静脉血骨膜瓣生发层朝向对再生关节软骨的影响

在２４条犬髌股关节面上造成２０ｍｍ×２５ｍｍ的软骨缺损，用静脉血营养骨膜瓣移植修复，根据生发层不同朝向，分两组对比研究。结果表明：生发层朝关节腔组新生软骨组织学结构，超微结构，胶原类型及软骨细胞的营养代谢均明显优于生发层朝骨面组。对于临床应用具有指导意义。     

经皮注射重组人转化生长因子β1促进骨折愈合的实验研究

目的 运用基因重组的方法，对人转化生长因子β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ－β１）进行基因克隆，并在大肠杆菌中表达。同时观察其促进骨折愈合的作用。方法 以ｐＢＶ２２０作为原核细胞表达载体，将ＴＧＦ－β１ｃＤＮＡ片段定向重组到ｐＢＶ２２０的多克隆位点上，构建原核细胞表达性质粒ｐＴＧＦ－β１，并转化至大肠杆菌中进行温度诱导表达。制造兔桡骨骨折模型，经皮注射重组ＴＧＦ－β１，并     

雄激素和转化生长因子β1协同调节前列腺基质细胞增殖和分化

目的：探讨双氢睾酮（DHT）和转化生长因子β1（TGF－β1）对体外培养的前腺基质细胞增殖和分化的影响及前列腺基质增生的机制。方法：体外培养人前列腺基质细胞，加入DHT和TGF－β1，采用MTT法检测细胞增殖，免疫组化、RT－PCR方法检测平滑肌细胞特异性标记蛋白的表达。结果：对平顶期的前列腺基质细胞，单独应用DHT或TGF－β1无显著刺激增殖作用（P＞0．05）；DHT和TGF－β1联合应用时，可显著刺激基质细胞增殖（P＜0．01），TGF－β1可使前列腺基质细胞中平滑肌细胞特异性标记蛋白的表达增加（P＜0．05），与DHT联合应用时这种作用更强。结论：DHT和TGF－β1具有协同促进前列腺基质细胞增殖和分化的作用。TGF－β1和雄激素可能是前列腺基质增生和平滑肌细胞过度增殖的重要诱因。     

TGFβ1和BMP2对培养兔关节软骨细胞增殖和分化的作用

目的：探讨TGFβ1和BMP2对培养兔关节软骨细胞增殖和分化的影响，从而了解其在关节软骨损伤修复及骨关节炎（OA）病理变化中的作用，方法：采用光电镜、免疫细胞化学、液烁计数、流式细胞仪分析细胞周期等方法观察软骨细胞的直微结构和增殖、分化及其特异性的表达。结果：TGFβ1显著增加了原代软骨细胞^3H-TdR的掺入和使其进入S-G2/M期细胞比例增加。而BMP2则对第5代软骨细胞有明显的促增殖作用。结论：TGFβ1能促进原代软骨细胞的增殖，但不能阻止其增殖能力随传代培养而减弱，而BMP2则显著促进了第5代软骨细胞的增殖，这可能与细胞的分化状态和细胞外基质（ECM）、细胞骨架等有关。     

转化生长因子β1诱导的耐受性树突状细胞及其机制

目的探讨耐受性树突状细胞（DC）的诱导及其机制。方法以20ng／ml转化生长因子β1（TGF-β1）与C57BL／6小鼠来源的树突状细胞系（DC2．4）共培养6d，诱导耐受性DC（TGFβ-DC）；以脂多糖（LPS）刺激DC 48h即为成熟DC（LPS-DC）；以特异性针对免疫球蛋白样受体B（PIR—B）的小RNA干扰片段（PIR-B siRNA）转染TGF-DC（si—DC）。应用半定量逆转录聚合酶链反应和流式细胞仪测定各细胞表面PIR-A／B共同的胞外段PIR的表达、PIR—A／B及其mRNA的表达，以Balb／c小鼠脾淋巴细胞为反应细胞进行混合淋巴细胞反应（MLR），观察各组DC刺激反应细胞增殖的能力，同时以酶联免疫吸附试验测定MLR上清液中γ干扰素（IFN-γ）的水平。结果TGFβ-DC的PIR—B mRNA表达明显上调，PIR-A mRNA的表达明显下调（P〈0．05），而LPS-DC的PIR—B mRNA表达明显下调，PIR-A mRNA表达明显上调（P〈0．05），二者表面PIR的表达均增加，但差异无统计学意义（P〉0．05）；转染PIR-B siRNA后，TGFβ-DC的PIR-B mRNA表达明显下调，细胞表面的PIR表达也受到明显抑制（P〈0．05）。正常DC2．4细胞可以刺激异基因淋巴细胞增殖；LPS-DC刺激异基因淋巴细胞增殖的能力明显增强，其反应体系中的IFN-γ水平明显升高；TGFβ-DC刺激淋巴细胞增殖的能力受到明显抑制，其反应体系中的IFN-γ水平明显下降；而转染PIR—B siRNA后，TGFβ-DC刺激淋巴细胞增殖的能力得到明显恢复，其反应体系中的IFN-γ水平明显回升。结论TGF-β1可诱导产生耐受性DC，其高度表达免疫抑制性受体PIR—B，上调PIR—B的表达可能是TGF-β1诱导产生耐受性DC的分子机制之一。     

转化生长因子β1与肝纤维化

肝纤维化是以包括胶原在内的细胞外基质(ECM)的过度积聚,是多种原因引起的慢性肝病.转化生长因子-β1(TGF-β1)是肝纤维化最关键的因子,与肝纤维化发生发展、ECM代谢关系最为密切.大量研究证明TGF-β1在肝纤维化形成、发生及发展中有着重要的作用.就TGF-β1与肝纤维化的关系作—综述.     

转化生长因子β1对成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的：探讨转化生长因子β1（TGFβ1）对成纤维细胞增殖和胶原合成的影响及其意义。方法：采用非放射性细胞增殖检测,3H－胸腺嘧啶摄入,3H－哺氨酸摄入及DNA定量分析方法,观察TGFβ1对体外培养的生长融合后早期（24h)的病理性瘢痕及正常皮肤成纤维细胞的增殖活性和胶原合成的作用。结果：经TGFβ1作用后,来自瘢痕的成纤维细胞的3H－胸腺嘧啶核苷和3H－脯氨酸掺入增强（P＜0．01）,但来自正常皮肤的无明显变化（P＞0．05）。结论：在细胞生长融合后早期（24h),TGFβ1对瘢痕成纤维细胞的增殖和胶原合成具有正性调控作用,其在瘢痕的形成中可能具有重要作用。     

兔关节软骨细胞转化生长因子－β1免疫组织化学的研究

目的观察成纤维细胞生长因子对培养兔关节软骨细胞转化生长因子－β１的表达。方法 培养１月龄新西兰兔的关节软骨细胞,在每次换液时加入成纤维细胞生长因子１００ｎｇ／ｍｌ,辅满后收集细胞,作关节软骨细胞转化生长因子－β１常规及电镜免疫组织化学研究。结果 光镜下实验组细胞明显呈棕色,电镜下细胞膜表面有明显的胶金颗粒粘附。结论 成纤维细胞生长因子能促进关节软骨细胞转化生长因子－β１的表达。     

HB-EGF对系膜细胞增殖及转化生长因子-β1表达的影响

目的：观察肝素结合性表皮生长因子样生长因子（HB-EGF）对肾小球系膜细胞（GMC）增殖及转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的作用。方法：以原代培养大鼠肾小球系膜细胞为细胞模型,采用MTT、ELISA、RT-PCR等方法观察外源性HB-EGF对系膜细胞增殖及TGF-β1表达的影响。结果：（1）不同浓度HB-EGF对系膜细胞增殖有不同影响,10ng/ml时无刺激GMC增殖作用（P〉0.05）,100、1000ng/ml均能刺激GMC增殖（P〈0.01）,100ng/ml作用最明显。（2）HB-EGF（10ng/ml、100ng/ml、1000ng/ml）能刺激系膜细胞TGF-β1的表达（P〈0.01）,100ng/ml时作用最强。（3）100ng/mlHB-EGF刺激GMC24h、36h、48h,系膜细胞TGF-β1的表达均增加,随作用时间而变化,刺激36h和48h比24h作用更明显（P〈0.05）。结论：一定浓度范围内HB-EGF刺激GMC增殖,促进系膜细胞TGF-β1的表达,且具有一定的时间及浓度依赖性。     

甲状旁腺激素促进系膜细胞合成分泌转化生长因子β1

目的：研究甲状旁腺激素（PTH）对大鼠系膜细胞合成与分泌转化生长因子β1（TGF－β1）的影响。方法：（1）分别以10^-12,10^-11,10^-10,10^-9,10^-8mol/l的hPTH1-34刺激大鼠系膜细胞6，12，24，48h后，ELISA方法测定上清中TGF－β1的浓度；（2）分别以10^-12,10^-11,10^-10,10^-9,10^-8mol/L的hPTH1-34刺激大鼠系细胞48h,采用半定量RT－PCR方法检测细胞TGF－β1 mRNA的表达；（3）以10^-8mol/L的hPTH1-34分别刺激大鼠系膜细胞6，12，24，48h，采用半定量RT－PCR方法检测细胞TGF－β1 mRNA的表达，结果：（1）ELISA结果显示，hPTH1-34促进大鼠系膜细胞合成与分泌TGF－β1分泌作用达高峰（P＜0．01），（2）半定量RT－PCR方法结果显示，hPTH1-34促进大鼠系膜细胞TGF－β1 mRNA的表达，并具有浓度依赖和时间依赖性特点（各组与对照组间P＜0．05），结论：hPTH1-34从蛋白和基因水平显著促进系膜细胞TGF－β1的合成与分泌，且呈浓度依赖和时间依赖性特点。     

转化生长因子 - β1对肌腱细胞增殖的调控作用

目的：探讨转化生长因子－β1（TGF－β1）对人胚腱细胞增殖的调控作用。方法：采用^3H-TdR掺入法观察TGF-β1人胚腱细胞的DNA合成剂量效应和时间效应;采用流式细胞仪观察TGF－β1对细胞周期及增殖指数PI值（S＋G2M）的影响。结果：在0．5％胎牛血清条件下TGF－β1可刺激腱细胞增殖,其作用在0．5－10ng/ml之间呈剂依赖性增强,当剂量为10ng/ml时,促NDA合成作用达到饱和。10ng/mlTGF-β1作用36h时开始增殖显著,并可持续到72h。细胞周期分析表明：在TGF－β1作用,G0／G1%呈降低趋势,而S％呈升高趋势,反映细胞增殖活力的PI值也呈升高趋势,尤以5ng/ml以上浓度时为显著。结论：TGF－β1可能通过促进腱细胞增殖参与肌腱的修复。     

转化生长因子-β1对人胚肌腱细胞增殖和胶原及内源性Smads基因表达的影响

目的 探讨转化生长因子（TGF）－β1对人胚腱细胞增殖和代谢及其下游信号分子Smad的影响。方法 采用^3H－胸腺嘧啶脱氧核苷和^3H-脯氨酸掺入法观察TGF－β1对人胚腱细胞的DNA和胶原合成的影响。采用半定量反转录聚－合酶链反应（RT－PCR）检测TGF－β1作用24h肌腱细胞Smad2、3和7mRNA表达水平的变化。结果 在体积分数为0．5％胎牛血清条件下TGF－β1可刺激腱细胞增殖,其作用在0．5－10．0μg/L之间呈剂量依赖性增强（P＜0．05）,饱和剂量10μg/L增加DNA合成73％。TGF－β1各剂量组对胶原蛋白合成均有促进作用（P＜0．05）,最大效应剂量为5μg/L（107％）。TGF－β1能显著下调Smad2和Smad3基因的表达水平,同时诱导TGF－β1信号拮抗因子Smad7的产生。结论 TGF－β1能有效促进腱细胞增殖及胶原合成,同时能对其细胞内信号分子Smad的表达起自身调控作用。     

结缔组织生长因子介导转化生长因子β1促进瘢痕成纤维细胞转分化的研究

目的 了解结缔组织生长因子(CTGF)介导TGF-β1发挥促人增生性瘢痕Fb(HSFb)转分化的作用.方法 体外培养人HSFb,取5份细胞标本分别加入不同浓度TGF-β1(0、2.5、5.0、7.5、10.0 ng/mL),作用48 h后待测.余下标本分为:空白对照组;CTGF刺激组,培养液中加入终浓度10.0 ng/mL重组人CTGF;TGF-β1刺激组,培养液中加入终浓度10.0 ng/mL重组人TGF-β1;CTGF反义寡脱氧核苷酸(ASODN)转染组,细胞转染CTGF ASODN后,加入培养液;CTGF ASODN转染+TGF-β1刺激组,细胞转染CTGF ASODN后2 h,加人含终浓度10.0 ng/mL重组人TGF-β1的培养液.蛋白质印迹法分析不同浓度TGF-β1刺激对细胞CTGF表达的影响,比较各组α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达变化;流式细胞仪检测α-SMA阳性细胞百分率.结果 TGF-β1浓度为10.0 ng/mL时,CTGF的表达明显高于未受刺激的细胞(P<0.05).CTGF刺激组与TGF-β1刺激组α-SMA表达明显高于空白对照组(P<0.01).CTGF ASODN转染组以及CTGF ASODN转染+TGF-β1刺激组α-SMA表达与空白对照组接近(P>0.05).上述各组细胞α-SMA阳性细胞百分率依次为(10.8±2.8)%、(29.1±4.0)%、(28.7±4.8)%、(10.7±2.3)%、(14.3±2.9)%,统计学分析结果类似于α-SMA表达.结论 CTGF是TGF-β1发挥促人HSFb转分化的重要下游效应分子之一.     

雄激素和转化生长因子β_1协同调节前列腺基质细胞增殖和分化

目的　探讨双氢睾酮 (DHT)和转化生长因子 β1(TGF β1)对体外培养的前列腺基质细胞增殖和分化的影响及前列腺基质增生的机制。　方法　体外培养人前列腺基质细胞 ,加入DHT和TGF β1,采用MTT法检测细胞增殖 ,免疫组化、RT PCR方法检测平滑肌细胞特异性标记蛋白的表达。　结果　对平顶期的前列腺基质细胞 ,单独应用DHT或TGF β1无显著刺激增殖作用 (P >0 .0 5 ) ;DHT和TGF β1联合应用时 ,可显著刺激基质细胞增殖 (P <0 .0 1)。TGF β1可使前列腺基质细胞中平滑肌细胞特异性标记蛋白的表达增加 (P <0 .0 5 ) ,与DHT联合应用时这种作用更强。　结论　DHT和TGF β1具有协同促进前列腺基质细胞增殖和分化的作用。TGF β1和雄激素可能是前列腺基质增生和平滑肌细胞过度增殖的重要诱因     

胎儿和少儿皮肤内转化生长因子-β1和β3基因表达的变化

目的　探讨转化生长因子 β1(TGF β1) ,TGF β3及其Ⅰ 型和Ⅱ 型受体 (TBRⅠ ,TBRⅡ )在胎儿和少儿皮肤中表达的特征。方法　提取 18例不同胎龄的胎儿皮肤和 6例少儿皮肤的总RNA后 ,分离mRNA ,用逆转录 多聚酶链反应 (RT PCR)方法检测这 4种基因的表达。结果　在早期妊娠胎儿的皮肤中 ,TGF β1,TBRⅠ和TBRⅡ基因表达较弱 ,随着胎龄的增加 ,这 3种基因表达逐渐增强。在少儿皮肤内 ,这 3种基因的表达量分别为妊娠早期皮肤的 1.3 ,1.3和 1.2倍 ,基因表达显著升高 (P <0 .0 5 )。在早期胚胎的皮肤中 ,TGF β3基因表达较强 ,而在少儿皮肤内 ,该基因表达低下。结论　在早期胚胎皮肤中 ,TGF β1,TBRⅠ和TBRⅡ基因低表达 ,TGF β3基因的高表达可能与胎儿皮肤创面无瘢痕修复密切相关。     

椎间盘内注射转化生长因子-β1诱导椎间盘退变

目的探讨转化生长因子-β1（transforming growth factorial,TGF-β1）对正常成年的羊椎间盘组织内环境的影响。方法将TGF-β1注射进羊的椎间盘内,生理盐水和碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growing factor,bFGF）分别作为阴性和阳性对照。术前及术后2．4．6个月检查腰椎X线及MRI,观察影像学变化;术后6个月处死动物,取出完整的椎间盘组织,观察椎间盘组织学变化。结果羊L5／L6椎间盘在注射转化生长因子6个月后（与对照组相比较）即出现明显退变。结论外源性TGF-β1可以导致正常椎间盘的退变。     

不同浓度转化生长因子β_1对人主动脉平滑肌细胞增殖及迁移的影响

目的探讨不同浓度转化生长因子(TGF)-β_1对人主动脉平滑肌细胞(HA-VSMCs)增殖及迁移的影响。方法体外培养人主动脉平滑肌细胞,用0、0.05、0.1、0.5、1、2、5、10ng/ml浓度的重组人TGF-β_1进行干预,分别在干预后第0、6、12、24、36小时5个不同时间点进行CCK-8试验,或24小时后进行Transwell迁移试验,观察细胞增殖及迁移情况。结果当TGF-β_1浓度5ng/ml时,随着刺激浓度增加,人主动脉VSMCs增殖水平逐渐升高,当TGF-β_1浓度5 ng/ml时,细胞增殖水平降低。不同浓度TGF-β_1(0、0.05、0.1、0.5、1、2、5、10 ng/ml)干预细胞,随着作用时间延长,细胞增殖水平逐渐升高,在24小时时达到高峰,之后逐渐降低。TGF-β_1浓度为5 ng/ml且培养时间为24小时时细胞增殖水平最高(OD值:0.843±0.016)(P0.01)。当TGF-β_1浓度≤5ng/ml(0、0.05、0.1、0.5、1、2、5 ng/ml)且作用时间为24小时时,随着TGF-β_1浓度增加,人主动脉VSMCs迁移水平不断升高,其中以TGF-β_1浓度为5 ng/ml时细胞迁移水平最高,迁移细胞数为84.667±0.577;TGF-β_1浓度5 ng/ml时,细胞迁移水平降低,迁移细胞数为69.667±1.528。与其余各组TGF-β_1浓度作用下的迁移细胞数比较,差异有统计学意义(P0.01)。结论 5ng/ml的TGF-β_1作用24小时更能刺激人主动脉平滑肌细胞发生增殖及迁移。     

转化生长因子-β1基因和胰岛素样生长因子1基因联合转染治疗兔膝骨性关节炎的研究

目的观察重组大鼠转化生长因子(TGF)-β1和胰岛素样生长因子(IGF)-1基因转染兔膝关节后对骨性关节炎(OA)的治疗效果。方法前交叉韧带切断法(ACLT)将新西兰白兔膝关节制成OA模型,分为5组,分别向膝关节内注射转染了不同重组基因的阳性克隆软骨细胞。4 周和8周后,取关节标本进行Mankin’s评分,AB-PAS染色,TGF-β1、IGF-1、Ⅱ型胶原原位杂交和免疫组织化学检测,透射电镜观察。结果手术对照组软骨损伤程度较大,其Mankin’s评分为 9．50±0．96(4周)和12．5±1．71(8周),明显高于空白对照组(P<0．01)和TGF—β1基因转染组、双基因转染组(P<0．05);各因子原位杂交和免疫组织化学染色,空白对照组(P<0．01)及TGF-β1 基因转染组、双基因转染组(P<0．05)的灰度值高于手术对照组;双基因转染组的灰度值较单基因转染组高(P<0．05);8周时各对应组灰度值较4周有明显下降(P<0．05);透射电镜观察显示,手术对照组的超微结构较空白对照组明显紊乱,经基因治疗4周后,超微结构逐渐恢复正常,但在8 周后,其紊乱程度又逐渐加重。结论关节内注射转基因软骨细胞对OA有一定治疗作用;TGF-β1 和IGF-1双基因的治疗效果优于单基因;基因治疗4周后,基因表达逐渐减弱,基因治疗具有时效性。     

转化生长因子-β1和胰岛素样生长因子-1对人髓核细胞体外增殖活性的影响

目的：研究转化生长因子-β1（TGF—β1）和胰岛素样生长因子-1（IGF—1）单独及联合应用对人髓核细胞体外增殖活性的影响，并观察其量效和时效关系。方法：体外分离培养人髓核细胞．将传2代细胞种于96孔板，采用噻唑蓝（MTT）比色法，观察TGF—β1和IGF—1在1％和10％血清浓度下对人髓核细胞体外增殖的调节作用及其剂量、时间与作用效果的关系。结果：在1％血清条件下，IGF—1的作用不显著，TGF—B1具有促增殖作用。在10％血清条件下，TGF—B1和IGF—1均能提高细胞的增殖活性，并且在有效浓度范围内呈剂量效应关系，TGF—B1的作用强于IGF—1。二者联合应用效果更显著。结论：TGF—B1和IGF—1均能不同程度地促进入髓核细胞的体外增殖，其效应在一定范围内与剂量和时间呈正相关．联合应用促进增殖作用更显著。