苄索氯铵原料毒理学评价

摘要 目的 评价苄索氯铵原料的毒理学安全性。方法 采用小鼠急性经口毒性试验、家兔多次完整皮肤刺激试验、家兔多次阴道黏膜刺激试验、豚鼠皮肤变态反应试验等方法,对苄索氯铵的急性毒性、刺激性和致敏性进行研究。结果 苄索氯铵对雌、雄ICR小鼠的急性经口LD50值均为316 mg/（kg·bw）［95%CI：205～488 mg/（kg·bw）］。5 000 mg/L苄索氯铵水溶液对新西兰白兔完整皮肤刺激指数为0.8,多次阴道黏膜刺激指数为1.9;对豚鼠皮肤致敏率为0%。结论 苄索氯铵原料为中等毒性物质;其5 000 mg/L水溶液对完整皮肤、黏膜分别为轻刺激性和极轻刺激性,且无皮肤致敏性。     

苄索氯铵比浊法测定脑脊液蛋白质的方法学评价

目的对一种新的测定脑脊液蛋白质含量的方法——苄索氯铵比浊法进行方法学评价。方法采用罗氏（Roche）公司的质控品、c．f．a．s定值血清和试剂在Roche P800全自动生化分析仪上,参照美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）评价方案对苄索氯铵比浊法的灵敏度、精密度、线性、抗干扰性进行评价,并与强生（Johnson）公司的干化学法进行比对。结果经实验得出苄索氯铵比浊法的测量灵敏度为42．7mg／L,标本浓度在85mg／L与2685mg／L之间线性关系良好,精密度检查低、中、高浓度标本的批内、批间、日间、总变异系数（CV）〈5％,干扰试验除了血红蛋白在浓度达到0．1g／L开始产生明显干扰外,葡萄糖、维生素C、胆红素在试验浓度内均未产生明显干扰,与强生公司的干化学法进行比对,Passing—Bablok回归方程为y=0．931X＋12．5,线性回归的Cusum检验证实偏倚无统计学意义（P〉0．05）。一元直线回归方程为y=0．922X＋13．8,计算得出相关系数（r）=0．986,表明两种方法相关性良好。结论苄索氯铵比浊法稳定性好、灵敏度高、线性范围宽、能对抗多种物质的干扰,是一种适合于临床应用的较理想的方法。     

高效液相色谱法同时测定消毒剂中的苯扎氯铵和苄索氯铵

目的建立一种高效液相色谱法,同时测定消毒剂中的苯扎氯铵和苄索氯铵。方法用配备二极管阵列检测器(DAD)的高效液相色谱仪,采用Agilent TC-18C液相色谱柱,以乙腈/乙酸铵/冰乙酸(70/30/0.15,V/V/V)为流动相,使用DAD(检测波长270 nm)进行检测分析。结果苯扎氯铵和苄索氯铵在20~400 mg/L范围内,线性回归方程的相关系数r=0.9990。2种成分的分离度为1.87,可以较好地分离苯扎氯铵和苄索氯铵。日内精密度苯扎氯铵为0.98%,苄索氯铵为0.23%;日间精密度苯扎氯铵为0.80%、苄索氯铵为0.47%。平均回收率范围苯扎氯铵为96.3%~103%,苄索氯铵为99.5%~104.0%;RSD范围苯扎氯铵为1.0%~1.5%,苄索氯铵为0.64%~2.6%。灵敏度苯扎氯铵检出限(LOD)为0.364 mg/L,定量限(LOQ)为1.21 mg/L;苄索氯铵LOD为0.311 mg/L,LOQ为1.04 mg/L。结论建立的高效液相色谱法能更准确地测定苯扎氯铵的含量,并能与苄索氯铵进行区分测定。     

苄索氯胺法——一种新的尿蛋白定量检测方法

目的 对苄索氯胺法这种新的尿蛋白检测方法进行评价。方法 收集150例门诊就诊患者尿液,用苄索氯胺法检测其尿蛋白含量,以此评价该方法的线性范围、精确度、灵敏度、回收试验、重复试验。结果该方法线性范围上限达2.014g／L,回收率手工法为86．95％,自动法为106．85％,有良好的精密度（CV分别为4．97％和2．63%）,灵敏度为单一钨酸比浊法的19～34倍,该法与单一钨酸比浊法的相关性良好,相关系数r为0．9846。两法结果进行t检验,t=0．436,P〉0．05,结果 差异无统计学意义。结论 该方法有灵敏度高、重复性好的优点,结果稳定,标本用量少,适用于自动分析,是值得在临床上推广的方法。     

苄索氯胺法——一种新的脑脊液蛋白质检测方法

目的对苄索氯胺脑脊液蛋白质检测方法进行评价。方法用罗氏公司的苄索氯胺试剂，以比浊法进行脑脊液蛋白质测定，并观察了本法的精密度、灵敏度、检测范围等。结果苄索氯胺法的批内精密度为1．5％、2．3％，日间精密度为0．62％、0．72％；灵敏度为0．08g／L；检测范围可达1．9g／L。传统磺基水杨酸蛋白质测定法与之比较，回归方程为Y=0．854X＋0．097，r=0．985。结论本法简便、快速、准确且样本用量少，适合临床实验室推广应用。     

血红蛋白变异体对糖化血红蛋白测定方法的干扰

目前,大部分糖化血红蛋白的检测系统可排除常见的血红蛋白变异体杂合子的干扰,或给出警告提示信息,而一些较为罕见的血红蛋白变异体引起的干扰常被临床医生和患者忽视。因此对于血红蛋白变异体普遍存在的地区,应谨慎选择HbA1c的检测系统,对于变异体携带者可选择合适的替代指标用于评估血糖水平。1血红蛋白和糖化血红蛋白血红蛋白是由珠蛋白和血红素构成的一种结合蛋白质,相     

肾功能对随意尿蛋白/尿肌酐判断24小时尿蛋白定量的影响

目的:探讨肾小球滤过率(GFR)降低对随意尿蛋白/尿肌酐(P/C)值判断24 h尿蛋白定量准确性的影响.方法:测定200例肾脏病患者身高、体重、肾功能,留取上午的随意尿测定P/C,并留取当日至次日的24 h尿送检蛋白定量.GFR计算公式:175×(SCr)-1.234×年龄-0.179×0.79(女).对P/C和24 h尿蛋白定量进行相关分析及线性回归分析.结果:(1)GFR越低,P/C尿蛋白定量较24 h尿蛋白定量越高.(2)P/C值与24 h尿蛋白定量相关系数0.799,P=0.000.Y (24h尿蛋白定量)=0.288+0.740x(P/C).(3)GFR＜45 mL/min·(1.73 m2)]-1组,与24 h尿蛋白定量比较,以回归方程求得的尿蛋白量较实测的P/C值更准确.结论:P/C值是判断24 h尿蛋白定量有效简单的指标.肾功能损害严重者,P/C值会偏高,应作必要的修正.     

苄索氯胺法检测尿蛋白联合尿β2-微球蛋白测定在糖尿病肾病早期诊断中的价值

目的探讨苄索氯胺法检测尿蛋白联合免疫比浊法尿β2-微球蛋白(β2-MG)测定在糖尿病肾病(diabetic mephropathy DN)早期诊断中的价值。方法选取尿常规检查尿蛋白阴性的糖尿病(diabetes mellitus DM)病人97例,用苄索氯胺法检测尿蛋白、用免疫比浊法测定β2-MG,选取健康查体者30名做对照。结果97例尿常规检测尿蛋白阴性的DM病人中有7例苄索氯胺法测定尿蛋白和β2-MG均增高,3例仅苄索氯胺尿蛋白增高,9例仅β2-MG增高。结论肾小球损害时可导致尿蛋白增高,尿常规检测因为试纸条敏感性差,未有明显增高的病人往往检测不出,而苄索氯胺法检测尿蛋白敏感性高,可以较好的筛选该类病人;糖尿病肾病以肾小球和肾小管结构和功能的改变为特征,肾小管和肾小球损害时尿β2-MG往往增高。通过苄索氯胺法检测尿蛋白联合免疫比浊法测定尿β2-MG可以很好的了解DM病人早期肾损害情况,对及早发现和治疗DN具有重要意义。     

一阶导数光谱法定量测定一氧化碳血红蛋白

目的利用导数光谱技术研究一氧化碳血红蛋白的导数光谱特性,并建立血液中一氧化碳血红蛋白的导数定量测定方法。方法采用保险粉使多组分的血红蛋白转化为含Hb和COHb的两组分。在血红蛋白溶液通入CO可制备饱和COHb溶液,通入O2可制备饱和Hb溶液,以两饱和溶液作为测定COHb的相对标准溶液。结果利用零交技术消除血红蛋白及溶液基底干扰,发现在波长427 nm的导数光谱值可应用于定量测定血液中一氧化碳血红蛋白。结论经过对样品测定,并与双波长分析法比较,在COHb>5%时,测定结果较为理想,适用于临床上COHb>5%的诊断性测定。     

利用反应曲线识别尿蛋白定量检测中的样品干扰

尿蛋白定量检测对肾脏疾病的诊断治疗有着重要意义。检测尿蛋白定量的方法很多，不论哪种检验方法都有可能受到干扰，受到干扰的检测结果不是对标本客观真实的反映，必然会影响到疾病的诊断治疗。为确保检验结果准确，如何识别和排除干扰是检验工作中的重要内容之一。本文就我科利用反应曲线识别和排除24小时尿蛋白定量检测中的样品干扰进行报道。     

变异血红蛋白和氨基甲酰血红蛋白对糖化血红蛋白测定干扰的评价

目的评价变异血红蛋白和血红蛋白衍生物氨基甲酰血红蛋白对离子交换-高效液相色谱(HPLC)系统和用酶法检测糖化血红蛋白(HbAlc)的影响。方法分别用2种方法同时检测无尿毒症糖尿病患者血红蛋白结构正常的血液样本和含有不同浓度胎儿血红蛋白(HbF)的血液样本及尿毒症患者HbA1c浓度。结果对于血红蛋白结构正常且无尿毒症的糖尿病患者,2种方法的HbA1c检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。当HbF<8.75%时,离子交换-HPLC的HbA1c测定结果与预期值无差异;当样本中HbF浓度为8.8%～23.0%时,其HbA1c测定结果要明显低于理论浓度;当HbF浓度达35.0%～70.0%时,离子交换-HPLC无法检测出结果。因尿毒症患者血液中含氨基甲酰血红蛋白,所以离子交换-HPLC的HbA1c检测结果明显高于酶法;而酶法检测HbA1c不受血液中HbF和氨基甲酰血红蛋白的干扰。结论采用离子交换-HPLC检测含HbF和氨基甲酰血红蛋白的样本中的HbA1c时,结果可能受到干扰;而酶法检测HbA1c时几乎不受样本中HbF和氨基甲酰血红蛋白的干扰。     

Assessment of the benzethonium chloride method for routine determination of protein in cerebrospinal fluid and urine

We have tested the characteristics of the method of Iwata and Nishikaze (Clin Chem 25: 1317, 1979). The linearity, sensitivity, and precision are satisfactory and the reactivity of benzethonium chloride with various proteins (albumin, immunoglobulins) is the same. The method has been compared with Meulemans's technique (Clin Chim Acta 5: 757, 1960), routinely used in our laboratories, by analysis of 82 samples of cerebrospinal fluid (CSF) and 119 samples of urine. Our results for cerebrospinal fluid agree well with those of Iwata and Nishikaze (r = 0.976; y = 0.992x - 0.013), but we find their method unsuitable for urinary protein determination, probably because of interfering compounds in urine.     

氨基糖苷类药物对尿液总蛋白检测的干扰分析

目的探讨美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP7-A2文件对于筛查、量化临床化学尿液样本分析干扰的实际应用,评价氨基糖苷类抗菌药物对尿总蛋白检测的干扰效应。方法遵循CLSI EP7-A2文件,选取尿总蛋白浓度为77、146、538、832 mg/L的新鲜尿液样本,分别加入最大治疗剂量时每升尿液中3倍浓度的硫酸依替米星溶液,采用邻苯三酚红钼法分别进行干扰筛选试验。4种浓度尿液样本中分别加入由硫酸依替米星和一级纯水配制而成的梯度浓度溶液(0、0.15、0.30、0.45、0.60 mg/mL),进行干扰效应试验。通过多项式回归分析量化干扰效应,估计在任何干扰物浓度水平下的干扰度。结果在尿总蛋白浓度分别为77、146、538、832 mg/L的尿液样本中加入0.6 mg/mL硫酸依替米星溶液,其干扰效应点估计值置信区间下限均超过医学决定水平处的允许误差。在尿总蛋白浓度分别为77、146、538、832 mg/L的尿液样本中加入5个干扰浓度(0、0.15、0.30、0.45、0.60 mg/mL)的硫酸依替米星溶液,得出的系列浓度均为线性剂量效应关系,其线性方程分别为Y=202X-1.2、Y=187.3X+4、Y=325.3X+0.6、Y=345.3X+6.4。通过回归方程分析得出尿总蛋白浓度为77、146、538、832 mg/L时,加入0.08、0.15、0.35、0.50 mg/mL硫酸依替米星溶液所引起的正干扰效应均超过临床可接受的允许误差。结论硫酸依替米星对邻苯三酚红钼法测定尿总蛋白存在正干扰;临床实验室需进行分析干扰实验,筛选潜在干扰物质、量化干扰效应、评估潜在风险,并建立对临床有意义的干扰声明。     

1种血红蛋白电泳液标本改良方法的探讨

目的探讨1种血红蛋白电泳液改良制备方法的运用。方法对一批EDTA抗凝全血标本先用加样器吸取血液中沉降的红细胞,滴入到生理盐水中,借助吸液嘴从液面自上至下反复冲打,使红细胞均匀地悬浮在液体当中,上机离心,使红细胞充分沉淀在底部,倾倒出离心后的上清液,以去除血浆及杂质,留余量的红细胞,加蒸馏水或溶血素,溶解红细胞,双手端起试管架利用手腕轻轻前后摇动数次至溶血液澄清透明。结果该文方法与传统方法作比较,将二者结果再与国际地贫协会推荐的方法高效液湘色谱法(HPLC)测得的结果比较,3种初筛方法再与地贫基因确认方法比较结果符合性,从而可以客观地评价试验的可靠性。结论该方法 SOP操作所泳电泳图效果一致、省时省力、节省试剂成本、而且整个制备血红蛋白液的过程中不需接触任何化学试剂,不会对环境有污染,减小了有毒试剂对人体的伤害。     

响应面分析法优化微量清蛋白及糖化血红蛋白检验条件

目的利用响应面分析法对检验尿液中微量清蛋白以及血液中糖化血红蛋白的条件进行优化。方法随机选择60例糖尿病患者分别抽取清晨空腹静脉血3mL,同时留取尿标本6mL,对不同保存温度、保存时间进行单因素实验。根据中心组合Box-Behnken的实验设计原理,在单因素实验的基础上,对样品保存温度、保存时间2个影响显著因素采用双因素双水平的响应面分析法优化检验条件,以保存温度4℃、保存时间3d为中心点进行响应面分析实验。结果尿液以及血液测量的最佳保存温度是4℃,最佳保存时间是1d,在此条件下尿液中微量清蛋白以及血液中糖化血红蛋白的测量值几乎没有影响,十分接近于稳定情况下的理想值。结论利用响应面分析法可以优化微量清蛋白及糖化血红蛋白检验条件。     

晨尿尿蛋白/尿肌酐比值评估狼疮性肾炎患者尿蛋白的效果

目的探讨狼疮性肾炎(LN)患者采用晨尿尿蛋白/尿肌酐比值(UPCR)预测24 h尿蛋白定量的有效性。方法纳入本院风湿免疫科住院治疗的LN患者136例,根据24 h尿蛋白定量、血清肌酐水平分为亚组,将患者UPCR与24 h尿蛋白定量行Pearson相关性分析,采用受试者工作曲线(ROC曲线),根据最佳敏感性和特异性确定UPCR诊断界点。结果晨尿UPCR和24 h尿蛋白定量呈显著正相关(r=0.899,P0.01)。24 h尿蛋白定量为0.5、1.0、2.0、3.0、4.0和5.0 g对应的UPCR诊断界值分别为0.4、1.0、2.04、2.44、3.37和4.65。结论晨尿UPCR与24 h尿蛋白定量具有良好的相关性。     

血清氯化物酶法测定

目的建立血清氯化物的α-淀粉酶及其底物2-氯-4-硝基苯-α-D-麦芽三糖苷(CNP-G3)直接测定方法。方法根据氯离子是α-淀粉酶的激动剂原理建立氯化物测定方法,并做方法学评价。结果测定结果的平均偏差率为0.46%;线性范围50~150mmol/L;平均回收率为100.62%;批内CV<1.24%,日间CV<1.86%,总CV1.45%~2.24%;加入高浓度的维生素C、葡萄糖、蔗糖、果糖、α-淀粉酶、三酰甘油、血红蛋白、胆红素、钙离子、溴离子、碘离子、氟离子、硫氰酸钾、对硝基酚、叠氮钠和硫酸铵均未显示干扰。与硫氰酸汞比色法(MTC)(x±s)比较:MTC法(x):(95.66±14.45)mrnol/L,酶法(Y):(95.62±14.93)mmol/L,t=0.078,P>0.5,Y=1.016X-1.587,r=0.984,n=93,P<0.001;与离子选择电极法(ISE)(x±s)比较:ISE法(X):(99.00±13.11)mmol/L,本法(Y)(98.61±12.70)mmol/L,t=0.140,P>0.5,Y=0.962X+3.375,r=0.993,n=44,P<0.001。溶解的工...