一氧化氮合酶抑制剂对酒精性脂肪肝大鼠肝组织氧化抗氧化系统的影响

研究不同一氧化氮合酶(NOS)抑制剂对大鼠肝组织酒精性脂肪变及氧化抗氧化系统的影响，探讨不同来源一氧化氮(NO)在肝酒精性脂肪变中的作用。     

硅对大鼠血清一氧化氮合酶及一氧化氮的影响

目的　观察硅 ( Na2 Si O3)对血清中一氧化氮合酶 ( NOS)及一氧化氮 ( NO)浓度的影响 ,探讨其抗动脉粥样硬化 ( AS)的作用。方法　高脂饮食饲养 SD大白鼠造成高脂血症和早期 AS模型 ,造模时以 Na2 Si O3 溶液灌胃 ,1 0 w后比较各组血清中 NOS活性和 NO浓度以及动脉壁形态。结果　与正常对照组比较 ,早期 AS时大鼠血清 NOS活性下降 (分别为 2 9.2 3± 1 .837和 2 7.4 3± 2 .0 0 U/ml,P<0 .0 5) ,NO总浓度增加 (分别为35.71± 1 4.4 7和 1 90 .57± 76 .4 3μmol/L ,P<0 .0 1 )。灌胃 Na2 Si O3 溶液 ( 1 0 mg/k g.d )后 NOS及 NO总浓度均恢复到正常组水平。结论　 Na2 Si O3可调节动脉硬化大鼠体内 NO代谢 ,发挥抗 AS作用     

偏侧帕金森病大鼠尾壳核神经型一氧化氮合酶表达的变化

目的　探讨神经型一氧化氮合酶 (nNOS)在帕金森病 (PD)大鼠尾壳核内的变化。方法　通过 6 OHDA立体定向注射破坏一侧黑质 ,制备PD大鼠模型 ,采用还原型辅酶Ⅱ 黄递酶 (NADPH d)组织化学方法和形态计量学技术 ,对其尾壳核NOS阳性神经元进行观察和计数。结果　 6 OHDA注射侧尾壳核内NOS阳性神经元数量显著低于健侧 (P <0 0 5)。结论　PD脑内DA的减少与尾壳核NOS神经元的减少密切相关 ,这可能是PD发病及病情渐进发展的重要因素之一。     

一氧化氮及一氧化氮合酶抑制剂对小鼠血吸虫病肝纤维化程度的影响

目的研究一氧化氮(NO)对小鼠日本血吸虫病肝纤维化程度的影响。方法昆明小鼠经腹部皮肤感染日本血吸虫,于感染后第4周末治疗组和抑制剂组分别给予NO前体-L-精氨酸(L-Arg)及一氧化氮合酶(NOS)抑制剂-NG-左旋-硝基精氨酸甲基乙酯(L-NAME),于第10周末处死小鼠,取血,分离血清,剖取肝脏。应用病理组织学方法及生物化学方法,观察各组小鼠血吸虫病肝纤维化程度,同时测定血清NO、层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、谷-草转氨酶(AST)及谷-丙转氨酶(ALT)活性和肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量。结果小鼠感染血吸虫后,感染组肝脏有明显的纤维化,血清中HA、LN、AST、ALT等指标显著升高,肝组织内Hyp含量也明显增加。与感染组相比:L-Arg高、中剂量组肝纤维化程度评分降低显著,低剂量组虽有减轻但无统计学意义,同时,L-Arg高、中剂量组血清LN、HA、AST、ALT的水平和肝组织Hyp的含量有所降低;低剂量组HA、LN、AST、ALT的水平虽然降低,但无统计学意义,Hyp水平降低明显;抑制剂组血清LN、HA、AST、ALT含量和肝组织Hyp的水平均明显升高。血清NO的水平随着精氨酸剂量的增加而显著增加,而精氨酸抑制剂组NO的水平降低明显。结论NO能明显降低血吸虫病肝纤维化的程度和减轻肝纤维化所造成的损伤作用。     

大鼠海马脑片缺血-再灌注模型中一氧化氮及一氧化氮合酶的变化

目的 建立器官型海马脑片缺血-再灌注模型,以阐明一氧化氮和一氧化氮合酶(NOS)在脑缺血-再灌注中的作用。 方法 以12只出生7-8 d的Sprague-Dawley乳鼠制备海马脑片,根据培养时间随机分为4组,每组2个微孔膜,每个Millcell-CM微孔膜放置6张脑片,在培养液和气体界面上培养脑片,4组中每组36张脑片。培养14 d后,缺氧、缺糖30 min,再灌注12、24和36 h,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹技术,分别检测脑片组织中一氧化氮、NOS的mRNA和蛋白质水平的变化;用改良镉还原法检测培养液中一氧化氮代谢产物亚硝酸盐含量;生化法榆测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平。 结果 缺血-再灌注模型的脑片组织,诱导性的一氧化氮合酶(iNOS)和神经源性的一氧化氮合酶(nNOS)在mRNA和蛋白质水平均表达上调,培养液中一氧化氮代谢产物亚硝酸盐含量明显高于对照组,差异有显著意义(P<0.05)。同时,培养液中LDH的水平随再灌注时间的延长而升高。结论 一氧化氮及NOS在脑缺血-再灌注损伤中起着重要作用。     

诱生型一氧化氮合酶抑制剂对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的　探讨诱生型一氧化氮合酶抑制剂 (iNOSI)氨基胍 (aminoguanidine ,AG)对大鼠脑缺血 再灌注 (ischemia reperfusion ,IR)后期的保护作用。方法　采用Longa改良法 ,建立局灶缺血 再灌注模型。于再灌注即刻给予AG(10 0mg/kg ,每天两次 ) ,测定再灌注后不同时点 (6h ,12h ,2 4h ,48h ,72h ,7d)脑内NOS活性的动态变化及脑梗死体积 ,并对顶叶皮层半暗带区进行光镜下观察。结果　再灌注后 12h～ 72h ,AG治疗组NOS活性明显降低 ,梗死体积减小 ,光镜下病理学观察也表明 ,各时点AG治疗组顶叶皮层神经元变性数目及变性程度均减轻 ,微循环障碍也有不同程度缓解。结论　大鼠大脑中动脉闭塞 3h ,于再灌注即刻给予AG ,可使脑梗死体积缩少 ,使半暗带区神经元变性、微循环障碍程度减轻 ,起到对脑保护的作用。     

一氧化氮合酶在自发性高血压大鼠中的表达

一氧化氮（NO）作为一种内源性活性物质和一类新的神经递质在20世纪80年代末期引起了广泛注意,而一氧化氮合酶（NOS）作为合成NO的关键酶在心脑血管疾病的发生、发展中起着重要作用。文章就NOS及其亚型在自发性高血压大鼠心血管、神经、肾脏等组织中的表达及其意义进行了综述。     

一氧化氮合酶抑制剂对实验性大鼠结肠炎疗效的研究

背景：炎症性肠病（IBD）中，诱生型一氧化氮合酶（iNOS）合成的高浓度一氧化氮（NO）与肠道炎症和疾病活动度相关。因此抑制iNOS为肠道炎症提供了新的治疗选择。目的：评估NOS抑制剂治疗进展期结肠炎的疗效。方法：予雌性Sprague．Dawlev大鼠含30mg三硝基苯磺酸（TNBS）的50％乙醇溶液0．85ml灌肠，诱导实验性结肠炎。7天后，将大鼠随机分成4组，每组7只，每天分别腹腔注射0．9％NaCl溶液1ml（造模组）、0．2mg／kg地塞米松（DX）、5mg／kg氨基胍（AG）和35mg／kgN-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME）。另取4只正常大鼠作为正常对照组。通过肠道重量指数、溃疡面积、大体形态和组织学评分以及肠组织髓过氧化物酶（MPO）、丙二醛（MDA）、NOS和iNOS活性、血浆CD62P活性、血清NO含量测定评估疗效。结果：与造模组相比，DX组和AG组肠道重量指数、溃疡面积、大体形态和组织学评分以及肠组织MPO、MDA、NOS和iNOS活性、血浆CD62P活性、血清NO含量均显著降低，L-NAME组肠组织NOS和iNOS活性以及血清NO含量显著降低，但大体形态和组织学评分无改善。结论：选择性iNOS抑制剂AG能通过其抗炎作用减轻进展期肠道炎症，提示AG可作为IBD新的治疗选择，其疗效与DX相似。     

一氧化氮合酶抑制剂与脑缺血

在脑缺血过程中,一氧化氮（NO）的产生显著增加,对脑缺血既有保护作用又有加重损害的作用。在NO形成过程中由于一氧化氮合酶（NOS）不同,因而不同NOS抑制剂对脑缺血的作用也不尽相同,这与NOS抑制剂的类型、给药的剂量和时间以及脑缺血模型等因素密切相关。     

一氧化氮合酶抑制剂对实验性大鼠结肠炎的作用

炎症性肠病的病因和发病机制尚不清楚 ,Ｒａｃｈｍｉｌｅｗｉｔｚ等[1] 发现 ,炎症性肠病活动期患者病变肠段一氧化氮合酶(ＮＯＳ)活性和一氧化氮 (ＮＯ)生成量明显高于正常对照组 ,推测ＮＯ可能参与其发病过程。为此 ,我们使用不同剂量的ＮＧ 硝基 Ｌ 精氨酸甲酯 (ＮＧ ｎｉｔｒｏ Ｌ ａｒｇｉｎｉｎｅｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒ,Ｌ ＮＡＭＥ)抑制ＮＯＳ活性 ,以探讨ＮＯ参与炎症性肠病的可能机制与组织损伤间的关系。材料和方法一、大鼠结肠炎模型的建立和实验分组成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 5 0只 ,体重 190～ 2 30 ｇ ,随机取 10只为空白对…     

实验性心房颤动血栓形成时内皮型一氧化氮合酶和纤溶酶原激活剂抑制物-1的变化

目的研究心房颤动(房颤)犬心房心内膜一氧化氮(NO)浓度、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和纤溶酶原激活剂抑制物-1(PAl-1)蛋白表达的变化,探讨房颤左房血栓形成的可能机制。方法应用埋藏式高频心脏起搏器快速起搏心房(400次／min)6周,建立房颤犬动物模型。采用ISO-NOP3005N0敏感电极测定心内膜NO含量,Western blot和免疫组化检测eNOS、PAl-1蛋白表达,酶联免疫吸附双抗体夹心法检测血浆PAl-1含量。结果房颤组左房心内膜NO含量明显低于窦性心律组,eNOS蛋白表达下调,PAl-1蛋白表达上调,右房无明显变化。房颤组血浆PAl-1含量亦明显高于窦性心律组。结论房颤引起的左房心内膜NO含量降低、eNOS蛋白表达下调、PAl-1蛋白表达上调可能是左房血栓形成的重要原因。     

醛固酮对血管外膜诱导型一氧化氮合酶/一氧化氮通路影响的实验研究

目的观察醛固酮对血管外膜诱导型一氧化氮合酶（iNOS）／一氧化氮（NO）通路的影响及作用机制。方法取sD大鼠胸主动脉外膜,分别给予不同浓度醛固酮（ALD）10^-8～10^-6mol／L、ALl）＋螺内酯以及ALD＋RU486进行孵育,此外在给予脂多糖激活血管外膜iNOS／NO的情况下,观察以上各组药物刺激后iNOS／NO系统的变化。与上述药物共同孵育6h后通过Griess法测定相对稳定的代谢产物硝酸盐和亚硝酸盐（NOx）代表NO的产生量,采用[^3H]-L-精氨酸标记的同位素法测定外膜iNOS活性。结果（1）NOx产生的变化：ALD刺激后血管外膜NOx生成无明显变化。用螺内酯拮抗盐皮质激素受体后,高浓度ALD组（10～～10^-6mol／L）血管外膜NOx产生呈下降趋势（P〈0．05）。用RU486拮抗糖皮质激素受体后随ALD浓度增加NOx生成量也呈浓度依赖性增加（P〈0．01）。脂多糖刺激后上述趋势更为明显。（2）iNOS活性的变化：ALD刺激后iNOS活性无明显变化,螺内酯刺激后血管外膜iNOS活性有下降趋势,但无统计学意义。而RU486刺激后血管外膜iNOS活性显著增加（P〈0．05）。同时给予脂多糖刺激后,螺内酯＋ALD组血管外膜iNOS活性显著下降（P〈0．01）,ALD＋RU486组血管外膜iNOS活性显著增加（p〈0．05）。结论ALD主要通过盐皮质激素受体和糖皮质激素受体通路两种途径直接影响血管外膜iNOS／NO系统,醛固酮作用于盐皮质激素受体能够诱导iNOS激活、刺激NO产生,作用于糖皮质激素受体抑制iNOS／NO激活。     

不同中医治法对帕金森病大鼠氧化应激反应的影响

目的研究不同中医治法对帕金森病大鼠氧化应激反应的影响。方法采用经典的6-羟基多巴胺损毁注射法制作PD模型,并应用活血化瘀（代表方桃红四物汤）、涤痰熄风（代表方涤痰汤）、滋阴熄风（代表方天麻钩藤饮）和复合治法（代表方复方地黄方）等不同治法的方剂进行治疗,同时设立正常对照组、假手术组作对照。测定大鼠中脑黑质纹状体部位丙二醛、谷胱甘肽含量,谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶的活性。结果模型组SOD、GSH、GSH—Px下降,MDA升高。各中药组均可以改善模型组的异常变化,差异均有统计学意义（P〈0．05,或P〈0．01）。桃红四物汤组与涤痰汤组比较,各指标差异均无统计学意义（P〈0．05）。天麻钩藤饮组与桃红四物汤组比较,在SOD、MDA、GSH指标上差异均有统计学意义（P〈0．05,或P〈0．01）;与涤痰汤组比较,在SOD、MDA指标上差异均有统计学意义（p〈0．05）。复方地黄方与桃红四物汤比较,在SOD、MDA和GSH—Px指标上差异均有统计学意义（P〈0．05,或P〈0．01）;与涤痰汤比较,在SOD、MDA和GSH指标上,差异均有统计学意义（P〈0．01）;与天麻钩藤饮比较,在GSH指标上,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论各种治法均有明显的抗氧化应激损伤的作用,但以复合治法为好。     

基因芯片技术分析老年冠心病患者的易感基因

目的 研究血管紧张素转换酶（ACE）、血管紧张素原（AGT）及内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因多态性与老年人冠心病（CHD）的关系.方法 选择老年CHD患者100例及对照者91例,应用基因芯片技术检测ACE、AGT和eNOS基因多态性,并比较其基因型及等位基因频率。结果 CHD组ACE DD基因型频率（28.0%）与对照组（15.4%）比较，差异有统计学意义（P＜0.05）,ACE基因多态性与老年CHD相关.AGT TT基因型频率（75.0%）与对照组（51.7%）比较，差异有统计学意义（P＜0.01）,AGT基因多态性与老年CHD相关.eNOS TT基因型频率（5.0%）与对照组（0.0%）比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。同时携带ACE DD和AGT TT基因型或AGT TT和eNOS TT基因型者与老年CHD呈显著正相关（OR=2.9,P＜0.05,OR=1.1,P＜0.05）。结论 ACE和AGT基因多态性可能是中国老年人CHD的危险因素。     

阿托伐他汀对冠心病患者血清一氧化氮及一氧化氮合酶含量的影响

目的　观察阿托伐他汀对冠心病患者血清一氧化氮 (NO)及一氧化氮合酶 (NOS)含量水平的影响。方法　对用阿托伐他汀治疗的 79例冠心病患者依据是否合并高胆固醇血症分为两组 ,对其治疗前后血清 NO及 NOS含量水平进行对比分析。结果　不论是否合并高胆固醇血症的冠心病 ,阿托伐他汀均可升高其血清 NO及 NOS水平。结论　阿托伐他汀可通过调脂治疗抑制脂质的过氧化反应 ,保护血管内皮功能 ,但其保护内皮功能的作用不受患者是否存在高脂血症的影响 ,改善内皮功能 ,对冠心病的防治具有重要意义。     

血管内皮型一氧化氮合酶基因Glu298Asp多态性与老年心肌梗死的关系

目的　探讨老年人血管内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)基因Glu2 98Asp多态性的分布及其与老年人心肌梗死的关系。　方法　测定 37例老年心肌梗死患者和 172例性别、年龄相匹配对照者的身高、体重、空腹血脂等指标 ,采用聚合酶链反应 (PCR)和限制性片断长度多态性 (RFLP)检测eNOS基因Glu2 98Asp多态性。　 结果　患病组Glu/Asp基因型高于对照组 (32 4 %和 18 0 % ) ,两组eNOS基因Glu2 98Asp多态性构成差异有显著性 (χ2 =3 87,P <0 0 5 )。无高血压患病亚组Glu/Asp基因型高于无高血压对照亚组 (35 0 %和 10 9% ) ,两亚组Glu2 98Asp多态性构成差异亦有显著性 (χ2 =7 4 3,P <0 0 1)。患病组 2 98Asp等位基因频率高于对照组 (16 2 %和 9 0 % ,P >0 0 5 ) ;无高血压患病亚组 2 98Asp等位基因频率亦高于无高血压对照亚组 (17 5 %和 5 4 % ) ,两组比较差异有显著性 (χ2 =6 82 ,P <0 0 1)。　结论　eNOS基因Glu2 98Asp多态性在中国老年人群中存在 ,Glu/Asp基因型和 2 98Asp等位基因可能是中国老年人心肌梗死的遗传易感指标。     

Effects of nitric oxide synthase inhibitor to esophagus in a feline esophagitis model

The present study explores the effects of nitric oxide synthase inhibitor on esophageal motility in a feline model with esophagitis. Perfusion of the esophagus with acid produced inflammatory changes of esophageal mucosa. The esophageal motility was measured before and after the perfusion. One group of cats was given nitric oxide inhibitor orally at the same time as the perfusion of acid. The control group was given water instead. Esophagitis impairs the motility of the esophagus. However, the esophageal motility of the cats that were given nitric oxide synthase inhibitor decreased less than that of the control group. The results suggested that during esophagitis there is an alteration of the nitric oxide synthase/nitric oxide pathway in the esophagus, which may be one of the important mechanisms of esophageal motility dysfunction.     

BXSB小鼠肾组织诱生型一氧化氮合酶的异常表达及甲泼尼龙干预效应

目的探讨诱生型一氧化氮合酶(iNOS)是否参与介导BXSB小鼠狼疮肾炎(LN)及甲泼尼龙(MPS)是否可通过影响iNOS表达而缓解LN。方法用MPS对BXSB自发狼疮小鼠进行体内实验,利用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学技术研究了MPS对狼疮小鼠肾脏iNOS表达的影响,并观察了狼疮小鼠MPS治疗前后24h尿蛋白和NO3-/NO2-排泄量。结果BXSB狼疮小鼠肾组织检测到了iNOSmRNA的表达,而BALB/C小鼠未见表达;免疫组织化学示iNOS表达于BXSB小鼠肾小管上皮细胞、血管内皮细胞、肾间质及肾小球浸润的炎症细胞胞质内。MPS治疗组BXSB狼疮小鼠肾组织iNOSmRNA表达量显著低于未治疗组(P<0.01);治疗组24h尿蛋白及NO3-/NO2-排泄量显著低于未治疗组(P<0.01,P<0.05)。结论iNOS及其合成的一氧化氮(NO)可能参与介导了LN。MPS可能通过抑制肾组织iNOS的表达缓解LN。     

流体切应力对内皮祖细胞内皮型一氧化氮合酶基因表达和一氧化氮分泌的影响

目的本研究旨在观察不同切应力对内皮祖细胞内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因表达和一氧化氮（NO）分泌的影响,以探讨流体切应力对内皮祖细胞功能的调节作用。方法诱导健康成人外周血的单个核细胞分化为内皮祖细胞,分为静态组、低切应力组（5dyn／cm^2,1dyn／cm^2=0．1Pa）、中切应力组（15dyn／cm^2）和高切应力组（25dyn／cm^2）4个不同处理组,观察不同切应力对内皮祖细胞eNOS基因表达和NO分泌的影响。结果外周血单个核细胞分化成为内皮祖细胞,倒置荧光显微镜下呈典形的“纺锤样”梭形细胞,ac-LDL吞噬及lectin抗体荧光标记双阳性,FLK-1和vWF免疫荧光抗体染色均为阳性。切应力处理4h,低、中和高切应力组内皮祖细胞eNOS／β-肌动蛋白基因表达比值分别为0．364、0．505和0．548,较静态组（0．183）明显高（P〈0．05）。在切应力处理的各时间点,低、中和高切应力组内皮祖细胞NO分泌也较静态组明显升高（P〈0．05）。结论流体切应力提高明显上调内皮祖细胞eNOS基因表达和促进其NO分泌,提示流体切应力可改善内皮祖细胞的功能活性,是提高内皮祖细胞修复血管内皮损伤能力的有效方法之一。     

赛格列酮对HUVECs表达eNOS和NO生成的作用

目的探讨过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPARγ)激动剂赛格列酮,对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)表达一氧化氮合酶(eNOS)及其一氧化氮(NO)生成的影响。方法体外培养HUVECs,用1×10-6～10-4mol/L赛格列酮预处理HUVECs24h,再与10-7mol/LAngⅡ共同孵育12h;通过RT-PCR和WesternBlot分别检测eNOSmRNA和蛋白表达水平;通过Griees反应测定上清NO释放量。结果与无刺激组比较,10-7mol/LAngⅡ刺激HUVECs12h后明显抑制eNOSmRNA及蛋白表达,P<0.001;基础状态下,HUVECseNOSmRNA及其蛋白表达较强,10-7mol/LAngⅡ刺激12h后明显下调eNOSmRNA和蛋白表达(与对照组相比,P<0.001)。各浓度赛格列酮预处理24h明显减弱AngⅡ对HUVECseNOSmRNA的下调作用(与AngⅡ组相比,P<0.001)。同样赛格列酮也明显减弱AngⅡ对HUVECseNOS蛋白表达的下调作用(与AngⅡ组相比,0.1、1μmol/L时P<0.01,10、100μmol/L时P<0.001,但0.1、1、10μmol/L赛格列酮组间比较P>0.05)。与无刺激组比较10-7mol/LAngⅡ明显减少NO的释放,P<0.05;与AngⅡ组比较,赛格列酮干预24h后呈浓度趋势增加NO的释放,P<0.001。结论赛格列酮呈浓度效应上调HUVECs表达eNOS,并呈浓度趋势增加内皮NO的释放。