不同碘制剂对人皮肤成纤维细胞黏附和增殖的影响

目的 研究碘化钾(KI)和碘伏(PI)对人皮肤成纤维细胞(HSF)的影响,初步探索碘对HSF的作用机制.方法 体外培养HSF,实验分为9组:空白对照组、3 mg/L KI组、30 mg/L KI组、300 mg/L KI组、3 000mg/L KI组、1 mg/L PI组、2 mg/L PI组、3 mg/L PI组、4 mg/L PI组分别加入不同浓度碘化钾和碘伏作用分别于第2、4、6天采用MTT检测HSF黏附和增殖情况;免疫荧光细胞化学方法观察增殖细胞核抗原(PCNA)表达.结果 3 mg/L KI组、30 mg/L KI组、300 mg/L KI组细胞黏附和增殖活性明显增强,PCNA表达增强,与对照组差异有显著性,3 000 mg/L KI组和含碘伏组细胞活性明显减弱.其中含碘伏组随碘浓度增加细胞活性越差,甚至脱水、死亡.结论 适当浓度碘化钾使体外培养HSF黏附和增殖活性增强,高浓度的碘化钾导致细胞凋亡;稀释浓度的碘佚对体外培养HSF有明显毒性作用.     

杞叶含药血清对长波紫外线损伤人皮肤成纤维细胞的保护作用

目的探讨不同浓度枸杞叶（LBL）含药血清对长波紫外线（UVA）辐射致人真皮成纤维细胞（HSF）损伤的防护作用及其作用机制。方法采用强度2.8J.cm^-2的UVA照射HSF损伤造模,实验分为空白组、对照组、UVA模型组、空白血清组、UVA＋0.15g.mL^-1LBL组,UVA＋1.5 g.mL^-1LBL组和VitC阳性对照组,用MTT法检测细胞增殖活性,酶生化法检测MDA含量及培养液中LDH漏出量。结果正常大鼠血清不影响HSF功能,UVA照射HSF损伤法可造成HSF增殖活性降低,MDA含量升高,LDH漏出增加,与空白组相比差异有统计学意义（P均〈0.05）;不同浓度的LBL及VitC均能增加细胞的增殖活性,减少MDA含量和LDH的漏出量,但LBL作用更优（P〈0.05）。结论不同浓度LBL对UVA损伤的HSF均有一定的保护作用,其机制可能与LBL的抗氧化作用及促进细胞增殖活性有关。     

不同浓度腐胺对人皮肤成纤维细胞增殖、迁移和凋亡的影响

目的探讨不同浓度腐胺对人皮肤成纤维细胞（human skin fibroblasts,HSF）增殖、迁移、凋亡的影响。方法将体外HSF
分为腐胺组和对照组,以含腐胺浓度分别为0.5、1、5、10、50、100、500、1000 μg/ml完全培养基培养细胞设为腐胺组,不添加腐胺
设为对照组。经对照组及不同浓度腐胺组处理的HSF培养24 h后,再以四唑化合物电子耦联显色法（MTS法）测定细胞增殖能
力（用吸光度值表示）,Transwell迁移实验测定细胞的迁移能力,流式细胞技术（Flow Cytometry, FCM）Annexin V/PI标记法测
定细胞凋亡率。结果（1）细胞增殖能力（MTS）测定结果显示,0.5、1、5、10 μg/ml 腐胺组HSF的吸光度值较对照组升高（P<
0.01）,并且1 μg/ml时达峰值（0.754±0.024）;500、1000 μg/ml腐胺组HSF吸光度值较对照组降低（P<0.01）;50、100 μg/ml腐胺
组HSF的吸光度值与对照组无明显差异（P>0.05）;（2）Transwell迁移实验结果显示,1 μg/ml腐胺组穿过微孔膜的细胞数目较对
照组显著增加（P<0.01）,且达到峰值309±21;50 μg/ml及以上浓度腐胺组HSF穿过微孔膜的数目较对照组减少（P<0.05）;0.5、
5、10 μg/ml腐胺组HSF穿过微孔膜的细胞数目与对照组比较无明显差异（P>0.05）;（3）流式细胞凋亡结果显示,0.5、1、5、10 μg/ml
腐胺组HSF凋亡率较对照组显著降低（P<0.05）,而且在1 μg/ml时细胞凋亡率达最低值（11.10±0.79）%;100 μg/ml及以上浓度
腐胺组细胞凋亡率较对照组显著升高（P<0.01）,而且随着浓度增加凋亡率逐渐升高;50 μg/ml腐胺组与对照组比较细胞凋亡率
无明显差异（P>0.05）。结论微量腐胺可维持细胞正常的迁移能力,显著提高HSF的细胞增殖能力,而较高浓度的腐胺能显著
抑制HSF迁移与增殖,并诱导细胞发生凋亡,提示不同浓度的腐胺会对创面愈合起到完全不同的作用。
     

钠泵α2亚基介导低浓度哇巴因影响大鼠心室肌细胞收缩力的作用研究

背景 强心苷类（CGs）药物临床治疗心力衰竭因其治疗窗窄使应用受到很大限制。心肌钠泵是CGs药物作用的靶点,然而CGs药物与钠泵相互作用的机制仍有待阐明。目前认为,钠泵的第一个膜外区H1-H2是哇巴因可能的结合位点。目的 利用作用在抗心肌钠泵α2亚基H1-H2膜外区结构域的多克隆WJS为工具,封闭该结合位点,有效拮抗哇巴因对钠泵的抑制作用,比较封闭前后哇巴因对心室肌细胞钠泵活性的影响及心室肌细胞收缩力、细胞内钙的变化,探讨钠泵与哇巴因的作用机制。方法 2013年1月-2015年1月急性分离大鼠心室肌细胞,将心室肌细胞分为4组,1 μmol/L哇巴因组、WJS+1 μmol/L哇巴因组、1 mmol/L哇巴因组、WJS+1 mmol/L哇巴因组。1 μmol/L哇巴因组给予哇巴因（1 μmol/L）进行灌流;WJS+1 μmol/L哇巴因组以WJS（稀释浓度1∶1 000）孵育心室肌细胞0.5 h后,再给予哇巴因（1 μmol/L）进行灌流;1 mmol/L哇巴因组给予哇巴因（1 mmol/L）进行灌流;WJS+1 mmol/L哇巴因组以WJS（稀释浓度1∶1 000）孵育心室肌细胞0.5 h后,再给予哇巴因（1 mmol/L）进行灌流。采用全细胞膜片钳技术记录钠泵电流（Ip）,观察WJS对哇巴因抑制Ip作用的影响;采用激光共聚焦显微镜测定心室肌细胞游离钙浓度（［Ca2+］i）;采用细胞动缘探测系统测定心室肌细胞收缩力的大小。结果 Western blotting法检测结果显示,纯化后的WJS在电泳时分别出现2条清晰的条带,其分子量均为 110 kD 左右。细胞免疫荧光法测定结果显示,WJS均结合在心室肌细胞钠泵的膜外区,而且这种结合并不被1 μmol/L哇巴因影响,但却被在H1-H2膜外区特异性抗原点具有相同成分的多肽阻断剂RE2取消。WJS+1 μmol/L哇巴因组高亲和力钠泵电流（Iph）低于1 μmol/L哇巴因组（P＜0.05）;1 mmol/L哇巴因组、WJS+1 mmol/L哇巴因组Iph高于1 μmol/L哇巴因组和WJS+1 μmol/L哇巴因组,低亲和力钠泵电流（Ipl）低于1 μmol/L哇巴因组和WJS+1 μmol/L哇巴因组（P＜0.05）;WJS+1 mmol/L哇巴因组Iph高于1 mmol/L哇巴因组,Ipl低于1 mmol/L哇巴因组（P＜0.05）。灌流5、15 min WJS+1 μmol/L哇巴因组心室肌细胞［Ca2+］i低于1 μmol/L哇巴因组（P＜0.05）;灌流5、15 min 1 mmol/L哇巴因组、WJS+1 mmol/L哇巴因组心室肌细胞［Ca2+］i高于1 μmol/L哇巴因组和WJS+1 μmol/L哇巴因组（P＜0.05）;灌流5、15 min WJS+1 mmol/L哇巴因组心室肌细胞［Ca2+］i高于1 mmol/L哇巴因组（P＜0.05）。灌流5、15 min WJS+1 μmol/L哇巴因组心室肌细胞收缩力低于1 μmol/L哇巴因组（P＜0.05）;灌流5 min 1 mmol/L哇巴因组、WJS+1 mmol/L哇巴因组心室肌细胞收缩力高于1 μmol/L哇巴因组和WJS+1 μmol/L哇巴因组,灌流15 min心室肌细胞收缩力低于1 μmol/L哇巴因组和WJS+1 μmol/L哇巴因组（P＜0.05）;灌流5、15 min WJS+1 mmol/L哇巴因组心室肌细胞收缩力低于1 mmol/L哇巴因组（P＜0.05）。结论 抗心肌钠泵α2亚基H1-H2膜外区结构域的多克隆抗体WJS取消Iph和低浓度哇巴因所致的心室肌细胞收缩力增强作用,表明钠泵α2亚基介导低浓度哇巴因治疗心力衰竭的作用。     

长期高蛋白饮食对营养性肥胖大鼠胰岛的影响

目的观察长期等热量高蛋白饮食对营养性肥胖大鼠胰岛形态功能的影响。方法利用高脂饲料建立营养性肥胖大鼠模型34只,分为高蛋白饲养组（HP组,n=12）、高脂饲养组（HF组,n=11）、普通饲养组（NC组,n=11）,正常等热量饲养24周后,观察体质量、内脏脂肪及空腹血浆GLP 1的改变,行静脉葡萄糖耐量试验（IVGTT）观察胰岛分泌功能,作胰岛素免疫组化染色进行胰岛形态学分析。结果与NC组相比,HP组体质量、内脏脂肪均显著降低［分别为（490.92±39.47)g vs（545.55±31.08）g,P＜0.01,（22.42±7.04）g vs（32.33±9.27）g,P＜0.05］,HF组则均明显增加［分别为（656.01±58.49 ）g  vs （545.55±31.08）g,（55.33±17.81）g vs（32.33±9.27）g,P均＜0.01］。IVGTT结果显示,各点血糖无差异,但HP组5、10?min血清胰岛素显著降低［(91.56±21.72)mIU/L vs （121.29±34.03）mIU/L,;（58.62±15.80）mIU/L vs （81.12±24.36）mIU/L,P均＜0.05］;而HF组0、10?min显著升高［(40.21±14/12) mIU/L vs (27.48±11.31) mIU/L,(98.15±27.58) mIU/L vs (81.12±24.36) mIU/L, P均＜0.05］。空腹血浆GLP 1水平HP组显著降低［（0.52±0.13）μg/L vs （0.71±0.19）μg/L,P＜0.05］,HF组则有增加趋势［（1.03±0.28）μg/L vs （0.71±0.19）μg/L,P=0.11］。免疫组化结果显示,与NC组相比,HP组胰岛形态无改变,但HF组已出现胰岛显著增大、胰岛染色面积比率明显降低及平均灰度升高（P＜0.05）。结论高脂饮食可造成胰岛形态功能受损,而长期等热量高蛋白饮食虽能降低营养性肥胖大鼠胰岛素的第一时相分泌,但尚未引起胰岛形态变化。该组胰岛素分泌减少可能与空腹GLP 1降低、体质量减轻有关。     

肾上腺素对布比卡因抑制大鼠心室肌细胞钠电流的影响

目的：研究肾上腺素对较低浓度布比卡因所抑制的大鼠心室肌细胞钠电流（INa）的影响。方法：采用急性酶解分离法获得Sprague-Dawley雄性大鼠心室肌细胞,随机分为2组（n=5）,以全细胞膜片钳技术记录INa,观察0.15 μg/mL肾上腺素对40 μmol/L布比卡因和50 μmol/L布比卡因所抑制的INa的影响。结果：40 μmol/L和50 μmol/L布比卡因对大鼠心室肌细胞INa抑制率分别为（50.2%±5.8%）和（62.7%±7.7%）,差异有统计学意义（P＜0.05）。当加入0.15 μg/mL肾上腺素后,40 μmol/L布比卡因组抑制率变到（33.7%± 10.2%）,差异有统计学意义（P＜0.05）;50 μmol/L布比卡因组抑制率变为（62.1%±7.3%）,差异无统计学意义（P＞0.05）,肾上腺素对I-V曲线无明显影响。结论：肾上腺素可以部分恢复较低浓度布比卡因所抑制的心室肌细胞INa,但其作用在较高浓度布比卡因中受到限制。     

姜黄素对人早幼粒白血病细胞增殖和凋亡的影响及其机制研究

目的 研究姜黄素对人早幼粒白血病细胞HL-60细胞增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法 将HL-60细胞设立实验组、阴性对照组、空白对照组,实验组分姜黄素（0、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0 μmol/L）单独亚组和姜黄素（0、5.0、10.0、20.0 μmol/L＋30 μmol/L GANT61）联合亚组,于作用24、48 h时观察。采用CCK-8法检测HL-60细胞增殖,计算细胞增殖抑制率;并评价体外联合应用药物对细胞毒性作用是否有协同作用;采用AnnexinⅤ-FITC/PI双染检测细胞凋亡率。结果 姜黄素单独亚组和姜黄素联合亚组在24、48 h对HL-60细胞的抑制率比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;培养至24、48 h时,5.0、10.0、20.0 μmol/L姜黄素联合亚组分别与5.0、10.0、20.0 μmol/L单独亚组对HL-60增殖抑制率比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;培养至24、48 h时,10.0、20.0 μmol/L姜黄素联合亚组与0 μmol/L姜黄素联合亚组对HL-60增殖抑制率比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。培养至24 h时,5.0 μmol/L姜黄素与30 μmol/L GANT61对HL-60细胞的增殖抑制率呈拮抗作用,培养至48 h时,呈单纯相加作用;24、48 h时,10.0、20.0 μmol/L姜黄素与30 μmol/L GANT61联合用药对HL-60细胞的增殖抑制率均呈增强作用。培养至24、48 h时,姜黄素、GANT61和姜黄素＋GANT61对HL-60细胞凋亡率比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;其中,培养至24 h时,10.0、20.0 μmol/L姜黄素联合用药分别与10.0、20.0 μmol/L姜黄素单独用药对HL-60细胞凋亡率比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;培养至48 h时,5.0、10.0、20.0 μmol/L姜黄素联合用药分别与5.0、10.0、20.0 μmol/L姜黄素单独用药对HL-60细胞凋亡率比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;5.0、10.0、20.0 μmol/L姜黄素联合用药与GANT61单独用药对HL-60细胞凋亡率比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 姜黄素和GANT61联合用药对HL-60细胞增殖具有协同抑制作用,显著促进HL-60细胞凋亡,而且与浓度和时间有关,姜黄素可能通过抑制Hedgehog信号通路而起作用。     

不同浓度的高锶矿泉水对人肝细胞增殖及功能的影响

目的:观察不同浓度的高锶矿泉水对LO2细胞(入肝细胞株)增殖和功能的影响.方法:LO2细胞分为2mg/L、4mg/L、6mg/L、8mg/L锶矿泉水组(SMW)和双蒸水组(DDW),以5× 104/ml的浓度接种于培养板中,24h后,换成条件培养基培养至7d.分别于2d、3d、5d和7d后行MTT法观察细胞的增殖情况.培养5d的细胞分别用比色法测培养基中总胆红素(TB)的含量,和用赖氏法测细胞内谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的活性.结果:2mg/L SMW细胞增殖、胆红素摄取量和转氨酶活性无显著变化(P＞0.05);4mg/L和6mg/L SMW组细胞提前出现增殖峰,并较长时间地保持旺盛的增殖状态(P＜0.05);细胞摄取胆红素的能力增强(P＜0.05),AST活性无显著变化(P＞0.05),但ALT的活性降低(P＜0.05);8mg/L SMW组细胞增殖速度减慢、摄取胆红素量增多(P＜0.05),但细胞内ALT和AST的活性均降低(P＜0.05).结论:4～6mg/L浓度范围的天然高锶矿泉水对肝细胞的增殖和胆红素代谢有益,能降低转氨酶活性;但超过8mg/L浓度时可对肝细胞造成一定损害.     

胃癌患者血清可溶性B7 H4的检测及其临床意义

目的检测胃癌患者血清中可溶性B7 H4（sB7 H4）的水平并探讨其临床意义。方法应用酶联免疫吸附试验（ELISA）夹心法检测61例胃癌患者与51例正常人血清sB7 H4水平,分析其与病理类型、治疗前后、胃癌其他血清标志物的相关性。结果胃癌患者血清sB7 H4水平（49.14±16.16）μg/L明显高于正常人（32.67±12.28）μg/L,P＜0.01。低分化腺癌患者sB7 H4水平（64.51±20.67）μg/L高于高分化腺癌（36.78±13.39）μg/L、粘液腺癌（42.79±12.31）μg/L和印戒细胞癌（44.62±12.27）μg/L,P＜0.05。手术前胃癌患者血清sB7 H4水平（58.09±15.28）μg/L明显高于术后（38.58±9.49）μg/L,P＜0.01。胃癌患者血清sB7 H4水平与CEA、CA19 9水平呈正相关（P＜0.01）。结论胃癌患者血清中高水平的sB7 H4及其与病理类型、治疗情况、及其他肿瘤标志物相关,提示sB7 H4可能在胃癌的发生发展中有重要作用,可为胃癌的诊断和治疗提供一种新的靶位点。     

枸杞叶含药血清对长波紫外线损伤人皮肤成纤维细胞的保护作用

目的 探讨不同浓度枸杞叶(LBL)含药血清对长波紫外线(UVA)辐射致人真皮成纤维细胞(HSF)损伤的防护作用及其作用机制.方法 采用强度2.8J·cm-2的UVA照射HSF损伤造模,实验分为空白组、对照组、UVA模型组、空白血清组、UVA+0.15g·mL-1LBL组,UVA+1.5 g·mL-1LBL组和VitC阳性对照组,用MTT法检测细胞增殖活性,酶生化法检测MDA含量及培养液中LDH漏出量.结果 正常大鼠血清不影响HSF功能,UVA照射HSF损伤法可造成HSF增殖活性降低,MDA含量升高,LDH漏出增加,与空白组相比差异有统计学意义(P均＜0.05);不同浓度的LBL及VitC均能增加细胞的增殖活性,减少MDA含量和LDH的漏出量,但LBL作用更优(P＜0.05).结论 不同浓度LBL对UVA损伤的HSF均有一定的保护作用,其机制可能与LBL的抗氧化作用及促进细胞增殖活性有关.     

人巨细胞病毒体外感染对外周血单个核细胞的趋化功能

目的: 探讨人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)体外感染对人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)的趋化功能,及地塞米松对病毒趋化作用的影响。方法: 将HCMV AD169株稀释成梯度半数组织培养感染量(tissue culture infective dose,TCID50),即5、10、20、40、60、80、100、1 000 TCID50,分别感染人胚肺成纤维细胞(human embryonic lung fibroblast,HELF),培养24,48,72,96 h后提取上清液,趋化PBMC,于倒置显微镜高倍镜下观察并计数被趋化的PBMC,比较趋化作用的强弱;同时用不同质量浓度的地塞米松(0.125,1.25,12.5,25,50,100 μg/mL)感染HELF,观察其对HCMV感染上清介导的PBMC趋化作用的影响,0 μg/mL作为对照。结果： 5 TCID50与10 TCID50 之间,80TCID50与1 00 TCID50之间,1 00 TCID50与1 000 TCID50之间,培养24,48,72,96 h时趋化作用差异均无统计学意义(P均>0.05)。10 TCID50与20 TCID50之间,20 TCID50与40 TCID50之间,培养24,48,72 h时趋化作用差异均无统计学意义(P均>0.05)。同一浓度病毒,培养24 h与48 h之间趋化作用差异均无统计学意义(P均>0.05),培养48 h与96 h之间,72 h与96 h之间趋化作用差异均有统计学意义(P均<0.05)。与对照组(0μg/mL)比较,1.25 μg/mL和12.5 μg/mL地塞米松对HCMV感染上清介导的PBMC趋化作用无明显影响(P均>0.05),其余质量浓度差异均有统计学意义(P均<0.01)。结论： HCMV感染HELF后的培养上清具有趋化PBMC的功能,在一定质量浓度范围内,随着时间的延长趋化作用增强。地塞米松体外能够抑制病毒的趋化作用,且对PBMC的趋化抑制作用随着质量浓度的增加而增强。     

ERK信号通路调控二氧化硅诱导的人支气管上皮细胞上皮-间质转化

目的:探讨细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)信号通路在二氧化硅( SiO2)诱导人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBEC)上皮-间质转型(epithelial-mesenchymal transit...     

重新评估诊断性刮宫在异位妊娠诊断中的作用

目的 重新评估诊断性刮宫(D&C)在诊断异位妊娠(EP)中的临床作用。方法 回顾性分析血β-人绒毛膜促性腺激素(HCG)异常增高但阴道超声未见到明确宫内妊娠囊且行D&C的不明部位妊娠患者118例和β-HCG＞5 000 IU/L但未行D&C的患者24例,最终诊断来自诊刮后血β-HCG的变化、病理和腹腔镜检查结果。结果 所有行D&C患者中,65.3%诊断为EP,34.7%诊断为宫内妊娠(IUP)。诊断为EP的患者诊刮前血β-HCG水平明显高于诊断为IUP的患者(P=0.005),而IUP组的平均产次明显高于EP组(P=0.001)。当β-HCG＜2 000 IU/L时,EP组子宫内膜厚度≤5 mm的患者为8例(40.0%),IUP组为3例(11.0%)(P=0.035)。EP的诊断率在β-HCG＜2 000 IU/L和2 000 IU/L＜β-HCG＜5 000 IU/L时分别为42.6%和68.3%(P=0.012)。在β-HCG＞5 000 IU/L的患者中,诊刮组和未诊刮组EP的诊断率差异无统计学意义(96.7%比96%,P=0.915)。结论 虽然子宫内膜薄、存在盆腔包块与EP相关,但是不能作为诊断EP的独立因素。为了避免误诊和不必要的甲氨蝶呤的治疗,在2 000 IU/L＜β-HCG＜5 000 IU/L可疑EP的患者中,D&C仍有重要的作用;当患者血β-HCG＞5 000 IU/L、宫内无妊娠囊且存在盆腔包块时,EP的可能性极大,D&C的意义减少,可直接行腹腔镜检查。     

脂多糖对正常人皮肤成纤维细胞胶原合成的影响

目的:研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对正常人皮肤成纤维细胞胶原合成的影响,以阐明LPS在皮肤创伤愈合中的可能作用.方法:体外培养正常人皮肤成纤维细胞,采用3H-脯氨酸掺入法观察不同浓度(0、0.005、0.01、0.05、0.1、0.5和1.0 μg·ml-1)的LPS对成纤维细胞胶原合成的影响.结果:LPS刺激浓度在0.005 μg·ml-1时,皮肤成纤维细胞胶原蛋白合成增加;随着刺激浓度增加,刺激作用增强;但当LPS浓度为0.5 μg·ml-1时,促胶原合成作用开始降低;当浓度达到1.0 μg·ml-1时则呈现抑制效应.结论:在一定浓度范围内LPS促进成纤维细胞胶原合成,表明LPS在皮肤创伤愈合中可能具有重要作用.     

MK-801急性处理改变斑马鱼幼鱼自发运动和焦虑行为

 目的  在不同光照条件下,地卓西平马来酸盐(dizocilpine,MK-801)急性处理对斑马鱼幼鱼自发运动和焦虑行为的影响。方法  野生型AB品系斑马鱼幼鱼(5天和7天)暴露在不同浓度MK-801 (0、10、20、50、100、200 μmol/L)溶液中。在光照与黑暗交替条件下,记录斑马鱼幼鱼每分钟游动距离和趋触性。结果  光照条件下,MK 801急性处理能显著降低幼鱼自发运动(P<0.05);黑暗条件下,MK-801急性处理也能降低幼鱼自发运动(P<0.05),但10 μmol/L MK-801对5天幼鱼自发运动无显著影响(P>0.05);黑暗条件下,7天幼鱼在100 μmol/L MK-801作用下抗焦虑能力显著增加,5天幼鱼在20、50 μmol/L MK-801作用下有显著的抗焦虑能力(P<0.05);光照条件下,斑马鱼幼鱼的抗焦虑行为都无显著变化(P>0.05)。结论  MK-801诱导幼鱼自发运动降低;在黑暗条件下,MK-801用药组(20、50、100和200 μmol/L)的幼鱼表现出抗焦虑行为;年龄、药物剂量和光照条件共同作用影响斑马鱼幼鱼的行为模式。     

钙敏感受体在3,3′-二吲哚甲烷抑制肝癌细胞增殖与迁移侵袭中的作用

目的:探讨钙敏感受体（calcium-sensing receptor,CaSR）在3,3′-二吲哚甲烷(3,3′-diindolylmethane, DIM)对肝癌细胞增殖、迁移与侵袭影响中的作用。方法:采用不同浓度（0、20、40、60、80 μmol/L）DIM分别处理人肝癌HepG2和SMMC-7721细胞24 h,采用MTT法检测肝癌细胞增殖能力,蛋白免疫印迹法检测CaSR蛋白表达,筛选合适的DIM浓度,Transwell法检测DIM对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响。另将HepG2和SMMC-7721细胞分为4组:对照组、60 μmol/L DIM组、300 μmol/L氯化钆（CaSR激动剂）组及氯化钆+ DIM组（用300 μmol/L氯化钆预处理细胞0.5 h,再与60 μmol/L DIM共处理24 h）,评价细胞增殖、CaSR蛋白表达以及细胞迁移和侵袭能力。结果:与对照组相比,60 μmol/L和40 μmol/L DIM处理后可分别显著抑制HepG2和SMMC-7721细胞增殖能力（P均<0.05）,降低两株细胞CaSR蛋白表达量（P均<0.05）；DIM抑制两株细胞迁移和侵袭能力呈效应剂量关系；与60 μmol/L DIM组相比,300 μmol/L氯化钆+60 μmol/L DIM组细胞CaSR蛋白表达、增殖、迁移和侵袭能力均明显升高（P<0.05）。结论:激活CaSR可以缓解DIM引起的抗肝癌效应,提示CaSR可能是DIM抗肝癌作用的潜在靶点。     

MIF对耐ADM人乳腺癌细胞MCF-7/ADM 体内外耐药逆转作用

目的：采用动物体内外结合方法探讨米非司酮（mifepristone, MIF）对耐阿霉素（adriamycin,ADM）人乳腺癌细胞MCF-7/ADM耐药逆转作用。方法：四甲基偶氮唑蓝法检测5 μmol/L MIF对 MCF-7/ADM体外耐药逆转作用。MCF-7/ADM接种裸鼠皮下构建裸鼠移植瘤模型,空白对照组（NS组）为0.2 mL生理盐水腹腔注射+0.5 mL食用油灌胃;ADM组为5 mg/kg ADM腹腔注射+0.5 mL食用油灌胃;MIF组为30 mg/kg MIF灌胃+0.2 mL生理盐水腹腔注射;ADM+MIF组为5 mg/kg ADM腹腔注射+30 mg/kg MIF灌胃。观察各组裸鼠移植瘤情况。结果：（1）5 μmol/L MIF对MCF-7/ADM细胞的抑制率小于5%,与未用MIF组的抑制率比较差异无统计学意义（P>0.05）。（2）ADM对MCF-7/ADM细胞的半抑制率为17.21 mg/L,而对非耐药乳腺癌细胞MCF-7细胞的半抑制率为0.42 mg/L,ADM对MCF-7/ADM细胞的半抑制率明显高于MCF-7的半抑制率（P＜0.05）。（3）5 μmol/L MIF与ADM联合处理MCF-7/ADM细胞后,MCF-7/ADM半抑制率为1.96 mg/L,明显低于单用ADM组的半抑制率（P＜0.05）。逆转ADM耐药倍数为8.78。（4）ADM+MIF组瘤体积［（232.5149±309.2377）mm3］均低于NS组的瘤体积［（962.2309±261.1313 ）mm3］（均P＜0.05）,也低于MIF组的瘤体积［（778.2846±42.6919）mm3］,还低于ADM组的瘤体积［（508.9648±16.2609） mm3］（均P＜0.05）。MIF+ADM组的瘤质量抑制率为78.0%。结论：MIF对耐阿霉素的人乳腺癌细胞MCF-7/ADM体内外均有逆转耐药性的作用。     

标准气压下低氧环境对大鼠体重的影响

为了确定大鼠的体重是否在标准气压缺氧环境下会减轻,本实验将12只5周龄Wis-tar大鼠移高至海拔2260m并使之持续暴露于含10%O2的低氧小低压舱内(相当于在海拔5000m)20日。在基线每5日测一次体重。由于标准气压缺氧环境可影响血循环功能,所以在大鼠移入高原前后20天,分别对其肺动脉压和血红蛋白浓度进行了测定。基线处体重为(222.4±20.7)g,而与基线处相比。大鼠体重在移高5、10、15和20天后明显下降,分别下降了(4.88±SD)%、(7.67土SD)%、(11.05±SD)%和(11.9±SD)%,差异显著(P<0.05)。基线处大鼠的平均肺动脉压为(21.3±2.5)mmHg,低氧暴露20天后肺动脉压明显增高[(45.3±5.8)mmHg,P<0.001]。血红蛋白浓度在基线处的平均值为(14.5±3.2)g/L,而在低氧暴露20天后明显增加[(22.6±5.4)g/L,P<0.001]。该结果显示,模拟高海拔可使大鼠体重明显下降,这与先前报道的人体试验结果相似。结果也进一步说明,标准气压下持续的低氧环境对肺动脉压和血红蛋白浓度可产生实质性影响。     

新型靶向药物对A549细胞体外抑制作用及其能谱CT成像初步研究

目的 探讨新型靶向药物对人非小细胞肺癌A549细胞的体外抑制作用及其能谱CT成像能力.方法 合成具有靶向A549细胞毒性的靶向药物,使用2.5、5、10、20、40 μmol/L靶向药物及吉非替尼分别体外培养A549细胞,应用四甲基偶氮唑蓝( MTT)比色法检测细胞抑制率.对 0、1.87、3.75、7.5、15、30 mmol/L靶向药物及吉非替尼进行能谱CT GSI模式扫描,分析两种药物细胞增殖抑制率与CT值差别及靶向药物碘浓度测量值与真实值之间关系.结果 靶向药物及吉非替尼可随时间及剂量依赖性地抑制 A549细胞增殖,浓度超过10 μmol/L时,靶向药物抑制率高于吉非替尼(P＜0.05);能谱CT GSI模式扫描,靶向药物CT值及碘浓度值明显高于吉非替尼(P＜0.05);靶向药物碘浓度测量值与真实值之间具有明显相关性( r=0.998).结论 新型靶向药物在很好的抑制A549细胞的同时,又具有良好的CT成像性能;利用能谱CT基物质成像能够准确反映不同浓度溶液的碘含量.