不同潮气量机械通气对大鼠肺组织HMGB1表达的影响

目的观察不同潮气量机械通气大鼠肺组织高迁移率族蛋白1(HMGB1) mRNA及其蛋白的表达水平,探讨HMGB1在呼吸机相关性肺损伤(VILI)发病中的作用。方法24只雄性Wister大鼠随机分为对照组、小潮气量组和大潮气量组,分别采用原位分子杂交技术和免疫组织化学染色法检测肺组织HMGB1 mRNA及其蛋白的表达水平。结果与对照组和小潮气量组比较,大潮气量组大鼠肺组织HMGB1 mRNA及其蛋白表达水平明显升高(均P0.01),小潮气量组与对照组各项指标比较差异无统计学意义(P0.05)。结论大潮气量机械通气可诱导肺组织HMGB1 mRNA及其蛋白高表达;HMGB1分泌增多导致肺组织炎症反应扩大,可能是呼吸机相关性肺损伤(VILI)发生的重要因素之一。     

机械通气对大鼠肺泡巨噬细胞内毒素CD14受体表达的影响

目的：探讨机械通气对大鼠肺泡巨噬细胞(alveolar macrophages，AM)内毒素受体CD14表达的影响。方法：清洁级成年雄性SD大鼠18只，随机分为自主呼吸组 （A组）、小潮气量机械通气组（S组）和大潮气量机械通气组（L组）3组，每组各6只。实验4?h结束，放血处死大鼠。测定大鼠肺病理形态学积分、肺组织湿/干重比（W/D）、支气管灌洗液（BALF）炎性细胞数和肺蛋白透性系数。RT PCR测AM上内毒素受体CD14的表达，免疫组化法测BALF里AM上的CD14表达。结果：与A组比较，L组肺病理形态学积分、W/D、WBC和肺蛋白透性系数、BALF里AM的CD14蛋白表达和CD14基因表达显著升高(P＜0.01)，S组改变差异无统计学意义(P＞0.05)。结论：大潮气量机械通气导致大鼠的肺部损伤，并使AM上CD14表达明显上调。小潮气量机械通气可避免上述改变的发生。     

不同潮气量机械通气对大鼠肺组织iNOS、NO的影响

目的 探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及一氧化氮(NO)在不同潮气量机械通气致大鼠急性肺损伤(VILI)中的作用. 方法 24只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、小潮气量组和大潮气量组,每组各8只.用SABC免疫组化染色法检测肺组织iNOS蛋白表达,用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肺组织iNOS mRNA表达,用硝酸还原酶法测定肺组织和血浆NO含量. 结果 与对照组和小潮气量组相比,大潮气量组大鼠肺组织iNOS mRNA及其蛋白表达水平以及肺组织和血浆NO含量均明显增JJU(均P<0.01);而小潮气量组与对照组各项指标比较差异无统计学意义(P>0.05). 结论 大潮气量机械通气可诱导肺组织iNOS mRNA及其蛋白高表达,产生大量内源性NO导致肺组织损伤,而小潮气量机械通气对正常肺组织无明显影响. 组化染色法检测肺组织iNOS蛋白表达,用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肺组织iNOS mRNA表达,用硝酸还原酶法测定肺组织和血浆NO含量. 结果 与对照组和小潮气量组相比,大潮气量组大鼠肺组织iNOS mRNA及其蛋白表达水平以及肺组织和血浆NO含量均明显增JJU(均P<0.01) 而小潮气量组与对照组各项指标比较差异无统计学意义(P>0.05). 结论 大潮气量机械通气可诱导肺组织iNOS mRNA及其蛋白高表达,产生大量内源性NO导致肺组织损伤,而小潮气量机械通气对正常肺组织无     

环氧化酶2抑制剂对大鼠机械通气所致肺损伤肺水代谢的影响

目的:探讨环氧化酶2 (COX-2)抑制剂对大鼠机械通气所致肺损伤(VILI)肺水代谢的影响.方法:健康成年雄性SD大鼠30只,体质量300～ 350 g,随机分为3组(n=10),对照组(TV组,潮气量8 mL/kg)、机械通气肺损伤组(HV组,潮气量40 mL/kg)、NS398预处理组(HV+NS398组).NS398预处理组于机械通气前30 min腹腔注射COX-2抑制剂NS398 8 mg/kg.于机械通气4h时处死大鼠,Western Blot法检测肺组织中水通道蛋白l(AQPl)、水通道蛋白5(AQP5)表达;检测血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白浓度,计算肺通透性指数(LPI);检测BALF中肿瘤坏死因子(TNF-α)浓度;计算肺组织湿/干重比(W/D).结果:与TV组相比,HV组BALF中TNF-α浓度增加,AQP1、AQP5表达降低(P＜0.05),LPI升高,肺组织W/D升高(P＜0.05);与HV组相比,HV+NS398组BALF中TNF-α浓度降低,AQP1、AQP5表达升高(P＜0.05),LPI及肺组织W/D降低(P＜0.05).结论:COX-2抑制剂可能通过上调AQP1、AQP5的表达,减轻肺水肿改善肺水代谢,从而减轻大鼠机械通气所致肺损伤.     

不同潮气量机械通气对大鼠肺组织Bax和 Bcl-2表达及凋亡的影响

目的：探讨不同潮气量（tidal volume,Vt）机械通气对大鼠肺组织Bax和Bcl-2表达及凋亡的影响。方法：将24只健康SD大鼠随机分成4组：对照组、低潮气量组、中等潮气量组和大潮气量组。对照组保留自主呼吸,其余组分别以不同潮气量（10,20,40 mL/kg）机械通气2 h,通气结束后24 h观察大鼠肺组织病理学改变、肺湿干比（W/D）、肺泡灌洗液（BALF）中白细胞计数、免疫组织化学法观察肺组织Bax和Bcl-2蛋白表达及评分、TUNEL染色情况。结果：与对照组比较,大、中潮气量组W/D值、BALF中白细胞计数、病理学评分、Bax蛋白表达及凋亡率（AI）均显著增加,而Bcl-2表达明显减少（P＜0.05）。与对照组相比,低潮气量组以上指标无明显变化（P＞0.05）。结论：低潮气量机械通气不引起肺损伤;较大潮气量机械通气引起肺损伤,可能与增加肺组织Bax和减少Bcl-2的表达,促进靶细胞凋亡有关。     

机械通气对急性肺损伤大鼠炎症反应的影响

目的: 评估不同潮气量对急性肺损伤(ALI)大鼠炎症反应的影响.方法: 雄性SD大鼠30只,随机分为对照组、ALI组、小潮气量(LV)组、传统潮气量(NV)组及高潮气量(HV)组5组.机械通气4 h后,进行肺组织病理切片Smith评分、肺水含量(W/D)测定、肺通透性(LPI)测定(放免法测定血浆及肺泡灌洗液中125I-白蛋白含量,计算两者比值),ELISA法测定肺泡灌洗液中TNF-α、IL-10含量.结果: Smith评分、W/DLV组较ALI、NV、HV组显著减轻.肺泡灌洗液中TNF-α、IL-10含量LV组较NV、HV组显著减低.结论: 小潮气量机械通气能减轻肺部炎症反应,从而减轻肺组织损伤,对ALI 具有保护作用.     

高浓度氧加重大鼠通气机所致肺损伤的实验研究

目的研究高浓度氧（100％）对大鼠通气机所致肺损伤（VILI）的影响。方法将48只健康雄性SD大鼠随机分为4组，行机械通气，通气时间4h。A组实施空气常规潮气量（VT=8mL／kg）通气，B组实施高氧常规潮气量通气，C组实施空气大潮气量（VT=40mL／kg）通气，D组实施高氧大潮气量通气。每小时行1次动脉血气分析，计算氧合指数（PaO2／FiO2）。行支气管肺泡灌洗液（BALF）白细胞、中性粒细胞计数，测定左肺湿干重比值（W／D），BALF中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）、巨噬细胞炎症蛋白2（MIP-2）含量以及肺组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）水平，并观察肺脏的组织病理学改变。结果组织病理学显示D组大鼠较C组肺脏内有更多的中性粒细胞浸润和肺泡壁结构的破坏。与C组比较，D组大鼠氧合指数显著下降，左肺W／D值显著升高，BALF中自细胞、中性粒细胞计数明显增加，BALF中TNF-α、IL-1β、MIP-2含量显著增高，肺组织MDA水平显著增加，SOD水平显著下降。B组与A组比较，除肺组织中MDA水平增加、SOD活性下降外，其余各项指标差异均无统计学意义。结论高浓度氧能明显加重大鼠大潮气量通气所致肺损伤，而对常规潮气量通气影响较小。     

大潮气量通气加重脂多糖所致急性肺损伤及谷氨酰胺的防护作用

目的观察不同潮气量通气对脂多糖所致大鼠急性肺损伤的影响,以及谷氨酰胺的防护作用。方法将30只健康雄性SD大鼠随机分为三组。实施麻醉和气管切开后,气管内注入脂多糖（LPS）5mg/kg,接小动物通气机进行机械通气,A组实施常规潮气量通气,B组实施大潮气量通气,C组大潮气量通气前1h静脉注入谷氨酰胺干预。每小时行1次动脉血气分析。通气4h后颈动脉放血处死大鼠。测定全肺湿重,并计算肺系数（肺湿重/体重×100）。测定BALF中白细胞及中性粒细胞计数、蛋白含量、TNF-α、IL-6和中性粒细胞趋化因子1（CINC-1）水平,肺组织匀浆髓过氧化物酶（MPO）、超氧化物歧化酶（SOD）水平。结果B组大鼠PaO2值、肺组织SOD水平较A组显著下降,肺系数、BALF中白细胞及中性粒细胞计数、蛋白含量、TNF-α、IL-6、CINC-1水平、肺组织MPO水平较A组显著增高;C组大鼠PaO2值、肺组织SOD水平较B组显著升高,肺系数、BALF中白细胞及中性粒细胞计数、蛋白含量、TNF-α、IL-6、CINC-1水平、肺组织MPO水平较B组显著下降。结论大潮气量通气能加重脂多糖所致大鼠急性肺损伤,而谷氨酰胺对此有较明显的防护作用。     

不同潮气量通气对大鼠呼吸机相关性肺损伤模型的影响

目的通过建立过度通气导致呼吸机相关性肺损伤（VILI）大鼠模型，评估不同潮气量对肺损伤的影响。方法清洁级SD大鼠随机分成对照组（A组）、正常通气组（B组）、过度通气小潮气量[潮气量（VT）=20ml／kg]组（C组）和过度通气大潮气量（VT=40ml／kg）组（D组）。机械通气组中每只大鼠采用经口气管插管。观察各组通气1、2和4h肺病理学改变、肺含水量、肺泡灌洗液（BALF）中自细胞总数（WBC）、总蛋白（Tp）、乳酸脱氢酶（LDH）含量的变化，以及两组过度通气组大鼠不同时程机械通气后3d内的死亡率。结果与A组和B组相比，两组过度通气组大鼠的肺组织湿／干比值及肺损伤评分均明显升高，BALF中的WBC计数、LDH、Tp含量显著性增加，且D组BALF中WBC计数、LDH、Tp含量较C组更高，并随着通气时间延长而增加。两组过度通气组大鼠生存率无明显差异。结论过度通气会导致严重的VILI。潮气量40ml／kg通气4h更能可靠复制VILI大鼠模型。     

丙泊酚对呼吸机所致肺损伤大鼠的保护作用及其机制

目的探讨p38信号通路在丙泊酚抑制呼吸机所致肺损伤(VILI)大鼠肺组织表达高迁移率族蛋白B1(HMGB1)中的作用。方法将32只健康SD大鼠随机分为4组,每组8只。对照组(A组)不行机械通气,保留自主呼吸;常规通气组(B组)潮气量(VT)为8ml/kg;大潮气量通气组(C组)VT为30ml/kg;大潮气量通气+丙泊酚组(D组)VT为30ml/kg,同时静脉注射丙泊酚8mg/(kg.h)。机械通气4h后处死动物,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白水平、白细胞计数以及肺湿干重比值(W/D)和中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)活性。采用Western blot方法检测肺组织HMGB1蛋白含量以及p38的激酶活性,采用RT-PCR方法检测HMGB1 mRNA的表达。应用单因素方差分析进行不同组别间的比较。结果通气4h后,与A组相比,C组总蛋白水平(1.58±0.46)g/L、白细胞计数(112.05±21.33)×107/L、肺W/D比值(8.25±0.92)、MPO活性(3.08±0.85)U/g、HMGB1蛋白(0.43±0.13)和mRNA(0.30±0.08)表达以及p38激酶活性(0.52±0.11)均明显增加(P0.05);与C组相比,D组上述各项指标的变化均明显降低(P0.05)。结论丙泊酚可改善VILI肺内炎症反应,可能与通过p38信号通路抑制HMGB1蛋白和mRNA的表达有关。     

还原型谷胱甘肽对大鼠呼吸机相关性肺损伤的保护作用

目的研究型谷胱甘肽（GSH）对大鼠呼吸机相关性肺损伤（VILI）的保护作用。方法24只健康雄性SD大鼠随机分为3组（每组n=8）,A组为自主呼吸组;B组为大潮气量机械通气组;C组为大潮气量机械通气加GSH处理组。B、C 2组呼吸参数：潮气量（VT）=30 m l/kg、频率（P）为40次/m in、通气时间为4 h。每小时行1次动脉血气分析,计算氧合指数（PaO2/F iO2）。实验完毕收集肺组织和肺灌洗液标本。光镜观察肺组织病理形态改变,免疫组化检测Fas/FasL蛋白,检测肺湿/干重比（W/D）、肺组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、肺灌洗液中白细胞计数、肿瘤坏死因子（TNF-α）和蛋白总量。结果和A组比较,B组肺组织病理学改变明显,Fas/FasL蛋白增加,W/D、白细胞计数（WBC）、TNF-α、MDA等指标升高,而SOD及通气3 h以后PaO2/F iO2下降;和B组比较,C组肺组织病理学改变明显减轻,Fas/FasL蛋白质量减少,W/D、WBC、TNF-α、MDA等指标降低,SOD、PaO2/F iO2上升。结论GSH对VILI有一定的保护作用。     

机械通气致大鼠急性肺损伤时肺组织及血MDA、SOD的变化

目的观察机械通气致大鼠肺损伤时肺组织及血MDA和SOD含量变化,探讨氧化应激在大鼠急性肺损伤发病机制中的作用。方法24只SD雄性大鼠随机分为自主呼吸组（A组）和机械通气组（B组）,每组12只。A组采用自主呼吸,B组采用大潮气量机械通气。于通气后4 h放血处死动物,收集肺组织和肺灌洗液标本,测定肺灌洗液中蛋白总量、白细胞计数和肿瘤坏死因子α（TNF-α）;测肺湿/干重比（W/D）;测定肺组织和血中MDA及SOD含量;取肺组织观察病理变化。结果与A组相比,B组肺灌洗液中白细胞计数、TNF-α和蛋白总量明显增加（P〈0.01）;肺组织和血中MDA含量上升,SOD含量下降（P〈0.01）;肺W/D增加（P〈0.01）。肺组织出现明显病理组织学损伤。结论机械通气致急性肺损伤时肺组织发生了强烈的氧化应激损伤,同时伴有机体抗氧化能力相对不足。     

参麦注射液对机械通气相关肺损伤大鼠肺炎性反应的影响

目的：探讨参麦注射液对机械通气相关肺损伤（VILI）大鼠肺炎性反应的影响。方法：健康成年雄性SD大鼠30只,体质量300~350 g,随机分为3组（n=10）：常规潮气量通气组（TV组,潮气量8 m L/kg）、大潮气量通气组（HV组,潮气量40 m L/kg）、大潮气量通气＋参麦注射液组（HS组）。HS组于机械通气前30min通过尾静脉注射10 m L/kg参麦注射液。机械通气4 h后抽取股动脉血行血气分析,留取肺组织和支气管肺泡灌洗液（BALF）,计算大鼠肺湿干重比（W/D值）和肺泡通透性指数（PPI）,测定BALF中肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素10（IL-10）浓度,测定肺组织匀浆Na＋-K＋-ATP酶活性,观察肺组织病理学变化。结果：与TV组相比,机械通气4 h后HV组Pa O2下降,W/D值和PPI升高,BALF中TNF-α、IL-1β及IL-10浓度增加,TNF-α/IL-10比值升高,Na＋-K＋-ATP酶活性降低（P〈0.05）,肺组织出现明显损伤;与HV组相比,HS组Pa O2升高,W/D值、PPI及TNF-α/IL-10比值降低,TNF-α及IL-1β浓度降低,IL-10浓度、Na＋-K＋-ATP酶活性增高（P〈0.05）,肺组织损伤程度减轻。结论：参麦注射液可减轻炎性反应,改善肺水代谢,从而减轻VILI。     

机械通气对小鼠肺损伤的初步研究

目的建立小鼠机械通气肺损伤(VILI)模型,研究大潮气量、高浓度氧疗以及不同机械通气时间对VILI的影响及其可能机制。方法将C57BL/6雄性小鼠随机分为9组,对小鼠进行机械通气,再对小鼠进行支气管肺泡灌洗,采用双抗体夹心法检测肺泡灌洗液中总蛋白含量和炎症因子水平;小鼠肺组织石蜡包埋切片后行HE染色,显微镜下观察肺组织形态变化及损伤程度。结果大潮气量组小鼠肺泡灌洗液中总蛋白、炎症因子含量明显高于低潮气量组(P<0.05);高浓度氧疗组小鼠肺泡灌洗液中总蛋白、炎症因子含量明显高于低浓度氧疗组(P<0.05),并且随着通气时间的延长而升高;与正常对照组相比,各实验组小鼠肺泡灌洗液中蛋白含量明显升高(P<0.01);HE染色显示大潮气量机械通气4 h后,小鼠肺组织肺间隔明显增厚、炎性细胞浸润以及肺泡中出现渗出物,部分肺泡中出现红细胞的渗出等。结论大潮气量、高浓度氧疗均产生了明显的VILI,主要表现为肺组织急性炎症反应、渗透性肺水肿、氧化应激反应。     

低潮气量机械通气对瓣膜置换病人肺换气功能影响的临床研究

目的以心输出量和肺换气功能为指标研究低潮气量通气对瓣膜置换病人心肺功能的影响。方法30例择期行二尖辩置换手术病人随机分成3组：常规（传统）潮气量组（组Ⅰ），潮气量9mL／kg，呼吸频率12次／min；低潮气量常规频率组（组Ⅱ），潮气量7mL／kg，呼吸频率12次／min；低潮气量高频率组（组Ⅲ），潮气量7mL／kg，呼吸频率15次／min。监测平均动脉压（MAP），放置飘浮导管监测心输出量（CO）和心指数（CI），平均肺动脉压（MPAP），肺毛细血管嵌压（PCWP），中心静脉压（CVP），体循环阻力指数（SVRI），肺循环阻力指数（PVRI）。测定动脉氧分压（PaO2）、动脉二氧化碳分压（PaCO2），以及氧合指数（PaO2／FiO2），肺泡动脉氧分压差（PA-aO2），肺内分流量（QS／QT）。结果组Ⅱ，体外循环后60min时与比麻醉后体外循环前比，氧和指数（PaO2／FiO2）显著降低（P〈0．05），肺泡-动脉氧分压差（PA-aO2）和肺内分流量（QS/QT）显著增加（P〈0.05）。组Ⅱ与组Ⅰ和组Ⅲ相比，在体外循环后60min（T4），氧和指数显著降低（P〈0．05），肺泡-动脉氧分压差和肺内分流量显著增加（P＜0．05）。结论低潮气量机械通气对循环功能无明显影响，并能保持起好通气。低潮气量常规频率通气不能减轻体外循环引起的肺换气功能损害。低潮气量高频率通气和常规潮气量通气能减轻或消除体外循环引起的早期肺换气功能损害。     

机械通气对大鼠肺组织中CC10表达的影响

目的探讨机械通气对大鼠肺组织中CC10蛋白表达的影响及CC10对肺炎症反应的影响。方法建立不同潮气量机械通气大鼠动物模型,分为对照组、小潮气量组和大潮气量组。通气4h后采用Western blot法测定肺组织CC10蛋白含量,计算细支气管上皮Clara细胞百分率;酶联免疫吸附法测定肺组织匀浆中TNF-α,MIP-2含量,对肺泡灌洗液行中性粒细胞计数。结果与对照组和小潮气量组相比,大潮气量组肺组织CC10表达降低,TNF-α、MIP-2升高,细支气管上皮Clara细胞百分率降低,差异均有统计学意义(P均<0.05);与对照组相比,小潮气量组上述指标无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论大潮气量机械通气引起肺组织中抗炎因子CC10表达减少,炎症因子TNF-α、MIP-2表达增加,肺损伤加重。     

人心房利钠肽对机械通气肺损伤大鼠肺组织NF-κB p65的表达及影响

目的 探讨人心房利钠肽（hANP）对大鼠机械通气性肺损伤（VILI）时炎症因子和NF-κB p65表达的影响.方法 采用高气道压机械通气模式制备机械通气性肺损伤模型.雄性SD大鼠30只随机分为空白对照组、机械通气肺损伤组（HV组）和人心房利钠肽组（HV＋ hANP组）.HV＋hANP组于机械通气30 min静脉注射hANP（0.1g/kg· min）,机械通气4小时时处死大鼠,免疫蛋白印迹法测定肺组织NF-κB p65的表达,酶联免疫吸附法测定肺组织TNF-a和IL-1β含量,计算肺组织湿/干重比（W/D）.结果 与TV组相比,HV组、HV＋ hANP组肺组织NF-κB p65表达明显增加,肺组织TNF-a和IL-1β含量明显上升（P＜0.05）,肺组织W/D明显升高（P＜0.05）;与HV组相比,HV＋ hANP组肺组织NF-κB p65表达明显抑制,肺组织TNF-a和IL-1β含量明显降低（P＜0.05）,肺组织W/D降低（P＜0.05）.结论 人心房利钠肽通过抑制肺组织NF-κB p65表达,减轻肺部炎症反应,从而减轻大鼠机械通气所致肺损伤.