未成熟树突状细胞对T细胞活化及其IFN-γ和IL-12表达的影响

目的:探讨未成熟树突状细胞(DC)对T细胞活化及其IFN-γ和IL-12表达的影响。方法:通过诱导Lewis大鼠骨髓前体细胞,获取未成熟(iDC)和成熟(mDC)两种状态的DC;将两种DC用乙酰胆碱受体(AChR)负载后进行T细胞重复刺激、交叉刺激和无关抗原刺激试验,观察T细胞增殖情况并测定T细胞IFN-γ、IL-12的表达水平。结果:(1)AChR负载的iDC可明显抑制T细胞增殖,且这种被抑制的T细胞对AChR负载的mDC的交叉刺激也不引起增殖,但对无关抗原OVA负载的mDC的刺激可产生明显增殖。(2)与mDC组比较,AChR负载的iDC初次和重复刺激均明显抑制T细胞IFN-γ和IL-12的表达。结论:iDC可诱导抗原特异性T细胞耐受,耐受机制可能与Th1细胞因子IFN-γ和IL-12的抑制有关。     

IL-37通过作用树突状细胞调节CD8~+T细胞功能

将小鼠骨髓细胞诱导分化为DC,用IL-37处理后,流式细胞术检测细胞表面共刺激分子(CD86、CD80),RT-PCR法检测TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-12和TGF-βmRNA的表达,多重液相蛋白定量CBA试剂盒及ELISA试剂盒检测细胞上清中TNF-α、IL-6、IL-12、IFN-γ、MCP-1和TGF-β蛋白的表达。Western blotting方法检测DC中磷酸化蛋白的表达。将DC与T细胞共培养,流式细胞术检测CD8+T细胞增殖及活化程度(CFSE、CD69)。结果显示,IL-37能够降低表达CD80+/CD86+的DC数量。促炎因子TNF-α、IL-12和IL-6的表达被明显抑制,而T淋巴细胞抑制因子TGF-β明显增高。IL-37预处理的DC明显降低T淋巴细胞的增殖和活化能力。IL-37能够降低DC中磷酸化ERK和NF-κB的表达。IL-37处理的DC对CD8+T细胞产生明显抑制作用。结果表明,IL-37能够通过影响ERK和NF-κB依赖的信号通路抑制DC的成熟和免疫反应,从而抑制CD8+T细胞的活化及增殖。     

树突状细胞和免疫耐受

树突状细胞（DC）是职业抗原递呈细胞，即可触发排斥反应，又能够调节T细胞反应而产生外周免疫耐受。尽管其诱导外周免疫耐受的确切机制尚不清楚，但DC在诱导供体特异性T无反应细胞（Treg）凋亡，供体特异T调整细胞，转基因诱导耐受DC以及T辅助细胞转化方向等方面都取得了明显进展。进一步研究DC在诱导自身抗原耐受的作用机理，可以揭示DC诱导移植免疫耐受，以实现人类在不依赖免疫抑制剂的条件下产生供体特异性免疫耐受，本文拟就有关内容作一综述。     

树突状细胞与免疫耐受的研究进展

ＤＣ参与胸腺Ｔ细胞的阴性选择过程，也参与外周Ｔ细胞的致耐，ＤＣ可能是唯一具有胸腺Ｔ细胞阴性选择功能的细胞，在外周，ＤＣ通过“否决”效应，诱导Ｔ细胞失能及其他一些机制诱导耐受生成，本文就此方面研究予以综述。     

转染IL-10的树突状细胞对小鼠哮喘气道表达的影响

研究小鼠重组腺病毒载体Ad-mIL-10及其转染的树突状细胞(dendritic cell,DC)对小鼠哮喘模型气道炎症的影响,探讨其相关的发病机制。用基因工程的方法构建小鼠IL-10腺病毒重组体Ad-mIL-10,并转染小鼠骨髓来源的DC。以卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏小鼠并雾化吸入激发的方法制作小鼠哮喘模型。第一次腹腔OVA致敏后静脉给予Ad-mIL-10、Ad-EGFP、Ad-EGFP转染的DC或Ad-mIL-10转染的DC,并设立哮喘模型制作对照组,观察各组小鼠血液、肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中的CD3+T细胞中的IL-10+IL-4-的Tr细胞及IL-10+IL-4+的Th2细胞比例变化,ELISA方法测定外周血及肺泡灌洗液中的IFN-γ、IL-4、IL-10水平,以观察Th1、Th2细胞的数量、功能变化以及IL-10的变化。结果显示Ad-mIL-10、Ad-EGFP、Ad-EGFP-DC对哮喘模型小鼠体内Tr细胞和Th2细胞的数量及肺部炎症局部的Th1及Th2细胞功能无明显影响;Ad-mIL-10转染的DC可以诱导哮喘模型小鼠体内IL-4-IL-10+的Tr细胞的增加及IL-4+IL-10+的Th2细胞的减少,并抑制哮喘模型小鼠肺部Th2细胞的功能,但对Th1细胞的功能无明显影响。提示单独应用Ad-mIL-10静脉注射产生高浓度的IL-10并不能诱导Tr细胞分化和抑制Th2细胞的激活。Ad-mIL-10转染的DC可以诱导原始T细胞向Tr细胞方向分化,并抑制Th2细胞的数量和功能。     

早期脂多糖干预对大鼠树突状细胞表型和功能的影响

目的探讨早期脂多糖(LPS)干预对大鼠树突状细胞(DC)表型和功能的影响。方法用rrIL-4和rrGM-CSF体外诱导骨髓前体细胞,成熟组于第6天加入LPS1μg/mL,干预组分别于第0、3、6天连续加入LPS1μg/mL,对照组不加LPS,第7天收集细胞。采用免疫细胞化学方法、流式细胞术、同种淋巴细胞刺激试验和RT-PCR进行表型和功能鉴定。结果与对照组相比,MHC-Ⅱ、CD80、CD86、IL-12的表达和刺激同种T淋巴细胞增殖的能力在成熟组明显增高而干预组明显降低(P<0.01),Dextran-FITC摄取能力在成熟组明显降低而干预组明显增高(P<0.01)。结论早期LPS干预可抑制大鼠DC成熟,获得纯度更高的未成熟DC,为进一步研究免疫耐受奠定了基础。     

IL-7对胸腺T细胞及树突状细胞体外分化发育的影响

目的:探讨IL-7对胸腺T细胞及胸腺树突状细胞分化的影响。方法:摘取15～16日龄胎鼠胸腺进行体外器官培养(胚胎胸腺器官培养-FTOC),分别将细胞因子IL-7和培养基滴加在胸腺小叶上,12天后收集不同条件下经FTOC培养获得的胸腺细胞,流式细胞仪检测细胞表面分子CD4、CD8、CD11c、B220、Ia等的表达,通过光学显微镜观察细胞形态,通过细胞计数检测细胞数目的变化。再将经FTOC培养获得的胸腺细胞和异源的T细胞进行混合淋巴细胞反应,通过MTT法检测T细胞的增殖情况。结果:细胞计数结果表明添加外源性IL-7组的胸腺细胞数目明显减少,流式细胞仪检测结果显示其中胸腺CD4-CD8-双阴性细胞及CD8+单阳性细胞比例有所增加,而CD4+CD8+双阳性细胞比例显著下降,CD4+单阳性细胞比例没有明显变化;此外,B细胞和树突状细胞、NK细胞数量均有不同程度的增加。结论:IL-7在胸腺T细胞及胸腺树突状细胞的分化发育中发挥重要的调节作用。     

IL-10与树突状细胞的免疫调控作用

IL-10是一种重要的抗炎性细胞因子，近年发现在树突状细胞的免疫调控中具有重要作用。IL-10可抑制树突状细胞的成熟及产生IL-12，有助手树突状细胞诱导Th2反应。内源性或外源性IL-10在树突状细胞诱导无能／调节T细胞中具有重要作用。许多因素影响树突状细胞分泌IL-10，从而对疾病的发生发展产生影响。     

体外联合应用IL-10和甲基强的松龙处理树突状细胞诱导移植的免疫耐受

目的探讨体外联合应用白细胞介素10(IL-10)和甲基强的松龙(Medron)处理供体树突状细胞(DC)对小鼠皮肤移植术后免疫耐受的诱导效果,为抗移植术后免疫排斥反应治疗提供依据。方法以健康成年C57BL/6小鼠为供体。BALB/c小鼠为受体,随机分为11组。除A组外,其余各组均于皮肤移植前3d自尾静脉输入对应的供体DC。具体对应关系如下A组为空白对照,尾静脉输入生理盐水;B组为输入未修饰的DC;C1组为10μg/LIL-10处理组;C2组为30μg/LIL-10处理组;D1组为10mg/LMedron处理组;D2组为20mg/LMedron处理组;E1~E4组分别为10μg/LIL-10 10mg/LMedron处理组、10μg/LIL-10 20mg/LMedron处理组、30μg/LIL-10 10mg/LMedron处理组、30μg/LIL-10 20mg/LMedron处理组。同时设立F组,为BALB/c对BALB/c的同种同基因皮片移植。各组行皮肤移植术,观察受体移植皮片存活情况。结果相对于生理盐水组,E3组(30μg/LIL-10 10mg/LMedron处理组)的移植皮片存活时间最长,经统计学分析两种药物之间具有交互作用(P<0.05)。结论用IL-10和修饰的供体树突状细胞对受体进行预处理,可明显延长移植皮片的存活时间。     

白介素—10、树突状细胞及免疫耐受

肝脏因其固有的移植耐受性而在免疫耐受研究中受到关注。最近有人提出肝移植受中,DC可能起关键作用。DC是一类专职抗原呈递细胞,在诱发免疫反应及诱导免疫耐受中均起重要作用。IL－10作为强有力的 制因子,在肝内由多种细胞分泌,尽管IL－10能直接抑制T细胞的功能,但其免疫抑制效应也可能通过影响DC的发育分化而起作用。抑制因子作用于DC发育成熟的早期阶段,引起DC的特殊分化,从而诱导对特定抗原地免疫耐受,这可能是肝移植耐受的主要原因。     

基因修饰未成熟树突状细胞诱导移植耐受的研究进展

未成熟树突状细胞(iDC)诱导同种异体移植耐受的能力有限,它可能在活体内复杂的微环境中接受成熟信号而被诱导成熟,而具有免疫抑制功能的单基因修饰iDC可增强其诱导同种异体移植耐受的能力,但仍有一定的局限性.因而有选择的联合不同具有免疫抑制功能的基因修饰iDC可显著增强iDC诱导同种异体移植耐受的能力.     

白介素-10、树突状细胞及免疫耐受

肝脏因其固有的移植耐受性而在免疫耐受研究中受到关注。最近有人提出肝移植耐受中 ,DC可能起关键作用。DC是一类专职抗原呈递细胞 ,在诱发免疫反应及诱导免疫耐受中均起重要作用。IL 10作为强有力的免疫抑制因子 ,在肝内由多种细胞分泌。尽管IL 10能直接抑制T细胞的功能 ,但其免疫抑制效应也可能通过影响DC的发育分化而起作用。抑制因子作用于DC发育成熟的早期阶段 ,引起DC的特殊分化 ,从而诱导对特定抗原的免疫耐受 ,这可能是肝移植耐受的主要原因。     

树突状细胞共表达TGF-β和自身抗原表位的体外研究

目的　用共表达转化生长因子 β(TGF β)和实验性变态反应性脑脊髓炎 (EAE)自身抗原表位蛋白脂蛋白 (PLP)的重组腺病毒载体转染小鼠树突状细胞 (DC) ,检测转基因DC的表型特征和功能特点。方法　构建共表达TGF β和EAE自身抗原表位的重组腺病毒载体转染小鼠骨髓造血细胞培养的DC。检测重组腺病毒的转染效率、转基因DC对抗脂多糖 (LPS)促成熟的能力、介导同种异体T细胞增殖能力、抗原递呈功能的改变、吞噬功能分析及表面表达自身抗原的情况。结果　该双表达重组腺病毒能高效转染DC并得到了正确表达 ,转基因DC比对照病毒载体更能对抗LPS的促成熟作用 ,它刺激同种T细胞增殖能力和抗原特异性增殖反应均受到一定程度的抑制 ,其抗原内吞能力较对照病毒载体增高。转基因DC在表达TGF β的同时 ,表达了自身致病抗原表位。结论　TGF β和PLP/Ig DC双基因修饰的DC可使DC维持在相对非成熟状态 ,在体外诱导T细胞抗原特异性低反应性。     

树突状细胞和免疫耐受

树突状细胞 (DC)是职业抗原递呈细胞 ,既可触发排斥反应 ,又能够调节T细胞反应而产生外周免疫耐受。尽管其诱导外周免疫耐受的确切机制尚不清楚 ,但DC在诱导供体特异性T无反应细胞 (Treg)凋亡 ,供体特异T调整细胞 ,转基因诱导耐受DC以及T辅助细胞转化方向等方面都取得了明显进展。进一步研究DC在诱导自身抗原耐受的作用机理 ,可以揭示DC诱导移植免疫耐受 ,以实现人类在不依赖免疫抑制剂的条件下产生供体特异性免疫耐受 ,本文拟就有关内容作一综述。     

IL-10与树突状细胞的免疫调控作用

IL 10是一种重要的抗炎性细胞因子 ,近年发现在树突状细胞的免疫调控中具有重要作用。IL 10可抑制树突状细胞的成熟及产生IL 12 ,有助于树突状细胞诱导Th2反应。内源性或外源性IL 10在树突状细胞诱导无能 /调节T细胞中具有重要作用。许多因素影响树突状细胞分泌IL 10 ,从而对疾病的发生发展产生影响。     

半乳糖凝集素3对树突状细胞及T淋巴细胞功能影响的研究进展

半乳糖凝集素3(Gal-3)是半乳糖凝集素家族成员之一,它是半乳糖凝集素家族中唯一的嵌合型凝集素,存在于正常细胞和肿瘤细胞的胞核、胞质和细胞外基质中,能调节树突状细胞(DC)和T淋巴细胞的免疫功能,调节机体免疫应答和炎症反应。研究发现DC分泌Gal-3具有抑制自身凋亡、调节细胞因子生成以及调节T细胞应答等多种功能。同时Gal-3位于胞外和胞内对T淋巴细胞分别具有相反作用,胞外Gal-3诱导T细胞凋亡,胞内Gal-3抑制其凋亡。此外Gal-3在调节炎症反应中的起重要作用。     

浆细胞样树突状细胞与调节性T细胞在移植免疫研究中的新进展

浆细胞样树突状细胞(pDC)是一类在病毒入侵时分泌Ⅰ型IFN并介导细胞免疫应答的抗原提呈细胞,除了启动获得性免疫应答,它们在扩增调节性T细胞及介导免疫耐受方面也发挥着重要的作用。结合最新研究,此文着重介绍pDC诱导、扩增调节性T细胞及其介导免疫耐受的分子机制,并对pDC来源在介导耐受中的作用进行了介绍,其对于免疫耐受的影响与受者所处的免疫环境、免疫效应发生部位密切有关。深入研究pDC与移植免疫耐受间的密切联系将有助于探讨临床细胞免疫治疗的更多可能性。     

未成熟树突状细胞诱导异基因嵌合体的形成

目的：证实供体来源的未成熟树突状细胞（imDCs）主支免疫受体小鼠后可诱导形成基因嵌合体。方法：应用供体（C57BL／6）来源的骨细胞在体外培养出imDCs，灭活后静脉输注受体小鼠（BALB／c），并于输注后不同时间输注供体来源的骨髓细胞，检测异基因嵌合体的形成。同时比较imDCs一次免疫与多次免疫对诱导嵌合体形成的影响。结果：在imDCs免疫后3d输注骨髓细胞可诱导基因嵌体合体的形成，并持续100d以上；在免疫后5d注射骨髓细胞只能形成短暂的（＜21d）、低水平（＜1％）的嵌合状态；7d后则完全不能形成嵌合。应用一次和多次imDCs免疫均能诱导形成异基因嵌合体，且维持时间均大于100d，但其嵌合程度有显著性统计学差异（P＜0．05）。结论：应用供体来源的imDCs主动脉免疫受体可诱导形成异基因嵌合体。     

052 白介素-10、树突状细胞及免疫耐受

肝脏因其固有的移植耐受性而在免疫耐受研究中受到关注.最近有人提出肝移植耐受中,DC可能起关键作用.DC是一类专职抗原呈递细胞,在诱发免疫反应及诱导免疫耐受中均起重要作用.IL-10作为强有力的免疫抑制因子,在肝内由多种细胞分泌.尽管IL-10能直接抑制T细胞的功能,但其免疫抑制效应也可能通过影响DC的发育分化而起作用.抑制因子作用于DC发育成熟的早期阶段,引起DC的特殊分化,从而诱导对特定抗原的免疫耐受,这可能是肝移植耐受的主要原因.     

Lewis大鼠骨髓来源成熟和未成熟树突状细胞的提取与鉴别

背景：树突状细胞在未成熟阶段表现出极强的抗原吞噬功能,它可以在免疫耐受、癌症的免疫治疗等方面都表现出极大的优越性。但由于未成熟树突状细胞在生物体内含量极微,这就严重限制了它在临床、科研方面的应用。目的：提取鉴别Lewis大鼠骨髓来源成熟和未成熟树突状细胞。方法：从Lewis大鼠骨髓中分离骨髓前体细胞,应用20 ng/m L粒细胞集落刺激因子、10 ng/m L白细胞介素4培养7 d诱导为未成熟树突状细胞,然后在未成熟树突状细胞中加入1μg/m L脂多糖继续培养2 d诱导为成熟树突状细胞。采用荧光倒置显微镜观察树突状细胞形态,流式细胞仪鉴定成熟和未成熟树突状细胞表面特异性分子,ELISA检测成熟和未成熟树突状细胞培养上清白细胞介素10、白细胞介素12和白细胞介素17A因子的分泌水平,混合淋巴细胞反应检测成熟和未成熟树突状细胞对T淋巴细胞的刺激反应。结果与结论：(1)普通荧光倒置显微镜下观察树突状细胞具有明显的突起结构;(2)流式细胞仪可见未成熟树突状细胞低表达CD40、CD86等共刺激分子;相反,成熟树突状细胞高表达上述共刺激分子;(3)未成熟树突状细胞的白细胞介素10、白细胞介素17A...