MMP13在骨性关节炎患者滑膜细胞中的表达

目的 观察在膝关节骨性关节炎（osteoarthritis，OA）患者的滑膜细胞中是否有基质金属蛋白酶13（matrix metalloproteinases-13，MMPl3）的mRNA表达。方法 分别取临床上5例确诊为膝关节骨性关节炎患者的滑液培养滑膜细胞，经形态学和免疫组化法鉴定其为成纤维细胞后，用RT-PCR检测其中MMPl3的mRNA表达。结果 所培养的细胞呈成纤维细胞样，Vimentin蛋白表达阳性，RT-PCR可检测到MMP13的mRNA表达，片断大小和文献报道的相一致。结论 骨性关节炎患者滑膜细胞中有MMP13的mRNA表达。     

Bak、Fas在骨关节炎软骨及滑膜中表达的实验研究

目的探讨Bak、Fas基因在骨关节炎软骨细胞及滑膜中的表达及意义。方法成年新西兰大白兔24只，根据文献采用石膏固定方法制作骨关节炎动物模型，用免疫组化、原位末端标记技术（TUNEL）等方法检测Bak、Fas在兔膝关节软骨细胞及滑膜中的表达和软骨细胞凋亡情况。结果在软骨细胞中Bak、Fas的表达实验组阳性率均高于对照组（P〈0．03）；实验组软骨细胞凋亡程度与Fas、Bak的表达均呈正相关（P〈0．03）。结论Bak、Fas基因与骨关节炎发生发展有密切关系。     

TLE1在滑膜肉瘤中的表达研究

目的:本研究旨在研究滑膜肉瘤组织中TLE1的表达,探讨其在临床病理诊断中的适用性。方法:运用免疫组织化学以及统计学方法对本院2001年至2011年期间手术切除的81例滑膜肉瘤患者进行研究和统计分析。结果:TLE1在滑膜肉瘤中的阳性率为80.2%,在双相型、单相型、差分化型中的阳性率分别为88.8%、78.9%以及68.7%;TLE1在恶性外周神经鞘膜瘤和孤立性纤维性肿瘤中的阳性率分别为12.5%和8.3%。结论:TLE1对于滑膜肉瘤的敏感性和特异性,有助于在滑膜肉瘤与其他类型肿瘤的鉴别诊断中发挥作用。     

HIF-1α及 VEGF 在类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞中的表达及意义

目的研究类风湿性关节炎（RA）患者滑膜细胞在体外常氧和缺氧培养条件下缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血管内皮生长因子（VEGF）表达的差异性及意义。方法对RA患者及骨关节炎（OA）患者的关节滑膜细胞在体外常氧和缺氧条件下分别进行培养,根据培养条件分为常氧组、缺氧6h组及缺氧12h组;采用免疫印迹法分别检测各组成纤维样滑膜细胞的HIF-1α及VEGF的表达情况。结果与常氧组相比,缺氧6h及12h的RA和OA患者滑膜细胞的HIF-1α及VEGF的表达均显著增加,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。同时RA和OA患者缺氧12h组滑膜细胞HIF-1α及VEGF的表达高于缺氧6h组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。RA和OA患者3组滑膜细胞的HIF-1α及VEGF的表达均呈正相关（均P＜0.05）。常氧组RA与OA患者滑膜细胞的HIF-1α及VEGF的表达均无统计学差异（均P＞0.05）;而缺氧6h和12h组中RA滑膜细胞HIF-1α及VEGF的表达均高于OA滑膜细胞,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论在缺氧条件下RA患者滑膜细胞HIF-1α及VEGF表达显著升高且密切相关,可能缺氧-HIF-1α-VEGF这一信号途径在RA的发生、发展中起着重要作用。     

凝血酶敏感激素蛋白酶4/5在骨性关节炎滑膜中的表达及意义

目的 研究凝血酶敏感激素蛋白酶4/5 ( ADAMTS4/5)在骨性关节炎( OA)滑膜组织及滑膜细胞中的表达及意义. 方法 取6例正常者滑膜组织和6 例OA患者滑膜组织,Western blot法检测标本中ADAMTS4/5 的表达,离体培养正常者滑膜细胞. 白介素-1β( IL-1β)刺激正常滑膜细胞,测定滑膜细胞中ADAMTS4/5的表达量;IL-1RA( IL-1β阻滞剂)抑制IL-1β后,测定滑膜细胞中ADAMTS4/5的表达量.结果 ADAMTS4/5 在OA患者滑膜组织中表达较正常者滑膜组织均显著增加;IL-1β刺激滑膜细胞后,ADAMTS4/5升高,IL-1RA可明显降低IL-1β诱导的滑膜细胞中ADAMTS4/5的表达. 结论 IL-1β可以按照剂量依赖方式正向调节ADAMTS4/5的表达;ADAMTS4/5 和IL-1β在OA病变机制中发挥重要的作用.     

能量限制条件下SIRT1和SIRT2的表达变化

目的研究不同程度的能量限制(CR)下,大鼠脑组织中SIRT1和SIRT2的表达变化。方法 60只大鼠随机分成四组:正常对照组、75%CR组(喂养食物为正常对照组的75%),55%CR组(喂养食物为正常对照组的55%)和高脂组,喂养8周。免疫组织化学检测大鼠脑组织中SIRT1和SIRT2的表达与定位。RT-PCR及Western-blot检测各实验组中SIRT1、SIRT2的表达。结果在大鼠脑组织中发现SIRT1可于细胞浆和细胞核中表达,且主要于细胞核中表达;SIRT2主要在细胞核中表达。能量限制下,与对照组相比SIRT1表达升高;高脂食物条件下,SIRT1表达相对于对照组增高,但是比CR组减少。75%CR与55%CR相比,后者中的SIRT1的表达增加更多。与对照组相比,55%CR增加SIRT1的表达差异有统计学意义(P<0.05),而75%CR和HFa增加SIRT1的表达差异无统计学意义。SIRT2在CR和HFa下表达无明显变化。结论 CR能增加SIRT1而不增加SIRT2的表达,重度CR比中等程度CR对SIRT1表达的影响更大。     

BMP-2 TGF-β1和VEGF在骨性关节炎滑膜组织中的表达

目的 探讨骨形成蛋白-2(BMP-2)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和血管内皮生长因子(VEGF)在人膝关节骨性关节炎(OA)各期滑膜组织中的表达及作用.方法 收集2012~2014年内蒙古自治区人民医院骨关节科原发性膝关节OA患者滑膜组织标本,男性35例,女性45例,作为试验组,根据Kellgren-Lawrence(K-L)分级标准将试验组分为OA1组(10例,K-LⅠ级)、OA2组(16例,K-LⅡ级)、OA3组(28例,K-LⅢ级)、OA4组(26例,K-LⅣ级).另选取4例正常膝关节滑膜作为对照组.采用免疫组织化学法观察BMP-2、TGF-β1和VEGF在各组滑膜中的表达情况.结果 与对照组各细胞因子的表达(BMP-2:0.087±0.015,TGF-β1:0.103±0.018,VEGF:0.095±0.017)比较,试验组4组滑膜中BMP-2、TGF-β1和VEGF表达率(OA1组,BMP-2:0.112±0.022,TGF-β1:0.173±0.019,VEGF:0.135±0.008;OA2组,BMP-2:0.214±0.012,TGF-β1:0.288±0.03,VEGF:0.271±0.021;OA3组,BMP-2:0.298±0.030,TGF-β1:0.416±0.032,VEGF:0.368±0.025;OA4组,BMP-2:0.330±0.024,TGF-β1:0.471±0.020,VEGF:0.300±0.033)增高(P<0.05).OA1、OA2、OA3、OA4各组滑膜中BMP-2、TGF-β1和VEGF表达水平依次递增,且差异均有统计学意义(P<0.05).结论 滑膜中高表达的BMP-2、TGF-β1和VEGF可能是OA的病理进程中的重要因素之一.     

白细胞SIRT1、SIRT4与2型糖尿病的相关性

目的 了解外周血白细胞(WBC)中SIRT1、SIRT4与2型糖尿病(T2DM)的相关性,及其能否作为检测指标用于反映T2DM患者的血糖、血脂水平以及胰岛β细胞功能.方法 收集对照组(NC组)与T2DM组的资料,用免疫细胞化学染色检测SIRT1、SIRT4在WBC(包括粒细胞、单核细胞、淋巴细胞)中的表达情况,用逆转录...     

稳定性心绞痛患者SIRT1表达与氧化应激的相关性研究

目的：检测冠心病稳定性心绞痛患者外周血单个核细胞(PBMC)中沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)蛋白表达和血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶（SOD）水平,探讨SIRT-1和氧化应激的相关性。方法：选择稳定性心绞痛患者25例,并与20名健康者（对照组）做比较。采用Western blot法检测PBMC中SIRT1蛋白表达和血清MDA、SOD水平,分析SIRT1蛋白表达和氧化应激相关性。结果：与对照组相比,稳定性心绞痛患者PBMC中SIRT1蛋白表达显著降低（P＜0.05）;血清MDA升高,SOD降低（P均＜0.05）;Pearson直线相关法分析稳定性心绞痛患者的SIRT1蛋白表达水平与血清MDA呈显著负相关（r=-0.539,P＜0.05）,与SOD呈正相关（r=0.630,P＜0.05）。结论：冠心病稳定性心绞痛患者SIRT1蛋白表达水平降低,与血清MDA呈负相关,与SOD呈正相关,提示SIRT1与稳定性心绞痛患者机体内氧化应激关系密切。     

SIRT1在胃癌组织中表达及对患者预后的影响

目的:探讨胃癌和癌旁组织中SIRT1的表达及其对患者预后的影响。方法:收集1990年1月至1995年12月142例胃癌单纯手术治疗患者的临床病理资料,术后生存随访资料,将癌组织与相对应癌旁组织制作组织芯片,通过免疫组化的方法,分别获得SIRT1在其中的表达评分。分析SIRT1表达与患者临床病理指标及预后之间的关系。结果:本研究最终获得113例患者的有效信息,SIRT1在113例胃癌组织中的表达显著低于癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.05),癌组织中SIRT1低表达患者癌体浸润深度、淋巴结转移比例、远处转移比例均显著高于高表达患者(P<0.05),pTNM分期晚期比例也高于高表达患者(P<0.05)。胃癌组织中SIRT1表达越高患者预后越好(HR=0.211,95%CI:0.124～0.360,P<0.001)。结论:胃癌组织中SIRT1表达水平与恶性表型呈负性关系,可作为预测手术治疗患者预后的生物标志物。     

骨关节炎关节液促进滑膜间充质干细胞软骨分化

目的 观察骨关节炎(OA)关节液对滑膜间充质干细胞(SDSCs)软骨分化能力的影响.方法 用OA患者手术切除的滑膜组织标本分离培养SDSCs并诱导成软骨分化.将OA患者的关节液加入诱导后的SDSCs培养液中,模拟体内的OA关节环境继续培养(实验组),以不加OA关节液的SDSCs作为对照组.测量两组SDSCs形成的软骨小球的直径,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测成软骨相关标志物COLⅡ、Aggrecan、SOX9的mRNA及蛋白表达.结果 OA关节液处理16 d后,实验组软骨小球直径大干对照组(P＜0.05),COLⅡ、Aggrecan、SOX9 mRNA和蛋白的表达均高于对照组(P＜0.05).结论 OA关节液能够促进SDSCs软骨分化.     

骨性关节炎患者关节滑液中结合珠蛋白水平与病情严重程度的相关性

目的研究骨性关节炎（osteoarthritis,OA）患者关节滑液中结合珠蛋白（haptoblobin,Hp）水平与病情严重程度的相关性,探讨Hp在OA病理过程中的作用机制。方法收集2011年7月-2012年2月在解放军总医院行关节镜诊治的41例OA患者及18例非OA膝关节疾病患者（半月板损伤16例,盘状半月板2例,均无明显关节软骨损伤）关节滑液,采用Outerbridge软骨损伤评分法对OA患者分级并记录OA患者膝关节HSS评分（美国特种外科医院膝关节评分）。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测两组关节滑液中Hp水平。比较不同程度OA患者滑液Hp水平。结果 OA组滑液中Hp水平明显高于非OA组[（23.04±13.19）μg/mlvs（7.32±3.76）μg/ml,P〈0.001]。OA组滑液中Hp水平与膝关节HSS评分呈负相关（r=-0.487,P=0.001）。结论滑液中Hp水平与OA病变严重程度呈正相关,测定OA患者滑液中Hp水平对早期诊断和有效防治具有重要意义。     

膝骨关节炎滑膜不同部位基质金属蛋白酶3的表达及临床意义

目的 研究膝骨关节炎(osteoarthritis of knee,KOA)滑膜不同部位基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)的表达强度,探索其与KOA发病机制的关系。方法 选取48例KOA患者为研究对象,膝关节镜下滑膜清理术中分别取患侧膝关节内侧间室、髌上囊及外侧间室滑膜,并将患者按综合评分方法进行临床评分。行免疫组织化学染色,比较滑膜不同部位MMP-3的表达强度,并分析MMP-3表达强度与临床评分的相关性。结果 1内侧间室滑膜MMP-3表达强度为3.45±0.22,髌上囊滑膜为2.69±0.21,外侧间室为1.99±0.16,差异有统计学意义(P=0.000)。2内侧间室及髌上囊滑膜MMP-3表达强度与临床评分呈正相关关系,相关系数分别为r₁=0.894(P=0.000)、r₂=0.803(P=0.000);外侧间室滑膜MMP-3表达强度与临床评分无明显相关性r₃=0.485(P=0.057)。 结论 MMP-3在KOA膝内侧间室滑膜的表达高于滑膜其他部位的表达,与临床表现为膝内侧症状重相符合;膝滑膜病变程度与临床评分呈正相关,为临床上有限切除滑膜病变缓解症状、改善功能提供了依据。     

miR-146 a/27 a在SD大鼠OA软骨、滑膜组织中的表达及意义

目的：观察切断前交叉韧带( ACLT)构建SD大鼠骨性关节炎( OA)模型的病理特点,并检测 miR-146a和 miR-27a在OA动物模型软骨、滑膜组织中的表达情况。方法120只SD大鼠随机分为实验组和对照组,实验组行左膝前交叉韧带切断术,对照组只打开关节腔不切断前交叉韧带,分别于术后2、4、8周获取关节软骨、滑膜组织,对软骨情况进行大体及组织学评分,应用RT-PCR检测软骨和滑膜组织中miR-146a、miR-27a的表达情况。结果实验组术后2周软骨表面粗糙,色泽灰暗,4周和8周病变程度加重,对照组关节软骨无明显退变;实验组不同时间段Mankin评分与对照组比较差异有统计学意义( P<0．01)。实验组和对照组2、4、8周时软骨组织中miR-146a的相对表达量分别为(0．58±0．13)vs(0．66±0．14)、(0．43±0．08) vs (0．68±0．12)、(0．18±0．06)vs(0．61±0．07),各个时间点差异均有统计学意义(P<0．01);同期检测到软骨组织中miR-27a、滑膜组织中miR-146a和miR-27a在实验组和对照组各时间点的表达量差异有统计学意义( P<0．01)。应用Pearson相关分析显示,miR-146a、miR-27a在软骨组织中的表达情况与 Mankin评分呈显著负相关(r=-0．92、-0．89,P<0．05),而滑膜、软骨中miR-146a和miR-27a的表达呈线性正相关(r=0．78、0．80,P<0．05)。结论 miR-146a 和 miR-27a 在 SD 大鼠OA模型软骨组织、滑膜组织中呈低表达,且与OA软骨病变程度呈负相关。     

miRNA-140、MMP-3在OA关节滑液中的表达及相关性研究

目的 比较 miRNA-140 和 MMP-3 在骨性关节炎( OA)组与非OA组关节滑液中的表达,探究miRNA-140 和MMP-3与OA的相关性. 方法 采用实时定量PCR技术检测miRNA-140、MMP-3在OA组(n=65)与非OA组(n=65)关节滑液中的表达水平,并运用 Spearman 相关分析分析miRNA-140与MMP-3的相关性. 结果 组间比较显示OA 组miRNA-140的表达显著低于非OA组(P<0. 05),MMP-3的表达明显高于非OA组( P<0. 05 ). OA组内各因子之间相关分析显示,miRNA-140 和 MMP-3 呈显著负相关性( r=-0. 693、-0. 720,P<0. 05). 结论 相对于非OA病变,OA组关节滑液中miRNA-140 低表达,MMP-3高表达,两者之间呈负相关性.     

冠状动脉粥样硬化与AMPK、SIRT1基因表达的关系初步研究

目的:通过检测冠状动脉粥样硬化患者外周血单个核细胞(PBMC)中单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)以及沉默信息调节因子2相关酶Ⅰ(SIRT1)的基因表达情况,初步探讨AMPK和SIRT1基因表达与冠状动脉粥样硬化形成以及调控血浆中一氧化氮(NO)水平、血脂、血糖代谢的可能机制.方法:利用普通PCR、琼脂糖凝胶电泳、实时荧光定量PCR及SPSS分析软件检测冠心病者和正常对照组外周血单个核细胞(PBMC)中AMPK和SIRT1的基因表达区别,以及它们与血脂(TC、TG、LDL-c、HDL-c)、空腹血糖(FBG)、一氧化氮(NO)含量的相关性.结果:冠心病组PBMC中AMPK和SIRT1基因表达以及血浆中NO含量均明显低于对照组,差异具有统计学意义(P均＜0.05).AMPK和SIRT1表达均与TC、TG、LDL-c、FBG呈负相关,与NO含量及HDL-c呈正相关(P均＜0.05).结论:冠心病患者PBMC中AMPK和SIRT1基因表达下降可能与冠心病的发病存在相关性,对调控血脂、血糖及NO生成释放中可能起到一定作用.     

应用MRI测量膝骨性关节炎滑膜厚度的方法及其临床意义

目的:探讨核磁共振成像(MRI)对膝骨性关节炎患者合并滑膜炎的严重度评估的方法及临床意义.方法:23例膝骨性关节炎患者行MRI检查.应用MRI的T2加权像检查膝关节内滑液含量和用梯度回波(GRE)检查滑膜厚度,应用ROI体积测量方法测量滑膜厚度,包括内外侧间沟和内外侧髌上囊4个区域,每个区域分0～3级,总计最大12级....