miRNA-140、MMP-3在OA关节滑液中的表达及相关性研究

目的 比较 miRNA-140 和 MMP-3 在骨性关节炎( OA)组与非OA组关节滑液中的表达,探究miRNA-140 和MMP-3与OA的相关性. 方法 采用实时定量PCR技术检测miRNA-140、MMP-3在OA组(n=65)与非OA组(n=65)关节滑液中的表达水平,并运用 Spearman 相关分析分析miRNA-140与MMP-3的相关性. 结果 组间比较显示OA 组miRNA-140的表达显著低于非OA组(P<0. 05),MMP-3的表达明显高于非OA组( P<0. 05 ). OA组内各因子之间相关分析显示,miRNA-140 和 MMP-3 呈显著负相关性( r=-0. 693、-0. 720,P<0. 05). 结论 相对于非OA病变,OA组关节滑液中miRNA-140 低表达,MMP-3高表达,两者之间呈负相关性.     

血浆及关节滑液中结缔组织生长因子水平与膝关节骨性关节炎严重程度的相关性

目的测定原发性膝关节骨性关节炎(OA)患者血浆和关节滑液中结缔组织生长因子(CTGF)水平,探讨CTGF与膝关节OA严重程度的相关性。方法选择原发性膝关节OA患者75例为研究组,男25例,女50例,平均年龄(68.9±8.1)岁;采用Kellgren-Lawrence分级系统(KL分级)进行分级,研究组患者的膝关节X线片评价至少为KL 2级。对照组为排除膝关节OA的健康人25例,其髋、膝关节X线片评价均为KL 0级,男8例,女17例,平均年龄(67.8±7.5)岁。研究组与对照组性别、年龄、体质量指数差异均无统计学意义(P>0.05)。采用酶联免疫吸附测定法测定2组血浆和滑液中CTGF水平,分析研究组血浆和关节滑液中CTGF水平与KL分级的相关性。结果研究组血浆CTGF水平显著高于对照组,研究组关节滑液中CTGF水平显著高于血浆,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同KL分级亚组间的血浆和关节滑液中CTGF水平比较差异均有统计学意义(P<0.05),KL分级越高,血浆和滑液中CTGF水平越高。血浆和关节滑液中CTGF水平与OA严重程度的KL分级呈显著正相关(P<0.05)。结论血浆和关节滑液中CTGF水平与OA患者影像学严重程度呈正相关,CTGF可作为反映膝关节OA严重程度和疾病进展情况的标志物。     

miRNA-27a和miRNA-146a在骨性关节炎患者中的诊断意义

目的 探究血清miRNA-27a和miRNA-146a表达量与骨性关节炎(osteoarthritis,OA)发病的关联性。 方法 选取2017年5月—2018年12月湖州市第一人民医院骨科收治的OA患者75例,以性别和年龄为匹配因素选取同时期进行治疗的非OA患者63例和健康体检者44例作为研究对象。RT-qPCR观察滑膜组织和血浆中miRNA-27a和miRNA-146a的表达量差异及相关性;观察OA患者中影响两种miRNA表达的因素及诊断价值。 结果 OA患者滑膜组织和血浆中的miRNA-27a和miRNA-146a表达量显著高于其他患者,差异具有统计学意义(P<0.05),且相关性良好(r=0.425;r=0.622,均P<0.05)。年龄>65岁、女性、晚期和肥胖的OA患者两种miRNA在滑膜组织和血浆中的相对表达量显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。血浆miRNA-27a诊断结果的诊断准确率、灵敏度、特异度和Kappa值分别为:80.8%、90.7%、73.8%和0.619;血浆miRNA-146a的诊断结果为:76.9%、86.7%、70.1%和0.544;串联诊断结果为:90.6%、86.3%、93.5%和0.803。 结论 miRNA-27a和miRNA-146a在OA患者中呈高表达,有较佳的诊断价值,在血浆和滑膜组织中表达趋势一致,女性、高龄、晚期OA和肥胖可能是导致两种miRNA升高的因素。      

microRN A-34a在大鼠膝骨关节炎模型中的功能研究

目的：探讨微小RNA‐34a（miR‐34a）在碘乙酸钠所致大鼠膝骨关节炎模型中的表达变化,并初步明确其功能。方法选取30只雄性Wistar大鼠,左侧膝盖不注射碘乙酸钠作为对照组,右侧膝盖注射碘乙酸钠作为模型组;造模完成后检测两组大鼠关节液内miR‐34a表达水平的变化;分离两组大鼠的膝关节软骨细胞并进行原代培养,敲低miR‐34a后,使用流式细胞仪测定细胞凋亡情况。结果模型组M akin评分为（5．09±1．35）分,对照组为（1．27±0．64）分,差异有统计学意义（ P＜0．05）。与对照组比较,模型组中miR‐34a在关节液和关节软骨细胞内的表达均升高,差异均有统计学意义（P＜0．05）。将miR‐34a用它的反义互补片段敲低后,模型组大鼠关节软骨细胞的凋亡受到明显抑制（P＜0．05）。结论 miR‐34a在碘乙酸钠所致大鼠膝骨关节炎的关节液中表达升高,并且抑制miR‐34a的表达会降低关节炎大鼠的关节软骨细胞凋亡率。     

miRNA-140在早期骨关节炎软骨细胞中的表达规律及功能

目的 观察早期骨关节炎（osteoarthritis,OA）软骨细胞中miRNA-140的表达规律以及转染ds-miRNA-140对软骨细胞功能的影响。 方法 建立兔OA模型,获得正常软骨细胞（A组）和4周（B组）、8周（C组）OA软骨细胞,应用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测各组miRNA-140相对表达量以及Ⅱ型胶原蛋白（Col2a1）和金属蛋白酶13（MMP-13）的表达情况。各组软骨细胞转染ds-miRNA-140后,观察细胞Col2a1、MMP-13的表达情况。 结果 B组、C组软骨细胞miRNA-140的表达和A组相比分别下降到63%和57%（P<0.01）,而B组和C组软骨细胞miRNA-140的表达差异无统计学意义（P>0.05）;B、C两组细胞Col2a1 mRNA的表达和A组相比分别减少了52%和63%（P<0.01）,B、C两组软骨细胞MMP-13 mRNA的表达和A组相比分别升高了3.01倍和4.15倍（P<0.01）。转染ds-miRNA-140后,B、C两组细胞Col2a1 mRNA的表达分别增加了60%和127%（P<0.01）,B、C两组MMP-13 mRNA的表达在转染后是转染前的54.53%和42.61%（P<0.01）。Col2a1和MMP-13蛋白表达水平变化趋势与mRNA一致。 结论 OA早期关节软骨miRNA-140的表达显著减少;转染ds-miRNA-140可增加软骨细胞Col2a1表达,同时降低MMP-13的表达。     

MMP-13与IL-6在骨性关节炎相关性表达的研究

①目的探讨MMP-13与IL-6在骨性关节炎患者的相关性表达。②方法采用免疫组织化学技术检测60例OA患者及20例正常对照组关节软骨与滑膜MMP-13、IL-6的表达及二者在OA中表达的相关性。③结果MMP-13蛋白在OA组阳性表达的IOD值明显高于正常对照组(P<0.01),IL-6蛋白在OA组阳性表达的IOD值高于正常对照组(P<0.05);二者在OA中的表达呈正相关(r=0.827,P<0.01)。④结论MMP-13与骨关节炎发生发展有密切关系,OA关节软骨细胞与滑膜细胞中高水平的MMP-13,可能是通过IL-6等一系列炎性细胞因子激活,并上调。     

Bak、Fas在骨关节炎软骨及滑膜中表达的实验研究

目的探讨Bak、Fas基因在骨关节炎软骨细胞及滑膜中的表达及意义。方法成年新西兰大白兔24只，根据文献采用石膏固定方法制作骨关节炎动物模型，用免疫组化、原位末端标记技术（TUNEL）等方法检测Bak、Fas在兔膝关节软骨细胞及滑膜中的表达和软骨细胞凋亡情况。结果在软骨细胞中Bak、Fas的表达实验组阳性率均高于对照组（P〈0．03）；实验组软骨细胞凋亡程度与Fas、Bak的表达均呈正相关（P〈0．03）。结论Bak、Fas基因与骨关节炎发生发展有密切关系。     

大骨节病与骨关节病患者软骨细胞凋亡及其机制的比较研究

目的比较分析大骨节病与骨关节病关节软骨中细胞凋亡及相关调控因子Bcl-2、Bax、Fas及iNos的表达分布特点，探讨两病发病机制的异同。方法收集大骨节病和骨关节病的关节软骨各15例．并以15例正常人作对照。采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的脱氧核糖核酸缺口标记（TUNEL）技术和免疫组化抗生物素蛋白-生物素-碱性磷酸酶（B-SA）法染色，观察大骨节病、骨关节病和正常对照关节软骨的凋亡细胞和Bcl-2、Bax、Fas及iNOS蛋白阳性表达率及其分布特点。结果（1）大骨节病及骨关节病关节软骨凋亡阳性细胞数较正常关节软骨增多（F=20．90～53．16，df=42，P〈0．01），且关节软骨剥蚀区的凋亡阳性细胞数较未剥蚀关节软骨区增多（t=4，154-6.004，df=28，P〈0.01），但大骨节病与骨关节病之间软骨细胞凋亡阳性数无显著性差异（t=1.329～1.362，df=28，P〉0.05）。（2）大骨节病与骨关节病关节软骨Bcl-2、Bax、Fas及iNos表达阳性细胞数较正常关节软骨增多（F=25.46-215.31，df=42，P〈0．01），且关节软骨剥蚀区Bcl-2、Bax、Fas及iNos表达阳性细胞数较未剥蚀区增多忙2．278～7.77，df=28，P〈0．05），但大骨节病患者与骨关节病Bcl-2、Bax、Fas及iNos的表达阳性细胞数无显著性差异（t=0.284-1．590，df=28，P〉0．05）。结论大骨节病与骨关节病均有相似的细胞凋亡，而且凋亡机制相同，即Bcl-2、Bax、Fas及iNos途径。     

抑瘤素M在膝关节骨关节炎中的表达

目的检测抑瘤素M(OSM)在骨关节炎(OA)和正常滑膜组织中的表达差异,探讨OSM在骨关节炎发病中的作用。方法术中留取33例OA严重病变组、10例OA轻微病变组、8例正常对照组的滑膜组织。采用实时定量PCR技术检测各组膝关节滑膜组织中OSM的表达,免疫组织化学法检测各组滑膜组织中OSM的分布与表达。结果在膝关节滑膜组织中,OA严重病变组、OA轻微病变组和正常对照组均能检测出OSM阳性表达且与病情严重程度呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05)。OA轻微病变组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 OA患者滑膜细胞高表达OSM与病情相关。OSM在骨关节炎的发病过程中起到重要作用。     

膝骨性关节炎患者滑膜和滑液中基质金属蛋白酶-3表达水平的研究

目的比较骨性关节炎和半月板损伤患者关节滑膜和滑液中基质金属蛋白酶-3的表达,探讨OA的发病机制。方法收集骨性关节炎患者关节滑膜和滑液43例,以单纯半月板损伤患者的关节滑膜和滑液45例为对照;采用免疫组织化学染色法,观察骨性关节和半月板损伤患者关节滑膜MMP-3阳性表达强度;采用ELISA法检测两种滑液标本基质金属蛋白酶-3的水平。结果MMP-3在OA滑膜组织中的表达与对照组相比差异有统计学意义（P（0.01）;MMP-3在OA滑液中的水平与对照组相比差异也有统计学意义（P（0.05）;MMP-3在OAX线分级为I度的关节滑膜和滑液中的表达和II度相比无统计学意义（P〉0.05）。结论MMP-3在OA发生发展中扮演着重要的角色。     

骨关节炎患者关节软骨及滑膜中MMP-9、IL-6的表达

目的探讨骨关节炎中基质金属蛋白酶9(MMP-9)、白介素6(IL-6)mRNA和蛋白的表达。方法采用免疫组织化学技术检测60例骨关节炎病例(OA组)及20例正常对照关节软骨及滑膜MMP-9、IL-6蛋白的表达水平;采用原位分子杂交技术检测30例OA及10例正常对照关节软骨及滑膜MMP-9、IL-6 mRNA的表达水平。结果 MMP-9 mRNA和蛋白在OA组阳性表达的积分光密度(IOD)值均高于正常对照组[(8.38±2.29)vs(3.52±1.36),P<0.01;(9.18±3.58)vs(3.83±1.48),P<0.01],OA中二者的表达正相关性(r=0.924,P<0.01);IL-6 mRNA和蛋白在OA组阳性表达的IOD值均高于正常对照组[(8.74±3.62)vs(5.91±1.53),P<0.01;(8.96±3.57)vs(6.87±1.43),P<0.01],OA中二者的表达亦正相关(r=0.917,P<0.01);MMP-9 mRNA、IL-6 mRNA及相应蛋白在OA中的表达均正相关(原位杂交r=0.426,P<0.05;免疫组化r=0.444,P<0.01)。结论 MMP-9、IL-6在OA关节软骨与滑膜中呈高表达,二者对OA的发生发展可能起促进作用。     

小儿脑性瘫痪类型与手功能分级相关性初探

目的 探讨脑瘫患儿的脑瘫类型和手功能受损情况以及两者之间的相关性。方法 采用中文版脑瘫患儿手功能分级系统 ( Manual Ability Classification System, MACS)对成都市20个区市县残疾人联合会登记在册的4～12岁脑瘫患儿手功能进行评定,并分析其与脑瘫类型的关系。结果 在调查的280例患儿中,痉挛型脑瘫195例（69.64%）,其中痉挛型双瘫最多见（56.41%）,痉挛型偏瘫最少见（1.03%）;在痉挛型脑瘫中,65.13%的患儿MACS分级为Ⅰ～Ⅱ级,而在混合型脑瘫和不随意运动型脑瘫中, 84.44%和80.95%的患儿MACS分级分别为Ⅲ～Ⅴ级。脑瘫患儿认知功能障碍程度的增加,其MACS功能分级水平也在增加（r=0.613, P<0.05）。脑瘫类型不同的患儿其MACS手功能分级有差别 ( P<0.05),痉挛型脑瘫患儿大多表现为轻度手功能障碍,而混合型和不随意运动型脑瘫患儿大多表现为中重度手功能障碍。痉挛型脑瘫的不同亚型与MACS功能分级存在正相关（r=0.541, P<0.05）,表现为绝大多数痉挛型双瘫的患儿手功能受损轻,而痉挛型四肢瘫患儿大多表现为中重度手功能障碍。MACS手功能分级与患儿父母受教育的程度及抚养人的类型无关（ P>0.05）。结论 脑瘫类型与MACS手功能分级有关,临床上根据脑瘫类型可预测脑瘫患儿的手功能受损情况,尽早制定有针对性的康复计划和分级管理措施。     

超声造影在类风湿关节炎腕关节炎活动期病变中的诊断价值

目的 探讨超声造影在类风湿性腕关节炎活动期病变中的诊断价值。 方法 选取温州市中心医院在2015年1月-2016年11月收治的以腕关节肿痛为主诉就诊的类风湿性关节炎患者30例(54个腕关节),设为观察组,另选取同期做类风湿筛查的健康体检者23例(共46个腕关节),设为对照组。采用彩色多普勒超声检测2组腕关节滑膜厚度,检测增生滑膜有无血流信号、关节有无骨质侵蚀、有无关节积液;对观察组患者腕关节进行超声造影检查(CEUS),分析检查结果与DAS28、EST、CRP、RF的相关性。 结果 ①观察组患者54个腕关节中出现滑膜增厚51个、关节积液33个、骨质侵蚀29个,对照组46个腕关节中,出现滑膜增厚3个、关节积液4个、关节侵蚀1个,比较差异具有统计学意义(P<0.05);2组平均滑膜厚度比较差异有统计学意义(t=15.731,P<0.001);②观察组51个滑膜增厚关节中,42个检出血流信号,对照组3个滑膜增厚关节中,1个检出血流信号,差异具有统计学意义(P<0.001);③滑膜厚度和CEUS分级与ESR、CRP、DAS28评分呈正相关,与RF、Anti-CCP无相关性;超声造影TIC定量分级与滑膜厚度、CEUS灌注分级呈正相关。 结论 超声造影能够清晰显示腕关节内滑膜形态学改变,定量分析滑膜内血流灌注情况,与血清学指标及疾病活动度呈正相关,在早期诊断类风湿性关节炎腕关节活动期病变中具有较高的临床价值。      

血清外泌体miR-27a在胃癌中的表达及其临床意义

目的 外泌体近年来成为肿瘤研究中关注的热点，外泌体中的miRNA已经证实在多种肿瘤中发挥重要作用。本研究旨在探讨胃癌患者血清外泌体microRNA-27a的表达变化及其临床意义。 方法 收集40例在2015年1月—2017年12月间就诊于安徽医科大学第二附属医院普外科且前期没有接受过任何治疗的胃癌患者术前术后血清标本，收集同期20例体检健康者血清标本，分离血清外泌体，同时进行RNA提取。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清外泌体miR-27a水平的相对定量含量，比较胃癌组与正常组之间的差异，并比较胃癌组术前、术后外泌体miR-27a表达的差异。对40例胃癌患者血清外泌体miR-27a水平以及临床病理表现(性别、年龄以及肿瘤分级)进行分析，在参照随访资料的基础上，分析患者外泌体miR-27a表达与预后间的联系。 结果 胃癌患者术前血清外泌体miR-27a水平为0.153±0.092，健康体检者为0.823±0.125，两者比较差异有统计学意义(P＜0.001)；胃癌患者术后血清外泌体miR-27a水平为0.505±0.143，与术前比较明显升高(P<0.05)。肿瘤患者血清外泌体miR-27a表达量与肿瘤分级成负相关，Ⅰ/Ⅱ期患者术前相对表达量为0.179±0.102，Ⅲ/Ⅳ期为0.102±0.076(P<0.05)。 结论 胃癌患者血清外泌体中miR-27表达量明显降低，其表达量与肿瘤分级负相关，对于早期筛查胃癌和胃癌的治疗有一定的临床价值。      

血清学阴性类风湿关节炎关节液中抗环瓜氨酸肽抗体、抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体的测定及临床意义

目的：检测血清学阴性类风湿关节炎(serum negative rheumatoid arthritis,SNRA)患者的关节液中抗环瓜氨酸肽（cyclic citrullinated peptide,CCP）抗体、抗突变型瓜氨酸波形蛋白（mutated citrullinated vimentin, MCV）抗体水平，了解关节液中这两种抗体对诊断SNRA的临床意义。方法: 应用酶联免疫吸附测定（enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）法检测两组患者膝关节液中抗CCP抗体和抗MCV抗体，实验组为SNRA患者，共29例，对照组为骨关节炎（osteoarthritis,OA）患者，共28例，并收集两组患者的临床表现及实验室指标。结果: 实验组29例SNRA患者膝关节液中抗CCP抗体阳性者10例（34.5%），测定值为（114.5±62.6） U/mL；抗MCV抗体阳性者6例（20.7%），测定值为（32.0±11.3） U/mL；对照组28例OA患者膝关节液中3例抗CCP抗体阳性（10.7%），测定值为（20.6±0.1） U/mL，2例抗MCV抗体阳性（7.1%），测定值为（22.1±1.7） U/mL。SNRA组关节液抗CCP抗体的阳性率显著高于对照组（34.5% vs.10.7%， χ2=4.571, P＜0.05）；SNRA组关节液抗MCV抗体的阳性率高于对照组（20.7% vs.7.1%， χ2=2.167, P＞0.05），但差异无统计学意义；抗CCP抗体在SNRA中的敏感性为34.5%，特异性为89.3%，阳性预测值为76.9%，阴性预测值为56.8%；抗MCV抗体敏感性为20.7%，特异性为92.9%，阳性预测值为75.0%，阴性预测值为53.1%；膝关节液中抗CCP抗体和抗MCV抗体两者联合检测的敏感性为48.0%，特异性为82.8%，SNRA关节液抗CCP抗体阳性组、抗MCV抗体阳性组与各自阴性组相比较，在年龄、病程和晨僵方面差异均无统计学意义，而膝关节液抗CCP抗体阳性组和抗MCV抗体阳性组红细胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate, ESR）、C反应蛋白（C-reactive protein，CRP）和28个关节的疾病活动评分（the disease activity score in 28 joints，DAS28）均比各自阴性组高(P均<0.01)。抗CCP抗体与ESR和CRP之间呈正相关(r=0.567, P<0.01; r=0.664, P<0.01)；抗MCV抗体与ESR和CRP之间呈正相关(r=0.344, P<0.01; r=0.749, P<0.01) 。结论: SNRA关节液抗CCP抗体和抗MCV抗体联合检测有助于SNRA诊断和疾病活动的判断。     

软骨中硫化氢含量及其对白介素1β诱导的软骨细胞基质金属蛋白酶13表达的抑制作用

目的：研究关节液及关节软骨中硫化氢（hydrogen sulfide,H2S）及其合成酶的含量和变化,以及H2S对白介素1β（interlukin-1β,IL-1β）诱导的软骨细胞人基质金属蛋白酶-13（matrix metalloproteinase 13,MMP-13）表达的影响。方法：收集在北京大学第一医院行膝关节手术（关节镜手术或膝关节置换术）患者的关节液及废弃的关节软骨,用亚甲基蓝法检测关节液H2S的含量;从废弃的关节软骨中分离出相对正常的软骨细胞,用H2S分子探针方法检测软骨细胞中的内源性H2S,用免疫细胞化学方法检测软骨细胞中H2S合成酶胱硫醚-β-合成酶（cystathionine beta-synthase,CBS）、胱硫醚-γ-裂解酶（cystathionine gamma-lyase,CSE）、巯基丙酮酸硫转移酶（3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,MPST）;用Western blot法检测H2S合成酶CBS、CSE、MPST在不同退变程度的软骨组织中的含量。培养相对正常的人软骨细胞至第三代,分为4组：（1）对照组：不加任何药物;（2）IL-β组：单加5 μg/L的IL-1β;（3）IL-1β+H2S组：提前0.5 h加200 μmol/L的NaHS,再加5 μg/L的IL-1β;（4）H2S组：单加200 μmol/L的NaHS。Western blot法检测各组细胞MMP-13蛋白、总核因子κB p65（nuclear factor κB p65,NF-κB p65）及磷酸化NF-κB p65蛋白的含量,Real-time PCR检测各组细胞MMP-13基因的转录情况。结果： 退变膝关节的关节液中H2S含量为(14.3±3.3) μmol/L,Outerbridge分级3级软骨组织中CSE表达量显著高于Outerbridge分级1级软骨组织中的表达量（1.67±0.09 vs. 1.26±0.11,P＜0.01）,而CBS与MPST的表达量差异无统计学意义（P＞0.05）。IL-1β组MMP-13的表达较正常对照组明显升高,且差异具有统计学意义（1.87±0.67 vs. 0.22±0.10,P＜0.05）, IL-1β+H2S组MMP-13的表达较IL-1β组明显降低,且差异具有统计学意义（0.55±0.11 vs. 1.87±0.67,P＜0.05）,H2S组MMP-13的表达较正常对照组差异无统计学意义。 Real-time PCR方法测量了药物干预实验中各组细胞MMP-13基因转录情况,结果显示IL-1β组MMP-13基因转录较正常对照组明显升高,且差异具有统计学意义（31.40±0.31 vs. 1.00±0.00,P＜0.05）, IL-1β+H2S组MMP-13基因转录较IL-1β组明显降低,且差异具有统计学意义（24.41±1.28 vs. 31.40±0.31,P＜0.05）, H2S组MMP-13基因转录较正常对照组无显著性变化。IL-1β组总p65含量较正常对照组明显升高,且差异具有统计学意义（2.13±0.08 vs. 0.73±0.08,P＜0.05）, IL-1β+H2S组总p65含量较IL-1β组明显降低,且差异具有统计学意义（1.24±0.13 vs. 2.13±0.08,P＜0.05）, H2S组总p65含量较正常对照组无显著性变化;IL-1β组磷酸化p65含量较正常对照组明显升高,且差异具有统计学意义（1.30±0.13 vs. 0.19±0.04,P＜0.05）, IL-1β+H2S组磷酸化p65含量较IL-1β组明显降低,且差异具有统计学意义（0.92±0.26 vs. 1.30±0.13,P＜0.05）,H2S组磷酸化p65含量较正常对照组无显著性变化。结论： H2S参与了软骨退变,起到部分抑制细胞外基质降解酶MMP-13的作用,从而实现对软骨细胞外基质的保护。     

老年原发性直肠癌组织中miRNA-143和miRNA-221的靶基因预测及相关生物信息学分析

目的 探讨miRNA-143和miRNA-221在老年直肠癌中的诊断价值及临床意义。 方法 收集2015年9月-2016年12月蚌埠医学院第一附属医院老年直肠癌患者标本50例和健康人群标本30例,使用高通量测序技术、荧光定量PCR检测验证直肠癌及正常组织中miRNA差异表达;Pearson检验对miRNA-143和miRNA-221进行相关性分析;miRBase数据库预测两者miRNA的靶基因;R 3.4.0软件绘制差异miRNA热图聚类图,miRNet数据库和cytoscape 3.5.1绘制miRNA与mRNA表达调控网络。 结果 对比正常组织,miRNA-143和miRNA-221在老年原发性直肠癌组织中均下调(P<0.001,P=0.009),两者表达水平呈正相关(r=0.517,P=0.003)。GO功能注释主要富集于MAPKK活性、干细胞发育、STAT蛋白酪氨酸磷酸化调控、蛋白质磷酸化氨基酸结合、酪氨酸磷酸化肽、调节脂质激酶活性、磷蛋白聚合、核转录mRNA聚A尾缩短等生物学过程和分子功能(P<0.01);KEGG信号通路富集主要涉及TP53基因调节细胞死亡基因转录、VEGF信号通路、IL-4信号通路、抑瘤素M信号通路(P<0.01)。调控网络表明miRNA-143和miRNA-221之间有少许靶基因重合,两者之间具有协同作用。 结论 miRNA-143和miRNA-221作为直肠癌抑癌因子,为临床老年直肠癌的诊断提供一定的临床意义。      

基质金属蛋白酶13和转化生长因子β1 mRNA及蛋白在骨性关节炎中的表达

目的：探讨骨性关节炎（OA）中金属蛋白酶-13（MMP-13）,转化生长因子-β1（TGF-β1）mRNA和蛋白表达的意义.方法：采用免疫组织化学技术,对60例OA病例及20例正常对照组进行了MMP-13及TGF-β1蛋白表达的检测;通过原位杂交技术,对30例OA及10例正常对照进行了MMP-13及TGF-β1在mRNA水平表达的检测.结果：MMP-13mRNA和蛋白在OA组阳性表达的积分光密度（IOD）值均显著高于正常对照组（P〈0.01）,OA中两者的表达有显著正相关性（P〈0.01）;TGF-β1mRNA和蛋白在OA组阳性表达的IOD值均显著高于正常对照组（P〈0.01）,OA中两者的表达亦有显著正相关性（P〈0.01）;MMP-13mRNA,TGF-β1mRNA及相应蛋白在OA中的表达均呈负相关（P〈0.05或P〈0.01）.结论：OA中TGF-β1高表达通过下调关节软骨与滑膜细胞中MMP-13的表达,对OA关节软骨起保护作用.     

骨性关节炎患者血清和关节滑液中BMP-7的检测及临床意义

目的探讨将BMP-7作为骨性关节炎（osteoarthritis,OA）早期诊断潜在生物学标志的可能性。方法收集67例OA患者及23例非OA膝关节疾病患者（半月板损伤11例,前交叉韧带损伤9例,盘状半月板2例,髌骨半脱位1例,均无明显关节软骨损伤）的血清和关节滑液,采用Kellgren-Lawrence放射学分级标准对OA患者的影像学表现分级。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清和关节滑液中BMP-7水平。结果 OA组血清、滑液中BMP-7水平高于非OA组（Pser〈0.001,PSF=0.001）,两组血清中BMP-7水平均高于滑液（P〈0.001）。OA组血清、滑液中BMP-7水平与OA严重程度相关（rser=0.788,Pser〈0.001;rSF=0.766,PSF〈0.001）,血清BMP-7与滑液BMP-7水平呈正相关（r=0.817,P〈0.001）。结论 BMP-7可作为生物学标志用于OA的早期诊断及预后监测。     

白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子α及基质金属蛋白酶13在骨性关节炎中的表达及相关性

目的 探讨白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及基质金属蛋白酶-13(MMP-13)在骨性关节炎中的表达及相关性.方法 采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法及酶联免疫吸附(ELSIA)法检测72例骨性关节炎患者及32例正常对照者关节液中IL-1β、TNF-α及MMP-13的表达,对骨性关节炎患者病情严重程度进行美国纽约特种外科医院(HSS)评分,采用Pearson 相关分析法分析骨性关节炎患者IL-1β、TNF-α与MMP-13的相关性以及它们与HSS评分之间的相关性.结果 骨性关节炎患者关节液中IL-1β、TNF-α、MMP-13基因及蛋白表达水平均高于正常对照者(P<0.01),骨性关节炎患者关节液中IL-1β、TNF-α、MMP-13蛋白水平均与骨性关节炎严重程度呈正相关,IL-1β和TNF-α均与MMP-13蛋白水平呈正相关.结论 IL-1β、TNF-α及MMP-13与骨性关节炎发生、发展有密切关系,并且与病情严重程度相关,关节液中MMP-13的高表达可能是通过IL-1β及TNF-α等炎性细胞因子激活、上调.测定骨性关节炎患者关节液中IL-1β、TNF-α及MMP-13 水平对骨性关节炎的诊断、病情判断和治疗具有重要意义.