联合应用NGF和CNTF对大鼠坐骨神经损伤后功能恢复的影响

目的 探讨联合应用神经营养因子（Nerve growth factor,NGF）和睫状神经营养因子（Ciliary neurotrophic factor,CNFT）对大鼠坐骨神经损伤后再生及功能恢复的影响。方法 用硅胶管桥接120只大鼠左侧坐骨神经长6mm缺损，随机分为4组，分别行NGF＋CNTF、CNTF、NGF、生理盐水（NS）靶肌肉注射。术后行坐骨神经功能指数（SFI）、电生理检测、病理学检查。结果 联合应用NGF和CNTF组SFI恢复率、各项电生理及轴突图像分析指标明显优于单独用药组。结论 联合应用NGF和CNTF可明显促进大鼠坐骨神经损伤后再生与功能恢复。     

甲状腺激素在新西兰家兔面神经损伤修复中的作用

目的 观察甲状腺激素在兔面神经损伤修复中的作用.方法 25只成年健康新西兰家兔,设立正常对照组、手术对照组、T3治疗组3个实验组.制作双侧面神经横断损伤、损伤局部硅胶管套接的动物模型;其中右侧为T3治疗组,硅胶管中注入甲状腺素溶液16～18μl;左侧为手术对照组,硅胶管中注入等量生理盐水.在术后4、6周取再生面神经,电镜检测有髓轴突比率和髓鞘厚度,取脑桥中下部组织,运用免疫组织化学SP法检测面神经核运动神经元中神经营养因子NGF、BDNF表达的变化,光镜下计数两种神经营养因子标记的阳性细胞数.结果 电镜结果显示在术后4周和6周,T3治疗组的有髓轴突比率和髓鞘厚度均＞手术对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).术后4周,手术对照组和T3治疗组NGF、BDNF两种分子标记的阳性细胞数较之正常对照组增幅明显,差异有统计学意义(P＜0.01).术后6周,T3治疗后阳性细胞数NGF、BDNF比手术对照组NGF、BDNF仍有明显增加,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 面神经横断损伤后,再生室中注射T3能够促进面神经有髓轴突比率和髓鞘厚度的增加,并且增加面神经核运动神经元中神经营养因子NGF、BDNF的表达.     

肝细胞生长因子对面神经损伤修复作用的实验初探

目的：以新西兰家兔面神经切断后硅胶管神经再生腔模型，研究肝细胞生长因子（Hepatocyte growth factor,HGF）对面神经损伤后再生修复作用的影响，为临床寻找方便、有效的神经营养因子提供初步的实验依据。方法：30只新西兰家兔，双侧面神经上颊支横断后用显微外科技术将硅胶管与神经外膜缝合以形硅胶神经再生腔，一侧注入HGF为实验侧，另一侧注入生理盐水为对照侧，于术后1、2、4周分别麻醉家兔后行电生理检测，在特殊染色下进行组织形态学观察，并进行形态定量分析。结果：术后1周，实验侧与对照侧均未见再生的有髓神经纤维。术后2周，两组间即出现差异。术后4周，两组差异有显著性意义。结论：外源性追加HGF对神经再生短期内有促进作用。     

外源性睫状神经营养因子对离断面神经修复的实验研究

目的 探讨应用外源性睫状神经营养因子(CNTF)对成年猫面神经损伤后的再生修复作用。方法 猫颞骨内面神经横断损伤后端端对合,局部应用CNTF作实验组,对照组用同等量生理盐水(SAL);于术后2、4和8周各组进行电生理、免疫组织化学细胞化学技术结合免疫电镜观察及形态学分析。结果 术后2周两组电刺激面神经均未诱发面肌兴奋,有髓纤维计数实验组(834±326)、对照组(235±152)t检验(P<0.05),有显著意义。术后4周CNTF组,面神经复合肌动作电位潜伏期实验组(7.832±2.695)、对照组(16.120±3.516);有髓神经纤维数实验组(1435±318)、对照组(957±269),有显著性差异。术后8周CNTF组,面神经复合肌动作电位潜伏期实验组(3.125±0.156)、对照组(3.095±0.178),有髓神经纤维数实验组(1695±283)、对照组(1543±320),t检验(P>0.05),两组差异均无明显意义。但髓鞘厚度较均匀、结构尚完整,轴突再生明显,雪旺细胞增多。结论 局部应用CNTF在正常猫神经损伤的较早期(4周左右)有促进再生修复作用,但远期作用尚不明确。     

神经节苷脂GM1对面神经再生的影响

目的：研究局部应用神经节苷脂GM1对兔面神经损伤的修复作用。方法：将18只兔子随机分为实验组和对照组。建立兔面神经损伤后再生的实验模型，外源性给予GM1，分别于术后2周、4周、8周观察面神经的传导速度及组织学变化。结果：术后2周、4周，实验组神经传导速度、有髓神经纤维数均优于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。术后8周，实验组神经传导速度、有髓神经纤维数与对照组差异无统计学意义。结论：兔面神经横断伤后立即应用神经节苷脂GM1对面神经损伤后早期（2周、4周）再生恢复有明显的促进作用。     

牙髓干细胞对兔面神经损伤的修复作用及其机制

目的：通过手术建立兔面神经损伤模型,探讨牙髓干细胞对兔面神经损伤的修复作用,阐明其可能机制。方法：分离、培养并诱导牙髓干细胞。45只兔随机分为正常对照组、模型组和实验组,每组15只。除正常对照组外,其余各组兔沿嘴角至耳前处做长约3 cm的切口,离断面神经上颊支,建立面神经上颊支损伤的动物模型。1周后向实验组兔手术术腔部位注入0.1 mL牙髓干细胞悬液（5×10⁶个）,正常对照组兔不作任何处理,模型组兔注射等量磷酸盐PBS缓冲液。术后2周观察各组兔行为表现及面部胡须运动功能评分,HE染色观察各组兔面神经组织病理形态表现,免疫组织化学染色观察兔面神经组织中脑源神经生长因子（BDNF）和睫状神经生长因子（CNTF）阳性细胞数,透射电镜观察兔面神经组织横切片中再生神经纤维数目、纤维直径和髓鞘厚度。结果：成功分离鉴定原代幼兔牙髓干细胞,大多数呈成纤维状、长梭形。HE染色后,第3代干细胞的细胞核呈深蓝色、卵圆形,呈梭形着色深细胞为成纤维细胞样细胞。与正常对照组比较,模型组兔面部胡须运动功能评分降低（P<0.05）;与模型组比较,实验组兔面部胡须运动功能评分升高（P<0.05）。与模型组比较,实验组兔治疗10周后,再生神经纤维较多,呈束状且紧密。与正常对照组比较,模型组兔面神经组织中BDNF和CNTF阳性细胞数明显降低（P<0.05）;与模型组比较,实验组兔面神经组织中BDNF和CNTF阳性细胞数明显升高（P<0.05）。与正常对照组比较,模型组兔面神经组织横切片中再生神经纤维数目、纤维直径和髓鞘厚度明显降低（P<0.05）;与模型组比较,实验组兔面神经组织横切片中再生神经纤维数目、纤维直径和髓鞘厚度数均明显升高（P<0.05）。结论：牙髓干细胞对面神经损伤具有一定的修复作用,其机制可能与上调BDNF及CNTF表达有关联。     

CNTF在周围神经损伤及再生中的表达和分布

目的：探讨周围神经损伤及修复后神经干睫状神经营养因子（CNTF）的表达及分布，方法：以犬喉返神经损伤及修复再生为实验模型，采用原位杂交及免疫组织化学技术，结合图像分析技术检测CNTFmRNA及其蛋白反应产物的灰度及面积。结果：正常神经CNTF位于神经膜细胞中，神经切断后远段神经CNTF表达迅速下降，6周后消失，随着神经的再生CNTF表达逐渐增加，表达产物分布于包绕再生轴突及髓鞘的神经膜细胞质中，CNTF蛋白还出现于再生的轴突中，神经再生完成后，表达仍明显低于正常状态，近段神经干也出现类似远段的改变。结论：再生神经CNTF的表达呈下调型并与轴突再生有关，CNTF的重分布为神经再生提供合适的微环境。     

曲安奈德局部应用对周围神经再生影响的实验研究

目的观察曲安奈德在周围神经损伤后神经再生中的作用。方法将新西兰大白兔胫神经切断后行端-端吻合,吻合口处实验组用曲安奈德局部注射,对照组用生理盐水局部注射。于术后2、4、8、16周分别用肉眼观察和光镜观察,术后第16周进行神经电生理检查、小腿三头肌湿重比测定。结果实验组较少出现神经吻合口周围粘连,神经生长速度快,在神经传导速度、小腿三头肌湿重比、有髓神经纤维再生率等方面明显优于对照组（P〈0.01）。结论术中使用曲安奈德处理神经吻合口,能有效防止周围神经粘连,促进周围神经再生。     

红细胞生成素对体外培养许旺细胞增殖周期及其分泌神经营养因子的影响

目的观察促红细胞生成素（EPO）对体外培养许旺细胞（SCs）增殖周期及其分泌神经生长因子（NGF）和睫状神经生长因子（CNTF）的影响,探讨EPO促进周围神经再生的机制。方法对成年新西兰兔的坐骨神经进行结扎预变性,1周后取预变性的坐骨神经,剥净神经外膜,用植块法、差速贴壁法培养纯化许旺细胞,向培养基中加入不同剂量的EPO,通过流式细胞术检测细胞增殖周期分布,应用ELISA测定培养上清液中的NGF和CNTF水平。结果与对照组相比,实验组许旺细胞处于S期数量（S％）和增殖指数PrI值[（S＋G2M）％]都有明显升高,培养上清液中的NGF和CNTF水平明显增高。结论EPO可提高体外培养许旺细胞的增殖活性,并且能提高许旺细胞分泌神经营养因子的水平,这可能是其促进周围神经再生的作用机制之一。     

睫状神经营养因子对视神经损伤修复作用的研究

目的：观察睫状神经营养因子（CNTF）能否促进视神经（ON）损伤后在原中枢神经环境中再生,为临床救治提供理论依据和新的治疗途径。方法：选用成年日本青紫蓝兔22只,其中随机抽取两只做正常对照,不做任何处理;其余20只为实验组,构造视神经中度损伤模型（中号显微血管夹于视神经后3 mm处夹持20 s）。于损伤后即时、3 d、7 d、14 d各时间点给予右眼（实验眼）玻璃体腔内注射CNTF 2μl（1μg/μl）,左眼（对照眼）于同等时间点注射等量双蒸水。于损伤后3 d、7 d、14 d、28 d分别取实验眼和对照眼视神经行常规HE染色观察视神经组织学变化;免疫荧光检测观察生长相关蛋白-43（GAP-43）在视神经的表达;同时将动物实验眼及对照眼于损伤前、损伤后即刻及处死前进行视觉诱发电位（F-VEP）检查以观察兔视功能变化情况,采用SPSS 13.0统计学软件包对数据进行统计学分析。结果：HE及免疫荧光检测实验组组织学变化明显好于对照组;F-VEP检查可见视神经损伤后即时闪光视觉诱发电位波形几近熄灭。伤后1周,两组潜伏期基本恢复至损伤前水平,振幅恢复缓慢,组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）;2周以后两组间比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：睫状神经营养因子对视神经损伤有修复作用,可促进视神经轴突在原中枢环境中的再生。     

睫状神经营养因子对急性面神经损伤端侧吻合后促进再生作用的研究

目的　研究睫状神经营养因子 (CNTF)对急性面神经损伤端侧吻合后促进神经再生的作用。方法　 2 4只成年家兔随机分为 3组 ,兔双侧面神经上颊支切断后与同侧外膜开窗的下颊支作端侧吻合。右侧为实验侧 ,术后局部给予CNTF ,左侧用生理盐水作为对照侧。分别于术后 3、5、1 2周取材 ,进行大体观察和面神经功能评分、神经组织学、电生理、透射电镜等检查。结果　各组实验侧颊支有髓神经数目、运动神经传导速度、面神经功能评分均高于对照侧 (P <0 0 5 )。实验侧颊支神经成熟程度优于对照侧。结论　CNTF在提高神经端侧吻合后侧支萌出率和减轻失神经肌肉萎缩方面有积极的作用。     

外源性睫状神经营养因子对离断面神经修复的实验研究

OBJECTIVE: To study the role of extrinsic (CNTF) in the regeneration of severed facial nerve in cats. METHOD: The facial nerve in temporal bone of adult cats were severed and the severed ends were connected with CNTF or saline applied at the connection. Electrophysiological examination and immunocytochemistry were performed with immunoelectron microscope for morphological analysis at 2, 4 and 8 weeks after the operation. RESULTS: Two weeks after operation, both CNTF and saline groups failed to exhibit muscular excitement by facial nerve stimulation, but the amount of myelinated nerve fibers had statistical difference between the two groups (P<0.05). At 4 weeks, the latency of the facial muscle excitement was 7.832+/-2.695 ms in CNTF group and 16.120+/-3.516 ms in saline group, and the average number of myelinated axons was significantly different between the two groups (1,435+/-318 vs 957+/-269, P<0.05). At the 8th weeks, the latency of facial muscle excitement was reduced to 3.125+/-0.165 ms in CNTF group and to a comparable level of 3.095+/-0.178 ms in saline group (P>0.05), and the average number of myelinated axons increased to 1,695+/-283 and 1,543+/-320 respectively in the two groups (P>0.05). Significant increase of Schwann cells was noted in both groups at this stage. CONCLUSION: Local application of CNTF may enhance facial early-stage nerve regeneration in adult cats, but its long-term effects remain unclear.     

神经生长因子几丁质管修复兔面神经缺损

目的：评价神经生长因子(nerve growth factor，NGF)几丁质管在修复兔面神经缺损中的作用。方法：在16只新西兰兔的两侧面神经上颊支上分别造成8mm缺损，左侧用管腔内注入NGF的几丁质管修复，右侧用自体神经移植修复作对照。术后8周和16周分别取8只动物进行电生理和组织学检查及计算机图像分析。结果：术后8周，实验组的再生神经已通过近远中吻合口，神经纤维密集成束；术后16周，再生神经纤维的数量增加，神经纤维束增粗，形态接近于正常神经。电生理检测和图像分析显示实验组和对照组的神经传导速度和有髓神经轴突总截面积均无显著差异(P＞0．05)。结论：NGF几丁质管可为免面神经缺损提供良好的修复环境。     

乳酸-羟基乙酸共聚物导管内应用睫状神经营养因子修复猫动眼神经缺损

目的探讨乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)导管修复猫动眼神经缺损时,局部应用睫状神经营养因子(CNTF)能否促进神经再生.方法家猫22只随机分为生理盐水(NS)组、CNTF组,对照组.右侧动眼神经制成4mm缺损,NS组、CNTF组分别用PLGA导管 NS、PLGA导管 CNTF修复神经缺损;对照组不修复.比较三组猫动眼神经再生情况.结果术后14周时,NS组有7/9只猫、CNTF组有8/9只猫的动眼神经功能有一定程度的恢复,大体标本、光镜及电镜显示动眼神经再生成功;CNTF组平均轴突直径较大、轴突通过率较高,与NS组比较差异有显著性(P＜0.05).结论PLGA导管(明胶海绵、纤维蛋白胶)能有效修复猫颅内段动眼神经缺损;PLGA导管内局部应用CNTF能促进动眼神经再生.     

外源性神经节苷脂GM1对面神经再生的影响

目的：探讨神经节苷脂GM1对面神经损伤再生的影响。方法：建立兔面神经损伤后再生的实验模型，外源性给予GM1，分别在术后2，4，8周观察面神经的组织学及超微结构变化。结果：实验组术后2，4周光镜下可见大量有髓神经纤维排列整齐，髓鞘厚度增加，雪旺氏细胞多见。术后8周时实验组与对照组无明显差异。术后2，4周时，电镜观察实验组再生神经纤维增多，轴索成熟，可见雪旺氏细胞胞体完整。术后8周时实验组与对照组无明显差异。结论：神经节苷脂GM1对兔面神经损伤的早期康复有明显促进作用。