NF-кB介导促红细胞生成素神经细胞保护作用的研究

目的:观察促红细胞生成素(EPO)对谷氨酸(Glu)诱导的大脑皮质神经元损伤的保护作用和核因子-кB(NF-кB)介导的细胞内信号转导机制.方法:采用1日龄Wistar大鼠皮层神经细胞体外原代培养技术,建立Glu兴奋性毒性神经细胞损伤模型.实验分为正常对照组、Glu组、EPO组和吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC,NF-кB活化阻断剂)组.倒置显微镜下观察细胞的形态学改变;MTT法测定细胞存活率;流式细胞术测定细胞凋亡率评价细胞损伤程度.结果:Glu处理后神经细胞形态明显受损,EPO组神经细胞形态趋于正常,PDTC组细胞形态与Glu组相似;与正常对照组相比.Glu组神经细胞存活率明显下降、凋亡率明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01);而与Glu组相比,EPO组神经细胞存活率明显增高下降、凋亡率明显下降,差异均有统计学意义(P<0.01).与EPO组相比,PDTC组细胞存活率明显下降、凋亡率明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01),这些变化与Glu组相似.结论:EPO对Glu诱导的大脑皮质神经元损伤的具有保护作用,其胞内信号转导机制涉及到NF-кB的活化.     

NF-κB介导促红细胞生成素神经细胞保护作用的研究

目的：观察促红细胞生成素（EPO）对谷氨酸（Glu）诱导的大脑皮质神经元损伤的保护作用和核因子-κB（NF-κB）介导的细胞内信号转导机制。方法：采用1日龄Wistar大鼠皮层神经细胞体外原代培养技术,建立Glu兴奋性毒性神经细胞损伤模型。实验分为正常对照组、Glu组、EPO组和吡咯烷二硫氨基甲酸（PDTC,NF-κB活化阻断剂）组。倒置显微镜下观察细胞的形态学改变;MTT法测定细胞存活率;流式细胞术测定细胞凋亡率评价细胞损伤程度。结果：Glu处理后神经细胞形态明显受损,EPO组神经细胞形态趋于正常,PDTC组细胞形态与Glu组相似;与正常对照组相比,Glu组神经细胞存活率明显下降、凋亡率明显升高,差异均有统计学意义（P〈0.01）;而与Glu组相比,EPO组神经细胞存活率明显增高下降、凋亡率明显下降,差异均有统计学意义（P〈0.01）。与EPO组相比,PDTC组细胞存活率明显下降、凋亡率明显升高,差异均有统计学意义（P〈0.01）,这些变化与Glu组相似。结论：EPO对Glu诱导的大脑皮质神经元损伤的具有保护作用,其胞内信号转导机制涉及到NF-κB的活化。     

17β-雌二醇通过PI3K-Akt信号通路抑制丙泊酚诱导皮层神经元凋亡

 目的: 探讨17β-雌二醇对丙泊酚诱导原代培养皮层神经元凋亡的影响及机制。方法: 原代培养7 d的大鼠皮层神经元,给予不同浓度丙泊酚和或17β-雌二醇处理12 h,用MTT法检测神经元存活率变化,Hoechst 33258核染色法检测神经元调亡,Western blot法测定神经元p-Akt蛋白的变化。结果: 与溶剂对照组比较,丙泊酚呈剂量依赖性降低神经元存活率(P<0.05);与丙泊酚组比较,17β-雌二醇呈剂量依赖性提高神经元存活率(P<0.05),PI3K/Akt激动剂IGF组神经元存活率显著增加(P<0.01)。与溶剂对照组比较,丙泊酚组神经元凋亡率显著增加(P<0.01),丙泊酚+17β-雌二醇组神经元凋亡率较丙泊酚组显著下降(P<0.01),LY294002预处理可阻断17β-雌二醇的作用,使细胞凋亡率增加(P<0.01)。与溶剂对照组比较,丙泊酚呈剂量依赖性降低神经元p-Akt蛋白水平(P<0.05);与丙泊酚组比较,17β-雌二醇呈剂量依赖性提高神经元p-Akt蛋白水平(P<0.05);与丙泊酚+17β-雌二醇组比较,LY294002预处理组p-Akt蛋白水平显著下降(P<0.01)。结论: 17β-雌二醇可抑制丙泊酚诱导的原代培养皮层神经元凋亡,其机制可能与激活PI3K-Akt信号通路有关。     

13-甲基十四烷酸对氧反常诱导大鼠胚脑皮质神经元凋亡和形态学损伤的保护作用

目的探讨13-甲基十四烷酸(13-MTD)对氧反常诱导大鼠胚脑皮质神经元凋亡和形态学损伤的保护作用。方法原代培养大鼠胚脑皮质神经元,并以神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫荧光法鉴定。将神经细胞随机分为正常对照组、模型组和不同剂量13-MTD组,每组设6个复孔。氧糖剥夺3h/再复氧糖24h(OGD3h/R24h)方法制备神经元氧反常模型,于再复氧糖即刻分别给予13-MTD 5、10、20、40mg/L干预。倒置相差显微镜下观察神经细胞形态改变;磺酰罗丹明B(SRB)法测定神经细胞存活率;吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)染色法观察神经细胞凋亡;透射电子显微镜下观察神经元超微结构的改变。结果与正常组比较,模型组神经元呈现病理改变,神经细胞存活率显著下降(P0.01),细胞凋亡显著增多(P0.01),神经元超微结构损伤明显,可见核内染色质边集或凝聚成块状,胞质内细胞器明显减少甚至消失,线粒体肿胀、嵴断裂甚至消失等;与模型组比较,不同剂量的13-MTD可有效改善上述变化(P0.05,P0.01),使神经元形态及其超微结构损伤明显恢复,且存在剂量依赖关系,以13-MTD 20mg/L改善更显著(P0.01)。结论 13-MTD对氧反常诱导的大鼠胚脑皮质神经元损伤具有明显保护作用,其可能通过改善神经细胞形态和线粒体超微结构损伤,减少神经元凋亡,提高细胞存活率。     

脑缺血对大鼠大脑皮质中钙通道Cav1.3表达的影响

目的:探讨脑缺血后大鼠大脑皮质中钙通道Cav1.3表达变化及其在脑缺血损伤中的作用机制。方法:雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、缺血7 d组和缺血14 d组。采用免疫组织化学和免疫印迹分别检测各组大鼠大脑皮质中钙通道Cav1.3的表达,采用TUNEL法观察大鼠大脑皮质内细胞的凋亡。结果:与假手术组比较,缺血7 d和14 d组大鼠大脑皮质中钙通道Cav1.3免疫组织化学显色的平均光密度(OD)值和免疫印迹条带的IOD比值都明显降低,缺血14 d组较7 d组降低更明显,细胞凋亡检测显示大脑皮质中凋亡神经元数量随缺血时间延长而增加。结论:缺血导致神经元凋亡的机制可能通过影响钙通道Cav1.3的表达,从而影响皮质神经元的正常功能,导致神经元死亡。     

番茄红素对原代小鼠皮质神经元的保护作用及机制研究

目的:观察番茄红素(lycopene)对氧化损伤的原代皮质神经元的保护效应并探讨其作用机制。方法:采用原代细胞培养技术体外分离培养小鼠皮质神经元,通过免疫荧光染色法检测微管相关蛋白2(microtubuleassociated protein 2,MAP-2)的表达进行鉴定。将神经元分为4组:正常神经元组、叔丁基过氧化氢(tert-butyl hydroperoxide,t-BHP)处理组、t-BHP+lycopene处理组和lycopene处理组,培养24 h,采用MTT法检测各组神经元的活力;采用流式细胞技术检测各组神经元内ROS的水平;Western blot法检测各组神经元Bax、Bcl-2、caspase-3、cleaved caspase-3及细胞色素C蛋白表达的变化。结果:Lycopene能明显提高t-BHP处理的神经元活性,降低tBHP处理的神经元内ROS含量,同时上调Bcl-2蛋白的表达,降低Bax、cleaved caspase-3和细胞色素C蛋白的表达(P0.05)。结论:Lycopene能够对抗t-BHP诱导的原代皮质神经元的损伤,抑制神经元凋亡,其机制可能与降低神经元内ROS的水平及上调的表达有关。     

母源性丙烯酰胺暴露对子代鼠皮质神经元MAP-2与氧化应激的影响

目的:探讨母源性丙烯酰胺(acrylamide,ACR)暴露对子代鼠大脑皮质神经元MAP-2与氧化应激的影响。方法:SD孕鼠随机分为4组,自怀孕第6 d至怀孕第19 d起对照组和实验组分别灌胃给药给予双蒸水和每日8,16和24 mg/kg ACR溶液。HE和尼氏染色观察子代鼠皮质神经元形态学改变,免疫组织化学和Western Blot检测子代鼠皮质神经元MAP-2的表达,应用试剂盒检测大脑皮质组织中氧化应激指标丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、还原谷胱甘肽(GSH)。结果:(1)MAP-2表达:与对照组相比,实验组中、高剂量组MAP-2表达下降,差异有统计学意义(P0.05),而低剂量组则差异不显著(P0.05)。(2)氧化应激指标变化:与对照组相比,实验组中、高剂量组子代鼠大脑皮质组织中MDA含量显著升高,而T-SOD活力和GSH含量显著下降,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:丙烯酰胺致子代鼠神经元损伤的机制可能与其诱导氧化应激损伤有关。     

银杏内酯B对谷氨酸诱导脑皮质神经元凋亡及Ca2+超载的影响

目的：观察银杏内酯B对谷氨酸诱导培养脑皮质神经元凋亡的拮抗作用，并探讨这种作用与神经细胞内游离Ca2+浓度改变的关系。方法： 采用改良的方法原代培养胎小鼠脑皮质神经元，用噻唑兰（MTT）法检测神经元的存活情况；细胞凋亡采用形态学观察、DNA琼脂糖凝胶电泳法和Hoechst 33258核染色方法进行分析；用Fura-2/AM荧光指示剂法测定细胞内Ca2+浓度。结果： 谷氨酸（0.8 mmol/L）能诱导神经细胞凋亡和胞内Ca2+超载，银杏内酯B（10-250 μmol/L）能减轻谷氨酸所致的细胞损伤，表现为神经元存活率提高，细胞形态的恢复和DNA断裂减少。结论： 银杏内酯B可拮抗谷氨酸所致的神经细胞毒性作用，这可能与其能竞争PAF受体并降低神经细胞内［Ca2+］从而抑制谷氨酸诱导的神经元凋亡有关。     

母源性丙烯酰胺暴露对断乳期大鼠额叶皮质GAP-43和BDNF表达的影响

目的:探讨母源性丙烯酰胺(acrylamide,ACR)暴露对断乳期大鼠额叶皮质生长相关蛋白(GAP-43)和脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法:SD孕鼠随机分为4组,怀孕第6 d起对照组和实验组分别给予双蒸水和50,100,200μg/ml ACR饮水,直至仔鼠出生21 d,染毒结束时对断乳期大鼠称重。免疫组织化学检测额叶皮质GAP-43和BDNF的表达。结果:与对照组相比,实验各组断乳期大鼠体重呈浓度依赖性下降,且组间差异明显(P0.05)。与对照组相比,ACR实验各组GAP-43表达显著降低(P0.05),而低、中剂量组之间差异不显著(P0.05),高剂量组与低、中剂量组相比,表达显著减少(P0.05);与对照组相比,ACR实验组各组BDNF表达显著减少(P0.05),中、高剂量组与低剂量组相比,BDNF表达减少(P0.05),而中、高剂量组之间差异不显著(P0.05)。结论:母源性ACR染毒可能通过下调额叶皮质神经元GAP-43和BD)NF表达,抑制轴突延伸或扰乱神经元发育的内环境稳态,进而影响额叶皮质的发育。     

丙烯酰胺母源性暴露对新生大鼠海马GFAP和S100β表达的影响

目的:探讨丙烯酰胺(ACR)母源性暴露对新生大鼠海马胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和S100β表达的影响。方法:32只SD母鼠随机分为对照组(control)、低剂量ACR暴露组(ACR-L)、中剂量ACR暴露组(ACR-M)和高剂量ACR暴露组(ACR-H),每组8只,母鼠自妊娠第6 d起连续14 d灌胃给药,control组给予dd H2O,ACR组分别给予4、8以及16 mg/kg ACR直至仔鼠出生取出海马组织,建立ACR染毒孕鼠模型。HE染色观察各组大鼠海马神经元细胞形态的改变;免疫组化和Western Blot检测海马GFAP和S100β蛋白的表达情况。结果:HE染色显示随ACR染毒剂量增大,新生大鼠海马颗粒层神经元排列疏松;与control组相比,各剂量组GFAP的表达量呈浓度依赖性减少,而S100β的表达量随染毒剂量的增大而增加。结论:ACR母源性暴露对新生大鼠海马神经元造成损伤,其机制可能与下调GFAP表达及上调S100β表达有关。     

Effects on M-protein on laboratory data

We describe two patients with abnormal immunoglobulins: Case 1 was a non-diabetic patient with IgA-kappa type M-protein whose serum fructosamine(FRA) value was markedly elevated; and Case 2 was a patient with pseudo-leukocytosis induced by the interaction of etylenediaminetetraacetic acid(EDTA) and IgG-kappa type M-protein. The M-protein in Case 1 was found to be conjugated to serum albumin by immunoelectrophoresis. By gel filtration, the FRA peak of the patient's serum was shown in the high molecule weight fraction. The glycation of IgA-kappa type M-protein was clearly demonstrated by FRA staining after fractionation by serum protein electrophoresis. Although serum FRA values of other non-diabetic patients with IgA type M-protein were elevated, patients with IgG type M-protein and IgM type M-protein had low or normal serum FRA values. In Case 2, the white blood cell count of the patient's blood anti-coagulated with EDTA was 52,300/microliter as determined using an automated counter, but was within normal limits when counted manually by light microscopy using a hemacytometer. The white precipitates were formed by the interaction of the patient's serum with EDTA. Immunofixation electrophoresis revealed that the precipitates were IgG2-kappa type M-protein.     

国外关于复原力的研究综述

复原力是指个体从创伤经历以及压力性情景中成功成对并良好适应的一种能力。文章对国外有关复原力的研究进行了系统综述，从复原力的概念、结构、测量等三个办衙总结了具体研究领域的最新进展。在此基础上，指出复原力研究领域中存在的问题和将来的研究方向。     

Possible influence on heart rate on tinnitus

Assuming the possibility of the inner ear damage due to a hemodynamic imbalance essentially due to an abnormal vasomotor regulatory response, the possibility that heart rate (HR) has a correlation with the onset and/or the enhancement of tinnitus is hypothesized. In fact, recent studies have drawn the influence of other factors than blood pressure, in normotensive subjects, in taking part to the regulation of peripheral resistance, outlining the importance of both cardiac output (CO) - which is a function of heart rate (HR) and stroke volume (SV) and SV itself as a dynamic component to baroreflex control of muscle sympathetic nerve activity (MSNA). From this point of view, it could be possible that a condition of bradycardia can enhance tinnitus regardless of its cause, and conversely that a more elevated HR can be related to a relief of this symptom.     

国外关于自我设阻行为的研究综述

文章对国外 2 0多年来有关自我设阻的研究进行了系统综述。从自我设阻的行为表现及分类、引发条件、内在动机、影响因素、效果和测量等 7个方面总结了具体研究领域的最新进展。在此基础上 ,指出自我设阻研究领域中存在的问题和将来的研究方向     

超声造影方法的再探讨

目的探讨造影剂（Sono Vue）和与之相匹配的对比脉冲系列成像技术（CPS）在超声造影（contrast—enhanced uhrasonography）中的方法。方法对不同的造影部位及不同造影目的采用了不同的造影参数设置。结果84例患者除1例注射时刺破血管造成造影剂外渗影响造影效果外，其余83例效果满意。超声造影检查对肿块定性诊断的准确率优于CT、MRI，心肌灌注检查为临床提供方便、可靠的无创方法。结论应根据使用的造影剂和成像技术及造影目的设置相应的造影参数。     

胎儿血红蛋白持续综合征的实验研究

目的采用电泳技术对地中海贫血进行诊断,研究血红蛋白电泳技术在诊断HbF持续综合征应用中的准确性、可靠性。方法在地中海贫血筛查中,对脆性低者进行血红蛋白电泳,HbF定量分析,丽春红染色。结果在182例地贫筛查者的电泳结果中,有7例HbF持续综合征电泳只出现一条颜色较深的HbF带,含量均在65%以上。结论电泳技术在诊断地中海贫血疾病中是一项不可缺少的重要技术,对HbF持续综合征的正确诊断率为100%。