P2Y_(12)受体与神经系统疾病研究进展

ATP是维持机体细胞正常代谢所必须的能量载体,但同时也是一种重要的神经递质.Burnstock等(1978年)将ATP受体分为P1和P2受体两类,P1受体又称腺苷受体;P2受体分为P2X(离子通道受体)和F2Y(G蛋白偶联受体).     

神经系统P2Y受体功能研究进展

ATP是维持机体细胞正常代谢所必须的能量载体,但同时也是一种重要的神经递质.1978年,Bumstock等[1]将ATP受体分为P1和P2两类受体:P1受体又称腺苷受体;P2受体分为P2X(离子通道受体)和P2Y(G蛋白偶联受体).     

脑内P2X7受体研究进展

三磷酸腺苷（ATP）是细胞供能和储能的物质,在研究中发现它还是中枢神经系统的一种重要神经递质。1970年Burnstock G证实ATP是非胆碱能和非肾上腺素能神经释放的神经递质,正式提出了神经元细胞膜表面存在嘌呤受体。1985年他将ATP结合的受体命名为嘌呤能受体,并将其分为P1（腺苷）、P2（腺嘌呤核苷酸）两大类受体。     

P2嘌呤受体与免疫和炎症

嘌呤受体分为P1和P2受体两大类.P1受体属G蛋白偶联受体家族,包括A1、 A_(2A)、 A_(2B)、 A_3四类,主要由腺苷激活;P2受体包括P2X和P2Y两类,P2X受体是一类离子型配体门控通道,已克隆出7个不同的P2X亚型(P2X_(1-7)),P2Y受体是一类与G蛋白偶联的代谢型受体,包括P2Y_1、 P2Y_2、 P2Y_4、 P2Y_6 、 P2Y_(11-14)受体.这些P2受体主要由核苷酸(ATP、 ADP和UTP等)激活.P2嘌呤受体在体内分布广泛,在免疫反应与炎症过程中起着重要的作用.     

P2X_7受体与神经病变的研究进展

<正>"嘌呤受体"根据其内源性配基、药理学和生化学特征的不同可分为P1和P2受体两大类,P1受体的配基是腺苷,P2受体的配基是嘌呤核苷酸。P2受体包括P2X和P2Y两个家族。P2X家族属配体门控离子通道,是2次跨膜受体;P2Y家族是7次跨膜的G蛋白耦联受体。     

P2X7受体在人固有免疫中的作用

P2受体是嘌呤受体的一种。P2受体包括P2X和P2Y,P2X受体是一类离子型配体门控通道有7个不同的亚型(P2X1-7)[1],P2Y受体是一类与G蛋白偶联的代谢型受体,发现有8个亚型(P2Y1、P2Y2、P2Y4、P2Y6、P2Y11-14)。近年来,随着科研工作者对P2X7受体的研究深入,P2X7受体的功能得到了更全面的认识。本文对P2X7受体在人固有     

P2X7介导的小胶质细胞形态和受体表达的变化

目的:研究P2X7受体介导的小胶质细胞形态和受体表达的变化,探讨P2X7受体信号通路及其下游过程。方法:运用ATP刺激原代小胶质细胞,免疫细胞化学观察P2X7受体介导的细胞形态和受体表达的变化;建立表达P2X7受体的单克隆细胞模型,免疫细胞化学观察ATP刺激下P2X7受体介导的细胞形态和受体表达的变化。结果:ATP刺激下小胶质细胞和P2X7-HEK293细胞的突起变短,形态变圆,体积缩小;随着ATP刺激量的增加,P2X7受体的表达逐渐增加。结论:P2X7受体介导了小胶质细胞形态的变化。     

ATP门控离子通道P2X_7受体在中枢系统的表达与功能

正P2X受体是由ATP激发的离子通道,从中可渗透Na~+、K~+和Ca~(2+),这些蛋白参与一系列生理过程,包括调节突触传输、平滑肌收缩、化学递质分泌和免疫反应调控。P2X_7受体作为P2X受体家族最独特的成员,其与其它成员在结构和功能上有显著差异,属于低分子溶质转运的非选择性离子通道~([1-3])。P2X_7受体作为嘌呤能受体,与其它P2受体有明显     

ATP通过P2Y1受体引发脊髓背角星形胶质细胞[Ca2+]i升高和GFAP表达上调

目的 观察体外培养的背角星形胶质细胞P2Y1受体激活对其[Ca2 ]i的变化和GFAP表达的影响.方法 培养并纯化脊髓背角星形胶质细胞,采用免疫组织化学染色观察背角星形胶质细胞P2Y1受体及GFAP的表达,激光共聚焦技术观察星形胶质细胞[Ca2 ]i的变化.结果 体外培养的大鼠脊髓背角星形胶质细胞大多表达P2Y1受体;P2Y受体激动剂ATP、ADP、ADP-βs剂量依赖性促进星形胶质细胞[Ca2 ]i升高;10 μg/mL的ATP、ADP和ADP-βs显著增加胞内[Ca2 ]i,此作用可被特异性P2Y1受体拮抗剂MRS2179所阻断,并具量效关系.免疫组织化学染色结果显示,100 μg/mL的ATP、ADP和ADP-βs作用下,星形胶质细胞GFAP表达上升,此效应可被100 μg/mL的MRS2179所抑制.结论 体外培养的大鼠脊髓背角星形胶质细胞表达P2Y1受体;P2Y1受体介导了ATP、ADP及ADP-βs促进星形胶质细胞[Ca2]i升高和GFAP表达增强的过程.     

嘌呤能离子通道型受体7与类风湿关节炎的相关性

RA是一种慢性炎症性自身免疫性疾病,炎症反应在RA的发病中起关键作用.嘌呤能离子通道型受体7(purinergic ligand-gated ion channel 7 receptor,P2X7R)是三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)门控的非选择性阳离子通道型受体,属嘌呤受体P2X家族...     

P2Y_6受体及其在神经系统疾病研究中的进展

<正>1978年Burnstock等发现了介导ATP神经递质信号转导的嘌呤受体,将其分为P2X1-7和P2Y1,2,4,6,11,12,13,14受体两类,其中P2X受体是离子通道受体,P2Y受体是G蛋白偶联受体。不同亚型P2Y受体通过不同G蛋白激活不同的细胞内信号转导通路,从而产生特定的生理功能。近年研究表明,P2Y6受体不仅参与了神经病理性疼痛的发生与维持,而且     

P2X受体拮抗剂对大鼠心肌缺血心电图的影响

受损伤(创伤、休克或缺血)时心血管组织可释放三磷酸腺苷(ATP),而心脏和血管的细胞均表达嘌呤受体的亚型,表明嘌呤类物质可影响心血管功能.     

P2Y及P2Y1嘌呤受体研究进展

1嘌呤受体的分类 1929年Drury和Szent—Gyorgyi首次证明了腺核苷酸和腺苷具有生物学效应：如静脉注入腺苷后可引起豚鼠心动过缓、尿分泌抑制和血管舒张等现象。1953年Holton发现刺激神经时其感觉末稍可释放ATP。此后,对于腺核苷酸和腺苷药理学和组织反应方面的报道逐渐增多。1972年以来Burnstock提出了“嘌呤能神经学说”,认定嘌呤核苷酸／ATP为一种神经递质,以后又证明在神经纤维内ATP与其它递质如NA或ACh共同存在（共递质）。1978年Burnstock正式命名“嘌呤能受体”（“purinergic receptor”）或“嘌呤受体”（“purinoceptor”）,并将其区分为P1（腺苷）和P2（ATP）两大类。     

ATP信号研究进展

胞外ATP浓度尽管很低，但在神经和非神经组织中均具有重要的生理意义，包括充当神经递质或调制、调节血管紧张度，参与血小板聚集和影响细胞增殖、分化、凋亡等。ATP信号在不同组织发挥的生物学作用由嘌呤受体介导。嘌呤受体有P1，P2两大类型，其中P2受体又包括P2X，P2Y两大受体家族。迄今已有19种嘌呤受体亚型被克隆。     

孕酮减轻ATP诱导的SH-SY5Y细胞损伤

目的:探讨孕酮对抗腺苷三磷酸(ATP)诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞损伤的神经保护作用和机制。方法:取对数生长期的SH-SY5Y细胞按照孕酮或ATP浓度的不同进行分组,CCK-8法检测细胞存活率,YO-PRO-1染色检测细胞膜通透性,Fluo-3染色检测细胞内Ca~(2+)浓度的变化,Western blot法检测嘌呤能P2X_7受体表达的变化。结果:与对照组相比,不同浓度(1、3、5和7 mmol/L)ATP作用2 h,SH-SY5Y细胞存活率显著降低(P0.05),细胞摄入YO-PRO-1的荧光强度明显增加(P0.05),且呈剂量依赖性。浓度为3、10和30 nmol/L的孕酮预孵育30 min可减轻ATP损伤作用,细胞存活率较单纯ATP组明显升高(P0.05或P0.01)。孕酮(30nmol/L)或P2X_7受体拮抗剂KN-62(500 nmol/L)预孵育30 min均可显著抑制ATP诱导的胞内YO-PRO-1的荧光增强(P0.01),而孕酮和KN-62两者之间没有明显差异。正常组细胞内钙离子含量少,ATP组细胞内钙离子荧光强度较对照组明显增高(P0.05),孕酮(30 nmol/L)或KN-62(500 nmol/L)预孵育30 min可明显降低(P0.05)ATP诱导的胞内钙荧光增强,而孕酮和KN-62两者之间的作用无明显差异。ATP组SH-SY5Y细胞P2X_7受体表达较对照组明显增加(P0.05),而孕酮(30 nmol/L)预孵育30 min则可显著降低ATP诱导的P2X_7受体表达(P0.05)。结论:孕酮可抑制ATP诱导的P2X_7受体表达、膜孔形成和胞内Ca~(2+)升高,降低细胞死亡率,明显减轻高浓度ATP对SH-SY5Y细胞的损伤作用。     

H_2S抑制ATP诱导的大鼠小胶质细胞活化及IL-1β的释放

目的:观察硫化氢(H_2S)供体硫氢化钠(Na HS)对三磷酸腺苷(ATP)损伤的大鼠小胶质细胞通透性、胞内Ca~(2+)浓度([Ca~(2+)]_i)及IL-1β释放的影响,探讨H_2S对ATP-P2X嘌呤信号通路的作用及其神经保护的分子机制。方法:取对数期形态结构及生长分化良好的大鼠小胶质细胞用于实验。Fura-2/AM荧光染料检测各组[Ca~(2+)]_i,细胞内YO-PRO-1荧光强度检测以反映膜的通透性,ELISA检测ATP-细菌脂多糖(LPS)激活的大鼠小胶质细胞IL-1β的释放水平。结果:随着ATP浓度的增加,大鼠小胶质细胞内YO-PRO-1的荧光强度显著增加,而给予Na HS预处理后细胞膜通透性明显降低,对YO-PRO-1的摄取明显减少(P0.05),胞内荧光强度明显减弱(P0.05)。ATP处理大鼠小胶质细胞引起[Ca~(2+)]_i迅速升高后缓慢下降形成持续时间较长的平台期。Na HS预处理虽不能改变[Ca~(2+)]_i的峰值,但可抑制平台期的形成(P0.05)。ATP与LPS联合作用可促进大鼠小胶质细胞IL-1β的生成和分泌,而Na HS预处理可明显逆转这一效应(P0.05)。结论:Na HS可降低ATP诱导的大鼠小胶质细胞膜通透性、Ca~(2+)内流和IL-1β释放,抑制该细胞的激活,提示嘌呤信号通路可能介导H_2S的细胞保护作用。     

三磷酸腺苷对N9小胶质细胞的损伤作用及其机制

目的:研究三磷酸腺苷(ATP)对N9小胶质细胞的损伤作用及其机制。方法:取对数生长期N9小胶质细胞,随机分为3组:(1)正常对照组:常规培养,不进行ATP处理;(2)ATP组:接种24 h后行ATP处理;(3)KN-62(P2X₇受体阻断剂)干预组:KN-62孵育30 min后行ATP处理,且KN-62存在于ATP作用整个过程。XTT法测各组N9小胶质细胞的活力;倒置相差显微镜观察细胞形态变化;流式细胞术检测细胞周期及凋亡;细胞免疫荧光检测P2X₇受体表达;Western blotting检测细胞P2X₇受体蛋白水平;ELISA检测细胞上清液中白细胞介素1β(IL-1β)含量。结果:500 μmol/L ATP和1 mmol/L ATP对细胞活力损伤程度较小,作用24 h后,细胞活力仍可达88.5%±5.5%和88.2%±8.4%。当ATP浓度达到或高于2 mmol/L时,细胞活力迅速降低,细胞发生皱缩,且随ATP作用时间延长,细胞活力逐渐降低,细胞密度逐渐减少,细胞皱缩程度加重,而KN-62干预后细胞活力较ATP组明显增多,细胞密度及形态明显好于ATP组。细胞周期及凋亡检测结果显示,ATP可使细胞周期阻滞于S期,细胞凋亡比例明显较对照组增多(P<0.01),KN-62干预可显著减轻ATP引起的细胞周期阻滞,细胞凋亡比例显著减少(P<0.01)。免疫荧光显示,ATP及KN-62干预对N9小胶质细胞上P2X₇受体的表达分布没有影响。Western blotting显示,正常对照组、ATP组及KN-62干预组间P2X₇受体蛋白水平没有明显差异(P＞0.05)。ELISA结果显示,ATP及KN-62干预对IL-1β的释放没有作用。结论:高剂量ATP可诱发N9小胶质细胞损伤,其机制可能与P2X₇受体介导的细胞周期阻滞和细胞凋亡有关,而与小胶质细胞的炎症反应无关。     

体外冲击波通过三磷酸腺苷诱导人骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化

目的 研究体外冲击波是否通过三磷酸腺苷（ATP）激活P2X7受体,诱导人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)向成骨细胞分化。方法 培养hMSCs细胞,检测冲击波是否引起其向外释放ATP;通过检测碱性磷酸酶(ALP)活性、骨钙素表达和钙结节形成,判断骨化形成和钙质沉积;用实时定量PCR检测P2X7受体的mRNA表达;用ATP水解酶、P2X7受体的siRNA以及 P2受体的抑制剂评估ATP释放和P2X7受体在冲击波诱导hMSCs成骨分化中的作用。结果 冲击波可引起细胞内ATP向外释放,冲击波和细胞外ATP能够诱导hMSCs向成骨分化,采用ATP水解酶、P2X7受体的siRNA和抑制剂能够抑制冲击波引起的hMSCs成骨化作用。结论 冲击波通过引起细胞内ATP向外释放,激活P2X7受体传导信号通路,促进hMSCs向成骨细胞分化。本研究结果为冲击波促进骨折愈合和治疗骨不连疗法提供了理论依据。     

疼痛研究的新靶点-P2受体

嘌呤与嘧啶受体(P受体)分为P1和P2受体两大类,P2受体包括P2X和P2Y受体.P2X进一步可分为P2X1,P2X2,P2X3,P2X4,P2X5,P2X6和P2X7亚型.P2X3受体在感觉神经元中高度表达,在痛觉中发挥重要作用,异聚体P2X2/3受体也涉及疼痛;P2Y受体的某些亚型在感觉神经元中高度表达,与痛觉有关.P2受体通过与其内源性配体核苷酸结合,参与机体组织器官多种功能的调节,在疼痛病理状态下(如神经病理性痛、急性疼痛、炎性痛及内脏痛等)发挥着重要的作用.P2受体有可能成为疼痛研究的新靶点.     

P2嘌呤受体亚型与冠心病的关系

嘌呤受体包括P1受体和P2受体。本文综述了P2嘌呤受体的多个亚型与冠心病之间的关系,P2Y1、P2Y2、P2Y11和P2X7受体参与动脉粥样硬化斑块中的炎性反应,P2X3受体参与了心绞痛的伤害性反应,P2X4受体参与血管重塑和增强非梗死区心肌的收缩力,P2Y2和P2Y6受体与冠脉介入术后再狭窄的形成有关,P2Y11受体的多态性可增加心肌梗死的风险,P2Y1、P2Y12和P2X1受体则参与了血栓的形成。研制P2嘌呤受体各亚型特异性的激动剂和拮抗剂对开发治疗冠心病的新药具有重要意义。