NF-κB/REL激活的信号机制

NF-κB/REL蛋白是进化学上高度保守的一种免疫反应介质。多种不同的刺激信号都可激活核转录因子参与细胞的生长、分化、发育、凋亡、粘附及炎症反应。激活NF-κB的信号机制十分复杂。不同的刺激信号,不同的细胞种类,以及细胞不同的状态所涉及的NF-κB激活的具体信号通路有可能不同。随着一些IκB家族成员激酶的鉴定及其相关敲剔基因模型的建立,人们对NFκB激活的信号机制有了更深入、全面的认识。     

Akt/NF-κB信号途径参与免疫复合物诱导肾小球系膜细胞表达趋化因子

目的探讨Akt/NF-κB信号途径在免疫复合物(ICs)诱导肾小球系膜细胞(MC)表达趋化因子中的作用.方法 体外培养小鼠MC.对照组0.5%(v/v)lipofectin作用8h后IgG单体刺激;刺激组0.5%(v/v)lipofectin作用8h后AIgG(一种标准的ICs模型)刺激;反义、正义、错义寡核苷酸组 0.5%(v/v)lipofectin转导Akt1反义、正义、错义寡核苷酸8h后AIgG刺激.ELISA法检测单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、巨噬细胞集落刺激因子(CSF-1)浓度, mRNA半定量用RT-PCR.EMSA法检测NF-κB活性.结果 MC有低水平NF-κB活化和组成性MCP-1、CSF-1 mRNA及蛋白表达.AIgG刺激后, NF-κB活化增强(0.35±0.06 vs 0.75±0.16, P＜0.01), MCP-1和CSF-1 mRNA表达上调(0.48±0.03 vs 0.72±0.02,P＜0.05;0.44±0.01 vs 0.59±0.02, P＜0.05),蛋白分泌增多(15.52±1.81 vs 43.05±3.18,P＜0.05; 389.06±13.75 vs 764.22±31.78,P＜0.05).Akt1反义寡核苷酸显著抑制AIgG诱导NF-κB活化(0.37±0.05 vs 0.75±0.16, P＜0.01)、MCP-1和CSF-1 mRNA(0.52±0.02 vs 0.72±0.02, P＜0.05; 0.44±0.01 vs 0.59±0.02, P＜0.05)及其蛋白(15.47±2.23 vs 43.05±3.18,P＜0.05;412.49±9.76 vs 764.22±31.78,P＜0.05)表达.正义、错义寡核苷酸无此作用.结论 Akt/NF-κB信号途径参与ICs诱导MC表达趋化因子MCP-1和CSF-1,提示此信号途径可作为抑制免疫复合物性肾小球肾炎炎症细胞浸润的一个新的治疗靶点.     

NF-κB信号途径在小鼠狼疮性肾炎发病中的可能作用

目的:探讨NF-κB信号途径在小鼠狼疮性肾炎发病中的可能作用。方法:选取16周龄的雄性BXSB小鼠(狼疮性肾炎模型组)和同周龄C57BL/6小鼠(正常对照组)作为研究对象,透射电镜和PAS染色观察肾组织的超微结构形态改变;RT-PCR技术检测小鼠全血中HMGB1mRNA的表达变化。采用ELISA方法检测血清中HMGB1蛋白浓度;免疫组织化学检测肾组织中HMGB1和PCNA蛋白的表达变化;Western blot和流式细胞术检测肾组织中RAGE、p-NF-κB和IκB蛋白的表达。结果:16周时,与正常的C57BL/6小鼠相比,BXSB小鼠血清中BUN水平及尿中微球白蛋白水平明显升高;与正常的C57BL/6小鼠相比,BXSB小鼠全血中HMGB1mRNA水平和血清中HMGB1蛋白浓度明显升高;16周时,与正常的C57BL/6小鼠相比,BXSB基底膜明显增厚,部分足突融合,内皮细胞下可见团块状电子致密物沉积;与正常的C57BL/6小鼠相比,BXSB小鼠肾组织的肾小球中可见较多的PCNA阳性表达,肾小管上皮细胞核内也可见少量的表达;BXSB小鼠肾组织中HMGB1蛋白表达升高,HMGB1蛋白尤其在细胞增生明显而肥大的肾小球呈高表达,主要位于细胞浆和细胞外;而在C57BL/6小鼠肾脏组织中以小管细胞核表达为主;与对照组相比,BXSB小鼠肾组织p-NF-κB和RAGE蛋白表达明显升高;而IκB蛋白表达明显降低;HMGB1蛋白与p-NF-κB蛋白表达呈显著正相关(r=0.833,P=0.000);p-NF-κB蛋白与RAGE蛋白表达呈显著正相关(r=0.621,P=0.018);HMGB1蛋白与RAGE蛋白表达呈显著正相关(r=0.848,P=0.000);p-NF-κB蛋白与IκB蛋白表达呈显著负相关(r=-0.759,P=0.002)。结论:HMGB1在小鼠狼疮性肾炎中的致炎作用可能部分通过结合其受体RAGE,激活NF-κB信号途径,促进肾小球固有细胞的增生,从而导致增生性肾小球肾炎形成而实现的。     

牵张刺激诱导心肌细胞NF-κB的激活与转位

应用免疫组化方法观察牵张刺激对心肌细胞中NF-κB分布的影响,探讨牵张刺激对心肌细胞NF-κB的激活作用.结果显示,未受牵张与牵张1小时的心肌细胞中,NF-κB位于胞浆,牵张3小时的心肌细胞中NF-κB位于胞浆及核膜周围,牵张5小时的心肌细胞中,NF-κB位于胞核.表明心肌细胞受到一定的牵张刺激后,NF-κB可以被激活而由胞浆转位到胞核.     

Akt/NF-κB信号途径在免疫复合物诱导肾系膜细胞增殖中的作用

目的 :观察免疫复合物 (IC)能否诱导体外培养的肾小球系膜细胞 (MC)增殖及其Akt/NF κB信号在其中的作用。方法 :实验设对照组、刺激组及Akt1正义 (SODN)、错义 (MSODN)与反义寡核苷酸 (ASODN)组。寡核苷酸组 :以lipofectin分别介导Akt1SODN、MSODN、ASODN转染MC 8h ;对照组和刺激组 :以lipofectin作用MC 8h。然后刺激组和寡核苷酸组均用聚合IgG(aggregatedIgG ,AIgG ,一种标准的IC模型 )刺激 ,对照组用等量的单体IgG刺激。用MTT比色法检测细胞的增殖 ,流式细胞术分析MC的细胞周期 ,RT PCR分析mRNA的表达 ,Westernblot检测蛋白的表达 ,电泳迁移率变动实验 (EMSA)检测NF κB的活性。结果 :IC可诱导MC中NF κB的活化 ,上调细胞周期蛋白cyclinD1的mRNA及蛋白表达 ,促进MC进入S期。Akt1ASODN可抑制Akt1蛋白的表达 ,抑制IC诱导的MC中NF κB活性 ,抑制cyclinD1mRNA及其蛋白的表达 ,进而抑制IC促进MC进入S期和增殖。Akt1SODN、MSODN则无上述抑制作用。结论 :IC可通过Akt/NF κB信号途径 ,介导体外培养的MC增殖。提示Akt/NF κB信号途径 ,可作为干预IC诱导MC过度增生的一个新的治疗靶点。     

NF-κB信号转导途径与炎症性疾病

核因子κB广泛存在于胞浆中,通常以p65-p50二聚体的形式存在,与抑制物IκB结合而呈非活性状态。NF-κB信号转导途径能被TNF-α、IL-1、神经生长因子等多种因素激活。激活后NF-κB信号转导途径能够调节包括生长因子、转录因子、细胞素、趋化因子、抗凋亡蛋白等在内的基因转录。NF-κB信号转导途径参与了炎症、细胞凋亡、免疫反应等病理过程。其与炎症性疾病关系密切,深入了解NF-κB信号转导途径,有助于阐明某些炎症性疾病的发病机制以及为某些炎症性疾病提供新的治疗靶点。     

NF-κB与TNF诱导的细胞凋亡

不同类型的细胞对于TNF-α诱导的细胞凋亡的敏感性可以有很大差别,但是多数的细胞在同时给予蛋白质合成抑制剂处理时会对TNF-α变得非常敏感。有学者认为有一个基因或一组基因在TNF受体活化后被诱导而传导细胞凋亡信号。近期的研究表明,一种被TNF激活的NF-κB转录因子在这一过程中起部分的作用。该发现把NF-κB原先只作为免疫和炎症反应调控因子的功能拓宽到了也可参与细胞凋亡的调控。     

NF-κB超抑制物IκBαM重组腺病毒的构建

目的 在克隆IκBα基因并构建IκBαM的基础上，构建重组腺病毒AdIκBαM。方法 将IκBαM克隆至穿梭质粒，线性化后与骨架质粒共同转染BJ5183菌，构建重组腺病毒质粒。酶切及PCR法鉴定；将其线性化后转染293细胞，观察绿色荧光以确定转染结果，以Western blot法检测目的基因表达。结果 凝胶电泳及行酶切鉴定表明同源重组成功；一PCR产物测序证明确为lxBaM；以重组腺病毒质粒转染293细胞，见绿色荧光；感染293细胞得到大量病毒。结论 成功构建了IκBαM重组腺病毒，为进一步研究奠定了基础。     

心肌NF-κB与疾病

NF κB被认为是近十年最有研究潜力的调节免疫反应、应激反应、凋亡和炎症的核转录因子。衰老、心肌缺血再灌注及心肌预适应、凋亡、心衰等与心肌细胞核转录因子NF κB的变化关系密切。     

SUMO化修饰对高糖诱导的大鼠肾系膜细胞IκB/NF-κB信号的影响

目的 探讨小泛素相关修饰物(SUMO)修饰对高糖诱导的肾系膜细胞IκB/NF-κB信号的影响.方法 体外培养正常大鼠肾小球系膜细胞,设对照组、不同浓度高糖干预组和渗透压对照组,用免疫共沉淀检测SUMO1,SUM02/3蛋白与IκBα蛋白的相互作用;免疫印迹检测IκBα、NF-κB P65蛋白表达.结果 高糖特异性地减弱肾系膜细胞SUMO2/3与IκBα蛋白间的相互作用(P＜0.05);高糖呈浓度-时间依赖性促进IκBα泛素化降解(P＜0.05),同时上调NF-κB P65表达(P＜0.05).结论 高糖特异性减弱IκBα的SUMO化修饰,可能介导了肾系膜细胞、NF-κB信号的激活,参与了糖尿病肾病的发病.     

NF-κB/IκB:重要的转录调节因子

核转录因子ｋａｐｐａ Ｂ（ＮＦκＢ）是一组重要的转录调节因子,可在免疫刺激剂等多种因素作用下激活而调节基因的转录,参与调节许多与免疫功能和炎症有关的基因。ＩκＢ（Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ＮＦκＢ）是其抑制分子,对其激活的调控起着关键作用。本文综述了ＮＦκＢ激活及调控的有关机理,为对其进一步研究提供理论依据。     

NF-κB与神经退行性疾病

NF-κB 是一种具有多向转录调节作用的蛋白质.它分布广泛,并调节多种基因的转录调控,参与炎症反应、免疫应答以及细胞的增生、转化和凋亡等重要的生理病理过程.最近研究表明, NF-κB与中枢神经系统中神经细胞的生长、发育、塑型有关,并在急、慢性神经退行性变如脑损伤、脑缺血、癫痫、阿尔茨海默病及帕金森病等病理过程中起重要作用.     

NF-κB的生物学功能

NF κB因其广泛参与机体的免疫及其它应激反应而受到人们的关注 ,其常见的形式是由p5 0和p6 5组成的异源二聚体。细胞受到外部因素刺激后 ,NF κB由细胞质转移到细胞核中 ,并发生磷酸化和乙酰化 ,启动相关基因的表达。目前研究表明受NF κB调节的基因有 2 0 0多种 ,其激活因子不少于 15 0种 ,所以对NF κB在各种条件下的激活过程及信号传导网络的研究具有重要的意义。本文综合了当前关于NF κB研究的最新进展 ,着重阐述了由TNF α、IL 1及LPS刺激而引起NF κB激活的信号传导通路 ,并进一步阐述了其在人类某些疾病当中的生物学功能     

IL-17通过NF-κB信号通路参与胃癌发生发展的免疫调控

目的探讨白介素-17(IL-17)通过NF-κB信号通路参与胃癌发生的分子机制。方法选取甘肃省武威肿瘤医院胃癌患者30例及同一时间在医院体检的健康人30名;酶联免疫吸附法检测胃癌患者及健康人血清中IL-17、IL-6和IL-8的表达;用HE染色法观察胃癌患者胃组织病理学变化;免疫组织化学法检测胃癌患者的胃癌组织、癌旁组织及远离癌组织的胃组织中IL-17、NF-κB p65、IKK-β和IL-6的表达。Western blot检测胃癌患者的胃癌组织、癌旁组织及远离癌组织的胃组织IL-17、NF-κBp65、pNF-κB p65、IKK-β和IL-6的表达。结果与对照组相比,IL-17、IL-6和IL-8与在胃癌患者血清中表达上调(P0.05);IL-17、NF-κB p65、IKK-β和IL-6在胃癌组织中的表达明显高于正常及癌旁组织(P0.05)。与正常胃组织相比,胃癌组织中IL-17、NF-κB p65、pNF-κB p65、IKK-β和IL-6表达增加(P0.05);癌旁组织中pNF-κB p65、IKK-β和IL-6表达增加(P0.05)。与癌旁组织相比,胃癌组织中IL-17、NF-κB p65、pNF-κB p65、IKK-β和IL-6表达增加(P0.05)。结论 IL-17可能通过NF-κB信号通路刺激IL-6参与胃癌的免疫调控以及促进胃癌的发生发展,为胃癌发病机制提供新的见解。IL-17可能作为胃癌的临床治疗潜在靶点。     

NF-κB拮抗措施的研究进展

核因子-κB(NF-κB)是一种重要的转录调节因子,NF-κB过度激活与多种疾病有关.因此,针对NF-κB激活途径中的不同环节为靶点进行拮抗,可以治疗与之相关的疾病.本文就近年来抑制NF-κB活化的拮抗措施作一简要综述.     

NF-κB的激活及阻断策略的研究进展

核因子-κB(NF-κB)是一种重要的转录调节因子,它的活化是涉及多种分子的复杂过程.其过度激活与多种疾病相关,尤其是在肿瘤细胞的发生及抗凋亡的过程中起重要作用.因此,针对NF-κB激活途径中的不同环节、以NF-κB为核心进行阻断,可以导致肿瘤细胞的凋亡.     

NF-κB与心血管疾病

NF-κB是调节细胞基因转录的关键因子之一。它参与许多基因,特别是与机体防御功能有关的即早基因的表达调控。本文综述NF-κB的刺激因子及靶基因,NF-κB在血管内皮细胞、平滑肌细胞中的作用及与动脉粥样硬化、缺血再灌注损伤的关系。     

羟基喜树碱通过激活NF-κB诱导人乳腺癌Bcap-37细胞凋亡

 目的: 探讨NF-κB信号转导途径在羟基喜树碱诱导人乳腺癌Bcap-37细胞凋亡中所起的作用。方法: 突变IκB-α-pcDNA3.1(-)质粒转染Bcap-37细胞，并用G418进行阳性克隆选择；采用MTT法测定细胞的增殖活力，琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡，流式细胞仪进行细胞周期分析，Western blotting法和DIG-EMSA研究细胞凋亡途径。结果: 羟基喜树碱对Bcap-37有明显的生长抑制作用，琼脂糖凝胶电泳检测到典型的DNA梯状条带；羟基喜树碱可通过降解IκBα 蛋白进而激活NF-κB，并使NF-κB发生核移位；羟基喜树碱没有激活突变IκB-α-pcDNA3.1(-)质粒转染细胞的NF-κB，并且转染细胞凋亡受到抑制。结论: 羟基喜树碱对Bcap-37有明显的生长抑制和诱导凋亡作用；NF-κB 信号转导途径在羟基喜树碱诱导人乳腺癌Bcap-37细胞凋亡中起着促进凋亡的作用。     

NF-κB与类风湿性关节炎

转录因子核因子 κB(nuclearfactor κB ,NF κB)是普遍存在的真核细胞转录因子 ,在机体免疫反应和细胞增殖等方面发挥中心调节作用。在类风湿性关节炎 (RA)的病理机制中 ,NF κB的异常活化与滑膜组织炎性增生及其对关节局部组织的侵蚀密切相关 ,为以NF κB为作用靶点治疗RA提供了理论依据。     

NF-κB信号转导途径与肿瘤抗凋亡关系的研究进展

细胞核因子κB(NF κB)家族及其介导的细胞信号转导通路广泛调控着人类免疫和炎症反应中一系列基因的表达 ,同时也发现它对肿瘤的发生发展有着重要作用 ,特别是它可以调控一些细胞凋亡相关基因如TRAF家族、IAPs家族、Bcl 2家族及FLIP基因、p5 3基因、COX 2基因的转录表达 ,从而大大提高肿瘤细胞的抗凋亡能力。本文就近年来对NF κB通路与肿瘤抗凋亡关系的研究进展作一综述