辐射对豚鼠鼻黏膜组织结构及微血管的影响

目的：探讨辐射对豚鼠鼻黏膜结构及微血管的损伤。方法：选择健康豚鼠84只，随机分为对照组（12只）及照射组（72只）。均在同样条件下喂养。将照射组豚鼠置于直线加速器射线内照射，每周1次，每次照射5Gy，计3周，总剂量15Gy，建立辐射损伤动物模型。分别于照射后0．5、1.0、2．0、3．0、5．0、6．0个月处死动物12只，随机取6只做鼻腔黏膜微血管铸型，另6只做病理检查。对照组在假照射后6个月处死动物，随机各选6只分别做鼻黏膜微血管铸型检查和病理检查。结果：照射组豚鼠的鼻黏膜辐射后早期表现为急性炎症反应，黏膜大量坏死、脱落，电镜下见仅少部分黏膜表面还被覆着正常的纤毛结构。以后黏膜开始修复，至6个月时基本结束，但大部分黏膜失去了正常的纤毛柱状上皮结构特点，部分区域甚至代为组织转化的鳞状上皮；微血管铸型可见，早期改变为毛细血管扩张充血及血管内皮细胞肿胀，以后逐渐出现毛细血管的扭曲变形、闭塞及中断，毛细血管数量大量减少，致血液回流障碍，微静脉萎瘪。后期部分区域出现新生的毛细血管，但结构紊乱，不具备微循环的功能。结论：鼻黏膜的损伤、晚期的鳞状上皮组织转化以及鼻黏膜微循环的破坏是放疗后鼻腔功能障碍的病理学基础。     

抗原长期刺激致变应性鼻炎豚鼠模型鼻黏膜重塑的研究

目的:观察抗原长期刺激致变应性鼻炎豚鼠模型鼻黏膜重塑的特点。方法:Hartley豚鼠48只,随机分为6组(每组8只),即实验组用卵清蛋白(OVA)激发(OVA2W组、OVA6W组和OVA12W组),对照组用生理盐水激发(Sal2W组、Sal6W组和Sal12W组)。OVA制备变应性鼻炎动物模型,抗原刺激分别持续2W、6W和12W,在最后一次激发24h后行鼻腔灌洗、取鼻黏膜组织。ELISA法检测鼻腔灌洗液中OVA特异性免疫球蛋白(OVA-sIgE)、嗜酸粒细胞阳离子蛋白(ECP)含量;鼻黏膜组织切片采用苏木精-伊红、AB-PAS和MT法染色,计数鼻黏膜上皮杯状细胞数量,测量上皮细胞损伤程度、基膜胶原含量;免疫组织化学法检测鼻黏膜组织转移生长因子β1(TGF-β1)的表达。结果:①OVA6W、OVA12W组与OVA2W组比较,OVA-sIgE含量均差异有统计学意义(均P<0.05),而ECP含量在3个实验组中无明显差别;实验组与相应的对照组比较,OVA-sIgE、ECP含量均差异有统计学意义(均P<0.01)。②OVA6W、OVA12W组与OVA2W组比较,0级、1级上皮细胞损伤均差异有统计学意义(均P<0.01);实验组0级、1级上皮损伤与相应的对照组相比差异有统计学意义(均P<0.05)。③鼻黏膜杯状细胞增生和基膜胶原沉积,OVA6W、OVA12W组与OVA2W组比较均差异有统计学意义(均P<0.01);对照组杯状细胞数均较相应的实验组明显减少(均P<0.05);Sal6W、Sal12W组基膜胶原沉积均较相应的实验组明显减少(均P<0.05)。④OVA6W、OVA12W组与OVA2W组比较,TGF-β1的表达均差异有统计学意义(均P<0.01);实验组与相应的对照组比较,TGF-β1的表达均差异有统计学意义(均P<0.01)。结论:鼻黏膜上皮细胞损伤、杯状细胞增生和细胞外基质胶原沉积是变应性鼻炎鼻黏膜组织重塑的特点;在抗原激发早期,表现为上皮损伤,与重塑相关的细胞因子表达增强,随着抗原刺激延长,表现出腺体增生和胶原沉积的特征越明显。     

丙酸氟替卡松对变应性鼻炎鼻黏膜重塑动态影响的实验研究

目的:探讨变应性鼻炎(AR)实验动物模型鼻黏膜重塑的动态表现,及丙酸氟替卡松(FP)对重塑的影响。方法:选近交系健康SD大鼠120只,随机分为正常对照组(A组)、AR组(B组)和FP治疗组(C组),每组各40只。以OVA+Al(OH)3凝胶配制变应原建立实验模型,并对各组模型进行不同干预,分阶段取鼻黏膜进行苏木精-伊红染色及透射电镜切片制作,观察其鼻黏膜结构的动态变化情况。结果:A组鼻黏膜结构清晰,纤毛完整,未见炎性细胞浸润及基膜增厚、胶原沉积等。而B、C组鼻黏膜上皮及纤毛不完整,出现以嗜酸性细胞为主的炎性细胞浸润,基膜增厚,胶原沉积及少量纤维增生,但细胞间的结构尚未破坏。随着变应原的持续接触,B组鼻黏膜形态学改变随时间延长逐步加重,至上皮全层剥脱至基膜,细胞及组织结构明显破坏。C组在FP治疗后,鼻黏膜的形态学改变未进一步加重,但仍可见纤毛不同程度脱落,排列不齐,基膜增厚,胶原沉积及纤维增生等。结论:AR鼻黏膜存在重塑,且随着变应原的持续接触,重塑将进一步加重,最终发生不可逆性改变。FP可有效控制AR,减缓或一定程度逆转鼻黏膜重塑,而对于已发生的不可逆性改变并无明显逆转或修复作用。     

神经生长因子在变应性鼻炎病人鼻黏膜中的表达

目的 进一步探讨神经生长因子(nerve growth factor,NGF)在变应性鼻炎发病中的作用。方法采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法对30例变应性鼻炎病人鼻黏膜组织中NGF的含量进行检测,以10例正常鼻黏膜组织作对照。结果 变应性鼻炎组鼻黏膜组织中NGF的含量为(6.03±1.53)ng/g湿重(n=30),明显高于对照组鼻黏膜组织中NGF的含量(3.43±1.19)ng/g湿重(n=10),两组差异有统计学意义(P<0.001)。结论 NGF与变应性鼻炎的发生有着密切联系。     

变应性鼻炎鼻黏膜上皮细胞免疫活性研究进展

鼻黏膜上皮细胞构成的物理和化学屏障是呼吸道接触外源性微生物、变应原和环境污染物等的第一道防线。除理化屏障功能,上皮细胞在变应性鼻炎发病机制中的免疫调控作用受到越来越多的重视。上皮细胞对天然免疫和获得性免疫均具有重要的免疫调控功能,这种免疫调控功能的实现依赖于功能性细胞因子的表达及上皮细胞与下游免疫细胞的相互信息传递。现就鼻黏膜上皮细胞与变应原及其他免疫细胞之间的信息传递做一简要梳理。     

变应性鼻炎鼻黏膜组织重塑的研究

目的:探讨变应性鼻炎(AR)鼻黏膜组织是否存在重塑,检测与组织重塑密切相关的转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及其组织抑制物1(TIMP-1)在AR患者鼻黏膜组织中的表达情况。方法:15例单纯性鼻中隔偏曲患者为对照组,16例鼻中隔偏曲伴轻度间歇性AR的患者为轻度AR组,12例鼻中隔偏曲伴重度持续性AR的患者为重度AR组。均取中鼻甲黏膜组织,苏木精-伊红染色观察嗜酸粒细胞浸润情况并测定上皮损伤情况;AB-PAS法计数杯状细胞数,MT法测定细胞外基质沉积面积百分比,ELISA测定组织中TGF-β1、MMP-9及TIMP-1的表达。结果:①对照组无明显嗜酸粒细胞浸润,轻度、重度AR组嗜酸粒细胞浸润均较对照组明显增多(均P<0.05);②轻度AR组中仅上皮细胞损伤1级比对照组明显(P<0.05),重度AR组上皮损伤1、2、3级均比对照组明显(均P<0.05);③轻度、重度AR组杯状细胞数明显多于对照组(均P<0.05);④与对照组相比,轻度AR组胶原沉积面积增多,但差异无统计学意义(P>0.05);重度AR组胶原沉积面积比对照组明显增多(P<0.05);⑤TGF-β1、MMP-9及TIMP-1在轻度、重度AR组黏膜中的表达均较对照组增高(均P<0.05);重度AR组TGF-β1和TIMP-1的表达均比轻度AR组增高(均P<0.05)。结论:AR的鼻黏膜组织发生了重塑,表现为上皮细胞损伤、杯状细胞化生、细胞外基质沉积,重度AR患者的鼻黏膜重塑更强、更广泛,TGF-β1、MMP-9、TIMP-1积极参与了AR鼻黏膜组织的重塑。     

吸入糖皮质激素对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜病理改变影响的实验研究

目的 探讨吸人性糖皮质激素对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜病理改变的影响.方法 选健康SD大鼠180只,应用随机数字表法完全随机分成正常对照组(A组,60只)和实验组(120只).首先对实验组大鼠予以卵清蛋白(ovalbumin,OVA)进行基础致敏、致敏加强、局部激发建立变应性鼻炎动物模型,然后再将实验组动物完全随机分为B、C二组,每组60只.B组继续予以等浓度OVA双侧鼻腔滴鼻,每周2次;C组在予以等浓度OVA双侧鼻腔滴鼻每周2次的同时,每天予以丙酸氟替卡松每侧鼻腔50μl/,次,喷鼻1次,A组则以等量生理盐水代替进行腹腔注射及滴鼻.分别于治疗后第1、2、4、8、12、及16周末从各组中随机挑选10只进行处死,其中1只行鼻黏膜微血管铸型,其余9只立即取鼻黏膜送病理检查,以观察鼻黏膜形态学改变、微血管铸型情况.结果 大鼠接受变应原激发后,鼻黏膜出现柱状上皮杯状细胞化生,部分细胞剥脱,固有层腺体增生肥大、嗜酸粒细胞为主的炎症细胞浸润及血管增多;电镜下见上皮层纤毛不同程度脱落,排列欠整齐,基底膜板层网状结构增厚,胶原沉积及纤维增生,微血管密度增加,血管迂曲,粗细不一,并交织成网状.B组由于持续变应原接触,鼻黏膜病变进一步加重;C组吸入糖皮质激素后可有效控制临床症状,但鼻黏膜仍有纤毛脱落,上皮细胞杯状细胞化生,腺体增生及炎性细胞浸润,基底膜增厚,胶原沉积及纤维增生,微血管密度增加.结论 变应性鼻炎可导致鼻黏膜发生病理改变,接触时间越长,病变越明显.糖皮质激素可较好地控制变应性鼻炎的症状,在一定程度上可减轻鼻黏膜的病理改变,但对已经发生不可逆性改变的黏膜结构无逆转或明显的修复作用.     

变应原点刺实验及其和鼻黏膜激发实验的相关性研究

目的:研究变应性鼻炎患者变应原的分布情况及其和鼻黏膜激发实验的相关性,以确定阳性变应原不同等级在诊断变应性鼻炎中的可靠性。方法:采用阿罗格公司生产的标准化变应原试剂,对有临床症状和体征的1400例患者进行了吸入性变应原的皮肤点刺实验,同时选择阳性变应原不同等级的各30例螨阳性的患者行鼻黏膜激发实验,以评价两者的相关性。结果:变应原阳性患者1 088例(78%),其中螨过敏890例(81.8%);单纯常年性变应原阳性率为52.2%(568例),单纯性季节性变应原为35.7%(388例),两者皆有者12.1%(132例)。阳性变应原等级为+++和++++患者鼻黏膜激发实验皆为阳性,等级为++的有1例为阴性,等级为+的患者中鼻黏膜激发实验有9例为阴性,而在变应原为阴性的患者中有5例为阳性。结论:变应原阳性等级较高的患者其鼻黏膜激发实验皆为阳性,而在较低等级阳性患者中有假阳性发生,在变应原实验为阴性患者中亦存在假阴性。因此临床上在挑选患者行免疫治疗前,应考虑上述情况。     

变应性鼻炎大鼠鼻黏膜纤毛超微结构和鼻症状变化的研究

目的:通过变应原诱发大鼠变应性鼻炎(AR),观察鼻黏膜纤毛超微结构和鼻腔症状变化的特点。方法:采用卵清蛋白(OVA)为变应原激发大鼠鼻黏膜建立AR大鼠模型,建模成功后,每周2次鼻腔激发,分别至16 d、42 d、56 d、112 d、140 d。正常对照组在整个试验过程中以生理盐水代替OVA。观察变应原激发后的鼻黏膜纤毛超微结构改变以及检测鼻黏膜中浸润的嗜酸粒细胞(EOS)情况,同时观察变应原诱导的大鼠鼻腔流涕症状。结果:暴露变应原会引起大鼠鼻黏膜细胞纤毛排列紊乱,有的纤毛粘集成团向不同方向倾倒,上皮纤毛和绒毛多数脱落等超微结构进行性损害改变,EOS浸润先增多后降低;抓鼻次数变化无统计学意义,而鼻腔流涕症状起初一直加重,随着暴露变应原时间的延长出现鼻涕排除障碍。结论:AR大鼠模型在延长变应原诱导下鼻黏膜纤毛呈进行性损害;此外,长期变应原攻击下鼻腔症状变化可能与鼻黏膜纤毛结构进行性损害有关。     

黏附分子在实验性变应性鼻炎鼻黏膜中的表达

变应性鼻炎迟发相反应阶段是以嗜酸粒细胞为代表的大量的炎性细胞的浸润而导致的慢性炎症，血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1，VCAM-1)、细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)在嗜酸粒细胞等炎性细胞的黏附、浸润到黏膜炎症区域起着重要作用。本研究观察实验性变应性鼻炎鼻黏膜中黏附分子的表达。     

正常人群鼻黏膜中组胺受体亚型的表达

目的 通过观察健康志愿者鼻黏膜中4种组胺受体(histamine receptor,HR)亚型的表达及分布差异,初步阐明4种HR亚型在正常人群鼻黏膜中的表达,为了解组胺(histame,HA)及其受体HR在鼻腔病理生理学中的作用提供理论基础.方法 选择健康志愿者10人,表面麻醉下取下鼻甲黏膜,分别行HR免疫组化检测及半...     

下鼻甲等离子消融术对鼻黏膜组织学及纤毛功能改变的初步研究

目的探讨等离子下鼻甲消融术对鼻黏膜组织学及纤毛功能的影响。方法对40例慢性肥厚性鼻炎患者行低温等离子下鼻甲消融术(coblation inferior turbinate reduction,CITR),测定手术前及术后6个月患者的鼻腔黏膜纤毛传送速率并行比较,取12例患者的下鼻甲黏膜行HE、Masson染色及扫描电镜检查。结果手术前后鼻腔黏膜纤毛传送速率(mucociliary transport rate,MTR)差异无统计学意义(P>0.05)。HE染色显示术后的鼻黏膜表面纤毛有部分脱落,Masson染色显示术后的鼻黏膜中胶原纤维含量较术前增高,扫描电镜显示等离子术后黏膜表面纤毛部分脱落。结论 CITR对鼻黏膜及纤毛可能产生局部损伤,但对鼻腔整体纤毛运动功能无明显影响。     

干燥性鼻炎与萎缩性鼻炎鼻粘膜超微结构观察

目的通过透射电镜观察比较干燥性鼻炎与萎缩性鼻炎鼻粘膜的超微结构。方法取干燥性鼻炎和萎缩性鼻炎鼻粘膜各5例,并取正常鼻粘膜3例作对照,在透射电镜下观察。结果干燥性鼻炎与萎缩性鼻炎鼻粘膜超微结构改变有类似之处,但萎缩性鼻炎比干燥性鼻炎病变严重,上皮层细胞已鳞状上皮化生,杯状细胞消失,腺腔闭锁,部分腺细胞溶解、坏死,血管腔已被阻塞。而干燥性鼻炎的病理改变较轻,是可逆的。结论治疗干燥性鼻炎建议从扩血管、滋养恢复鼻粘膜细胞着手,促进鼻粘膜细胞新陈代谢,使受损的鼻粘膜尽快恢复正常结构和生理功能。     

聚焦超声对黄羊鼻黏膜形态学的影响

目的研究聚焦超声对黄羊鼻黏膜形态学的影响.方法运用中国重庆海扶技术公司生产的CZB型超声波鼻炎治疗仪,在不同剂量参数下对离体牛肝进行直线扫描,观察聚焦超声在离体牛肝中形成的生物学焦域形态是否满足设计需要;以选择参数在鼻内镜下扫描活体黄羊下鼻甲鼻黏膜,通过大体形态、光镜和透射电镜观察聚焦超声扫描后黄羊鼻黏膜组织形态学的改变.结果离体牛肝实验结果显示在选择剂量参数下可获得满足设计需求的生物学焦域形态.聚焦超声扫描黄羊下鼻甲后,其黏膜外观和色泽无明显改变,但扫描后第3天鼻腔分泌物增加、第7天恢复正常.扫描后第3天,光镜下显示黄羊鼻黏膜上皮层完好,鼻黏膜下层出现散在、点状的凝固性坏死.凝固性坏死区血管内皮细胞变性、部分血管内血栓形成,神经细胞空化变性或坏死,腺体细胞部分或完全坏死.电镜显示鼻黏膜上皮杯状细胞、纤毛柱状上皮细胞等结构正常.在第7天凝固性坏死区出现胶原纤维增生等组织修复表现.在第14天坏死组织开始溶解吸收,部分切片显示坏死组织消融.结论在选择参数下聚焦超声能量可特异性沉积于鼻黏膜下层,对富含血管、神经和腺体的鼻黏膜组织消融,但不破坏鼻黏膜上皮层等非靶点区结构,从而可能维护鼻黏膜黏液纤毛系统功能.     

真菌性抗原致变应性鼻炎豚鼠模型建立

目的建立真菌性抗原致变应性鼻炎豚鼠模型。方法将24只豚鼠随机分为A、B、C三组,A、B组分别用不同剂量的真菌性抗原腹腔致敏,2周后分别用变应原鼻腔激发;C组作为对照组,用生理盐水代替变应原。激发后观察其行为学差异,并行鼻腔分泌物涂片和组织病理学检查。结果行为学得分,A组(6.13±0.99)明显高于B组(3.50±0.85)和C组(0.50±0.75),其差异有极显著意义(P<0.01);A组鼻分泌物和鼻黏膜固有层中见大量嗜酸粒细胞浸润。结论采用适量真菌性抗原可以成功建立具有典型症状和组织病理学改变的变应性鼻炎豚鼠模型。     

Immunohistochemical localization of 3-nitrotyrosine in the nasal respiratory mucosa of patients with vasomotor rhinitis

Conclusion This study demonstrates that, in the nasal respiratory mucosa of patients with vasomotor rhinitis, oxidative stress following peroxynitrite formation is confined to the respiratory epithelium. This suggests that the role of peroxynitrite in vasomotor rhinitis differs from its role in other diseases of the respiratory tract. The results of this study also support the concept that different pathogenetic mechanisms are probably involved in vasomotor rhinitis.

Objective Previous studies indicated that nitric oxide (NO) is involved in the pathogenesis of vasomotor rhinitis, strong expression of NO synthase being detected in the smooth muscle cells of the cavernous sinuses and in the respiratory epithelium. However, most adverse effects of high levels of NO originate from the reaction of NO with superoxide anions to form peroxynitrite. Therefore, in this study we evaluated the involvement of peroxynitrite in the pathogenesis of vasomotor rhinitis.

Material and methods Sites of peroxynitrite formation were identified by immunolabelling for 3-nitrotyrosine (3NT), its footprint in tissues. Samples of nasal mucosa were obtained from vasomotor rhinitis patients and from control subjects who had undergone corrective surgery of the nasal septum. All samples were obtained by reduction of the inferior turbinate.

Results Examination of specimens from vasomotor rhinitis patients revealed that 3NT is absent in epithelium with a normal appearance, cells of the subepithelial connective tissue, the glands and the blood vessels, including the cavernous sinuses. In contrast, intense 3NT immunolabelling was found in the disrupted respiratory epithelium. 3NT was not present in any of the specimens from control subjects.