类风湿关节炎寒热证候淋巴细胞亚群及细胞因子的差异分析

目的?比较分析类风湿关节炎（RA）患者寒、热证候间外周血淋巴细胞亚群与相关细胞因子的差异。方法?纳入RA患者115例，其中寒证58例，热证57例。采集中医证候数据，检测血沉（ESR）、C-反应蛋白（CRP）、免疫球蛋白及补体、类风湿因子（RF）、抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体、外周血淋巴细胞亚群及相关细胞因子水平，分析淋巴细胞亚群数量及细胞因子在RA寒、热证候中的差异。结果?与寒证组比较，热证组CD4+T细胞、B2细胞、B1细胞、NK细胞数量降低，IL-1β、IL-8、IL-6、干扰素（IFN）-γ升高（P<0.05，P<0.01）。ROC曲线结果显示：CD4+T/IL-6<30时，判断RA热证的敏感性为82.1%，特异性为82.4%；CD4+T/IFN-α<205时，热证可能性大，其敏感性为60.7%，特异性为91.2%。结论?寒、热证候间淋巴细胞数量及细胞因子有显著差异，CD4+T/IL-6<30和CD4+T/IFN-α<205是RA热证的特征性表现。     

生地苦参汤联合艾拉莫德对类风湿性关节炎患者血清抗CCP抗体及炎症因子的影响

目的:观察生地苦参汤联合艾拉莫德对类风湿性关节炎患者临床疗效、血清抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体及炎症因子的影响。方法:将80例类风湿性关节炎患者随机分为对照组和观察组,每组40例,疗程3个月。观察两组治疗前后血清CCP抗体、干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素α(IFN-α)水平及临床总有效率。结果:观察组血清CCP、IFN-γ、IFN-α、TNF-α水平均低于对照组,IL-4水平高于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。观察组显效率、有效率高于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。观察组总不良反应发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:生地苦参汤治疗类风湿性关节炎患者可降低血清CCP抗体水平,抑制TLR通路细胞因子TNF-α、IFN-α分泌,从而调节IFN-γ、IL-4平衡,发挥稳定免疫微环境作用。     

青藤碱对类风湿关节炎病人树突状细胞免疫活性的影响

 目的观察中药单体青藤碱对体外培养类风湿关节炎树突状细胞免疫活性的影响。方法分离12例类风湿关节炎病人外周血单核细胞,分为青藤碱高、中、低剂量组和空白对照组。采用GM-CSF,IL-4进行刺激分化,于分化第4天开始给予干预,于培养第8天收获细胞。混合淋巴细胞反应检测树突状细胞对同种异体T细胞的刺激作用,酶联免疫吸附法检测树突状细胞培养上清中IL-12的含量,流式细胞技术检测树突状细胞表型的改变。结果与对照组相比,在不同混合比例下青藤碱可抑制树突状细胞对同种异体T细胞的刺激能力,青藤碱可抑制树突状细胞IL-12的分泌及其表面分子CD40,CD80,CD83,CD86和HLA-DR的表达。结论青藤碱可能通过抑制树突状细胞激活T细胞的能力,而达到治疗类风湿关节炎的作用。     

健儿强身膏对卵蛋白致敏豚鼠外周血Th1/Th2免疫调控作用的影响

目的:研究健儿强身膏对卵蛋白致敏豚鼠外周血CD4 T细胞中Th1/Th2免疫调控作用的影响,为健儿强身膏防治哮喘提供理论和实验依据。方法:制备卵蛋白(OVA)致敏豚鼠哮喘模型,用ELISA检测各组豚鼠外周血IFN-γ、IL-4水平。结果:地塞米松和健儿强身膏高、中剂量均能显著上调下降的哮喘模型豚鼠血清IFN-γ水平,与哮喘模型组比较差异显著。地塞米松组和健儿强身膏高、中剂量组豚鼠外周血IL-4/IFN-γ比值亦有明显改善,与哮喘模型组比较差异有统计学意义。结论:健儿强身膏对哮喘豚鼠Th1/Th2细胞起调节作用,能上调Th1细胞分泌细胞因子IFN-γ,从而纠正致敏豚鼠Th1/Th2细胞失衡。     

健脾清化方药物血清对慢加急性肝衰竭患者体外T淋巴细胞及其细胞因子的影响

目的:本研究通过健脾清化方大鼠含药血清和空白对照组血清体外培养湿热型HBV相关慢加急性肝衰竭患者淋巴细胞,观察患者T细胞亚群以及细胞上清液中IFN-γ、TNF-α、IL-18、IL-10水平变化,探讨健脾清化方对慢加急性肝衰竭患者T细胞分化的影响及细胞上清液中细胞因子的影响。方法:分离20例HBV相关慢加急性肝衰竭证属湿热型患者外周血淋巴细胞,分别应用健脾清化方大鼠含药血清和空白对照组血清体外培养,流式细胞仪检测T细胞亚群的变化,ELISA定量检测细胞上清液中IFN-γ、TNF-α、IL-18、IL-10水平变化。结果:含药血清刺激细胞后,CD_3~+、CD_4~+百分比较空白血清组上升,CD8+百分比较空白血清组下降,CD_4~+/CD_8~+比值较空白血清组上升,细胞上清液中TNF-α、IFN-γ、IL-18水平呈下降趋势,IL-10水平呈上升趋势,两组差异有统计学意义(P0.001)。结论:健脾清化方可以提高CD_3~+、CD_4~+百分比及CD_4~+/CD_8~+比值,降低CD_8~+百分比,改善T细胞亚群紊乱状态,健脾清化方可降低慢加急性肝衰竭患者外周血淋巴细胞上清液中TNF-α、IFN-γ、IL-18水平,提高IL-10水平,改善Th1/Th2失衡状态,减轻肝脏损伤程度,延缓病情发展。     

参芪扶正注射液对脐血CIK细胞体外增殖及杀瘤活性的影响

目的观察参芪扶正注射液对脐血细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)体外增殖及杀瘤活性的影响。方法用脐血单个核细胞,诱导分化CIK细胞,分为4组。细胞因子组加入γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素1α(IL-1α)、白细胞介素2(IL-2)、CD3单抗细胞因子;参芪扶正注射液组:加入参芪扶正注射液;细胞因子+参芪扶正注射液组:加入参芪扶正注射液﹑IFN-γ、IL-1α、IL-2、CD3单抗细胞因子;对照组只加培养液。培养12天后CIK细胞达到增殖高峰期,用流式细胞仪检测细胞表型和增殖能力,MTT法检测CIK细胞对K562细胞的杀伤作用,ELISA法检测CIK细胞分泌的细胞因子IL-2、IFN-γ、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果对脐血CIK细胞体外增殖的影响,在培养12天时,参芪扶正注射液组与细胞因子组比较差异无统计学意义(P>0.05),细胞因子+参芪扶正注射液组与细胞因子组相比差异有统计学意义(P<0.01);CIK细胞对K562细胞的杀伤作用,各实验组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),参芪扶正注射液组CIK细胞在12、16天时分泌IL-2、IFN-γ、TNF-α因子水平优于对照组(P<0.01)。结论参芪扶正注射液对脐血CIK细胞既有显著的增殖和杀瘤作用,又可促进脐血CIK细胞分泌IFN-γ、IL-2和TNF-α。     

痹痛定胶囊对类风湿性关节炎患者辅助T细胞的影响

目的研究痹痛定胶囊对类风湿性关节炎(RA)患者辅助T细胞(Th1/Th2)的影响。方法通过酶联免疫法检测RA患者及健康人血清标本中γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)的水平。结果RA患者组血清IFN-γ、IL-4水平和IFN-γ/IL-4比值显著高于健康对照组(P<0.01);经痹痛定胶囊治疗后RA患者IFN-γ、IL-4水平和IFN-γ/IL-4比值均明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论痹痛定胶囊可通过抑制血清中IFN-γ和IL-4水平而抑制体液免疫和细胞免疫功能,提示痹痛定胶囊可调节RA患者体内Th1/Th2细胞的激活状况。     

环瓜氨酸肽辅助完全弗氏佐剂致关节炎大鼠的模型研究

目的:研究环瓜氨酸肽(CCP)辅助完全弗氏佐剂(CFA)造模对佐剂性关节炎模型大鼠临床体征、血清因子、病理的影响。方法:SD大鼠随机分为4组,即空白对照组、完全弗氏佐剂雄性组(雄CFA组)、完全弗氏佐剂雌性组(雌CFA组)、完全弗氏佐剂+环瓜氨酸肽组(CCP+CFA组)。除空白对照组注射0.1ml生理盐水外,雄CFA组和雌CFA组注射0.1ml CFA,CCP+CFA组注射含有100μg环瓜氨酸肽的0.1ml CFA,造模后每隔3d观察大鼠足肿胀度,第28d处死取血清ELISA法检测IL-6、TNF-a、RF、anti-CCP,致炎侧踝关节进行病理检测。结果:与空白对照组比较,雄CFA组、雌CFA组和CCP+CFA组大鼠关节肿胀度在各个时间段均显著增大,但各模型组之间无显著的统计学意义;与空白对照组比较,各模型组IL-6、TNF-a、RF、anti-CCP均明显升高,具有极显著的统计学意义,与雄CFA组比较,CCP+CFA组IL-6、TNF-a、anti-CCP含量均升高,具有显著的统计学意义,但雌、雄CFA组之间无显著差异;与空白组比较,各模型组炎性细胞浸润、滑膜组织增生、纤维组织增生、巨噬细胞增生、骨质侵蚀水平均明显升高,具有显著的统计学意义,但各模型组之间无统计学意义。结论:环瓜氨酸肽作为一种类风湿关节炎造模的辅助剂,其血清IL-6、TNF-a、RF、anti-CCP均较普通模型显著,可以应用到类风湿关节炎的研究中。     

止痒合剂一号治疗急性湿疹40例临床观察及相关细胞因子检测

目的评价止痒合剂一号治疗急性湿疹湿热浸淫证型的临床疗效,并探讨其对患者血清IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ水平影响。方法80例急性湿疹患者随机分为止痒合剂一号组(治疗组)、氯雷他定组(对照组),每组40例,均以2周为1个疗程,2个疗后观察2组疗效及血清IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ水平的变化。选择健康志愿者40例作为空白对照组。结果治疗组总有效率85.0%,对照组为72.5%;治疗前,治疗组及对照组血清IL-2、IFN-γ水平均低于空白对照组,IL-4、IL-5水平均高于空白对照组(P0.05);治疗后,治疗组与对照组血清IL-2、IFN-γ水平均较各自治疗前降低,IL-4、IL-5水平均较各自治疗前升高(P0.05);治疗组前述细胞因子水平与对照组比较差异有统计学意义(P0.05);对照组与空白对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论止痒合剂一号对于急性湿疹湿热浸淫证型患者可能通过改善相关细胞因子水平发挥治疗作用,且疗效优于对照组。     

复方甘草酸苷调节过敏性紫癜患儿免疫平衡的机制研究

目的通过检测复方甘草酸苷注射液对急性期过敏性紫癜患儿外周血炎症因子IFN-γ、IL-4、IL-17的影响,探讨其调节辅助性T淋巴细胞平衡的作用机制。方法收集于我院就诊的符合皮肤型过敏性紫癜的患儿60例,采用随机数字表法随机分为试验组及对照组,并选取同期就诊的正常儿童30例作为空白对照组,入院后当日及治疗10 d后分别采用抗凝管采集患儿外周静脉血,室温下离心,收集血浆1 ml装于保存-80℃冰箱备用,并采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血中炎症因子IFN-γ、IL-4、IL-17的变化。结果过敏性紫癜患儿治疗前外周血中炎症因子IFN-γ、IL-4、IL-17含量较空白组有明显增高,结果具有统计学意义(P0.05),而治疗后对照组及试验组IFN-γ、IL-4、IL-17含量均有明显下降,试验组较对照组下降更明显(P0.05)。结论复方甘草酸苷可能通过调节过敏性紫癜患儿的体内免疫平衡从而改善患儿的临床症状。     

艾灸对实验性类风湿关节炎大鼠外周血炎症因子及滑膜组织膜型程序性细胞死亡配体1表达的影响

目的观察艾灸对实验性类风湿关节炎(RA)大鼠外周血中白细胞介素10(IL-10)、γ干扰素(IFN-γ)含量及滑膜组织膜型程序性细胞死亡配体1(mPD-L1)表达的影响,探讨艾灸治疗RA抗炎效应的作用机制。方法将45只SD大鼠按照随机数字表法分为空白组、模型组和艾灸组,每组各15只。采用弗氏完全佐剂法对模型组和艾灸组造模,空白组同法注射0.9%氯化钠注射液0.1 mL作为对照。在造模后第7 d,艾灸组采用麦粒灸"肾俞""足三里"穴各5壮,日1次,6 d为1个疗程,共治疗3个疗程:空白组及模型组不施灸。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组外周血中IL-10、IFN-γ的含量,免疫组化法测定滑膜组织mPD-L1的表达。结果模型组血清中IFN-γ含量高于空白组(P0.05),艾灸组低于模型组(P0.05),艾灸组与空白组比较差异无统计学意义(P0.05)。模型组血清中IL-10含量低于空白组(P0.05),艾灸组高于模型组(P0.05),艾灸组与空白组比较差异无统计学意义(P0.05)。模型组滑膜组织mPD-L1表达高于空白组(P0.05),艾灸组滑膜组织mPD-L1表达低于模型组(P0.05),艾灸组与空白组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论艾灸治疗实验性RA有显著的抗炎作用,其作用机制可能与艾灸调节滑膜组织mPD-L1的表达,进而调控炎症因子IL-10、IFN-γ的表达关系密切。     

鸡血藤等4种中药对类风湿性关节炎患者单个核细胞IFN-γ、IL-10基因转录的影响

目的:研究鸡血藤(Sptholobus suberectus Dunn.),青风藤[Sinomenium acutum(Thunb.)Re-hd.et Wils.],风湿草(Siegesbecuia orientalis L.),苏木(Caesalpinia sappan L.)4种中药治疗类风湿性关节炎(RA)的免疫学机理。方法:采用半定量 RT-PCR 方法检测上述4种中药水提取液刺激 RA 患者外周血单个核细胞(PBMC)后,其γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素10(IL-10)基因转录的变化。结果:添加中药后,RA 患者外周血 PBMC IFN-γ、IL-10基因的转录均有明显下降。结论:上述4种中药对 RA 患者异常活化的细胞免疫和体液免疫有纠正作用,是治疗 RA 有效的机理之一。     

健脾愈疡汤治疗缓解期溃疡性结肠炎临床研究

目的:研究健脾愈疡汤治疗缓解期溃疡性结肠炎的临床疗效。方法:将78例缓解期溃疡性结肠炎患者随机分为观察组和对照组各39例,对照组患者采用柳氮磺胺吡啶治疗,观察组患者采用健脾愈疡汤治疗,比较两组患者白细胞介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)水平、外周血调节T细胞比例及复发情况。结果:经过治疗,观察组患者IL-17、TNF-α、IFN-γ水平显著低于对照组,外周血调节T细胞比例显著高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。观察组患者复发率显著低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:健脾愈疡汤可降低缓解期溃疡性结肠炎患者IL-17、TNF-α、IFN-γ水平,提高外周血调节T细胞比例,抑制炎症反应,促进溃疡愈合,降低复发率,值得临床推广应用。     

清藓饮对糜烂型口腔扁平苔藓患者外周血IFN-γ和IL-10表达的影响研究

目的:评价"清藓饮"对糜烂型口腔扁平苔藓患者外周血中IFN-γ及IL-10表达的影响。方法:40例糜烂型OLP患者口服清藓饮,1剂/d,早、晚餐后各1次,连续8周。空白对照组40例为健康志愿者,不服药。采用空白对照方法,使用ELISA法检测空白对照组与治疗组治疗前后,外周血中IFN-γ及IL-10的表达情况,并观察评定"清藓饮"临床疗效。结果:患者经过8周的治疗后,显效28例,有效7例,无效5例,总有效率为87.5℅。患者治疗前外周血中IFN-γ、IL-10表达水平,IFN-γ/IL-10比值均有明显变化,差异有统计学意义(P0.01)。结论:清藓饮治疗口腔扁平苔藓有明显的临床疗效,发挥疗效的具有机制可能在于调整了患者体内Thl/Th2漂移,从而起到对机体的免疫调节作用。     

补肺汤对慢性阻塞性肺疾病肺气肿大鼠血清IFN-γ、 IL-4表达水平影响研究

目的:通过建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)肺气肿大鼠模型,观察补肺汤对慢性阻塞性肺疾病肺气肿模型大鼠肺组织病理学及血清中IFN-γ、IL-4表达水平的影响,探讨补肺汤的治疗作用及可能的作用机制。方法:将40只清洁级健康SD大鼠,随机分为四组,每组各10只。空白对照组、模型组、西药对照组(脾氨肽组)、中药治疗组(补肺汤组)。除空白对照组以外其余各组均予以气道内注射脂多糖联合烟熏的方法制作COPD肺气肿动物模型,空白对照组与此同时在气道内注射等量生理盐水,空白对照组不予以烟熏。造模结束后,分别给予生理盐水及相应药物灌胃,2次/d,连续给药14 d。第15天开始将大鼠处死,取肺组织观察其病理学变化,用ELISA法检测血清中IFN-γ、IL-4炎性因子的水平。结果:与模型组相比,补肺汤可减轻肺组织的病理损害。与空白对照组相比,模型对照组大鼠血清中IFN-γ、IL-4的含量均有显著差异;与模型对照组相比,西药对照组与中药治疗组大鼠血清中IFN-γ、IL-4的含量有显著差异;与西药对照组相比,中药治疗组血清中IFN-γ、IL-4的含量无显著差异。结论:补肺汤对COPD肺气肿有良好的治疗作用,其作用机制可能是通过调控血清中IFN-γ、IL-4的表达,从而调节了Th1/Th2细胞因子平衡有关。     

脾胃虚实证大鼠局部与整体Th平衡的研究

目的探讨脾胃虚实证候大鼠模型胸腺、脾脏、外周血Th1/Th2平衡的相关性。方法将60只SPF级SD大鼠随机分为3组,其中一组为脾虚组,一组为湿热组,一组为正常组,每组20只,雌雄各半,采用酶联免疫吸附法(ELISA)技术对大鼠模型血浆、胸腺、脾脏组织Th1/Th2细胞因子水平进行检测。结果在胸腺方面,与正常组对比,脾虚组的IFN-γ表达下降,IL-4表达和IFN-γ/IL-4比值升高,但均无统计学意义(P0.05);湿热组的IFN-γ表达和IFN-γ/IL-4比值明显升高(P0.05),IL-4表达下降,但无统计学意义(P0.05)。在脾脏方面,与正常组对比,脾虚组的IFN-γ表达下降,但无统计学意义(P0.05),IL-4表达明显下降(P0.05),IFN-γ/IL-4比值明显升高(P0.05);湿热组的IFN-γ表达升高,但无统计学意义(P0.05),IL-4表达明显下降(P0.05),IFN-γ/IL-4比值明显上升(P0.05)。在外周血方面,与正常组对比,脾虚组的IFN-γ表达明显下降(P0.05),IL-4表达升高,IFN-γ/IL-4比值下降,但均无统计学意义(P0.05);湿热组的IFN-γ表达与IFN-γ/IL-4比值明显升高(P0.05),IL-4表达下降,但无统计学意义(P0.05)。结论脾虚组和湿热组在脾脏的IL-4表达均表现出下降趋势,IFN-γ/IL-4比值呈升高趋势,脾脏的Th1/Th2平衡在不同证型中可能均向Th1漂移。胸腺、脾脏、外周血等不同组织的IFN-γ/IL-4比值在脾胃虚实证候的呈现不同,提示不同部位的细胞因子表达差异性与不同证候的相关性,这可能是脾胃虚实证候的发病机制之一。     

扶正散结方调控Lewis肺癌小鼠TAMs免疫重塑作用的相关研究

目的:探讨扶正散结方对Lewis肺癌小鼠肿瘤相关巨噬细胞有关细胞因子的调控作用。方法:建立Lewis肺癌小鼠模型,称瘤重,算抑瘤率;应用免疫组化法检测各组肿瘤组织中CD68+浸润程度;采用ELISA法测定小鼠血清中IFN-γ,TGF-β,IL-4,IL-13,IL-6,IL-10,IL-12,TNF-α的含量。结果:与荷瘤模型组相比,其他各组均较高,分别为DDP组(50.28%)、中药预防组(34.37%)、中西结合组(66.76%),差异具有统计学意义(P<0.05)。CD68+浸润程度差异不具统计学意义。各组荷瘤小鼠血清中IFN-γ,IL-6,IL-12含量均较空白对照组低,而IL-4,IL-13,TGF-β含量均较空白对照组高,且在不同药物干预下,部分相关细胞因子含量具有显著性差异(P<0.05),中药预防组、中西医结合组与荷瘤对照组差异亦具有统计学意义(P<0.05),而TNF-α,IL-10含量,与荷瘤对照组比较,不具统计学意义。结论:扶正散结方可以通过下调肺癌免疫微环境中IL-4,IL-13,TGF-β等,上调IFN-γ等细胞因子,从而逆转TAMs的免疫重塑作用,控制肿瘤生长。     

青藤碱联合甲氨蝶呤对类风湿关节炎患者IL-1,IL-17和TNF-α表达的影响

目的研究青藤碱联合甲氨蝶呤对类风湿关节炎(RA)患者体内IL-1,IL-17和TNF-α表达的影响。方法 RA患者60例随机分为2组:对照组30例给予甲氨蝶呤治疗,治疗组30例给予甲氨蝶呤联合青藤碱治疗,观察2组治疗前后的体征和相关临床指标(如DAS28、ESR、RF、CRP)变化;采用qRT-PCR法检测治疗前后IL-1,IL-17和TNF-αmRNA的表达情况。结果治疗后2组患者的体征、相关临床指标均有明显改善,治疗后治疗组外周血淋巴细胞中IL-1,IL-17和TNF-αmRNA的表达水平较治疗前及对照组更低。结论青藤碱联合甲氨蝶呤治疗可通过调节外周血淋巴细胞的免疫功能而对RA患者起到显著治疗效果。     

杞菊地黄丸对肝肾阴虚证孕妇血清IFN-γ及IL-4水平的影响

目的探讨杞菊地黄丸对肝肾阴虚证孕妇证型转化的影响,以及细胞因子水平失衡与中医肝肾阴虚证间的关系。方法采用随机对照的研究方法,将163例孕12～16周,经辨证分型为肝肾阴虚证的孕妇随机分为口服杞菊地黄丸治疗组（试验组,86例）和空白对照组（对照组,77例）,比较两组孕妇治疗前后中医证型的转归以及血清细胞因子γ干扰素（interferon-γ,IFN-γ） 和细胞因子白细胞介素4（interleukin-4,IL-4）水平变化。结果（1）试验组治疗后47.7%（41/486）转化为正常证型,在随访的相同时间段内,对照组11.7%（9/77）转化为正常证型,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。（2）试验组治疗后外周血细胞因子IFN-γ和IFN-γ/ IL-4比值水平较治疗前明显降低（P〈0.01）,且显著低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）;试验组IL-4水平较治疗前升高,且高于对照组,但差异无统计学意义。结论肝肾阴虚证孕妇外周血中存在细胞因子IFN-γ及IL-4比例失衡,杞菊地黄丸可能通过影响细胞因子IFN-γ水平发挥免疫调节作用。