水率显著降低,IL-1β、NF-κB、TNF-α、p38MAPK、PI3K和p-Akt蛋白表达水平下调(P＜0.05).结论 天麻素明显减轻脑缺血再灌注大鼠大脑皮质损伤程度,与调节MAPK信号通路减轻炎症反应相关.     

腺苷预处理对大鼠脑缺血-再灌注损伤后脑内肿瘤坏死因子α和核因子κB表达的影响

目的 通过观察腺苷预处理对脑缺血-再灌注（IR）损伤后大鼠脑内肿瘤坏死因子α（TNF-α）和核因子κB（NF-κB）表达的影响,探讨腺苷对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护机制。方法 Sprague-Dawley大鼠60只随机分为假手术组（F组）、缺血-再灌注组（IR组）和腺苷预处理缺血-再灌注组（AP组）,每组动物按照缺血-再灌注后2 h、6 h、24 h及48 h这4个时间点随机分组,每组5只。采用大脑中动脉阻塞（MCAO）法制备大鼠大脑中动脉闭塞模型。通过对以上3组脑缺血 再灌注48 h后的大鼠脑组织行头颅MRI、HE染色以及对以上60只大鼠进行神经功能缺损评分,通过免疫组织化学方法观察大鼠脑组织中TNF-α和NF-κB的平均积分吸光度值进一步验证腺苷预处理对大鼠脑缺血-再灌注损伤的脑保护作用,探讨腺苷对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护机制。结果 F组大鼠术后无神经功能缺损体征,AP组和IR组大鼠术后均出现明显神经功能缺损体征。AP组和IR组大鼠神经功能缺损评分显著高于F组,AP组大鼠神经功能缺损评分显著低于IR组,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。F组大鼠术后MRI中T1WI、T2WI均未见明显异常,AP组和IR组大鼠脑梗死体积显著高于F组,AP组大鼠脑梗死体积显著低于IR组,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。AP组和IR组术后大鼠脑组织中TNF-α和NF-κB的表达显著高于F组,AP组术后大鼠脑组织中TNF-α和NF-κB的表达显著低于IR组,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。结论 腺苷预处理可通过减少大鼠缺血-再灌注损伤后脑内TNF-α和NF-κB的表达而减轻神经细胞损伤,达到其脑保护作用。     

八肽胆囊收缩素对内毒素休克时大脑皮质损伤的影响及其机制初探

目的：观察八肽胆囊收缩素（CCK-8）对内毒素休克（ES）时大脑皮质损伤的影响，并探讨其可能的机制。 方法： 将日本大耳白兔经静脉注入脂多糖（LPS，8 mg/kg）复制ES模型。32只家兔随机分为对照组、LPS组、CCK-8+LPS组和非特异性CCK受体拮抗剂丙谷胺（Pro）+LPS组，每组8只。监测平均动脉压（MAP）变化，光、电镜观察大脑皮质的组织形态学改变，比色法检测大脑皮质NOS和SOD活性、NO和MDA含量的改变。用SD大鼠 （12只，同上复制模型及分组） 以免疫组织化学染色法观察大脑皮质iNOS和nNOS表达的变化。 结果： 注入LPS后，MAP明显持续低于对照组（P<0.01），大脑皮质组织水肿，iNOS和nNOS表达增强，NOS活性、NO和MDA含量显著高于对照组（P<0.05、P<0.01和P<0.01），SOD活性显著低于对照组（P<0.01）。预先注入CCK-8可明显减轻上述变化，预先注入丙谷胺Pro则加剧以上变化。 结论： CCK-8可减轻ES时的大脑皮质损伤，其机制可能与其抗氧化作用和抑制NO的过量生成有关。     

糖皮质激素通过抑制p38MAPK信号通路缓解大鼠内毒素性急性肺损伤

目的： 研究糖皮质激素对内毒素导致的急性肺损伤的影响及作用机制。方法: 成年雄性SD大鼠被随机分为6组：对照组（control 组,n=6）;LPS组（n=24）;地塞米松＋LPS组（Dex＋LPS组,n=24）;糖皮质激素受体拮抗剂RU486组（RU486组,n=6）;RU486+LPS组（n=24）以及RU486＋Dex＋LPS组（n=24）。除对照组和RU486组外,其余4组在注射LPS后1、3、6、12 h又被分为4个亚组。分别检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中TNF-α和IL-6的浓度,肺组织的病理变化,以及肺组织中p38MAPK的活化状态和MKP-1的表达情况。另外又分别比较了LPS组与RU486＋LPS组、Dex＋LPS组与RU486＋Dex＋LPS组大鼠48 h的死亡率。结果: 注射LPS后,BALF中TNF-α 和IL-6的浓度明显升高（P<0.05）,HE染色显示肺组织内广泛炎症反应。而这些现象在应用RU486后变得更加严重,并且RU486＋LPS组的死亡率也明显高于LPS组(P<0.05)。地塞米松能明显缓解LPS导致的肺损伤,糖皮质激素受体(GR)参与此作用。另外,在注射LPS后,肺组织中磷酸化的p38MAPK的表达明显升高,而MKP-1的表达则明显受到抑制。地塞米松能显著降低p38MAPK的磷酸化,这一作用也是GR依赖的。结论: 糖皮质激素活化GR诱导肺组织中MKP-1的表达,进而抑制p38MAPK的活化,从而发挥其抗炎作用,缓解LPS诱导的肺损伤。     

Perfusion with lipopolysaccharide negative blood eliminates lipopolysaccharide induced lung injury

We investigated whether perfusion with control blood improves pulmonary functions compromised by lipopolysaccharide (LPS) infusion. This was an animal study in a research laboratory at a university hospital by using Sprague-Dawley rats (n = 19), each weighing 325 to 350 g. All animals were pretreated with a 24 hour infusion of either LPS (5 mg/kg) or vehicle, after which, excised lungs were reperfused for 2 hours with either LPS+ or control blood. Three groups were studied: (1) group S (n = 6); LPS pretreated lungs reperfused with LPS containing blood to mimic persistent sepsis, (2) group N (n = 6); LPS pretreated lungs reperfused with control blood to mimic the removal of the septic blood components, and (3) group C (n = 7); vehicle pretreated lungs reperfused with normal blood as a control. Blood gas exchange, shunt fraction (Qs/Qt), alveolar-arterial oxygen gradient (A-aDO2), and variables for lung mechanics were measured. Leukosequestration was quantified with a myeloperoxidase (MPO) assay. The PO2 (mm Hg) values at 90 min after reperfusion in groups S, N, and C were 67.8 +/- 7.0*, 85.2 +/- 9.2, and 90.1 +/- 7.5, respectively (*p < 0.05; vs. group N and C). In addition to PO2, A-aDO2 and Qs/Qt significantly deteriorated in group S. MPO activity in the lungs after LPS infusion was significantly higher than that after vehicle infusion (1.7 +/- 0.3 vs. 0.12 +/- 0.04 units/g tissue; p < 0.001). Subsequent reperfusion with LPS+ blood (group S) increased MPO activity to 3.1 +/- 0.6 (p < 0.05), but reperfusion with normal blood (group N) caused a significant decrease to 1.1 +/- 0.2 (p < 0.05). MPO activity in group C did not significantly change compared with those after vehicle infusion. Reperfusion with control blood normalized lung function compromised by pretreatment with LPS and significantly reduced leukosequestration. These results favor the possibility that the removal of LPS+ blood components may eliminate septic lung injury.     

N-乙酰半胱氨酸对脂多糖诱导的小鼠肝MAPK磷酸化的影响

目的： 探讨N-乙酰半胱氨酸（NAC）对脂多糖（LPS）诱导的肝MAPK磷酸化的影响。方法: 雄性昆明种小鼠54只随机分为对照组(n=6)：0.9 % NaCl 0.2 mL ip；LPS组（n=24）：LPS 5 mg ip；NAC+LPS组（n=24）：NAC 150 mg·kg-1·d-1ip，连续3 d；第3 d NAC灌胃后1 h时，LPS 5 mg ip。将小鼠分别在注射LPS或生理盐水后0.5 h、1 h、2 h和6 h时，在戊巴比妥钠麻醉下开腹取肝，测定肝MDA和还原型谷胱甘肽（GSH）含量；Western blotting方法测定肝脏MEK1/2、ERK1/2、p38MAPK磷酸化水平，放免法测定肝TNF-α含量。结果: NAC预处理使肝MDA含量明显下降，使肝GSH含量升高。NAC预处理显著抑制了LPS所致的肝MEK1/2、ERK1/2、p38MAPK磷酸化，同时使肝TNF-α水平显著降低。结论: 在LPS诱导的急性肝损伤过程中，活性氧（ROS）在激活MAPK信号转导中起重要作用。NAC通过其抗氧化作用部分抑制了LPS诱导的MAPK磷酸化，使TNF-α生成减少，从而发挥抗损伤作用。     

Vascular endothelial growth factor in dialysate in relation to intensity of peritoneal inflammation

BACKGROUND: Peritoneal inflammation may induce changes in peritoneal microvessels, including neoangiogenesis/vasculogenesis, leading to increased peritoneal solute transport rate (PSTR) and loss of ultrafiltration capacity. We hypothesized that an inflammatory reaction in the peritoneal cavity during peritonitis induces increased synthesis of vascular endothelial growth factor (VEGF). We therefore studied the relationship between peritoneal inflammation markers, VEGF, and transport of fluid and solutes in rats during acute peritoneal inflammation induced by lipopolysaccharide (LPS) added to standard glucose-based dialysis solution. METHODS: Under ether anesthesia, male Wistar rats were injected intraperitoneally with 30 mL Dianeal 3.86% without (Control; n=6) or with LPS (microg/mL): 0.001 (LPS 0.001; n=6), 0.01 (LPS 0.01; n=7), 0.1 (LPS 0.1; n=7), 1.0 (LPS 1.0; n=8). After 8 hours, dialysate volume (IPV), peritoneal solute transport rate (PSTR) and dialysate cell count (DCC) were measured and effluent samples were collected. RESULTS: LPS i.p. resulted in increased PSTR and decreased IPV (p<0.005). DCC (cells/microL) and the neutrophil/macrophage ratio were higher for all LPS concentrations compared to the control group. After 8 hours, LPS-exposed rats had significantly higher dialysate levels of all investigated cytokines (TNF-alfa, MCP-1 and IL-10) than the control group. Addition of LPS resulted in increased dialysate VEGF concentrations (pg/mL) (LPS 0.001, 28.2+/-5.9; LPS 0.01, 38.9+/-11.6; LPS 0.1, 43.0+/-5.9; LPS 1.0, 46.6+/-11.3; Control, 14.5+/-9.8; p<0.0005 for all LPS vs. Control). CONCLUSIONS: The infusion of Dianeal 3.86% with different doses of LPS induced a strong acute intraperitoneal inflammatory reaction with increased DCC and cytokine levels, resulting in increased peritoneal solute transport and decreased IPV. LPS induced a dose-dependent parallel increase of the intraperitoneal concentrations of MCP-1, IL-10 and TNF-alfa, as well as of VEGF. These results suggest that intraperitoneal VEGF synthesis is induced in response to inflammation, and that this may be an important component in the process leading to peritoneal transport alterations.     

川芎嗪对大鼠脑缺血再灌注损伤后GFAP表达和脑组织水肿的影响

探讨川芎嗪对大鼠脑缺血再灌注损伤后星形胶质细胞表达胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)以及对脑组织含水量的影响。将70只SD大鼠随机分为3组:脑缺血后1、3、5、7、10d模型组(n=30,每个时间点用6只)、川芎嗪预处理组(n=30,每个时间点用6只)和假手术组(n=10,每个时间点用2只)。采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO),应用免疫组化法观察星形胶质细胞GFAP的表达,干湿重法测定脑组织的含水量。结果显示:川芎嗪预处理组大鼠各时间点海马CA1区的GFAP阳性细胞数量显著增多,与缺血模型组比较均有显著性差异(P<0.05)。缺血再灌注后脑组织含水量持续性增加,到3d达到最高峰,5d时仍较高,以后逐渐降低;川芎嗪组各时间点的脑组织含水量均低于缺血模型组(P<0.05)。上述研究结果提示川芎嗪可引起星形胶质细胞活化、保护神经元、减轻脑水肿,具有防治脑缺血再灌注损伤的作用。     

牛磺酸减轻内毒素诱导的大鼠心肌损伤

目的:探讨牛磺酸对内毒素(即脂多糖,LPS)诱导的大鼠心肌损伤的影响。方法:健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠30只随机分为3组:正常对照组、内毒素模型组及牛磺酸处理组。正常对照组和内毒素模型组大鼠尾静脉注射生理盐水,牛磺酸处理组大鼠尾静脉注射牛磺酸(100 mg/kg),2 h后,内毒素模型组和牛磺酸处理组大鼠腹腔注射LPS(10 mg/kg),正常对照组大鼠腹腔注射生理盐水。注射内毒素6 h后,采集血样品和心肌组织,检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素6(IL-6)水平;光镜下观察心肌形态学变化;Western blot检测心肌组织磷酸化核因子κB(p-NF-κB)、环氧合酶2(COX-2)、TNF-α、IL-6及血红素加氧酶1(HO-1)的表达。结果:与正常对照组比较,内毒素模型组大鼠血清SOD活性及心肌组织HO-1表达明显降低(P0.01),血清MDA、TNF-α和IL-6水平明显升高(P0.01),心肌组织p-NF-κB、COX-2、TNF-α及IL-6水平明显升高(P0.01)。与内毒素模型组比较,牛磺酸处理组大鼠血清MDA、TNF-α和IL-6水平明显降低(P0.01),牛磺酸处理明显降低心肌组织COX-2、TNF-α、IL-6及p-NF-κB水平(P0.01),血清SOD活性及心肌组织HO-1表达明显提高(P0.01)。组织学观察显示内毒素模型组大鼠心肌组织有炎症细胞浸润,心肌纤维排列疏松不规则,而正常对照组和牛磺酸处理组大鼠心肌纤维排列整齐规则。结论:牛磺酸预处理能减轻内毒素诱导的心肌损伤,其机制可能通过HO-1/CO信号下调p-NF-κB/COX-2而发挥作用。     

水飞蓟素对脂多糖性大鼠急性肺损伤的拮抗作用

目的： 观察水飞蓟素（SIL）对脂多糖所致的大鼠肺损伤的拮抗作用及其可能的机制。方法: 雄性SD大鼠58只, 体重230-250 g, 分为对照组(control, n=12)、脂多糖组(LPS, n=15)、水飞蓟素组(SIL 50 mg/kg. n=15 )、LPS+水飞蓟素组 (LPS+SIL 50 mg/kg，n=16 )。造模 6 h 后测定血清及肺组织中TNF-α、IL-1β、MCP-1的浓度与表达, 进行动脉血气分析, 取肺组织观察大体标本形态和光镜下的组织病理形态, 测定肺组织血管通透性变化、湿/干质量比值、髓过氧化物酶活性(MPO)、脂质过氧化产物［丙二醛(MDA)和共轭二烯(C-diene)、SOD及GSH-Px酶活性。结果: 光镜下可见对照组大鼠肺组织学正常, LPS组大鼠肺间质弥漫性出血, 肺泡腔内可见大量粒细胞聚集、浸润, 并可见弥漫性肺泡间隔增厚, 而SIL+LPS组大鼠上述病理表现明显轻于LPS组。肺组织湿/干质量比值和每克肺组织伊文思蓝含量在LPS组显著高于对照组; LPS+SIL组上述指标显著低于LPS组。LPS组大鼠血清及肺组织中TNF-α、IL-1β及MCP-1的浓度与表达、肺组织脂质过氧化产物水平均明显高于对照组；而SOD及GSH-Px的活性则明显低于对照组(P<0.05,P<0.01)。SIL+LPS组大鼠上述指标明显轻于LPS组。结论: SIL明显降低LPS引起的肺组织的炎症反应与氧化损伤,对脂多糖所致大鼠急性肺损伤具有显著的拮抗作用。     

抑制核因子-κB对人眼角膜基质细胞分泌细胞因子的影响

目的 观察体外抑制核因子-κB (NF-κB)对人眼角膜基质细胞分泌细胞因子的影响。 方法 四甲基偶氮唑盐（MTT)法检测不同浓度的大黄素对人眼角膜基质细胞活性的影响。用脂多糖(LPS)刺激体外培养的基质细胞,将细胞分为正常对照组(n=6)、LPS组(n=24)和大黄素组(n=24)。LPS组单纯给予LPS刺激,大黄素组于LPS刺激前先用大黄素预处理30min,其余处理同LPS组。分别用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）和酶联免疫吸附实验（ELISA）检测LPS刺激对角膜基质细胞白细胞介素8（IL-8）基因表达和蛋白分泌的影响,Western blotting检测角膜基质细胞中κB抑制因子α(IκB-α)蛋白的表达。 结果 所用浓度大黄素对体外培养的角膜基质细胞活性无影响。与刺激前相比,LPS刺激可引起人眼角膜基质细胞IL-8 mRNA表达增加,促进IL-8蛋白分泌、下调细胞内IκB-α蛋白水平,P＜0.01差异均有统计学意义。大黄素预处理可明显抑制LPS诱导的人眼角膜基质细胞表达IκB-α,下调细胞IL-8基因表达,减少IL-8蛋白分泌,明显低于同时间点LPS组的表达,P＜0.01差异具有统计学意义。 结论 LPS可引起人眼角膜基质细胞IκB-α的降解,促进NF-κB核转位,引起IL-8表达。体外抑制NF-κB,能减少人眼角膜基质细胞分泌IL-8。     

磷脂酰肌醇3-激酶通路对脂多糖预激动小胶质细胞高迁移率族蛋白1表达的影响

目的 探讨磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B(phosphoinositide 3-kinase/protein kinaseB,P13K/Akt)通路对脂多糖 (lipopolyssacride,LPS)预处理体外培养大脑皮质小胶质细胞高迁移率族蛋白1(high mobility group box-1protein 1,HMGB-1)表达的影响.方法 体外分离纯化小鼠大脑皮质小胶质细胞,纯度鉴定后按未刺激对照组、0.01μg/mL LPS单次刺激组(18 h)、1μg/mL LPS刺激组(24 h)、预处理组、PI3K/AKT通路抑制组(2 h)分别进行处理.收获各组细胞与培养上清,采用酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)分泌水平,免疫荧光法检测HMGB-1在细胞中的定位情况,Western blot 检测 HMGB-1和磷酸化Akt的表达水平.结果 PI3K/Akt通路抑制后,LPS预刺激小胶质细胞产生的TNF-α水平较1μg/mL单次刺激组、预刺激组水平降低(P=0.043;P=0.046);磷酸化Akt表达降低,小胶质细胞HMGB-1表达以及向胞浆中转位呈现降低趋势.结论 PI3K/Akt通路在LPS预激诱导的HMGB-1活化中起正性调节作用,这些分子及调节通路的变化参与LPS耐受诱导的重新调配过程,从而共同影响小胶质细胞的最终效应.