不同发育阶段丰富环境刺激对缺氧缺血性脑损伤大鼠学习记忆的影响

目的探讨在不同发育阶段丰富环境刺激对缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)新生大鼠学习记忆能力的影响。方法7日龄SD大鼠通过结扎左侧颈总动脉,吸入8%氧氮混合气,制成HIBD模型,分为干预组(intervention)、非干预组(non-intervention),同时设假手术对照组(sham)。其中干预组根据干预开始时间又分为早期干预组(断奶前开始干预)、晚期干预组(断奶后开始干预),分别在断奶前后(生后25d)开始给予丰富环境刺激,总干预时间为20d。3月龄时测定各组学习记忆能力(Morris水迷宫),海马CA1区存活锥体神经元计数评估脑损伤程度,比较不同发育阶段丰富环境干预的效果。结果早期干预组学习记忆能力和海马存活锥体神经元数明显高于晚期干预组(P<0.01)。早期干预组与假手术组差异无显著意义(P>0.05)。结论断奶前开始给予丰富环境干预较断奶后能明显改善HIBD大鼠学习记忆能力,减轻HI后海马病理损伤程度可能是其原因之一。     

丰富环境干预对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠海马神经元影响的研究

目的 通过检测早期环境干预后缺氧缺血性脑损伤(HIBD)大鼠脑海马区存活神经元数目的 改变,探讨早期环境干预对于促进缺血缺氧的脑组织恢复及神经网络重建的可能机制.方法 7日龄Sprague-Dawley(SD)新生大鼠,采用Rice法建立HIBD模型,随机分为3组:干预组、非干预组及正常组,于建模后24h进行早期抚触和丰富环境干预,干预28d后,应用Morris水迷宫测试大鼠学习记忆能力,测量体质量,HE染色观察海马病理形态学改变,尼氏染色计数海马区存活神经元数目.结果 HE染色见干预组患侧海马轻度异常;非干预组左侧海马明显异常;正常组左侧海马无异常.神经元尼氏染色计数显示,干预组患侧海马神经元存活数目明显多于非干预组(P<0.001),与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 (1)丰富环境可减少海马区神经细胞的丢失,因此对HIBD新生鼠的神经元具有保护作用;(2)早期环境干预能显著改善HIBD大鼠的远期学习记忆功能,提示早期环境干预对保护远期学习记忆功能有重要意义.     

早期丰富环境干预对缺氧缺血性脑损伤新生鼠海马GAP-43表达的影响

目的 探讨早期丰富环境干预对缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain injury, HIBI)新生大鼠海马生长相关蛋白(Growth-associated protein-43, GAP-43)表达的影响.方法 按Rice法制备SD大鼠HIBI模型,随机分为干预组和非干预组,假手术大鼠作为对照组.干预组大鼠于HIBI后第2天开始丰富环境干预,分别于术后第3、7、14、21、28天取各组大鼠脑组织进行免疫组织化学染色和RT-PCR检测,观察不同时间点各组大鼠海马GAP-43及其mRNA表达的差异.结果 非干预组大鼠海马GAP-43及其mRNA表达强于对照组(P＜0.01),干预组海马GAP-43表达于术后第14、21、28天强于非干预组,差异显著(P＜0.05),GAP-43mRNA表达于术后第7、14、21、28天强于非干预组,差异显著(P＜0.05). 结论 早期丰富环境干预可以增强HIBI新生大鼠海马GAP-43及其mRNA的表达,提示GAP-43表达的增多可能参与了丰富环境影响HIBI新生大鼠损伤修复的机制.     

丰富环境结合水疗对新生鼠缺氧缺血性脑损伤的干预效应

目的 探讨丰富环境刺激及水疗对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxia-ischemia brain damage,HIBD)的干预效应及可能机制.方法 新生7 d龄SD大鼠分为干预组、非干预组及假手术组,干预组又分为丰富环境组、水疗组、丰富环境 水疗组.干预组在HIBD第2天分别予相应干预治疗,持续28 d.以免疫组织化学法检测不同时相点海马CA1区NMDA受体NR1亚单位的表达,并于干预结束后利用Morris水迷宫测试各组学习记忆能力,透射电镜观察海马突触结构.结果 干预28 d,干预组海马CA1区NR1的蛋白表达及学习记忆能力明显高于非干预组,其中丰富环境组、丰富环境 水疗组与假手术组比较无显著性差异(P＞0.05),水疗组仍明显低于假手术组(P＜0.05).透射电镜下,干预组大鼠海马突触后膜致密物(postsynaptic density,PSD)较多,非干预组海马PSD最少,结构疏松.结论 丰富环境刺激及水疗有助于新生大鼠HIBD的恢复,其中以丰富环境刺激、丰富环境刺激联合水疗干预效果显著,海马NMDA受体表达变化是其可能的影响机制之一.     

丰富环境对缺氧缺血性脑损伤大鼠海马突触超微结构及突触素表达的影响

目的探讨早期丰富环境干预对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠海马CA1区神经元突触超微结构和突触素(p38)表达的影响.方法按Rcie法制作HIBD新生动物模型,共计20只,随机分为干预组和非干预组.同时设假手术对照组10只.干预组大鼠于术后第2天开始给予丰富环境刺激,持续20 d.干预结束后用透射电镜观察各组海马CA1区锥体神经元超微结构,免疫组化和图像分析技术检测p38的表达.结果与对照组比较,非干预组海马CA1区锥体细胞见部分核膜消失、线粒体嵴模糊、神经元突触数量减少,突触间隙增宽,突触囊泡减少,突触后致密物变薄;干预组神经元和突触无明显异常.非干预组海马CA1区突出素光密度值明显低于干预组和对照组(P<0.01),而干预组和对照组之间无显著差异(P>0.05).结论阻止或减轻HI后突触超微结构的损伤、促进突触的重建可能是丰富环境发挥作用的物质基础.     

丰富环境刺激对缺氧缺血性脑损伤大鼠脑神经丝蛋白表达的影响

目的 研究丰富环境刺激对缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain injury, HIBI)大鼠脑神经丝(neurofilament, NF)蛋白的影响.方法 大鼠分为正常对照组12只、缺氧缺血非干预组及丰富环境干预组各20只,干预组予早期抚触和丰富环境刺激共28 d,行为学测定后,利用免疫组织化学方法观察各组海马神经丝蛋白的染色情况,并借助自动图像分析系统对其进行定量分析.结果 非干预组左侧脑组织NF表达较干预组及正常对照组明显减少,左侧与右侧脑组织NF-H积分光密度值之比(L∶R NF)非干预组明显小于对照组及干预组(P＜0.01),干预组与对照组无显著差异(P＞0.05).Morris水迷宫测试表明远期学习记忆能力非干预组明显低于对照组及干预组(P＜0.01),干预组与对照组无显著差异(P＞0.05).结论 早期抚触和丰富环境刺激有助于促进缺血缺氧脑损伤恢复,促进脑组织神经网络重建是其可能的机制之一.     

环境刺激对缺氧缺血性脑损伤大鼠海马巢蛋白表达及学习记忆的影响

目的研究不同环境刺激对缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage, HIBD)新生大鼠海马巢蛋白(nestin)表达以及学习记忆能力的影响.方法按Rice法制备7日龄SD大鼠HIBD模型,随机分为3组:丰富环境组(enriched environment, EE)、贫瘠环境组(impoverished environment, IE)和标准环境组(standard environment, SE).另设假手术组.各组大鼠于术后第1天开始分别给予不同环境刺激.术后第28天,通过Morris水迷宫实验测试学习记忆能力,免疫组织化学染色检测海马nestin的表达.结果在学习记忆能力上,IE组明显差于假手术组、SE组和EE组,SE组差于假手术组和EE组,假手术组和EE组无显著差异.海马nestin免疫组织化学染色结果显示,EE组大鼠表达强于假手术组、SE组和IE组,SE组强于假手术组和IE组.结论丰富环境刺激可以增加海马nestin的表达,促进神经再生,改善学习记忆能力,而贫瘠环境刺激却使海马nestin表达减少,阻碍神经再生,加重学习记忆能力的损害.     

脑发育不同阶段丰富环境刺激对大鼠海马MAP-2表达的影响

目的 探讨脑发育不同阶段丰富环境(EE)刺激对缺氧缺血性脑损伤(HIBD) 新生鼠神经可塑性的影响及机制.方法 7日龄 SD大鼠通过结扎左侧颈总动脉,吸入8%氧氮混合气,制成 HIBD 模型,分为早期干预组、晚期干预组、非干预组,另设假手术组.早期干预组于脑发育关键期内,即建模后第2天开始进行EE干预.晚期干预组于脑发育关键期后,即建模后第 23天(日龄30d)开始进行EE干预.两组干预条件一致,总干预时间为20d.各组大鼠饲养至日龄100d时用免疫组织化学法检测患侧海马微管相关蛋白-2(MAP-2)的表达水平.结果 早期干预组患侧海马MAP-2的表达明显高于晚期干预组和非干预组(P<0.01),早期干预组与假手术组差异无统计学意义(P>0.05),晚期干预组MAP-2的表达高于非干预组(P<0.05).结论 EE干预可增强神经可塑性.MAP-2在海马表达的变化,可能参与了脑发育不同阶段 EE对 HIBD神经可塑性的影响机制.     

Investigation of the effects of global ischemia and reperfusion on learning and memory in rats

目的:探讨缺血性脑损伤对大鼠空间分辨学习和记忆能力的影响.方法:17只Wistar雄性大鼠随机分成两组,缺血组采用改良的Pulsinelli四血管闭塞法(4VO)建立大鼠全脑缺血模型,假手术组则只手术不缺血.缺血第8天开始利用Morris水迷宫测试来检测其空间分辨学习和记忆的能力.然后进行灌注固定,经石蜡切片和尼氏染色,最后在显微镜下观察海马CA1区神经元的存活情况,从而确定全脑缺血模型制作的成功与否.结果:缺血性脑损伤组大鼠CA1区约90％神经元死亡,未死亡的神经元散在分布,其形态与正常神经元形态稍异,而假手术组海马CA1区神经元排列整齐,并未发生死亡,说明模型制作成功;在Morris水迷宫测试前4天的训练中,缺血性脑损伤组大鼠平均找到平台时间明显多于假手术组大鼠所用时间,经统计分析两组间有显著性差异(P＜0.05),而两组间的游泳速度未见显著性差异(P＞0.05);第5天撤掉平台后,缺血性脑损伤组大鼠在原平台所在象限所走的路程占总路程的比例也明显比假手术组少(P＜0.05).说明与假手术组相比,缺血性脑损伤组大鼠的空间分辨学习与记忆能力明显降低.结论:缺血性脑损伤使大鼠的学习、记忆功能受到损害.     

早期康复训练对缺氧缺血大鼠脑结构和认知功能的影响

目的:探讨早期康复训练对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠脑组织结构和认知功能的影响.方法:24只SD大鼠随机分为正常对照组、HIBD组、HIBD康复干预组.HIBD组和HIBD康复干预组按Rice法建立HIBD模型,HIBD康复干预组于建模后72 h开始进行为期30 d的早期康复训练.通过Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力,观察脑重量变化,HE染色检测海马及皮层神经元病变.结果:(1)HIBD组大鼠学习与记忆保持能力均低于HIBD康复干预组和正常对照组,HIBD康复干预组测试成绩与正常对照组相比无统计学差异.(2)HIBD组和HIBD康复干预组建模侧脑重均低于正常对照组[(0.638±0.019)g],HIBD康复干预组的建模侧脑重[(0.428±0.085)g],高于HIBD组[(0.348±0.043)g].三组大鼠未建模侧脑重无明显差异.(3)HIBD组和HIBD康复干预组大鼠脑皮层和海马存活神经元较正常对照组少.但与HIBD组相比,HIBD康复干预组存活神经元数量增多.结论:早期康复训练对围产期HIBD后脑认知功能恢复具有一定的作用,可促进损伤后脑神经细胞的存活,促使脑损伤修复.     

环境对低氧缺血性脑损伤新生鼠海马GFAP表达的影响

目的 研究不同环境刺激对低氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemic brain damage,HIBD）新生大鼠海马胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）表达的影响。方法按RiCC法制备7日龄sD大鼠HIBD模型,随机分为3组：丰富环境组（enriched environment,EE）、贫瘠环境组（impoverished environment,IE）和标准环境组（standard environment,SE）。另设假手术组（Sham）。各组大鼠于术后第1天开始分别给予不同环境刺激。术后第28天,通过穿梭箱实验测试学习记忆能力,免疫组织化学染色检测海马GFAP的表达。结果在学习记忆能力上,IE组明显差于Sham组、SE组和EE组（P〈0．01）,SE组差于Sham组和EE组（P〈0．01）,Sham组和EE组差异无统计学意义（P〉0．05）。海马GFAP免疫组织化学染色结果显示,Sham组GFAP阳性细胞数分别低于其它3组（P〈0．01）,而EE组分别高于SE组和IE组（P〈O．05）,IE组低于SE组,但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论丰富环境刺激可以增加海马GFAP的表达,促进神经再生,改善学习记忆能力,而贫瘠环境刺激却使海马GFAP表达减少,阻碍神经再生,加重学习记忆能力的损害。     

出生前后慢性铝暴露对年轻大鼠海马长时程增强的影响

目的 研究出生前后不同浓度慢性铝暴露对年轻大鼠海马长时程增强的影响,进一步探讨铝损害学习与记忆的突触机制.方法 对照组、低浓度组和高浓度组大鼠从孕期始分别自由饮用蒸馏水、Al3+浓度为15mmol·L-1和30mmol·L-1的AlCl3水溶液;采用细胞外微电极记录法测定海马长时程增强.结果 对照组大鼠海马长时程增强发生率为90.91%,低浓度组为58.33%、高浓度组为18.18%,与对照组相比,高浓度组长时程增强发生率差异有显著性(P<0.01).对照组大鼠群体锋电位平均相对幅值达基线值(144.09±18.43)%,低浓度组为(105.83±16.79)%,高浓度组为(91.00±18.98)%,两铝暴露组与对照组比较,群体锋电位平均相对幅值增强率均明显降低(P<0.01),且各时点相比差异有显著性(P<0.01).结论 出生前后慢性铝暴露损害了海马LTP的诱导与维持,导致学习与记忆功能下降.     

颞叶癫痫大鼠认知功能与海马区NR2B表达的关系

目的〓〖HTK〗研究颞叶癫痫大鼠在Morris水迷宫(MWM)中学习、记忆能力与大鼠海马区N-甲基-D-天门冬氨酸受体2亚基B（NR2B）表达变化的关系,探讨颞叶癫痫学习、记忆等认知功能障碍的可能机制。〖HTW〗方法〓〖HTK〗随机将60只Wistar大鼠分为癫痫组（48只）和对照组（12只）。癫痫组采用海人酸（K A）右侧海马立体定向注射制作颞叶癫痫大鼠模型,又分为：癫痫迷宫训练组（A组）,癫痫迷宫未训练组（B组）;对照组即NS迷宫训练组（C组）,注射生理盐水。通过MWM测验观察A、C组大鼠在7、14、28、42d时各亚组的学习、记忆能力。采用免疫组化法检测大鼠在7、14、28、42d时各亚组海马CA1、CA3区NR2B的表达。〖HTW〗结果〓〖HTK〗与C组相比,在28、42d时A组学习、记忆功能明显下降,相应海马CA1、CA3区NR2B表达均明显降低(P＜0.05,P＜0.01) ,B组在28、42d时海马CA1、CA3区NR2B表达均明显降低(P＜0.01);与B组相比,A、C组在28、42d时海马CA1、CA3区NR2B表达均增高(P＜0.05,P＜0.01)。与A7、A14d亚组相比,A28、A42d亚组学习、记忆功能逐渐下降(P＜0.05,P＜0.01),NR2B的表达逐渐降低(P＜0.05,P＜0.01) ,且A组28d与A组42d亚组相比差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01)。B组各亚组NR2B表达与A组一致。〖HTW〗结论〓〖HTK〗颞叶癫痫长期反复发作时海马区NR2B表达减少,可能是导致颞叶癫痫学习、记忆等认知功能障碍的机制之一。     

外源性碱性成纤维细胞生长因子对放射后大鼠学习记忆能力的保护作用

目的 探讨外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对放射后大鼠学习记忆能力的影响.方法 利用分割照射建立的迟发性放射性脑损伤(RIB)模型鼠24只,采用尾静脉直接注射给药法给予外源性bFGF,3个月后进行学习记忆能力检测,同时观察脑组织病理变化及FGF受体1(FGFR1)表达情况.结果 bFGF组平均寻台潜伏期[(56.57±4.29)s]和第一象限路径与总路径长度百分比[(21.57±1.47)%]均较模型组[(118.24±10.79)s,(6.95±0.75)%]有显著改善(P<0.01);HE染色海马区域完整细胞计数bFGF组[(115.61±12.82)个]较模型组[(70.86±8.51)个]明显增多(P<0.01);IHC结果显示,bFGF治疗组海马内FGFR1表达水平(31.50±1.59)较模型组(12.03±1.68)明显增高(P<0.01).结论 外源性bFGF可通过诱导FGFR1表达对RIB模型鼠学习记忆能力起到一定的保护作用.     

脑低灌注触发脑内tau过度磷酸化和胆碱能神经损害

目的 探讨脑低灌注对脑内tau蛋白的过度磷酸化和胆碱能指标变化的影响.方法 40只SD大鼠随机分为低灌注组和假手术组,永久性阻断双侧颈总动脉制作脑低灌注模型;应用Y迷宫检测大鼠学习记忆能力,用免疫组化法检测大脑皮质和海马组织色氨酸404位点tau蛋白过度磷酸化(Pser404-Tau)和胆碱乙酰转移酶(ChAT)的表达,用考马斯亮蓝法检测海马组织乙酰胆碱酯酶(AChE)活性.结果 脑低灌注术后14 d和21 d,大鼠学习记忆能力明显减退,与假手术组相比差异有统计学意义(P＜0.01);大脑皮质和海马组织Pser404-Tau阳性细胞数较假手术组明显增加(P＜0.01);大脑皮质和海马组织ChAT阳性细胞计数较假手术组明显减少(P＜0.01);海马组织AChE活性较假手术组明显降低(P＜0.01).结论 脑低灌注后出现认知功能障碍,可能与脑缺血导致脑内tau蛋白过度磷酸化、损害胆碱能神经功能有关.     

丹参酮Ⅱ A对阿尔茨海默病模型大鼠海马MMP 2、iNOS表达及自由基释放的影响

目的探讨中药丹参酮ⅡA(TanⅡA)对AD模型大鼠学习记忆、海马内基质金属蛋白酶(MMP-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达及自由基释放的影响及作用机制。方法采用β-淀粉样蛋白(Aβ)定向注射法建立AD大鼠模型,并使用TanⅡA干预,通过观察大鼠学习记忆能力、定量分析大鼠海马MMP-2和iNOS基因及蛋白表达差异及表达相关性、自由基释放量的影响以阐明其作用机制。结果与正常对照组相比,Aβ注射法所建立AD模型大鼠海马内iNOS及MMP-2的表达显著增高(P0.05),两者的表达在mRNA及蛋白水平均正相关(P0.05)。AD大鼠海马内诱导释放的一氧化氮(NO)、ONOO-及活性氧(ROS)自由基含量显著增高(P0.05),同时AD模型组大鼠的学习记忆能力明显下降。而TanⅡA(50mg/kg)干预可显著降低AD大鼠海马内的NO、ONOO-及ROS含量,并降低iNOS(P0.05)及MMP-2蛋白的表达(P0.01),明显改善AD模型大鼠的学习记忆能力。结论TanⅡA可有效缓解AD症状,作用机制可能与抑制AD诱导的iNOS及MMP-2蛋白的表达,减少氧化性毒害自由基的产生,抑制氧化应激损伤有关。     

己酮可可碱促进学习记忆作用的实验研究

目的 探讨己酮可可碱对三种学习记忆障碍模型的作用.方法 观察己酮可可碱对自然衰老痴呆模型大鼠(Morris水迷宫法)、东莨菪碱所致记忆获得障碍模型小鼠(跳台法)和乙醇所致记忆再现障碍模型小鼠(跳台法)的学习记忆的影响.结果 己酮可可碱大中小剂量组均能够不同程度缩短自然衰老痴呆模型大鼠定位航行实验的潜伏期(P＜0.01或P＜0.05),提高空间搜索实验的空间象限记忆频度(P＜0.05);缩短东莨菪碱所致记忆获得障碍模型小鼠的触电潜伏期(P＜0.01或P＜0.01),减少错误次数(P＜0.05);对乙醇所致记忆再现障碍模型小鼠的记忆障碍也有一定的改善作用,但无统计学意义.结论 己酮可可碱具有改善学习记忆能力的作用.