正交试验优选脂蛋白—X电泳条件

脂蛋白-X（Lp－X）测定是目前诊断胆汁淤积最特异的实验手段，近年来已受到广泛重视。LP－X测定的方法很多，以电泳法最简单，但免疫电泳需要特异性抗血清，因此限制了它的广泛使用。我们在1982年2月建立了预染LP－X琼脂电泳后，为了提高电泳效果，又用正交试验对可能影响电泳效果的几个因素进行了优选，现将优选后的方法和正交试验报告如下。     

对流直线偏斜免疫电泳——一种抗原定量测定新方法的建立

将对流免疫电泳与直线偏斜电泳相结合,设计建立了一种定量测定抗原的新方法——对流直线偏斜免疫电泳(Counter current line deflection immunoelectrophoresis,CCLD 免疫电泳)。应用最适条件标准化的 CCLD 电泳法,检测了36份原发性肝癌或肝硬化患者血清和腹水标本中的甲种胎儿蛋目(AFP)含量,其结果与放射免疫测定法(RIA 双抗体夹心法)检测结果相近(r=0.9654);对10份 APP 阳性标本进行连续稀释测定,求得本法可检出AFP 含量的下限值范围为35±6.50ng/ml。实验证明:CCLD 电泳法敏感性较高,重复性较好,不需特殊设备与纯化免疫试剂,方法简便、经济,适于在普通医院推广应用。     

银染法在对流免疫电泳中的应用

本文使用简化的银染法于免疫化学方面,如对流免疫电泳、免疫电泳、火箭电泳等,在对流免疫电泳中,发现其敏感性比考马斯亮兰染色高10倍,并且染色背景清晰。用3N 氯化钠替代生理盐水,改良漂洗电泳板的方法,可缩短漂洗时间,具有实用价值。     

用交叉免疫电泳法分析血清蛋白成分

本文详细介绍了作者制取交叉免疫电泳谱的实验方法,对正常人、肝癌和红斑狼疮患者的电泳谱作了例示性对比。讨论了电泳谱在对各种疾病的分类识别中的应用。     

广州地区944名儿童乙型肝炎表面抗原的普查

自1985年至1986年,我们用醋酸纤维薄膜微量酶标电泳法,对广州地区944名儿重进行了乙型肝炎表面抗原(HBsAg)检查,现报告如下。取儿科门诊及幼儿园小儿的指血,用本室对流免疫电泳检出的阳性血清作阳性对照,用辣根过氧化物酶标记抗—HBs,用芦森方法(免疫学杂志1985;1:1,略有改良)进行电泳,以0.8～1mA/cm电流电泳20min,经磷酸盐缓冲液漂洗后,置底物溶液中显色,出现清晰沉淀线者为阳性,否则为阴性。     

乳酸脱氢酶免疫球蛋白复合物电泳分析

对2例自身免疫病患者常规琼脂糖电泳法测定LDH同工酶,酶免疫电泳方法测定乳酸脱氢酶(LDH)免疫球蛋白复合物.结果LDH3同工酶区带增宽,染色较深.酶免疫电泳显示抗全血清抗体在抗IgA抗体、抗L链κ抗体出现沉降线.证实异常的LDH3区带是LDH-IgA(k)复合物.     

免疫盘状聚丙烯酰胺双相电泳

Grabar和Williams(1953)建立了免疫电泳技术。Ressler(1960)改进并发展了免疫电泳技术,创建了交叉抗原-抗体电泳,为混合蛋白质抗原定量提供了可能性。在此研究基础上,科学家们为提高混合蛋白质抗原的分辨率以及蛋白质抗原鉴定、定量建立了许多简单、快速、灵敏的交叉免疫电泳方法,并用于疾病诊断。近年来,随着有机化学发展,新型人工合成载体出现,聚丙烯酰胺凝胶成为交叉免疫电泳的载体,极大地增进了抗原-抗体复合物模型的分辨率,表现出混合蛋白     

磷酸—硼酸缓冲液电泳(摘要)

鉴于常用的巴比妥缓冲液尚有缺点,特别在室温高于33℃时作线电泳其线条往往不清。因此提出用磷酸一硼酸缓冲液作线电泳等,具有安全、价廉、称量方便等优点。其配方如下:做血清醋纤膜电泳为M/10 KH_2PO_434ml;M/20 Na_2BB_4O_766ml加蒸馏水25ml,110V电压60一70分钟(春天60分钟、冬天70分钟),在做血清线电泳等时系用工作液,即用上面的磷酸一硼酸缓冲液2份加蒸馏水3份配成。试验结果:血清醋纤膜电泳(见图1),线电泳(见图2),免疫电泳(见图3),对流电泳(见图4),琼脂糖扩散(见图5),效果均     

免疫电渗电泳对“MM”患者免疫分型的研究

目前对多发性骨髓瘤(Multiplemyeloma,简称“MM”的免疫分多型,采用单向扩散法和免疫电泳法等。单扩易发生前滞现象(Proeon Phenomenon),定量也欠准确;免疫电泳也常因抗原过剩对形成弓形沉淀线有一定影响。本文根据IgG、IgA、IgM分子量大小、等电点及理化性质的不同和对琼脂胶的渗入有别以及电渗电泳的不同现象和特点,建立了免疫电渗电泳法,用于临床“MM”的免疫分型。现报道如下。材料和方法 1、玻璃:10×10cm或根据需要大小裁制,但长度不少于10cm。2.1.5％琼脂胶液:日本琼脂1.5g,叠氮钠0.05g,加入PH8.9离子强度0.025的巴比     

三种诊断原发性肝癌方法的对比观察

1986—1990年我们用三种癌性标志物对临床诊断为肝癌的121例患者血清,同步进行了检测,报告如下。 原发性肝癌121例。用聚丙烯酰胺凝胶梯度电泳法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法及对流免疫电泳定性法进行检测。     

原发性肝癌血清中甲种胎儿球蛋白检测法

检测病人血清中甲种胎儿球蛋白,是国内外普遍应用于原发性肝癌的辅助诊断方法。国内各地兄弟单位这方面资料报导很多,其方法有琼脂双向扩散法、琼脂对流免疫电泳法、补体结合试验,火箭电泳的定量测定法,放射免疫测定法。我们在现有条件下,选择一种简易、快速、且具有早期和准确性的琼脂双向扩散法和琼脂对流电泳法、从72年10月到今年2月共五个月的初步试验,现小结如下:     

妊娠区带蛋白(PZP)的分离、纯化及其鉴定

本文采用人胎盘后血为原料,经Sephadex G 200,DEAE-Sephadex A-50层析,等电聚焦电泳,Sepharose 4B负亲和层析技术,从胎盘后血清中分离、纯化出PZP纯品,经8.0％聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳,免疫电泳和双向免疫交叉试验,证实其为单一的成份。     

聚丙烯酰胺凝胶—琼脂糖凝胶交叉免疫电泳

聚丙烯酰胺凝胶电泳具有设备简单、操作简便、分辨力高等优点,日益被人们广泛应用。为了进一步提高分辨力,在聚丙烯酰胺凝胶电泳的基础上又发展了凝胶浓度梯度电泳、双向电泳,及其与等电点聚焦电泳、免疫电泳等结合使用的电泳分析方法。为开展分子生物学、细胞生物学以及免疫学等方面的研究,甚至临床诊断研究,提供了—个有效的手段。聚丙烯酰胺凝胶—琼脂糖凝胶交叉免疫电泳是一种抗原先在聚丙烯酰胺凝胶中电泳,接着在与第一向电泳成垂直方向的含抗体的琼脂糖凝胶上走第二向电泳的方法,在电场作用下,聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后的抗原又进入含有抗体的琼脂糖凝胶中,抗体也同时泳动,但由于抗体是γ-球蛋白和电     

人胎盘泌乳素分离纯化及其鉴定的研究

本研究采用hPL-Sepharose 4B亲和层析技术,从胎盘匀浆中分离纯化出hPL抗原,经聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳、免疫电泳、双向交叉免疫试验,证实本室提纯的hPL抗原为单一成份。     

一种新的醋酸纤维膜透明法——冰醋酸蒸薰法

<正> 醋酸纤维薄膜目前已广泛用于血清蛋白、脂蛋白、血红蛋白、糖蛋白的测定,同功酶的分离及免疫电泳等方面。特别是光密度扫描仪的广泛应用,给电泳区带定量带来了方便。但由于电泳后的醋纤膜透明程度直接影响扫描质量。故透明方法的选择尤为重要。当前所用透明方法有冰醋酸(25ml)与无水乙醇(75ml)混合溶液,和液体石蜡二种。我们     

酶标记免疫吸附试验诊断肺吸虫病的研究

自1979年我室建立酶标记技术以来,曾试用酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗肺吸虫抗体,初步显示其敏感性高于间接红细胞凝集试验以及对流免疫电泳法。1981年我们又进一步开展了ELISA对抗肺吸虫抗体的特异性、敏感性及其他方面的研究,以探索其在诊断及流行病学中的使用价值。材料和方法一、材料 1.制备可溶性肺吸虫成虫抗原。 2.试验血清:肺吸虫患者血清取自郧     

离子交换柱层析分离霍乱类毒素

用超滤、离子交换层析等方法从霍乱弧菌培养液中提取霍乱类毒素,经免疫电泳、SDS-凝胶电泳、等电点聚焦电泳等方法检测表明此法纯化的霍乱类毒素是纯的,家兔蓝斑试验与杀弧菌抗体均为阴性。     

双向电泳法分离LDH同工酶异常带

目的　采用双向电泳方法分离LDH同工酶的拖带现象。方法　经常规同工酶电泳后 ,改变方向 90° ,再进行第 2次电泳将异常带分开。结果　经过 2次电泳后 ,拖带现象消失 ,5种同工酶被清晰的分离。结论　普通电泳、免疫电泳、双向电泳的结合使用 ,能有效的分离异常同工酶 ,消除拖尾现象 ,确定异常电泳带的性质     

人血浆载脂蛋白CⅠ、CⅡ及CⅢ的分离与鉴定

作者利用超速离心法从人血浆分离、纯化极低密度脂蛋白(VLDL)。VLDL脱脂后经葡聚糖凝胶层析及离子交换层析获得apoCⅠ、apoCⅡ及apoCⅢ的纯品。经等电聚焦电泳、免疫电泳、免疫双扩散、酶联免疫及放射免疫鉴定,其纯度符合要求。作者等已用此纯品免疫动物获得特异的单价抗血清,在国内首次建立了人血清载脂蛋白CⅠ、CⅡ及CⅢ的免疫测定法。     

良性M蛋白血症的新亚型——r—重链型免疫学诊断及病例报告

良性M蛋白血症(Benign MonoclonalGammopathg—BMG),为没有多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症或其他疾病的单克隆高丙球蛋白血症。一般认为BMG为IgG、IgM等全分子型。我院在健康体检时发现一例极为罕见的BMG亚型-r-重链型,并随访四年以上(1982年5月-1986年10)无临床及实验室改变。经醋纤膜电泳、选择免疫电泳、免疫固定电泳及分子量测定等多种