M_2受体在脑心综合征心律失常中的表达

目的检测M2受体(M2R)在脑心综合征(CCS)模型大鼠心室肌中的表达,以探讨其与CCS所致心律失常的关系。方法线栓法栓塞大鼠右侧大脑中动脉建立CCS模型,监测Ⅱ导联心电图;电镜下观察心肌细胞亚显微结构的改变;用Western blot方法检测心室肌中M2R表达水平的改变。结果心电图分析发现,心律失常出现在脑梗死后(14.32±11.14)min,持续(31.87±23.69)min。脑梗死后出现心律失常前的心电QT间期较对照组显著延长(P<0.01);根据Western blot结果,CCS模型2 h组心室肌中M2R的表达水平较对照组显著降低(P<0.01);CCS模型24 h组心室肌中M2R的表达增加,且高于对照组(P<0.05)。结论 M2R表达改变可能是脑梗死后心律失常发生的重要原因之一,并可能成为治疗CCS的新靶点。     

缝隙连接蛋白43磷酸化在兔脑血管痉挛中的表达变化

目的 研究缝隙连接蛋白43(Cx43)磷酸化在兔2次蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血管痉挛(CVS)中的表达变化.方法 新西兰大白兔72只,随机分为:正常对照组(18只)、SAH组(又分3、7、14 d 3个亚组,每个亚组各18只).采用枕大池2次注血法建立兔SAH后CVS模型.脑血管造影及光镜观察分析基底动脉的直径及形态学变化,应用Western blotting检测Cx43 蛋白磷酸化表达的变化.结果 (1)在SAH后第7天,脑血管造影及光镜观察证实基底动脉管腔狭窄程度与形态学变化最明显,第14天逐渐缓解,但与正常对照组相比仍有统计学意义;(2)Western blotting 结果 显示,SAH后磷酸化的Cx43 (P-Cx43) 蛋白表达以第7天表达最高,14 d开始下降,但仍高于正常对照组;去磷酸化的Cx43(NP-Cx43)蛋白表达以第7天表达最低,14 d开始升高,但仍低于正常对照组.结论 SAH后,基底动脉Cx43发生磷酸化,其表达水平的变化与CVS发生发展的时相性一致,提示Cx43磷酸化可能在CVS的发生发展过程中起作用.     

缝隙连接蛋白43与心律失常相关性研究进展

缝隙连接蛋白43（connexin43,Cx43）是心肌细胞间隙连接的主要蛋白成分,在维持心肌细胞的连接通讯功能,电信号传导和正常的节律性的收缩中起重要作用。Cx43的空间分布、数量、结构的异常均能影响缝隙连接电荷耦联和代谢耦联的功能导致心律失常的发生,而Cx43在各种心脏疾病中受多因素的调控,如肾上腺素、血管紧张素等,能阐明Cx43病理变化发生的机理将对心律失常的治疗有着重要的意义。     

缝隙连接蛋白43在急性局灶性脑缺血大鼠心室肌中的表达

目的检测缝隙连接蛋白43（Connexin43,Cx43）在大鼠急性局灶性脑缺血模型心室肌中的表达,以探讨其与脑缺血后心律失常的关系。方法用线栓法建立大鼠右侧局灶性脑缺血模型,检测心电,观察心肌细胞电镜下的亚显微结构,用Western blot的方法,检测心室肌中Cx43表达的改变。结果电镜结果显示脑缺血后,心肌组织闰盘内桥粒和缝隙连接结构及分布改变。Western blot结果显示,缺血后2 h心室肌中Cx43的表达明显降低,分布紊乱。缺血后24 h,1 w心室肌中Cx43的表达随时间延长而增加,且均高于正常对照组。结论大鼠右侧局灶性脑缺血所引起的心律失常可能与心室肌Cx43蛋白表达和分布异常有关。     

缝隙连接蛋白43在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的探讨缝隙连接蛋白43(Cx43)在子痫前期患者与正常妊娠妇女胎盘组织中的表达规律及其在子痫前期发病过程中可能的机制。方法随机选取子痫前期患者50例(轻度组20例,重度组30例)和正常妊娠孕妇50例(对照组),应用免疫组织化学法对3组胎盘Cx43的表达进行标记,通过彩色病理图像分析系统对染色结果进行定量检测并分析。结果 Cx43在子痫前期重度组表达低于轻度组及对照组,差异均有显著性意义(P<0.05);轻度组与对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。Cx43在胎盘组织的表达与妊娠期高血压疾病病情严重程度呈负相关(r=-0.370,P<0.05)。结论子痫前期患者胎盘组织中缝隙连接蛋白Cx43的表达变化可能与子痫前期的发病机制有关。     

醛固酮对h9c2心肌细胞缝隙连接蛋白43的影响

目的：观察醛固酮对h9c2心肌细胞缝隙连接蛋白43（Connexin 43,Cx43）表达的影响。方法：将h9c2心肌细胞随机分为对照组和实验组,实验组用不同浓度（1×10^-8、1×10^-6、1×10^-4 mol/L）醛固酮处理24 h后,用RT-PCR和Western Blot观察不同浓度醛固酮下h9c2心肌细胞Cx43蛋白和mRNA的变化。结果：1×10^-8 mol/L醛固酮组Cx43mRNA和蛋白表达含量较对照组增加;1×10^-6 mol/L和1×10^-4 mol/L组的Cx43蛋白表达含量较对照组减少,而Cx43mRNA较对照组无明显改变。结论：醛固酮可能是通过对表达Cx43的双重影响来参与心肌细胞间隙连接重构的。     

缝隙连接蛋白43及其磷酸化蛋白在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的：探讨缝隙连接蛋白43（ Cx43）及其磷酸化蛋白（ p－Cx43）在人脑胶质瘤中的表达及意义。方法收集手术切除并经病理证实的脑胶质瘤标本80例和正常脑组织标本20例,其中脑胶质瘤WHO分级Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级各20例。应用免疫组化染色及Western blot技术检测标本中Cx43及p－Cx43的表达。结果Cx43、p－Cx43在不同级别胶质瘤中的表达差异有统计学意义（P＜0.05）,随着胶质瘤级别的升高,Cx43表达逐渐减少,而p－Cx43表达逐渐上升,且与正常脑组织相比,差异有统计学意义（ P＜0.05）,Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级相比,差异有统计学意义（ P＜0.01）。结论 Cx43、p－Cx43可能与脑胶质瘤的恶性程度密切相关,两者在脑胶质瘤的发生和发展过程中可能起到一定的作用。     

缝隙连接蛋白 43 在慢性疼痛中的研究进展

缝隙连接在细胞通讯中发挥了重要的作用，它广泛存在于哺乳动物的各器官和组织中(红细胞、骨骼肌除 外)。缝隙连接的过度表达和功能的增强与外周及中枢疼痛敏化机制密切相关。星形胶质细胞是中枢神经系统中最主 要的细胞类型，其主要的缝隙连接蛋白是缝隙连接蛋白43。缝隙连接蛋白43在慢性疼痛中的作用包括调控缝隙连接 的表达、耦联及活性变化。     

缝隙连接蛋白43在泌尿系统疾病中的研究进展

连接蛋白作为缝隙连接最重要的组成部分,目前为止发现的连接蛋白至少有20余种,其中表达最普遍和研究最多的是缝隙连接蛋白43。迄今为止已发现存在于几十种组织和细胞当中,其作为小鼠、大鼠、豚鼠、犬和人中一种重要的缝隙连接,机体的许多系统疾病病理生理过程都和其有关。Cx43的表达及分布异常,在泌尿系统多种疾病的发生、发展过程中起重要作用,因此成为近期研究的热点。本文就缝隙连接蛋白43在泌尿系统中多种疾病发生、发展过程中的作用进行综述。     

脑利钠肽对心肌梗死兔缝隙连接蛋白43的影响

目的探讨脑利钠肽对兔心肌梗死后梗死周边区缝隙连接蛋白43(Cx43)重构的影响。方法通过结扎冠状动脉前降支的方法制备兔心肌梗死模型,随机分为假手术组(Sham组),心肌梗死组(MI组),心肌梗死后人重组脑利钠肽(recombinan human brain natriuretic peptide)干预组(rh BNP组)。rh BNP组自术后即刻给予rh BNP(0.01μg/kg/min)持续静脉泵入24 h;MI组、Sham组给予同等剂量的生理盐水持续静脉泵入。术后8周行超声心动图检查;进行电生理实验;用免疫荧光结合激光共聚显微镜技术检测Cx43的分布及表达。结果 MI组较Sham组左室射血分数(LVEF)明显减低(P<0.01),rh BNP组较MI组LVEF提高(P<0.05)。MI组较Sham组QT离散度明显延长(P<0.01),rh BNP干预后QT离散度缩短(P<0.05)。Sham组的Cx43荧光斑分布较均匀,MI组梗死灶周Cx43的数量较Sham组明显减少,且分布紊乱,rh BNP组梗死灶周Cx43数量增加,不均一分布的程度减轻。结论脑利钠肽能够改善心肌梗死后Cx43的重构,这可能是脑利钠肽抑制心肌梗死后室性心律失常发生的一个机制。     

间隙连接蛋白connexin43基因在真核细胞中的表达

目的：构建携带间隙连接蛋白connexin43 cDNA的真核表达载体,建立connexin43蛋白高表达细胞株。方法：connexin43 cDNA在大肠杆菌中扩增后连入真核表达载体pEN4,转染中国仓鼠卵巢（CHO）细胞,用甲氨喋呤（MTX）筛选得到connexin43基因高表达细胞。结果：酶切电泳结果显示载体pED4-Cx43按设计构建。经MTX筛选得到不同抗性的CHO细胞,免疫组织化学方法显示有connexin43蛋白的表达,但表达量有限。细胞间染料传递实验证实不同MTX抗性的CHO细胞间传递小相对分子质量物质的能力有差异。结论：利用载体pED4可以使connexin43基因在真核细胞内表达。     

Expression of Connexin43 in Rat Epithelial Cells and Fibroblasts

To explore the role of connexin43 (Cx43) in gap junctional intercellular communication (GJIC) and propagated sensation along meridians, the expression of Cx43 in the rat epithelial cellsand fibroblasts was studied both in vitro and in vivo. With the in vitro study, the rat epithelial cells and fibroblasts were cultured together, and the localization of Cx43 was detected by immunohistochemistry and indirect immunofluorescent cytochemistry and under confocal microscopy . And the expression of Cx43 on the surface of the cells was examined by flow cytometry. With the in vivo examination, 20 SD rats were randomized into control group (n=10) and electrical acupuncture group (EAgroup, n=10). EA ( 0.5-1.5 V, 4-16 Hz , 30 min) was applied to “Zusanli”acupoint for 30 min at rat‘s hind paw, the localization of Cx43 was immunohistochemically detected. The immunohistochemical staining and indirect immunfluoresce.nt cytochemistry showed that Cx43 was localized on the surface of the cells and in the cytoplasm. The relative expression level of Cx43 on the cellular membrane surfaces of the rat epithelial cells and fibroblasts, as determined by FACS, were 13.91 % and 29.53 % respectively. Our studied suggested that Cx43 might be involved in GJIC and propagated sensation along meridians.     

高糖对人腹膜间皮细胞间隙连接蛋白的影响

目的研究高糖对人腹膜间皮细胞间隙连接蛋白（connexin43）表达的影响。方法分离培养人腹膜间皮细胞,细胞分为3组：正常糖组（含5．5mmol／L葡萄糖）、高糖组（含140mmol／L葡萄糖）和渗透压对照组（含5．5mmol／L葡萄糖加24．5mmol／L甘露醇）,培养24、48h后,应用Northernblot、Westernblot方法检测connexin43mRNA和蛋白质表达,比较3组之间的差异。结果正常糖组腹膜问皮细胞表达丰富的connexin43,高糖环境下培养的腹膜间皮细胞connexin43mRNA和蛋白质表达均较正常糖组显著下降（P〈0．05）。渗透压对照组与正常糖组之间无明显差异（P〉0．05）。结论高糖可抑制腹膜间皮细胞connexin43mRNA和蛋白质表达,可能为腹膜透析（PD）中腹膜间皮层完整性损伤的机制之一。     

急性脑血管病并发脑-心综合征的临床研究

目的探讨急性脑血管病并发脑-心综合征的发病机制和防治措施。方法选择急性脑血管病患者30例,对其临床资料进行回顾性分析,观察急性脑血管病并发脑-心综合征的发生率、病变部位、心电图及心肌酶的变化情况,并分析发病机制和防治效果。结果 30例急性脑血管病患者中,并发脑-心综合征17例,发生率56.67%;其中出血性脑血管病并发脑-心综合征的发生率(88.24%)明显高于缺血性脑血管病并发脑-心综合征的发生率(11.76%)(P<0.01)。17例急性脑血管病并发脑-心综合征患者的病变部位位于丘脑、脑干者的发生率明显高于病变部位位于小脑、基底节及脑叶者,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);17例并发脑-心综合征患者心电图均有异常改变,心肌酶谱异常15例。经卧床休息、吸氧、扩张冠状动脉、保护心肌功能、纠正水电解质紊乱等综合治疗后,好转16例,好转率94.12%。结论脑-心综合征的发生与急性脑血管病的类型存在相关性,出血性脑血管病高于缺血性脑血管病。在防治脑-心综合征的过程中,应注意加强对急性脑血管病特别是出血性脑血管病患者的心功能监护。     

缝隙连接蛋白43 (Cx43)与神经炎症的研究进展

 缝隙连接蛋白43(connexin43, Cx43)是中枢神经系统(central nervous system, CNS)中含量最丰富的连接蛋白,主要分布于星形胶质细胞,以缝隙连接(gap junction, GJ)和半通道(hemichannel, HC)的形式存在,分别介导细胞间和细胞与外环境间的信息交流。随着人口的老龄化,阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)、脑卒中及术后认知功能障碍等疾病的发生率越来越高,神经炎症是这些CNS疾病的一个共同特征,涉及到白细胞聚集、胶质细胞激活、炎性因子释放等,该过程需要高效的信息交流,研究表明Cx43在该过程中发挥着不可忽视的作用,主要表现为GJ抑制和HC活性增加并影响神经功能。本文重点综述Cx43与神经炎症的关系,为多种CNS疾病的治疗提供新的靶点。     

Gap junctional protein connexin 43 in rat detrusor muscle with unstable bladder

Background Unstable bladder is one of the common clinical dysfunctions of the lower urinary tract. Gap junctions （GJs） are the plaques of aqueous channels that facilitate electrical and metabolic communication between the intracellular compartments of adjacent cells, exchange of nutrients and ions between connected cells and transfer of electrical signals In the present study we investigated the quantitative alterations of the GJ in the rat detrusor muscle and its functional changes related to the developing of unstable bladder （USB）. Methods Thirteen female Wistar rats （study group） with obstructive unstable bladder as determined by urodynamic study and 10 sham-operated rats （control group） were sacrificed at 6 weeks after surgery. Cystometric investigation, and the content and distribution of the GJ protein connexin 43 （Cx43） in the detrusors which were taken from the bladder of the rats were studied by Western blot and laser confocal microscopy with a double label immunohistochemistry technique. Results The expression of Cx43 was found adjacent to the detrusor with the laser confocal microscopy. The Cx43 expression increased markedly in the study group （pixel density 29.5±13.9, staining size （17.9±8.8） μm2） compared with the control group （pixel density 14.2±2.2, staining size （5.7±3.1） pm2, P 〈0.05）. Western blot analysis demonstrated that Cx43 in the study group （the average gray level was 31.066） was significantly higher than in the control group （the average gray level was 11.701, P 〈0.01 ）. Conclusion The increase of GJ leading to a intercellular excitatory communication is one of the important mechanisms related to developing unstable bladder.     

抑胶素对大鼠脑胶质瘤缝隙连接蛋白43表达的影响

目的：探讨大鼠脑胶质瘤缝隙连接蛋白在抑胶素干预下的表达变化,阐明抑胶素抑制脑胶质瘤的多源性调节机制。方法：体外培养大鼠C6脑胶质瘤细胞,制作大鼠脑胶质瘤模型,分为空白对照组及不同浓度抑胶素实验组（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ,8、16 、32和64 μg•kg^-1）,各实验组腹腔注射抑胶素,利用免疫组织化学染色法及Western blotting法检测不同浓度抑胶素对大鼠脑胶质瘤缝隙连接蛋白43（CX43）免疫反应阳性细胞数及表达量的影响。结果: 对照组及8、16 、32和64 μg•kg^-1抑胶素组大鼠脑胶质瘤CX43免疫反应阳性细胞数分别为(4.31±1.24)、(5.23±2.01)、(11.58±3.21)、(20.13±3.04)和(23.58±4.32)个/视野,各实验组与对照组比较差异均有显著性（P<0.05或P<0.01）,各实验组组间两两比较差异均具有显著性（P<0.01）;对照组及8、16 、32和64 μg•kg^-1抑胶素组大鼠脑胶质瘤CX43表达量(蛋白条带的面积和平均灰度相乘量)分别为12 241、12 377、16 183、17 138和28 208,各实验组与对照组比较差异均有显著性（P<0.05或P<0.01）,各实验组组间两两比较差异均具有显著性 （P<0.01）。结论：抑胶素对脑胶质瘤的抑制作用可能与影响肿瘤细胞间的缝隙连接蛋白功能有关。     

人心脏间隙连接蛋白43的时空表达

目的探讨人心脏间隙连接蛋白43(Cx43)的时空表达规律。方法应用SP免疫组化和图像分析方法,检测胎儿、新生儿和成人心肌Cx43蛋白表达和含量变化。结果(1)胎儿和新生儿Cx43呈斑点状遍布于整个心肌的细胞质内和细胞膜表面,少数位于闰盘处;(2)成人Cx43在心房肌细胞非均质分布于细胞侧面连接处和端闰盘处;心室肌典型地排列在闰盘处;(3)Cx43分布密度随年龄增长而降低,且具有腔室差异,胎儿和新生儿心房<心室,成人心房>心室。结论随着年龄的增长Cx43从细胞侧表面向端-端闰盘处转移。这种位置移动是心脏机械收缩和电传导的生理性调整。     

Atorvastatin prevents connexin43 remodeling in hypertrophied left ventricular myocardium of spontaneously hypertensive rats

Background  Connexin43 (Cx43) is the predominant gap junction protein in heart and is involved in the control of cell-to-cell communication to modulate the contractility and the electrical coupling of cardiac myocytes. Left ventricular (LV) hypertrophy is accompanied by changes of Cx43 expression. Recent studies have demonstrated that statins reduced cardiac hypertrophy. However, it is unknown whether statins can affect Cx43 expression in hypertrophied left ventricular myocardium. This study was designed to assess the effects of atorvastatin on LV hypertrophy and Cx43 expression in spontaneously hypertensive rats (SHR).
Methods  Nine-week old SHRs were randomly divided into two groups. Some received atorvastatin at 30 mg/kg by oral gavage once daily for 8 weeks (SHR-A); others received vehicle. Age-matched Wistar-Kyoto rats (WKY) received atorvastatin or vehicle for 8 weeks were used as controls. At the end of the experiment, we investigated LV hypertrophy and the expression of Cx43 in LV myocardium in four groups. Cx43 expression was investigated by the methods of Western blotting, immunohistochemistry, and transmission electron microscope. LV hypertrophy was accessed by pathological analysis and plasma brain natriuretic peptide (BNP) level.
Results  LV hypertrophy was prominent in untreated SHR. In SHR, LV myocardium Cx43 level was upregulated, and the distribution of Cx43 was displaced from their usual locations to other sites at various distances away from the intercalated disks. After atorvastatin treatment, myocardium Cx43 level was reduced in SHR-A, and the distribution of Cx43 gap junction became much regular and confined to intercalated disk. Statins also prevented LV hypertrophy in SHR.
Conclusions  These results provide novel in vivo evidence for the key role of Cx43 gap junctions in LV hypertrophy and the possible mechanism in anti-hypertrophic effect of statins. Atorvastatin treatment may have beneficial effects on LV hypertrophy in spontaneously hypertensive rats.