运用流式细胞术分析孕妇外周血中胎儿有核红细胞的比例与孕周的关系

目的 :探讨母亲外周血中胎儿有核红细胞 (NRBCs)的比例与孕周的关系。方法 :分离纯化孕 11～ 34周、2 1～ 35岁的 6 1例孕妇外周血中的胎儿细胞 ,采用荧光激活细胞分离技术 (FACS)分选表达转铁蛋白受体的阳性细胞 (CD71+ 细胞 )。将孕妇组、未孕组及新生儿脐血组进行对照。结果 :孕 11～ 34周孕妇外周血中CD71+ 细胞的比例为 (0 .35± 0 .2 5 )× 10 -2 ,与未孕组及新生儿脐血组差异均有高度显著性 (P <0 .0 1)。CD71+ 细胞在外周血中的比例在孕 17、18周达峰值 ,分别为 (0 .6 4± 0 .2 5 )× 10 -2 和 (0 .5 4± 0 .35 )×10 -2 。结论 :早、中、晚期孕妇外周血中存在胎儿有核红细胞。利用母血循环中的胎儿细胞进行产前诊断的最佳时间应在妊娠 17～ 18周     

运用流式细胞技术分析孕妇外周血中胎儿有核红细胞的比例与孕周的关系

目的 :探讨母亲外周血中胎儿有核红细胞 (NRBCs)的比例与孕周的关系。方法 :对 6 1名孕龄为 11～ 34周、年龄为 2 1～ 35岁的妇女的外周血中的胎儿细胞进行分离纯化 ,采用荧光激活细胞分离技术 (FACS)分选表达转铁蛋白受体的阳性细胞 (CD71+细胞 )。将孕妇组、未孕组及新生儿脐血组进行对照。结果 :孕 11～ 34周的孕妇外周血中 CD71+细胞的比例为 (0 .35± 0 .2 5 )× 10 - 2 ,与未孕组及新生儿脐血组均有极显著性差异。CD71+细胞在外周血中的比例在孕 17～18周达峰值 ,分别为 (0 .6 4± 0 .2 5 )× 10 - 2和 (0 .5 4± 0 .35 )× 10 - 2。结论 :早、中、晚期孕妇外周血中存在胎儿有核红细胞。利用母血循环中的胎儿细胞进行产前诊断的最佳时间应在妊娠 17～ 18周     

胎儿血红蛋白用于分选孕妇外周血中胎儿有核红细胞的研究

目的研究胎儿血红蛋白(HbF)对单个核细胞的标记情况,并用于孕妇外周血中胎儿有核红细胞(NRBCs)的分选,同时探讨NRBCs的比例与孕周的关系。方法2003-10-2004-04深圳市人民医院选用胎儿特异性抗体HbF对90例正常孕妇外周血、15例未孕妇女和15例胎儿脐血单个核细胞进行标记,并结合流式细胞技术(FACS)对胎儿有核红细胞进行分选。结果孕8~41周的孕妇外周血中HbF阳性标记率为(4·62±3·42)%,与未孕组及胎儿脐血组比较,差异均有极显著性意义(P<0·01)。经流式细胞仪分选出的孕妇外周血中的胎儿NRBCs数在孕12~18周、19~23周最高,分别为412·4±135·5和454·2±153·4。结论早、中、晚期孕妇外周血中均存在胎儿有核红细胞,单抗HbF可以有效地进行识别,利用该细胞进行无创伤性产前诊断的最佳时间宜在妊娠12~23周左右。     

应用转铁蛋白受体和胎儿血红蛋白标记染色方法分选孕妇外周血中胎儿有核红细胞的研究

由于孕妇外周血中胎儿细胞的含量极少，Hahn，Holzgreve和Bianchi等报道，孕妇每毫升外周血中仅有1～2个完整胎儿细胞。所以采用特异性单克隆抗体对胎儿细胞进行标记，并结合流式细胞仪进行高效富集分选的技术，是分离、纯化孕妇外周血中胎儿细胞的最佳手段。但因目前尚未发现识别胎儿细胞的特异性抗体，故不同学者选用的标记性抗体也有所不同。本研究采用荧光激活细胞分离技术（fluorescence-activated cell sorting，FACS），通过对孕妇外周血及未孕妇女外周血中转铁蛋白受体（transferrin receptor，CD71）单标记染色和胎儿血红蛋白（fetal haemoglobin，HbF）单标记染色与双标记染色情况的比较，探讨CD71与HbF染色法分选胎儿有核红细胞的价值。     

孕妇血浆中胎儿DNA的数量变化的研究

目的探讨孕妇血浆中胎儿游离DNA的数量变化的规律。方法提取68例孕妇血浆中的DNA,用实时荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)技术检测其胎儿SRY基因,并对其中怀男胎孕妇外周血浆中的胎儿DNA的数量进行动态分析。结果在怀男胎的孕妇外周血中均检测到了SRY基因,而在怀女胎的孕妇中未检测到。胎儿游离DNA最早出现的时间平均为7.7周,SRY基因拷贝数平均为5.53copies/ml。随孕期的增加,母血浆中胎儿DNA的含量在逐渐增加,并得出各孕周的标准参考值。在分娩后母血中胎儿DNA的含量就显著下降,到分娩后第二天就完全不能检测到。结论孕妇外周血浆中游离DNA的含量变化具有一定的规律,可以利用其进行无创伤性产前诊断。     

孕妇血浆中胎儿DNA检测在产前诊断中的应用

目的 探讨孕妇血浆中提取胎儿游离DNA,鉴别胎儿性别以诊断胎儿遗传性疾病的方法。方法 选择妊娠7-38周,B超确诊为单胎,经绒毛和羊水细胞染色体检测,确诊为妊娠男性胎儿的正常孕妇16例,妊娠女性胎儿的正常孕妇8例;X性连锁遗传病（假性肥大性肌营养不良,血友病,色盲,无汗性外胚层发育不良症）家族史行产前诊断者4例,用酚提取法,纯化孕妇血浆中胎儿DNA,然后用巢式聚合酶链反应（PCR）技术测定男性胎儿睾丸决定因子（SRY）。结果 16例妊娠男性胎儿孕妇血浆中,胎儿游离DNA第1次巢式PCR测定,检出SRY基因扩增片段10例,第1次检出率为62.5%;经第2次巢式PCR测定。另6例全部检出SRY基因扩增片段,累计检出率为100%,妊娠女性胎儿的8例孕妇血浆中,均未检出SRY基因扩增片段,4例X性连锁遗传病家族史者均检出SRY基因扩增片段。结论 从孕妇血浆中提取胎儿游离DNA行胎儿性别诊断是一种快速,简便,准确的产前诊断方法。     

母血中胎儿DNA与子痫前期关系的研究

目的:探讨孕妇外周血中胎儿DNA的浓度水平与子痫前期之间的关系。方法:留取第一次常规产前检查的472例孕妇的外周血并随访。设置阴性对照后,采用实时PCR方法定量检测怀男性单胎并发展为子痫前期的17例孕妇及34例怀男性单胎正常孕妇的血浆胎儿DNA的SRY基因浓度。结果:发展为子痫前期患者的外周血浆胎儿DNA浓度明显高于正常孕妇,中位数分别为165.41copies/ml和48.75copies/ml,有显著的统计学差异(P<0.001)。结论:发展为子痫前期患者外周血中的胎儿DNA明显增高,而浓度水平与子痫前期的严重程度似乎无关。     

孕妇血浆中胎儿DNA在产前诊断中的初步应用--胎儿SRY基因、STR基因型的鉴定

目的 :利用孕妇血浆中游离胎儿 DNA进行非创伤性产前基因诊断。方法 :对 6 5例 5～ 4 1孕周孕妇血浆胎儿DNA进行 SRY的 PCR扩增 ,以检出男性胎儿 DNA;同时采用短串联重复序列 (STR)多态位点即 CSFIPO、TPOX、THO1(CTT)三个位点的复合扩增方法对 19例妊娠女性胎儿的孕妇血浆 DNA进行扩增 ,以检出女性胎儿 DNA。两种扩增均采用母体血浆直接作为模板进行。结果 :SRY- PCR中 ,4 6例妊娠男性胎儿的孕妇中 ,有 30例血浆中出现 SRY基因扩增带 ,19例妊娠女性胎儿的孕妇血浆中仅 1例孕中期者为假阳性 (5 .3% )。本研究孕早、中、晚期的性别符合率分别为 6 0 %、84 .0 9%、5 0 % ,总符合率为 73.85 % .CTT- PCR中 ,19例妊娠女胎孕妇血浆中有 15例检出父源性等位基因即女性胎儿 DNA。结论 :应用孕妇血浆中胎儿 DNA作产前诊断敏感性和特异性较高 ,尤其是在孕中期 ,它是一种非创伤性产前诊断方法 ,适用于临床。     

运用O型血孕妇血浆中游离胎儿DNA检测胎儿ABO血型

目的:探讨利用O型血孕妇血浆中游离胎儿DNA检测胎儿ABO血型的可行性。方法:用酚/氯仿法从39例O型血孕妇(孕36~40+3周)且孕男性胎儿的血浆中提取胎儿DNA,巢式PCR扩增血浆中的SRY基因证实胎儿DNA存在,再用特异性序列-聚合酶链反应(SSP-PCR)检测胎儿ABO血型。用常规血清学方法测母体及新生儿血型。结果:10例孕A型血胎儿的孕妇血浆中扩增出A基因8例,6例孕B型血胎儿的孕妇血浆中扩增出B基因6例,23例孕O型血胎儿扩增出O基因而无A或B基因21例,准确性和敏感性分别为89.7%(35/39)和87.5%(14/16)。结论:利用孕妇外周血中游离胎儿DNA检测胎儿ABO血型可行,对诊断和预防新生儿ABO血型不合性溶血病的发生具有积极意义。     

孕妇外周血中胎儿有核红细胞的富集纯化及在产前诊断中的应用

孕妇外周血中的胎儿细胞主要有三种:滋养叶细胞、有核红细胞和淋巴细胞。最适于富集纯化用于产前诊断的是胎儿有核红细胞。密度梯度离心富集结合胎儿有核红细胞特异性抗原标记CD71,γ珠蛋白阳性选择和白细胞抗原CD45阴性选择纯化是目前从孕妇外周血中分离胎儿有核红细胞的理想方法。已用于产前诊断胎儿性别和一些疾病。     

脐带穿刺致胎心减慢相关因素分析

目的 通过对脐带穿刺致胎心减慢相关因素的分析，提出预防脐带穿刺致胎心减慢的措施。方法 采用病例对照分析的方法，对1992年12月至2000年12月中山大学附属一院收治的70例脐带穿刺后胎心减慢病例与同期210例脐带穿刺后胎心正常病例的手术指征、手术相关因素及胎儿预后进行比较分析。结果 脐带穿刺后胎心减慢与脐带穿刺进针次数、手术时间、穿刺抽血量、是否穿入脐动脉、穿刺前是否进餐等密切相关。结论 穿刺前30min鼓励进餐，尽量缩短手术时间，提高穿刺的命中率，减少脐带穿刺的抽血量．避免穿入脐动脉．可预防穿刺后胎心减慢。     

利用孕妇血浆游离胎儿DNA产前诊断胎儿RhD血型的研究

目的探讨无损伤性产前诊断胎儿RhD血型的方法。方法西安交通大学第二医院1999年2月至2001年12月，以妊娠14～40周的单胎孕妇为对象，其中RhD阴性孕妇8例，RhD阳性孕妇12例，利用PCR技术对孕妇血浆中游离胎儿DNA进行RhD基因第10外显子的特异性扩增，扩增片段长度为186bp，另外以等位基因RhCE基因为内对照，扩增片段长度为136bp，结果能同时扩增出186bp和136bp两条带，判断所妊娠胎儿血型为RhD阳性；扩增出136bp一条带，判断所妊娠胎儿血型为RhD阴性。8例RhD阴性孕妇中，5例扩增出136bp一条特异性片段，3例同时扩增出136bp和186bp两爷特异性片段；12例RhD阳性孕妇血浆标本，均同时扩增出136bp和186bp两条特异性片段，所有RhD-PCR扩增结果均得到脐血血清学检测结果的证实。结论利用孕妇血浆中游离胎儿DNA对胎儿RhD血型进行诊断，是一种简便、快速、特异性较高的产前诊断方法，值得临床推广应用、     

肝素小剂量泼尼松和阿斯匹林治疗妊娠抗磷脂综合征

目的 探讨治疗磷脂综合征妇女反复妊娠流产和死胎的有效方法。方法 抗磷脂抗体阳性采用小剂量阿斯匹林７５ｍｇ每日一次口服２周，９例抗体持续一翥入用肝素６２５０ＩＵ每１２小时１次皮下注主泼尼松５ｍｇ晶次口服至体阴性停用。结果 ９例患者中有８例胎儿存活，平均孕周为３６周，无与药物有关的严重并发平。结论 纱的使用可增加围产期台儿存活率，结果产上述三种药物的小剂量合理应用是安全有效的。     

妊娠晚期联合应用无负荷试验与多普勒脐动脉血流速度测定对胎儿预后的评价

目的　探讨联合仪器监护判断胎儿预后的价值。方法　联合应用胎心无负荷试验 (NST)及多普勒脐动脉血流速度测定对 6 73例妊娠晚期孕妇进行观察。结果　NST可疑型和无反应型组S/D≥ 3者发生率比反应型组明显增高 ,在S/D≥ 3组中羊水污染、1分钟Apgar评分≤ 7分及低体重儿发生率均明显高于S/D <3组 (P <0 0 0 5 ) ,NST可疑或无反应型与S/D比值≥ 3预测胎儿预后的特异性、敏感性、阳性预测值和阴性预测值分别为77 86 %、83 6 5 %、40 85 %、96 30 %与 98 2 4%、2 8 85 %、75 0 0 %、88 31% ,NST可疑或无反应型联合S/D比值≥3的特异度、敏感度、阴性预测值和阳性预测值为 99 30 %、2 8 85 %、88 42 %、88 2 4%。结论　NST与多普勒脐动脉血流速度测定联合应用可以提高胎儿宫内缺氧状态的诊断 ,为临床及时纠正宫内缺氧提供了可靠依据。     

胎盘表皮生长因子受体的表达改变与胎儿宫内生长迟缓的关系研究

目的　研究胎儿宫内生长迟缓 (IUGR)患者胎盘表皮生长因子受体 (EGFR)的表达与正常妊娠及巨大儿胎盘之间是否有差异 ,并分析其变化与胎盘绒毛发育是否有关。方法　取足月分娩胎盘组织标本 6 3例 ,于分娩后立即置于 4%中性甲醛缓冲液固定。用免疫组织化学SP法进行胎盘EGFR检测。同时对末梢绒毛血管大小、面积及绒毛面密度等进行分析测量。结果　IUGR组胎盘EGFR的表达较正常对照组和巨大儿组明显增加 (P <0 0 1) ,IUGR胎盘末梢绒毛血管数及血管占绒毛横面积比均明显减少 (P均 <0 0 5 ;P均 <0 0 0 1) ;而巨大儿组与对照组比较无显著性差异。三组胎盘绒毛面密度无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论　IUGR儿胎盘EGFR表达增加与其胎盘绒毛发育不良有关 ,EGFR在胎儿胎盘的生长发育及IUGR的发生中起重要调节作用。     

高危妊娠胎儿血流速度波形与不同程度胎儿窘迫的关系

对妊娠晚期的高危孕妇２４４例，于分娩前一周内行彩色多普勒超声监测胎儿脐动脉（ＵＡ）、肾动脉（ＲＡ）以及大脑中动脉（ＭＣＡ）的血流速度波形（ＦＶＷｓ）的搏动指数（ＰＩ），产后随访围产儿预后。根据新生儿出生体重、Ａｐｇａｒ评分和羊水的性质分成预后正常、轻度、中度和重度预后不良等四级。结果：２４４例高危妊娠中，１４６例围产儿预后良好，６９例为轻度预后不良，１２例中度预后不良，１７例为重度预后不良。ＵＡ、ＲＡ和ＭＣＡ的ＦＶＷｓ与围产儿预后不良的程度均有明显的相关性。ＵＡＰＩ预测中度和重度预后不良的准确性较高，ＲＡＰＩ预测中度预后不良的准确性高于轻度和重度，ＭＣＡ在重度预后不良中改变最明显。说明胎儿ＵＡ、ＲＡ和ＭＣＡ的ＦＶＷｓ在胎儿窘迫时均有改变，但在不同程度的胎儿窘迫中，其敏感性不同     

短变异在胎心率监护中的应用

目的：采用计算机分析系统对胎心率图形中短变异和人工判读标准中长变异的各分型间的关系进行比较，并探讨短变异预测围生儿预后的价值：方法：分析了2001年12月至2002年9月3010份胎心率图型中，长变异各型相对应的短变异数值，及不同的短变异组围生儿不良预后的发生率。结果：短变异与长变异的各型之间呈正相关，短变异小于4．0ms组的围生儿预后不良的发生率显著高于短变异大于5．0ms组(P=0．039)。结论：计算机分析的短变异是反映胎心率基线变异的一个重要参数，对预测围生儿预后有重要价值，     

妊娠合并肝内胆汁淤积症胎儿宫内缺氧预测指标的研究

目的 探讨妊娠合并肝内胆汁淤２积症（ＩＣＰ）胎儿宫内缺氧的预测指标。方法对１０７例ＩＣＰ患者多项临床及实验室指标进行观察，并将其与围产儿结局进行对照分析。结果 皮肤瘙痒持续时间≥３周，血清转氨酶和胆红素同时升高，ＮＳＴ胎心基线率及变异消失者羊水胎粪污染率，新生儿窒息率及围产儿病死率，同于皮肤瘙痒持续时间〈３周（Ｐ〈０．０１），单纯转氨酶升高而胆红素值正常（Ｐ〈０．０１），ＮＳＴ胎儿基线率变异正常者     

B超测量胎儿双肩径及其它参数的临床应用

目的 探讨Ｂ超测量胎儿各径线的临床价值。方法 将１００例单胎孕３７￣４１周的孕妇产前３天内的Ｂ超测胎儿双顶径、股骨长、腹围、双肩径与生后３天内的新生儿各径线值比较,并进行其与新生儿体重的相关性的分析,应用双肩径预测巨大胎儿。结果 不同性别胎儿的各径线不同。Ｂ超测量胎儿各径线与生后测量值有良好的符合性,且与新生儿体重呈正相关。结论：双肩径为１１．０ｃｍ时巨大胎儿的诊断指数最好,对诊断巨大胎儿有帮助,     

Spontaneous Resolution of Second Trimester Fetal Pleural Effusion

A case of pleural effusion, diagnosed by ultrasound in the second trimester, underwent spontaneous resolution without adverse effect on lung development. Optimal management has not been defined; because the natural history of fetal pleural effusion is unknown, observation with serial ultrasound is an alternative to in utero therapy.