激光共焦显微镜测量细胞内钙离子时的几个关键因素

本文根据实际经验指出应用激光共焦显微镜测量细胞内钙离子的几个关键因素,掌握这几个关键因素有助于保证实验的成功率。     

共焦显微镜与A超测量角膜厚度的对比分析

目的探讨共焦显微镜测量角膜厚度结果与A超测量结果的一致性。方法在我院行准分子激光屈光性手术的患者,包括准分子激光原位角膜磨镶术(LASIK)和准分子激光角膜上皮瓣下磨镶术(LASEK)术前检查患者中随机抽样150人(296只眼),按近视程度分为4组,分别用非接触共焦显微镜及常规接触式A超角膜测厚仪测量。将测量结果进行分组比较。结果共焦显微镜测量角膜中央厚度均值为(535.58±36.34)μm,A超测量均值为(536.73±37.18)μm。结论共焦显微镜测量角膜中央厚度结果与A超比较差异细微,且无接触、无创伤。具有准确、无创、简捷的临床特点,有较好的临床应用前景。     

共焦激光显微镜在真菌性角膜炎药物治疗中的应用观察

目的:观察共焦激光显微镜在真菌性角膜炎药物治疗中的应用效果.方法:以我院收治的真菌性角膜炎患者40例(40只眼)作为观察对象,所有患者均采用抗真菌治疗,使用共焦激光显微镜观察治疗前、治疗1周后、2周后、3周后的情况.结果:共焦激光显微镜在真菌性角膜炎药物治疗中,治疗前能够观察到真菌菌丝和炎性细胞密集,随着治疗的进展,观察到菌丝和炎性细胞逐渐减少,直至完全消失.结论:共焦激光显微镜能够观察真菌性角膜炎的药物治疗情况,根据观察结果调整用药,对患者临床用药具有指导意义.     

细胞骨架的激光共焦研究技术

激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)是细胞骨架研究的新手段,本文简要介绍了细胞骨架的共焦研究技术,包括细胞骨架的荧光标记方法和共焦图像采集与处理技术,分析了CLSM在细胞骨架研究中的优势.     

抗砷细胞内荧光物质激光共聚焦显微镜检测

目的 应用激光共聚焦显微镜检测抗砷细胞内荧光物质含量。方法 用荧光染料Rhodamine-123对抗砷细胞进行荧光染色30min,分别用维拉帕米(Verapamil)、亚砷酸钠处理细胞,单纯Rhodamine-123的抗砷细胞为对照组。应用激光共聚焦显微镜采集Rhodamine-123的荧光图像动态序列,并且记录12,24,36,48,60h等不同时段细胞内荧光强度。结果 实验组细胞染色48h后,Verapamil实验组荧光强度分别为(38.940±0.3648),(38.153±0.533),均明显高于同时间段对照组的荧光强度,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 激光共聚焦显微成像技术可用于抗砷细胞拮抗效果实时定量检测。     

激光扫描共焦显微镜在检测活体组织和细胞中的应用

激光扫描共焦显微镜(Confocal Laser Scanning Microscopy,以下简称Confocal)的功能决定了其在生物医学中的应用及独特的地位,它能对完整的活细胞和组织或固定的细胞和组织内各种结构进行定性、定量、定时和定位的测量.但其强大的定位和动态测量功能,使Confocal尤其适合于活体组织和细胞的研究.本文简单介绍一下Confocal的原理和功能,着重阐述了Confocal在活体组织和细胞中的应用.     

共焦扫描显微镜及其在生物医学研究中的应用

激光共焦扫描显微镜是一种使用光学共轭焦点技术,利用光扫描对样品进行动态测量的显微装置,与传统的光学显微镜相比,它具有较高的分辨率,较大的像对比度并可以三维成像。本文介绍了共焦扫描显微镜的基本工作原理以及其在生物医学研究领域中的应用。     

激光共聚焦显微镜的使用和管理

激光扫描共聚焦显微镜（ConfocalLaser Scanning Microscope,CLSM）,简称共聚焦显微镜,是目前生物医学领域中最先进的荧光成像和细胞分析工具之一,其应用领域日趋广泛。作为一种用于图像采集和分析的大型精密仪器,它主要由以下几部分组成：激光光源、扫描器（内装有针孔光栏、分光镜、发射荧光单色器及检测器）、荧光显微镜（装有微量步进电动机）系统、光学装置、计算机存储与处理及控制系统。其各部分设计应用了先进的激光技术、光学显微镜技术、计算机控制及图像处理技术、精密的机械技术。     

利用共焦显微镜评价长期配戴软性角膜接触镜对角膜组织的影响

共焦显微镜（confocal microscope，CM）检查是以共焦激光作为光源，进行角膜活体组织学检查，将角膜临床检查提高到细胞形态学水平的一项技术。在眼科应用十分广泛，尤其在角膜病检查方面，更是优越于传统的光学显微镜和电镜检查。无需组织切片、固定和染色就能观察到角膜内各种细胞的形态结构和动态变化。CM可以对病变进行确切的深度定位，有利于病变的前后对比。同时其特有的纵向断层扫描，可以对角膜病变实行多层次立体观察，达到类似组织切片效果。CM可以提供多种图像获取模式，如Section模式、Sequence模式、Volume模式等，实现了时间与空间的动态观察。[第一段]     

激光扫描共聚焦显微镜中荧光强度的测定条件研究

目的对应用激光扫描共聚焦显微镜进行荧光强度的测定条件做了详细的分析.方法选择和设置激光扫描共聚焦显微镜的各参数,对用间接免疫荧光法检测改性后的材料表面对人牙龈成纤维细胞分泌细胞外基质纤粘连蛋白FN和Ⅰ型胶原的影响进行荧光强度的定量.结果细胞在材料表面接种后FN的荧光染色强度在四组材料之间没有显著差异,说明材料表面化学成分的改变对FN的形成没有明显影响.但四组材料对Ⅰ型胶原分泌的影响有差异.结论选择和设置适合的激光扫描共聚焦显微镜中荧光强度的测定条件,可以真实有效的反映实验的结果.     

骨骼肌肌纤维钙火花检测中的伪彩色增强

利用激光扫描共聚焦显微镜。对经Flou-3AM染色的、人工剥离的蟾蜍骨骼肌肌纤维进行连续扫描分析，捕获电刺激后骨骼肌肌纤维中发生的钙火花现象,并通过对检测结果进行伪彩色处理，将灰度图像转换为彩色图像，从而提高了检测结果的直观性,增强了对钙火花的表达能力。     

湖北省971例产妇孕期保健与生育观分析

1992年12月1日～1993年1月30日作者对在湖北省8个县(县级市)医院或妇幼保健院分娩的971例产妇进行调查。调查方法采取问卷式,并对在院分娩的产妇逐一询问访视,调查时无拒绝合作的情况。结果分析表明,孕妇及其配偶的文化程度、职业及孕妇的生育年龄对孕妇的早产、产前检查次数、怀孕后首次接受孕检时间等均有很大影响,而且社会文化因素对农村计划生育工作的落实具有重要的现实意义。     

锰对神经元细胞内钙稳态影响的研究

目的研究锰对神经细胞内钙稳态的影响,重点观察神经元细胞钙离子浓度、Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活性的改变。方法选用原代培养神经元为模型,待细胞生长至最佳状态时,予以分组处理:锰处理组为含不同浓度氯化锰(0,25,100,400μmol/L)的培养液,培养神经细胞12h后,通过倒置相差显微镜观察细胞形态的改变,并检测神经元细胞内钙离子浓度、Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活性的变化。结果随着染Mn剂量的加大,神经元形态出现异常,细胞内钙离子浓度逐渐升高;细胞Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活性也逐渐下降。结论锰通过影响与维持钙稳态相关的酶(Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase)活性,干扰神经元细胞内钙稳态,进而造成神经元细胞损伤。     

小波变换在钙火花图像滤噪处理中的应用研究

目的：在用激光扫描共聚焦显微镜研究肌兴奋收缩偶联时,肌浆网中的钙释放（即钙火花）现象中,图像噪声的存在使图像信噪比下降．直接导致钙火花图像的某些特征细节淹没在图像噪声中而难以被辨识,进而影响对钙火花图像的识别、分析和分类,因此,减少噪声对图像的影响成了钙火花研究工作的关键。方法：依据小波变换算法（Wavelet Transform,WT）,自研软件对捕获到的钙火花图像进行分析及滤噪处理。结果：对实验获得的80余幅钙火花图像进行滤噪处理,获得了很好的效果,均可以较理想地去除噪声,增强了钙火花图像的信噪比。结论：该研究方法明显提高了钙火花检测结果的直观性,进而可以更清晰地分析研究钙火花的形态参数。     

乌贼墨对H22癌细胞内Ca2+浓度、核膜Ca2+/Mg2+-ATP 酶活性及c-jun表达的影响

利用荧光探针和免疫组织化学方法,研究了乌贼墨对Ｈ２２癌细胞内ＣＡ＾２＋浓度,核膜Ｃａ＾２＋／Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性及ｃ－ｊｕｎ表达的影响。结果发现,乌贼墨使Ｈ２２癌细胞内Ｃａ＾２＋浓度分别降低了６９％和７９％,核膜Ｃａ＾２＋／Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性分别降低了２１％和３７％,ｃ－ｊｕｎ表达明显减少。     

多溴联苯醚-153染毒对大鼠神经细胞内钙离子浓度及其相关激酶活力和含量影响的体内和体外实验研究

目的研究多溴联苯醚-153(BDE-153)对大鼠体内、体外神经细胞内钙离子浓度及其相关激酶活力和含量的影响。方法体内实验:将40只4月龄清洁级雄性SD大鼠按窝别和体重随机分为4组,分别为溶剂对照(橄榄油)组和低(1 mg/kg)、中(5 mg/kg)、高剂量(10 mg/kg)BDE-153染毒组,每组10只。在仔鼠出生第10天,采用一次性腹腔注射方式进行染毒,染毒容量为0.01 ml/g;断乳后(出生第21天)继续饲养2个月。体外实验:将神经细胞分别暴露于含终浓度0(对照)、10、20、40μmol/L BDE-153的培养基染毒48 h。测定仔鼠大脑皮质细胞和神经细胞内钙离子、钙激活中性蛋白酶(calpain)浓度和钙调神经磷酸酶(CaN)、Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶的活力。结果体内实验结果显示,与溶剂对照组比较,各剂量BDE-153染毒组仔鼠大脑皮质细胞内钙离子的浓度较低,而calpain的浓度较高,差异均有统计学意义(P0.05);Ca N和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶的活力均无明显变化。且随着BDE-153染毒剂量的升高,仔鼠大脑皮质细胞内钙离子的浓度呈下降趋势,而calpain的浓度呈上升趋势。体外实验结果显示,与溶剂对照组比较,各浓度BDE-153染毒组神经细胞内钙离子和calpain的浓度均较高,除10μmol/L BDE-153染毒组钙离子浓度外,差异有统计学意义(P0.05);且随着BDE-153染毒浓度的升高,神经细胞内钙离子和calpain的浓度均呈上升趋势。结论 BDE-153染毒可导致细胞内钙离子和calpain的浓度升高,这可能是BDE-153的神经毒性作用机制之一。     

我国罕见药物现状分析及对策探讨

目的:完善国家基本罕见药物目录,保证群众对罕见药物的可获得性;方法:通过基本药物目录中的罕见病用药,分析我国罕见药的现状及其原因.结果:国家基本药物目录中罕见药种类极少,与基本药物的"可获得性"相差甚远.结论:我国急需从罕见药的法律地位、研究生产流通和费用支付机制政策方面入手,建立具有中国特色的罕见药制度.