溶脲脲原体与精子膜蛋白共同抗原分析

本文通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ｕ血清作免疫印迹技术证明，人精子膜蛋白有６条蛋白带，Ｕｕ与人精膜蛋白间有２条带为共同抗原，分子量约变６９ｋＤａ和６４ｋＤａ。进一步应用兔抗Ｕｕ血清对正常人精子涂片作ＡＢＣ免疫酶染色，显示精子膜及尾部呈棕黄色ＡＢＣ阳性反应。实验证明，人精子膜蛋白与Ｕｕ间确有共同抗原存在。     

人精子与溶脲脲原体的共同抗原

溶脲脲原体(UU)是人泌尿生殖道的常见病原体,男性感染者又常伴有抗精子抗体,并可致不育。本实验证实了人精子与UU有共同抗原。① ELISA方法抗 UU抗体不仅可与UU抗原起反应,也可与人精子或精子膜发生反应;抗人精子抗体同样也可与UU抗原发生反应;②10％不连续SDS-PAGE可见人精子、精子膜提取物与UU有相同的蛋白电泳区带;③免疫印迹技术证明抗UUIgG对转移到硝基纤维薄膜上的人精子、精子膜和UU的电泳条带,在分子量 61KDa处发生特异性的交叉反应。     

不同人群血清中解脲脲原体IgM和IgG抗体的检测及比较研究

以前的研究表明 ,泌尿生殖道解脲脲原体 (Ｕｒｅ ａｐｌａｓｍａｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ ,Ｕｕ)寄居或感染以第一群为主[1,2 ] ,可以推测Ｕｕ第一群与临床致病性关系密切。为了深入研究 ,我们已成功的对解脲脲原体第一群ＭＢ抗原Ｎ端基因片段进行了克隆表达[3] 。本研究对其蛋白表达产物用谷胱苷肽 琼脂糖株进行纯化 ,并用ＥＬＩＳＡ的方法对不同人群血清中ＵｕＩｇＭ和ＩｇＧ抗体进行检测 ,以揭示Ｕｕ第一群ＭＢ抗原与临床致病性的关系。现将主要研究方法及结果报告如下。　　材料与方法1.标准克隆菌株Ｕｕ3或Ｕｕ14型及生殖支原体30 4ｂ…     

人精子膜抗原的提纯及分析

目的：提纯并分析人精子膜抗原。　方法：用表面活性剂 Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ １００ 及脱氧胆酸钠（ Ｄ Ｏ Ｃ）的 Ｔ Ｄ Ｏ Ｃ缓冲液提取人精子膜抗原,并与超声法及反复冻融法所获精子抗原通过 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ法分析比较其成分。　结果： Ｔ Ｄ Ｏ Ｃ缓冲液提取的人精子膜抗原种类丰富,考马斯亮蓝染色见 ２３ 条蛋白（多肽）带,明显优于超声法或反复冻融法所提的抗原。　结论： Ｔ Ｄ Ｏ Ｃ缓冲液所提取的精子膜抗原种类丰富,为进一步研究精子膜抗原及其抗体提供了条件。     

雪旺氏细胞分泌蛋白质及其神经营养活性物质的生化分析

成年大鼠瓦勒氏变性神经来源的雪旺氏细胞（ＳＣ），经体外无血清分离培养，收集ＳＣ无血清条件培养液，用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析其超滤浓缩液（分子量大于１０ＫＤａ）中ＳＣ分泌蛋白，发现其含有１４条蛋白带，分子量从大于９４ＫＤａ至小于３４ＫＤａ。用免疫印迹技术、抗２．５Ｓ神经生长因子（ＮＧＦ）抗体鉴定证实ＳＣ分泌蛋白中含有ＮＧＦ。用Ｄｉｓｃ－ＰＡＧＥ（４℃）分离ＳＣ分泌蛋白带，分别经电洗脱、浓缩收集１０份蛋白区带，结合有髓腹侧运动神经元细胞培养、ＮＴＦｓ生物学活性鉴定，初步发现其中一组蛋白区带（Ｂ＋）含运动性神经营养因子（ＮＴＦ）活性，其分子量在６５ＫＤａ至３４ＫＤａ。     

血透前后甲状腺素、胰岛素、钙调蛋白对红细胞膜钙泵的影响

血透前后甲状腺素、胰岛素、钙调蛋白对红细胞膜钙泵的影响林新伟，刘钟明ＴＨＥＥＦＦＥＣＴＳＯＦＴＨＹＲＯＸＩＮＥ，ＣＡＭ－ＯＤＵＬＩＮ．ＡＮＤＩＮＳＵＬＩＮＯＮＣａ（２＋）ＡＴＰａｓｅＡＣＴＩＶＩＴＹＯＦＲＥＤＢＬＯＯＤＣＥＬＬＭＥＭ－ＢＲＡＮＥＤＵＲ...     

不同烧伤面积血清、尿、水泡液中Zn、Cu、Fe、Ca、Mg的动态比较

为探讨烧伤病人伤后血清、尿和水泡液中Ｚｎ、Ｃｕ、Ｆｅ、Ｃａ、Ｍｇ的含量，观察了１０６例烧伤病人（Ｌ组烧伤≥３０％ＴＢＳＡ，５７例；Ｓ组烧伤＜３０％ＴＢＳＡ，４９例）伤后１，２，３，７，１４，２１，２８天血清、尿和水泡液中Ｚｎ、Ｃｕ、Ｆｅ、Ｃａ、Ｍｇ的动态变化。发现除血清Ｆｅ第１天高于正常值外，其它各元素都减低，Ｌ组比Ｓ组减低明显。尿Ｚｎ、Ｃｕ、Ｆｅ排出明显增多，尿Ｃａ、Ｍｇ排出减少。水泡液Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃａ与血清正常值近似，Ｃｕ、Ｍｇ略低于血清正常值。说明烧伤后血Ｚｎ、Ｃｕ、Ｆｅ、Ｃａ、Ｍｇ的降低与从尿液及创面丢失有关。     

补肾中药对骨质疏松大鼠CaBp─D9k基因及表达的影响

本实验应用分子生物学基因重组及杂交技术，对地塞米松诱发的骨质疏松大鼠肠道钙结合蛋白Ｄ９ｋ（ＣａＢｐ─Ｄ９ｋ）基因及其ｍＲＮＡ水平及补肾中药和维生素Ｄ３（Ｖｉｔ─Ｄ３）治疗后的变化进行了研究。结果发现，地塞米松、补肾中药和Ｖｉｔ─Ｄ３均不能影响肠道ＣａＢｐ─Ｄ９ｋ基因，但对其转录却可产生不同影响，补肾中药可能是通过增加肠道ＣａＢｐ─Ｄ９ｋｍＲＮＡ水平，进而增加ｃａＢｐ─Ｄ９ｋ的含量而促进肠道钙的吸收，通过肠道（４５）Ｃａ的吸收实验进一步证明了这一点。     

雪旺细胞分泌的〉10kD蛋白分子支持脊髓前角神经元生存的初步报告

目的：探讨成年大鼠坐骨神经瓦勒变性期雪旺细胞（ＳＣ）促进周围神经再生的物质基础。方法：将２１５ｍｌＳＣ无血清条件培养液经ＰＭ１０超滤浓缩器（分子筛）分离，获得分子量＜１０ｋＤ（１ｄａｌｔｏｎ＝０．９９２１ｕ）蛋白质滤过液及＞１０ｋＤ蛋白质浓缩液，分别加入２４孔、９６孔培养板内脊髓前角神经元（ＳＡＨＮ）的培养液中，用倒置显微镜及ＭＴＴ微量自动比色法进行神经营养活性观察。结果：在＞１０ｋＤ蛋白分子影响下，ＳＡＨＮ在体外培养４８小时仍存活良好，并伴有少部分ＳＡＨＮ长出短突起。ＭＴＴ微量自动比色法进一步显示，＞１０ｋＤ蛋白分子神经营养活性在统计学上显著高于＜１０ｋＤ蛋白分子。结论：成年大鼠瓦勒变性期ＳＣ在无血清培养条件下仍能合成与分泌神经营养因子，其活性存在于＞１０ｋＤ蛋白分子中。     

抗P-糖蛋白单克隆抗体JSB-1和环孢素A协同逆转人膀胱癌MDR的研究

为了证实抗Ｐ糖蛋白（Ｐｇｐ）单克隆抗体协同环孢素Ａ（ＣｓＡ）逆转人膀胱癌耐药细胞亚株的抗药性以及建立能有效地克服ＭＤＲ的治疗方案，对人膀胱移行细胞癌ＢＩＵ８７细胞系和ＢＩＵ８７／ＡＤＭ耐药细胞亚株经柔红霉素（ＤＮＲ）与抗Ｐｇｐ单克隆抗体ＪＳＢ１和单独或联合ＣｓＡ；ＪＳＢ１和单独或联合异搏定（Ｖｅｒ）处理后，采用ＭＴＴ法评价细胞毒作用，荧光分光光度计检测细胞内ＤＮＲ的聚集量。结果：ＪＳＢ１和ＣｓＡ能协同增加ＤＮＲ对ＢＩＵ８７／ＡＤＭ的抗肿瘤作用，但ＪＳＢ１和Ｖｅｒ联合应用却不存在这种协同效应。结果显示：ＪＳＢ１和ＣｓＡ联合应用能增加细胞毒剂对具有Ｐｇｐ表达的ＭＤＲ肿瘤的抗肿瘤效应，是适合于临床应用的多药抗性逆转方案。     

BMP－1融合蛋白在大肠杆菌中的表达

本研究采用ＤＮＡ重组技术，构建ｐＭＳ３２Ｃ／ＢＭＰ－１表达载体，在工程细胞Ｅ．Ｃｏｌｉ中高效表达了人ＢＭＰ－１融合蛋白，ＭＷ６６ＫＤ，表达量占细菌总蛋白２０％，用制备性ＳＤＳ－ＰＡＧＥ纯化后免疫小鼠获得人ＢＭＰ－１融合蛋白多克隆抗体，免疫血清学鉴定证明表达的融合蛋白具有ＢＭＰ的抗原性，为ＢＭＰ研究打下了基础。     

人精子抗原基因表达克隆HSG_3生物学效应研究

本研究在已构建人睾丸ｃＤＮＡ表达文库，并用抗人精子抗体从中筛选出人精子抗原基因表达克隆（ＨＳＧ）的基础上，对其中ＨＳＧ３克隆进行了生物学效应的测定，结果显示①ＨＳＧ３克隆的溶原蛋白分子量为１４９ＫＤａ，并被兔抗人精子抗体识别。②ＨＳＧ３克隆表达抗原的特异抗体（ＨＳＧ３Ａｂ）对人精子ＳＩＴ和ＧＡＴ无明显影响，但能阻断人精子在顶体反应时，顶体后区ＣｏｎＡ受体的暴露。表明ＨＳＧ３克隆的表达抗原具有受精抗原的特性，能作为精子免疫避孕疫苗的候选成份。     

抗P—糖蛋白单克隆抗体JSB—1和环孢素A协同逆转人膀胱癌MD…

为了证实抗Ｐ－糖蛋白单克隆抗体协同环孢素Ａ逆转入膀胱癌耐药细胞亚株的抗药性以及建立能有效地克服ＭＤＰ的治疗方案对人膀胱移行细胞癌ＢＩＵ－８７细胞系和ＢＩＵ－８７．ＡＤＭ耐药 株经柔红霉素与抗Ｐ－ｇｏ单克 抗 ＪＳＧＢ－１和单独或联合ＣｓＡ；ＪＳＢ－１和单独或联合异搏定自理后，采用Ｍ ＴＴ法评价细胞毒作用荧光光光度计检测细胞民内ＤＮＲ的聚集量。结果ＪＳＢ－１和ＣｓＡ能协同增加ＤＮＲＢＩＵ－８７／ＡＤ     

人精子膜抗原的提纯及分析

目的：提纯并分析人精子膜抗原。方法：用表面活性剂Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００及脱氧胆酸钠的ＴＤＯＣ缓冲液提取人精子膜抗原，并与超声法及反复冻融法所获精子抗原通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法分析比较其成分。结果：ＴＤＯＣ缓冲液提取的人精子膜抗原种类丰富，考巴斯亮蓝染色见２３条蛋白带，明显优于超声法或反复冻融法所提的抗原。     

不同烧伤面积血清,尿,水泡液中Zn,Cu,Fe,Ca,Mg的动态…

对探讨烧伤病人伤后血清，尿和水泡液中Ｚｎ，Ｃｕ，Ｆｅ，Ｃａ，Ｍｇ的含量，观察了１０６例烧伤病人（Ｌ组烧伤≥３０％，ＴＢＳＡ，５７例，Ｓ组烧伤〈３０％ＴＢＳＡ，４９例）伤后１，２，３，７，１４，２１，２８天血清，尿和水泡液中Ｚｎ，Ｃｕ，Ｆｅ，Ｃａ，Ｍｇ的动态变化，发现除血清Ｆｅ第１天高于正常值外，其它各元素都减低，Ｌ组比Ｓ组减低明显，尿Ｚｎ，Ｃｕ，Ｆｅ排出明显增多，尿Ｃａ，Ｍｇ排出减少，水泡液Ｚｎ，     

BMP—1融合蛋白在大肠杆菌中的表达

本研究采用ＤＮＡ重组技术，构建ＰＭＳ３２Ｃ／ＢＭＰ－１表达载体，在工程细胞Ｅ．Ｃｏｌｉ中高效表达了人ＢＭＰ－１融合蛋白，ＭＷ６６ＫＤ，表达量占细菌总蛋白２０％，用制备性ＳＤＳ－ＰＡＧＥ纯化后免疫小鼠获得人ＢＭＰ－１融合蛋白多克隆抗体，免疫血清学鉴定证明表达的融合蛋白具有ＢＭＰ的抗原性，为ＢＭＰ研究打下基础。     

烧伤血清刺激下中性粒细胞与内皮细胞粘附力的变化及CD11…

为探讨烧伤血清作用下ＰＭＮ－ＥＣ粘附力的改变和ＣＤ１１／ＣＤ１８单抗对ＰＭＮ 皮细胞（ＥＣ）粘附力的影响，将烧伤血清与人ＰＭＮ或人脐静脉内细胞（ＨＵＶＥＣ）－同孵育，在孵育１，３，６，１２，２４小时分别应用细胞微管吸吮技术系统测定ＰＭＮ－ＨＵＶＥＣ粘附力，并用健康人血清刺激作对照。同时，将与烧伤血清孵育１，６，２４小时的ＰＭＮ，应用ＣＤ１１ａ／ＣＤ１１８ｍＡｂ和ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８ｍＡｂ处理后，     

骨巨细胞瘤GCF—5抗原分子量测定及蛋白性质分析

为了探明抗骨巨细胞瘤肿瘤细胞成分的单克隆抗体ＧＣＦ－５相应抗原的性质，并为研究ＧＣＴ肿瘤抗原打下基础，本研究采用高浓度ＳＤＳ提取细胞膜蛋白。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔｔｉｎｇ分析了抗原蛋白的分子量，用蛋白质化学染色技术对ＧＣＦ－５抗原蛋白进行了糖、脂分类染色、结果显示主要的ＧＣＦ－５抗原为分子量１３．５ＫＤ和１７．４ＫＤ的含糖量极少的糖蛋白。     

骨巨细胞瘤GCF－5抗原分子量测定及蛋白性质分析

为了探明抗骨巨细胞瘤（ＧＣＴ）肿瘤细胞成分的单克隆抗体ＧＣＦ－５相应抗原的性质，并为研究ＧＣＴ肿瘤抗原打下基础。本研究采用高浓度ＳＤＳ提取细胞膜蛋白。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔｉｎｇ分析了抗原蛋白的分子量。用蛋白质化学染色技术对ＧＣＦ－５抗原蛋白进行了糖、脂分类染色。结果显示主要的ＧＣＦ－５抗原为分子量１３．５ＫＤ和１７．４ＫＤ的含糖量极少的糖蛋白     

成骨肉瘤相关抗原的纯化及其特异性分析

用抗正常组织抗体制成免疫亲和层析柱，把成骨肉瘤组织提取物反复过此免疫亲和层析柱，其中的正常组织成分被吸附在层析柱上，不被吸附的成分经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，显示单一条带，是一种分子量为３２ＫＤ的抗原成分。利用免疫电泳、ＥＬＩＳＡ和琼脂双向扩散试验进行了特异性分析，结果表明，此抗原只在肿瘤组织中存在，而在正常组织中没有。用此抗原免疫ＢＡＢＬ／Ｃ小鼠制备了一株抗成骨肉瘤的单克隆抗体２Ｇ１０。用此单抗进行免疫组织化学染色，与正常组织反应阳性率为０／９，与成骨肉瘤组织反应阳性率为２０／２１。