运动性疲劳大鼠谷氨酸、γ-氨基丁酸受体含量变化及中药的调节作用

目的探讨运动性疲劳对大鼠谷氨酸(GLU)、γ-氨基丁酸(GABA)受体含量的影响及复方中药的调节作用。方法应用力竭性游泳方法制造疲劳大鼠模型,分为正常对照组、模型组、疏肝中药组、健脾中药组、补肾中药组,每组6只,用免疫组化法观察大鼠脑组织涂片细胞数目的方法进行评定。结果模型组大鼠海马GLU受体与正常对照组比较都呈下降趋势,而GABA受体含量呈上升趋势,纹状体模型组NR1和NR2A受体与正常对照组比较升高,GABA受体升高,疏肝、健脾中药复方对其有较好的调节作用。结论运动性疲劳大鼠可用疏肝、健脾的方法来调节及体内GLU、GABA受体含量。     

三种复方对慢性应激肝郁模型大鼠海马5-HT1A受体基因表达的影响

目的 探讨慢性应激肝郁模型大鼠海马5-HT1AR基因表达及疏肝、疏肝健脾与健脾3种方剂的影响.方法 SD雄性大鼠40只,用随机区组设计的方法分为对照组、模型组、四逆散组、逍遥散组和四君子汤组.处理21天后.观察1%蔗糖水摄取率和强迫游泳不动时间,用RT-PCR的方法检测海马5-HT1AR的mRNA表达.结果 与对照组比较,模型大鼠1%蔗糖水摄取率明显降低,强迫游泳不动时间明显延长(P＜0.01),海马5-HT1AR mRNA表达显著降低(P＜0.01);与模型组比较,四逆散组、逍遥散组的1%蔗糖水摄取率明显升高,强迫游泳不动时间明显缩短(P＜0.01),5-HT1ARmRNA表达均明显升高(P＜0.05);四君子汤组1%蔗糖水摄取率、强迫游泳不动时间及5HT1ARmRNA表达与模型组相比没有差异(P＞0.05).结论 慢性应激肝郁模型大鼠海马5-HT1ARmRNA表达降低.具有疏肝作用的四逆散和逍遥散可以对抗这种降低,而健脾的四君子汤作用不明显.     

三种复方对慢性应激肝郁模型大鼠海马5-HT1A受体基因表达的影响

目的探讨慢性应激肝郁模型大鼠海马5-HT1AR基因表达及疏肝、疏肝健脾与健脾3种方剂的影响。方法SD雄性大鼠40只，用随机区组设计的方法分为对照组、模型组、四逆散组、逍遥散组和四君子汤组，处理21天后，观察1％蔗糖水摄取率和强迫游泳不动时间，用RT-PCR的方法检测海马5-HT1AR的mRNA表达。结果与对照组比较，模型大鼠1％蔗糖水摄取率明显降低，强迫游泳不动时间明显延长（P〈0．01），海马5-HT1AR mRNA表达显著降低（P〈0．01）；与模型组比较，四逆散组、逍遥散组的1％蔗糖水摄取率明显升高，强迫游泳不动时间明显缩短（P（0．01），5-HT1AR mRNA表达均明显升高（P〈0．05）；四君子汤组1％蔗糖水摄取率、强迫游泳不动时间及5-HT1AR mRNA表达与模型组相比没有差异（P〉0．05）。结论慢性应激肝郁模型大鼠海马5-HT1AR mRNA表达降低，具有疏肝作用的四逆散和逍遥散可以对抗这种降低，而健脾的四君子汤作用不明显。     

脑缺血后抑郁大鼠海马NMDA受体表达及中药的干预作用

目的：观察脑缺血后抑郁模型大鼠脑内NMDA受体NR1、NR2 BmRNA的表达及中药颐脑解郁方的干预作用。方法：复制脑缺血后抑郁大鼠模型,采用逆转录PCR（RT—PCR）的方法,观察大鼠海马NMDA受体NR1、NR2BmRNA的表达。结果：脑缺血后抑郁模型大鼠海马的NR1、NR2BmRNA的表达较正常组明显升高（P〈0．01）,经中药颐脑解郁方干预后海马NR1mRNA表达较模型组显著降低（P〈0．01）,NR2BmRNA表达较模型组降低（P〈0．05）。假手术大鼠海马NR1mRNA表达明显升高（P〈0．01）,NR2BmRNA表达升高（P〈0．05）。结论：脑缺血后抑郁模型大鼠脑内NMDA受体NR1、NR2BmRNA表达升高,中药颐脑解郁方能使之明显下调,提示颐脑解郁方治疗脑缺血后抑郁状态的作用机制可能与下调脑内NMDA受体NR1、NR2BmRNA表达有关。     

半硫丸对"甲减"模型大鼠海马T3核受体mRNA表达的影响

目的研究甲状腺机能减退大鼠海马组织 T3核受体 mRNA 的变化规律及半硫丸对其的影响,探讨半硫丸对甲减的作用机理.方法Wistar 大鼠随机分为正常对照组和造模组,造模大鼠每日腹腔注射 PTU 诱发甲状腺机能减退动物模型后,分为模型组、甲状腺素片组、半硫丸组,治疗组分别予相应药物治疗30d.采用 RT-PCR 法测定大鼠脑海马组织 T3NRα1mRNA 和 T3NRβ1mRNA 的表达水平.结果甲减大鼠海马组织 T3NRα1mRNA 和 T3NRβ1mRNA 的表达水平明显下降,与正常组比较有显著性差异(P＜0.01).两种药物均可明显增强甲减大鼠海马组织 T3NRα1mRNA 和 T3NRβ1mRNA 的表达,与模型组比较均具有显著性差异,治疗组之间无明显差异.结论半硫丸可通过上调甲减大鼠海马 T3 核受体 mRNA 表达水平,增加 T3 核受体数目,改善甲减造成的脑神经损伤.     

酸枣仁汤对老年血亏阴虚失眠证候模型大鼠脑组织谷氨酸、γ-氨基丁酸及γ-氨基丁酸A受体表达的影响

目的:观察酸枣仁汤对老年血亏阴虚失眠证候模型大鼠脑组织谷氨酸(Glu)及γ-氨基丁酸(GABA)含量及GABAA受体α1和γ2亚单位表达的影响。方法:用D-半乳糖致亚急性衰老、环磷酰胺及氢化可的松致阴血亏虚,及自制改良多平台法剥夺睡眠48 h,制作复合型老年血亏阴虚失眠证候大鼠模型。采用高效液相色谱法检测模型大鼠大脑皮质及下丘脑氨基酸类神经递质Glu及GABA含量变化,采用免疫组化染色和mRNA半定量反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测大脑皮质及海马部位γ-氨基丁酸A受体(GABAAR)α1和γ2亚单位的表达变化,并考察酸枣仁汤对这些指标的影响。结果:与环境对照组比较,证候模型组大鼠大脑皮质及下丘脑Glu及GABA含量显著升高(P0.01,P0.05),且Glu/GABA比值增高,大脑皮质及海马部位的GABAARα1和γ2亚单位免疫化学累积光密度明显较高(P0.01),皮质部位GABAARα1和γ2 mRNA的表达均显著上调(P0.01),经酸枣仁汤干预后各指标明显下降(P0.01,P0.05),并趋于正常范围。结论:皮质及海马部位GABAARα1和γ2亚单位表达的明显上调是老年失眠证候的可能病理机制之一,酸枣仁汤的治疗机制可能与其减少脑内氨基酸毒性作用,下调大脑皮质及海马部位GABAARα1和γ2亚单位的表达有关。     

健脾与补肾对脾虚模型大鼠脑内生长抑素水平和受体基因表达的影响

目的比较健脾与补肾对脾虚模型大鼠脑内生长抑素(SS)水平和受体基因表达的影响。方法采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,以免疫组化和原位杂交法检测下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层SS及生长抑素受体1(SSR1)mRNA基因表达变化。结果模型组上述脑区SS免疫阳性反应物及SSR1 mRNA表达阳性反应物明显降低,与正常组比较差异显著;健脾组与补肾组上述脑区的SS免疫阳性反应物及SSR1 mRNA表达阳性反应物明显升高,与模型组比较差异显著,与正常组比较无显著差异。结论脾虚模型大鼠脑内对学习记忆有促进作用的SS水平和SSR1 mRNA基因表达有变化,健脾与补肾可能通过调节SS水平和SSR1基因表达而影响学习记忆能力。     

四逆酸枣仁汤合方对失眠大鼠海马GABAARα1、γ2及NKCC1的影响

目的:观察四逆酸枣仁汤合方对失眠大鼠海马GABAARα1、γ2及NKCC1的影响。方法:采用SD大鼠腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)复制失眠模型,将复制成功的模型大鼠随机分为模型组、西药组、四逆散组、酸枣仁汤组、合方组,并设置空白对照组,各组给予相应药物连续7 d,模型组和正常组生理盐水连续灌胃7 d,并观察各组大鼠的一般活动状态和体质量增量。采用实时荧光定量PCR检测海马中GABAARα1、γ2和NKCC1mRNA的表达;采用Western Blot的方法检测海马中GABAARα1、γ2和NKCC1蛋白的表达。结果:四逆酸枣仁汤合方可以提高海马中GABAARα1、γ2mRNA和蛋白的表达,降低海马中NKCC1mRNA和蛋白的表达。结论:四逆酸枣仁汤合方可以通过调节失眠大鼠海马中GABAARα1、γ2和NKCC1mRNA和蛋白的表达量来改善大鼠的睡眠节律。     

脑出血后抑郁大鼠脑内NMDA受体NR1 mRNA、NR2B mRNA表达及中药干预作用

目的:观察脑出血后抑郁大鼠脑内NMDA受体亚单位NR1mRNA、NR2BmRNA的表达及中药颐脑解郁方的干预作用.方法:建立脑出血后抑郁模型,采用逆转录PCR(RT-PCR)实验方法,研究NR1mRNA、NR2B mRNA在脑出血后抑郁模型及假手术大鼠脑内左前额叶皮质、海马的表达及中药颐脑解郁方的干预作用.结果:模型组及假手术组大鼠海马、前额皮质的NR1、NR2B表达明显高于正常组,中药颐脑解郁方干预后可明显降低NR1 mRNA、NR2B mRNA在脑内的表达.结论:卒中后抑郁模型大鼠脑内NR1 mRNA、NR2B mRNA表达升高,中药颐脑解郁方可使之明显下调,中药颐脑解郁方的抗抑郁作用可能与下调NMDAR的表达有关.     

加味四逆散对慢性应激大鼠海马区5羟色胺2A受体(5-HT2AR)及其mRNA表达的影响

目的:探讨加味四逆散对慢性应激模型大鼠海马区5-HT2A受体及其mRNA表达的影响。方法:选择Open-feild法评分相近的74只成年SD大鼠,随机分为对照组、模型组、氟西汀组、加味四逆散高,中,低剂量组。应用分养和长期不可预见的中等强度应激造成大鼠抑郁模型,以免疫组织化学法和原位杂交法研究大鼠海马区5-HT2AR及其mRNA表达的变化。结果:与对照组比,模型组和加味四逆散高剂量组海马区5-HT2AR表达降低(P0.01,P0.05);模型组、氟西汀组和加味四逆散中剂量组5-HT2AR mRNA表达降低(P0.01,P0.05)。与模型组比,各治疗组5-HT2AR及mRNA的表达均升高(P0.05,P0.01)。各组之间5-HT2AR/mRNA的变化无统计学差异。结论:慢性应激能诱发大鼠轻度抑郁障碍和海马区5-HT2AR及其mRNA的低表达。加味四逆散改善慢性应激大鼠的抑郁症状可能与调节海马区5-HT2A受体系统增高其表达有关。     

电针对慢性疲劳大鼠下丘脑、垂体、肾上腺指数及CRH的影响

目的观察电针对慢性疲劳大鼠模型下丘脑、垂体、肾上腺指数及下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin releasing hormone,CRH)mRNA表达的影响,从神经内分泌角度探讨电针(electro-acupuncture,EA)治疗慢性疲劳综合征(chronic fatigue syndrome,CFS)的作用机制。方法实验设正常组、模型组、电针组,模型组与电针组采用强制性冷水游泳的方法制作CFS大鼠模型,电针组在造模的同时在百会、足三里穴给予电针治疗。通过行为学检测对模型进行判定;采用称量法计算下丘脑、垂体、肾上腺指数;荧光定量聚合酶链反应(fluorescence quantitative polym erase chain reaction,FQ-PCR)法检测CRHmRNA含量。结果模型组大鼠行为出现改变,产生了心理和躯体的疲劳状态。CFS大鼠下丘脑、垂体、肾上腺指数升高,下丘脑CRHmRNA的表达上升,经电针治疗后,其心理和躯体疲劳状态明显改善,肾上腺指数降低,下丘脑CRHmRNA的表达下降,下丘脑、垂体指数下降不明显。结论采用强制性冷水游泳制作的慢性疲劳大鼠模型与CFS的发病机制和临床表现基本相符,CFS与下丘脑、垂体、肾上腺指数上升及下丘脑CRHmRNA表达上调关系密切。电针可能通过下调体内下丘脑CRHmR-NA的表达及降低肾上腺指数,以纠正异常的HPA轴功能来治疗CFS。     

抵当汤对血脂异常大鼠ET-1mRNA、VCAM-1mRNA表达影响

目的:观察抵当汤不同剂量对血脂异常大鼠血脂、黏附因子及内皮功能影响。方法:采用经典喂养法复制大鼠血脂异常的模型,喂高脂饲料,同时每天灌胃抵当汤。连续喂养8周。实验结束断头取血,测定血清TC、TG、HDL-C、LDL-C。取主动脉采用RT-PCR方法测定组织中ET-1 mRNA、VCAM-1 mRNA表达。结果:血清TC、TG、LDL明显降低,HDL显著升高;主动脉组织ET-1 mRNA、VCAM-1 mRNA表达显著降低。结论:抵当汤具有调节血脂,保护内皮功能的作用,是防治血脂异常理想的药物。     

复方蒲黄颗粒对局灶性脑缺血再灌注大鼠热休克蛋白70及其mRNA表达的影响

目的 观察复方蒲黄颗粒对大鼠脑缺血再灌注后热休后蛋白70(HSP-70)及其mRNA表达的影响. 方法 75只雄性SD大鼠,采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,随机分为假手术组、模型组,蒲黄颗粒大、中、小剂量组,每组15只.各组大鼠分别在缺血2小时再灌注6、24、72小时断头取脑组织,每时间点5只.再灌注24小时进行神经功能缺陷评分,采用Nissl染色观察神经元形态学变化;采用原位杂交检测HSP-70 mRNA的表达;采用免疫组化法检测HSP-70蛋白的表达. 结果 蒲黄颗粒大、中剂量组在缺血再灌注24小时时神经功能改善显著优于模型组(P＜0.05);Nissl染色结果显示,模型组大脑皮层神经元形态不规则,体积缩小,胞核固缩深染,细胞间质水肿,尼氏体减少,可见明显的神经元丢失,而蒲黄颗粒各剂量组未见明显的神经元损伤和丢失;模型组在再灌注6～72小时HSP-70及其mRNA的表达均增加,与假手术组比较各时间点差异均具有统计学意义(P＜0.01),蒲黄颗粒各剂量均能增强HSP-70及其mRNA的表达,与模型组各时间点的差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 复方蒲黄颗粒能促进脑缺血再灌注后HSP-70的表达,减轻缺血再灌注损伤.     

怀牛膝对2型糖尿病大鼠脑组织p75基因表达的影响

目的:研究怀牛膝(Achyranthes bidentata Blume,BL)水煎剂对2型糖尿病大鼠脑组织P75基因mRNA表达的影响。方法:随机选取以不同剂量怀牛膝水煎剂灌胃的2型糖尿病大鼠每组10只,以生理盐水灌胃的2型糖尿病大鼠及正常对照组大鼠各10只,用RT-PCR法测定脑组织P75基因mRNA的表达。结果:2型糖尿病大鼠脑组织P75基因mRNA的表达上调,服用怀牛膝水煎剂的2型糖尿病大鼠脑组织P75基因mRNA的表达下降。结论:怀牛膝水煎剂能降低2型糖尿病大鼠脑组织P75基因mRNA的表达。     

刮痧疗法对慢性疲劳大鼠行为学变化的影响

目的探讨刮痧疗法治疗对慢性疲劳大鼠的行为学变化的影响。方法 45只SD大鼠随机分为正常组、模型组、刮痧组、艾灸组和穴位埋线组。采用悬吊冷水游泳复合应激的方法复制慢性疲劳综合征（CFS）大鼠模型,各治疗组在复制模型的同时分别给予相应治疗;采用Morris迷宫实验、鼠尾悬挂实验、力竭游泳实验进行行为学检测。结果模型组大鼠体质量增长缓慢、空间学习记忆能力下降、力竭游泳时间缩短、悬挂不动时间延长。刮痧、艾灸、穴位埋线疗法均能显著改善各项评测指标（P均〈0.01）,且刮痧疗法与其他疗法比较各指标改善更显著（P均〈0.05）。结论刮痧疗法能够有效改善CFS大鼠的躯体、精神上的疲劳症状。     

耳穴按压对大鼠精神性疲劳影响的实验研究

目的：探究耳穴按压对大鼠精神疲劳的治疗作用。方法：将60只Wistar大鼠随机分为空白组、单纯抓取组、模型组及耳穴按压组,每组15只。检测各组大鼠自发活动度（爬格数和探身数）、负重游泳时间。结果：与空白组对照比较,模型组的自发活动度显著减弱（P〈0.05）,负重游泳时间显著缩短（P〈0.05）,说明造模成功;与空白组对照比较,单纯抓取组的自发活动度无显著变化（P〉0.05）,负重游泳时间无显著延长或缩短（P〉0.05）,说明单纯抓取对大鼠没有治疗作用;与模型组对照比较,耳穴按压组的自发活动度显著增强（P〈0.05）,耳穴按压组的负重游泳时间显著延长（P〈0.05）,说明耳穴按压对模型大鼠具有一定的治疗作用。结论：按压耳穴可显著改善大鼠精神性疲劳的症状和体征。     

心气虚证模型大鼠脑内细胞凋亡相关基因的变化研究

目的：建立心气虚证大鼠模型,研究模型大鼠脑神经元细胞凋亡情况。方法：75只SD大鼠随机分为5组：正常对照组、疲劳对照组、小剂量心得安＋疲劳组、中剂量心得安＋疲劳组和大剂量心得安＋疲劳组,采用强迫跑步加灌服心得安的方法建立心气虚证大鼠模型,观察其脑内凋亡相关基因Bax、Bcl-2和Caspase-3 mR-NA的表达情况。结果：中剂量心得安＋疲劳组大鼠的大脑皮层和海马Bcl-2 mRNA表达明显降低;大剂量心得安＋疲劳组大鼠的大脑皮层Bcl-2 mRNA表达明显降低、海马Caspase-3 mRNA表达明显升高。结论：心气虚证模型大鼠脑内存在神经元细胞的凋亡。     

电针对慢性应激抑郁模型大鼠松果体AANAT mRNA、HIOMT mRNA表达的影响

目的观察电针治疗对慢性应激抑郁模型大鼠行为学、血清褪黑素（melatonin,MT）以及松果体芳基烷化胺N-乙酰基转移酶（arylalkylamine N-acetyltransferase,AANAT）mRNA、羟基吲哚氧位甲基转移酶（hydroxyindole-O-methyl-transferase,HIOMT）mRNA表达的影响,探讨电针对慢性应激抑郁模型大鼠血清MT含量调节的作用机制,从而进一步充实电针抗抑郁的作用机理。方法将大鼠随机分为3组,空白组、模型组、电针组,每组10只,共30只,通过慢性温和不可预知性应激刺激结合孤养的方法复制慢性应激抑郁模型,电针组给予强度为2 Hz、1 mA的电针治疗,每次20分钟,每天1次,共电针21天。采用开野试验观察大鼠的行为学变化;采用酶联免疫吸附法对大鼠血清中MT的含量进行检测,用Real-time PCR检测各组大鼠松果体AANAT mRNA、HIOMT mRNA的表达情况。结果在大鼠开野试验中,与空白组比较,模型组大鼠水平运动、垂直运动的次数均显著减少（P=0.000〈0.01,P=0.007〈0.01）,而电针可逆转此变化,与模型组相比,电针组大鼠的水平运动次数和垂直运动次数均显著增多（P=0.000〈0.01,P=0.001〈0.01）;模型组大鼠血清中MT含量较空白组明显降低（P=0.000〈0.01）,与模型组大鼠比较,电针可提高血清中MT含量（P=0.000〈0.01）。与空白组相比,模型组AANAT mRNA、HIOMT mRNA的表达均显著降低（P=0.000〈0.01,P=0.026〈0.05）,而电针组的表达较模型组均显著升高（P=0.000〈0.01,P=0.000〈0.01）。结论电针可以提高慢性应激抑郁模型大鼠血清中MT含量,并且可以提高AANAT mRNA、HIOMT mRNA的表达。其中,电针提高慢性应激抑郁模型大鼠AANAT mRNA、HIOMTmRNA的表达可能是提高大鼠血清中MT含量的机制之一。     

蒙医温针对疲劳模型大鼠海马及下丘脑细胞因子含量的影响

目的:探究蒙医温针对疲劳模型大鼠海马及下丘脑细胞因子含量的影响及蒙医温针的作用机制。方法:将32只清洁级雄性大鼠随机分为正常组、温针组、模型组及模型+温针组。正常组不予任何处理,平行饲养。采用大鼠游泳力竭运动疲劳模型,温针组同正常组大鼠平行饲养的同时采用蒙医温针治疗。模型+温针组力竭游泳后行温针治疗。实验期间观察其行为学的同时,在21 d后采取断头取样法对大鼠海马及下丘脑细胞因子方面进行检测,探讨疲劳模型大鼠海马及下丘脑细胞因子IL-1β,IL-6,TNF-a含量的影响及蒙医温针的作用机制。结果:与正常组相比,模型组IL-1β,IL-6,TNF-a含量明显增加,差别有统计学意义(P<0.01);与模型组相比,温针组,模型+温针组IL-1β,IL-6,TNF-a含量明显降低,差别有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:蒙医温针能抑制力竭大鼠细胞因子释放的同时调节免疫功能、发挥抗疲劳功能。故对慢性疲劳综合征有一定的防治作用,值得进一步推广及应用,以便提高患者的生活质量。     

蜂针对佐剂性大鼠关节炎滑膜细胞因子基因表达的影响

目的 :检测IL 1 β、IL 6在类风湿性关节炎 (RA)的表达 ,探讨蜂针治疗RA的作用机理。方法 :将 40只大鼠随机分为四组 ,采用PCR微板核酸杂交 ELISA方法检测滑膜IL 1 β、IL 6的mRNA表达水平。结果 :蜂针组和激素组IL 1 β、IL 6的mRNA表达水平无显著性差异 ,而与模型组比较有显著性差异。结论 :RA早期IL 1 β、IL 6的mRNA表达水平是上调的 ,蜂针治疗后可以抑制其转录和表达 ,有利于RA病情的缓解