MIP-1α 诱导 Jurkat 细胞穿过人脑微血管内皮细胞单层能力分析简

本研究为探究人急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）细胞脑转移发生中枢神经系统白血病的机制及MIP-1α在T-ALL模式细胞Jurkat穿过人脑微血管内皮细胞（HBMEC）过程中的作用.应用real-time PCR、siRNA试验、跨内皮迁移试验和细胞黏附试验,分别检测MIP-1 α的表达、Jurkat细胞穿透能力、迁移能力和黏附力.结果表明,Jur-kat细胞作为研究T-ALL细胞穿过血脑屏障（BBB）机制的模式细胞MIP-1α表达均高于正常人T淋巴细胞以及其他3种T-ALL细胞系（HSB2、CEM、SUP-T1）,Jurkat细胞分泌的MIP-1α使其穿过HBMEC单层能力增强.MIP-1 αsiRNA干扰后的Jurkat细胞对HBMEC黏附和跨内皮迁移力下降.结论：Jurkat细胞分泌的MIP-1α参与了Jurkat细胞穿过HBMEC单层的过程.     

survivin基因在血液肿瘤细胞株的表达

survivin基因是近年来被发现的凋亡蛋白抑制因子家族(IAP)成员之一,其结构简单,组织分布具有明显的特征。我们研究了其在不同类型血液肿瘤细胞株中的表达,现报道如下。对象和方法1　研究对象　将巨核细胞白血病细胞株Dami、Burkitt’s淋巴瘤细胞株Raji、髓系白血病细胞株HL 6 0、组织细胞淋巴瘤细胞株U937、红白血病细胞株HEL、T细胞白血病细胞株6T CEM、慢性髓细胞白血病细胞株K5 6 2、T细胞淋巴瘤细胞株Jurkat、急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4、骨髓增生异常综合征RAEB t细胞株MUTZ 1(各细胞株均为我院保种)置于RPMI 16 4 0…     

T细胞急性淋巴细胞白血病中的染色体易位及其受累基因的研究进展

染色体易位在T细胞急性淋巴细胞白血病(T-ALL)中是非常普遍的现象.易位涉及的癌基因在T-ALL的发病机制中起重要作用.T-ALL染色体易位主要包括涉及T细胞受体(TCR)基因位点的染色体易位和形成融合基因的染色体易位.通过对染色体易位导致相关癌基因表达改变的研究来探讨T-ALL的发病机制,为发展临床上有效的相关特异性治疗提供可能.本文就T-ALL中染色体易位和涉及基因的研究进展作一综述.     

T细胞型急性淋巴细胞白血病靶向治疗的研究进展

T细胞型急性淋巴细胞白血病(T-ALL)为分子生物学特点与预后异质性大的恶性疾病,其侵袭性强,复发率高.尽管随着高强度联合化疗及造血干细胞移植(HSCT)应用于临床,T-ALL预后得到较大改善,但疗效仍不够理想.因此,深入研究T-ALL发病机制,探索新治疗靶位对于提高T-ALL疗效具有重要意义.随着对T-ALL分子生物学研究进展,T-ALL治疗的多个新型靶点被逐一发现.笔者拟就T-ALL靶向治疗新型靶点进行综述.     

63例T细胞急性淋巴细胞白血病患者MIC分型与临床预后分析

T细胞急性淋巴细胞白血病(T-ALL)约占ALL的20%,其生物学及临床特征不同于B细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL).我们回顾性分析了我院2000年1月至2007年6月63例住院初诊T-ALL患者的临床、免疫学分型和细胞遗传学资料,并就其与预后的关系进行讨论.     

HOX11~+急性T淋巴细胞白血病RUNX2基因启动子区域CpG岛甲基化及其表达的研究

本研究检测RUNX2基因在HOX11+急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞株和T-ALL患者骨髓细胞中的甲基化状态和表达水平,探讨其表达水平与启动子区CpG岛甲基化的关系。以3株急性T淋巴细胞白血病细胞株sil-ALL、DND41和RPMI及38例T-ALL患者、29例治疗后完全缓解T-ALL患者骨髓和8例正常人骨髓为样本,采用RT-PCR检测RUNX2 mRNA表达水平,采用重硫酸盐测序法、甲基化DNA免疫沉淀技术和启动子寡核苷酸微阵列芯片分析基因启动子区CpG岛甲基化状态和基因功能。结果表明,高表达HOX11的T-ALL患者样本中会出现RUNX2基因启动子区域的甲基化。RUNX2基因启动子区域在HOX11+T-ALL的甲基化比率为78.9%,明显高于HOX11-ALL(36.8%),两组差异有统计学意义(P<0.01)。RUNX2在HOX11+的细胞株中的表达明显低于HOX11-的细胞株,RUNX2在HOX11+的T-ALL患者中的表达水平(0.581±0.257)明显低于HOX11-的T-ALL患者(0.835±0.317),并且RUNX2 mRNA的相对表达程度与HOX11 mRNA的相对表达程度成负相关(rs=-0.378,P<0.01)。RUNX2基因在T-ALL中的表达水平与其甲基化呈负相关(rs=-0.419,P<0.01)。结论:HOX11能负调控RUNX2的表达,RUNX2基因启动子甲基化是导致其在T-ALL中表达下调或基因沉默的原因,这种HOX11对RUNX2基因的抑制作用有可能就是临床上HOX11高表达T-ALL患者具有更好的无事件生存率和更长的总生存率的原因。RUNX2基因的表达和甲基化水平对判断T-ALL患者的疗效有一定意义,并有望成为一个诊断T-ALL的分子标志。     

周期蛋白D3在小儿急性白血病细胞中的表达及期作用研究

目的　检测周期蛋白D1、D2 、D3 在小儿急性白血病细胞中的表达 ,并研究周期蛋白D3 在小儿急性白血病发病机制中的作用。方法　采用免疫组织化学法检测 43例急性白血病患者白血病细胞和 3种白血病细胞系中周期蛋白D的表达 ;用反义技术和流式细胞术研究周期蛋白D3在白血病细胞增殖中的作用。结果　小儿急性淋巴细胞白血病与急性非淋巴细胞白血病细胞中周期蛋白D3 阳性表达率分别为 47%和 38% ,急性白血病患者中周期蛋白D1阳性表达率约为5 % ,周期蛋白D2 表达均为阴性 ,正常对照组骨髓细胞周期蛋白D1、D2 、D3 表达均为阴性。周期蛋白D3 在白血病细胞系CEM细胞中表达阳性 ,用周期蛋白D3 反义脱氧寡核苷酸与CEM细胞共培养后 ,细胞增殖受到抑制。结论　周期蛋白D3 在小儿急性白血病细胞中呈现过度表达 ,并对白血病细胞增殖产生重要影响。     

成人T-急性淋巴细胞白血病的特点及治疗

T急性淋巴细胞白血病(T-ALL)是一种生物学特征异质性很大的疾病,其免疫表型、基因表达谱对疾病的治疗和预后有重要的指导意义.许多研究报告认为无论儿童还是成人T-ALL治疗效果均不理想.随着治疗强度的加大,T-ALL疗效有所改善,但仍有相当比例的患者无法治愈.本文就T-ALL的临床、生物学特点及治疗现状和进展做一综述.     

PAX5/BSAP在儿童急性白血病细胞和血液肿瘤细胞株中的表达研究

目的了解儿童急性白血病细胞和血液肿瘤细胞株中转录因子PAXS／BSAP的表达特性。方法采用实时定量RT-PCR方法，检测了6个血液肿瘤细胞株以及6例正常儿童、58例初发和4例复发急性白血病儿童骨髓细胞中PAX5和CD19mRNA的表达水平。采用Western Blotting分析了6个血液肿瘤细胞株和4个临床样本中BSAP表达水平。采用RNAi（RNA干扰）技术特异性阻断NAMALWA细胞株（B细胞系）中PAX5的表达。结果在NAMALWA细胞株中，PAX5和CD19mRNA相对表达量分别为2．35％和2．52％；而在T-和髓系细胞株中几乎不表达。同时运用Western Blotting在B系细胞中检测到-52KD的BSAP条带，但在T-和髓系细胞中为阴性。在临床样本中B-ALL（急性B淋巴细胞白血病）组比T-ALL（急性T淋巴细胞白血病）组和AML（急性髓细胞性白血病）组的PAX-5 mRNA表达高（P=0．029和P=0．013）。在B-ALL患儿中，PAX-5 mRNA表达的个体差异很大。RNAi技术抑制NAMALWA细胞株中PAX-5基因表达达35％，但不影响细胞增殖效率（P〈0．05）。结论部分B-ALL中PAX-5 mRNA表达明显升高，可作为进一步研究B-ALL发病机理的另一个切入点。RNAi技术可进一步用于B系血液恶性肿瘤细胞的观察研究。     

CD3相关T细胞受体研究进一步揭示T细胞型淋巴瘤与T细胞型急淋的区别

就定义而言,T细胞型淋巴瘤(T-LL)不侵犯或极低限度地侵犯骨髓,而T细胞型急性淋巴细胞白血病(T-ALL)则有广泛的骨髓浸润,并且常侵犯到外周血,然而T-LL与T-ALL的临床相似性却常使得二者难以被区分。本文作者选取30例肿瘤细胞表面表达CD3分子的T-LL和T-ALL患者,着重分     

T细胞急性淋巴细胞白血病免疫表型分析

本研究探讨T细胞急性淋巴细胞白血病（T-ALL）免疫表型特点。应用一组系列相关单克隆抗体和CD45/SSC设门的三色流式细胞术对140例T-ALL进行免疫表型检测。结果显示,白血病细胞表面T系抗原表达依次为CD7〉CD2〉CD3〉CD5,近20%患者CD10表达阳性。140例患者中12例带有B系抗原标记,阳性率达8.57%;136例中31例带有髓系抗原标记,阳性率达22.79%,所有病例均无CD14表达。干/祖细胞标记CD34表达阳性率31.06%,41例CD34＋T-ALL髓系抗原表达15例,阳性率36.59%,91例CD34-T-ALL髓系抗原表达14例,阳性率15.38%,二者具有统计学差异（p〈0.01）。儿童T-ALLCD3表达高于成人（p〈0.05）,而CD33表达明显低于成人（p〈0.01）结论：免疫表型分析是诊断T-ALL的重要手段,T-ALL免疫表型具有异质性。     

β-arrestin 1促进急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞衰老

目的:探讨β-arrestin1对急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞衰老的作用及其可能机制。方法:收集T-ALL患者骨髓样本和对照样本,应用RT-PCR和Western blot检测β-arrestin1在T-ALL患者中的表达,统计分析β-arrestin1的表达与T-ALL患者临床病理特征及预后的关系。构建稳定敲低或过表达β-arrestin1 Jurkat细胞株,应用CCK-8检测Jurkat细胞数,β-半乳糖苷酶染色(SA-β-gal)法检测β-arrestin1对Jurkat细胞衰老的作用,应用RNA-Seq与KEGG数据交叉分析筛选可能的信号通路,Western blot验证信号通路关键位点。结果:β-arrestin1在T-ALL患者样本中表达降低(P 0.01),且β-arrestin1的表达与外周血白细胞数(r=-0.601)、外周血原始细胞数(r=-0.516)和髓外浸润(r=-0.359)呈负相关,与化疗敏感性(r=0.393)呈正相关。利用敲低或过表达β-arrestin1的稳定Jurkat细胞株发现,β-arrestin1降低Jurkat细胞数(P 0.05),促进Jurkat细胞衰老(P0.05)。RNA-Seq与KEGG数据交叉分析发现,T-ALL患者中β-arrestin1可能通过Ras-p16-pRb-E2F1调控细胞衰老。经Western blot验证发现,β-arrestin1促进Ras和p16的表达,抑制pRB和E2F1的表达(P 0.05)。结论:β-arrestin1可能通过Ras-p16-pRb-E2F1促进T-ALL细胞衰老,延缓T-ALL疾病进程,这为阐释T-ALL新的发病机制提供理论依据。     

儿童急性淋巴细胞白血病免疫学表型与酸性α萘酚醋酸酯酶及酸性磷酸酶的关系

酸性磷酸酶(AP)和酸性α萘酚醋酸酯酶(ANAE)存在于T细胞性急性淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞中,但有报道儿童非T-ALL细胞也有阳性AP反应,可能为前T-ALL。本文比较83例儿童急性淋巴细胞白血病中ANAE及AP染色与免疫学表型间的关系。免疫学表型测定包括羊红细胞玫瑰花结形成试验,表面免疫球蛋白(SIg)及单克隆抗T细胞抗体(WT_1)测定等。酶染色以70%以上细胞有反应作为阳性标准。结果:31例白血病细胞的羊红细胞玫瑰花结形成率大于50%,属T细胞型;2例白血病细胞SIg阳性属B细胞型;50例无T或B细胞标记属非T非B细胞型(N-ALL)。后者26例抗普通型急淋(c-ALL)血清阳性,属c-ALL,2例WT_1阳性为前T-ALL,12例与上述     

T细胞受体γ基因和免疫球蛋白重链基因在急性淋巴细胞白血病细胞的重排及其在分型中的意义

用PCR扩增检测27例急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)和1例T细胞淋巴瘤(T lymphocytic lymphoma,T-LL)的T细胞受体(Tcell receptor,TCR)γ基因和免疫球蛋白重链(immunoglobulin heavy chain,IgH)基因重排。TCRγ基因在9例T-ALL及2例未分型白血病病例中全部重排;在6例B-ALL中有1例重排;在10例C-ALL中有1例重排,而IgH基因在24例ALL病例中重排,其中7例为T-ALL,1例为未分型白血病。TCRγ和IgH基因在1例T-LL中均无重排,在T-ALL、B-ALL和C-ALL中均有交叉重排现象。我们探讨了这些结果在分型中的意义,同时还注意到,在28例中的10例病人存在IgH和TCRγ基因双重重排,如作为特异的双标记检测其微小残留白血病细胞,无疑会提高准确率。     

复发的成人B细胞系列急性淋巴细胞白血病过表达周期素E

为研究细胞周期调节蛋白——周期素E(cyclin E)和周期素A在成人急性淋巴细胞白血病(ALL)复发中的作用,作者用Western印迹法对19例成人ALL患者的周期素E和周期素A蛋白水平进行研究。19例ALL患者(B-ALL15例,T-ALL4例)年龄16～74岁(平均     

核受体辅助抑制因子在急性非淋巴细胞白血病细胞株中的表达

目的:明确核受体辅助抑制因子(N-CoR)在急性非淋巴细胞白血病细胞株及细胞分化过程中表达的变化,探讨其在急性白血病中的意义。方法:RT-PCR半定量检测16种急性非淋巴细胞白血病细胞株中N-CoR的基因表达及急性早幼粒细胞白血病细胞株在维A酸作用过程中的变化。结果:N-CoR在所有细胞株中都有表达,在急性早幼粒细胞白血病细胞株中随着细胞的分化表达增加。结论:N-CoR对维持白血病细胞的增殖起重要作用,其表达量的变化和细胞的分化状态相关。     

急性淋巴细胞白血病的分子遗传学研究进展

细胞遗传学的改变已成为急性淋巴细胞白血病(ALL)最重要的预后判断指标。近年来分子遗传学研究显示,部分早前B-ALL和早前T-ALL患者存在一些小信号分子的突变。细胞和分子遗传学的发展为ALL患者的遗传学分组和个体化靶向治疗提供了可能。     

初诊成人急性淋巴细胞白血病免疫学亚型和临床特征的关系

报道了荷兰多中心协作组用免疫荧光法对91例初诊成人急性淋巴细胞白血病(ALL)免疫亚型的前瞻性研究结果,阐述了与临床特征的关系。全部病例均根据FAB标准诊断为ALL。在可比较的91例中,B-ALL 67例(73％),T-ALL 18例(21％),急性未分化细胞白血病(AUL)4例,双系ALL 2例(B-ALL/M_4,B/T-ALL)。与文献相似的是,CD_(10)~+ALL最多见,其次是T系ALL或AUL,而B-ALL     

2-甲氧基雌二醇诱导急性T淋巴细胞白血病细胞凋亡和P53基因表达的研究

目的:研究2-甲氧基雌二醇(2-ME2)诱导急性T淋巴细胞白血病细胞凋亡及其机制。方法:采用MTT法检测2-ME2对CEM细胞增殖的影响;DNA Ladder法检测2-ME2对CEM细胞凋亡的影响;RT-PCR法和Western blot法分别检测2-ME2对CEM细胞P53基因mRNA和蛋白表达的影响。结果:2-ME2能明显抑制CEM细胞增殖,作用48 h的半数抑制浓度(IC50)为2μmol/L;2μmol/L 2-ME2作用CEM细胞24,48和72 h后,DNA Ladder法检测出DNA密度梯度片段;2μmol/L 2-ME2处理细胞24,48和72 h后,CEM细胞P53基因和蛋白表达均下降,并呈时间依赖关系。结论:2-ME2抗白血病作用主要通过诱导细胞凋亡实现的,其机制与下调P53基因及蛋白表达有关。     

恶性血液病细胞中tankyrase表达与端粒酶活性关系研究

为研究以白血病为主的恶性血液病细胞中端粒酶活性正向调控基因tankyrase的表达与端粒酶活性的关系并初步探讨tankyrase对端粒酶活性调控的机理和意义 ,以实时定量RT PCR技术对髓细胞系白血病细胞株K5 6 2 ,HL 6 0 ,U937,NB4 ,THP 1,HEL ,Dami,T淋巴细胞性白血病细胞株 6T CEM ,Jurkat和B细胞淋巴瘤细胞株Raji中tankyrase的表达进行检测 ,同时检测端粒酶逆转录酶hTERT的表达确定端粒酶活性 ,并以经磁珠分离的正常人CD3 ,CD19 和CD33 细胞和 10份正常人骨髓单个核细胞做对照。结果发现 :tankyrase在恶性血液病细胞株中的表达明显高于正常对照 (U =19,P <0 .0 1) ,其中髓系白血病细胞株中的表达高于正常人CD33 细胞 ,T淋巴细胞性白血病细胞株和B细胞淋巴瘤细胞株中的表达分别高于正常人CD3 和CD19 细胞。髓系恶性血液病细胞株tankyrase的表达 (0 .0 0 32± 0 .0 0 10 )明显低于淋系恶性血液病细胞株的表达 (0 .0 12± 0 .0 0 16 ) (F =2 3,P <0 .0 1)。Tankyrase与hTERT的表达呈正相关 (相关系数为 0 .395 ,P <0 .0 5 )。结论 :tankyrase在恶性血液病细胞株中呈高表达 ,与端粒酶活性呈正相关 ,提示tankyrase可能是恶性血液病中端粒酶活性增高的原因之一。