siRNA抑制CDH13表达对膀胱癌5637细胞增殖和侵袭的影响

目的 探讨通过siRNA 抑制CDH13表达对膀胱癌5637细胞增殖和侵袭的影响。方法 以膀胱癌5637细胞为研究对象,用siRNA抑制CDH13表达,用western blot检测干扰后CDH13的表达水平,用MTT法检测细胞增殖,Transwell 法检测细胞侵袭能力。结果 westernblot 检测结果显示干扰组CDH13表达显著减少;干扰组5637细胞增殖明显加快,与空白对照组和阴性对照组相比差异有统计学意义（P﹤0.05）;siRNA抑制CDH13表达后细胞的侵袭能力明显增强,与空白对照组和阴性对照组相比差异有统计学意义（P﹤0.05）。结论 siRNA能够特异性地抑制CDH13在膀胱癌5637细胞中的表达,CDH13表达减少后细胞增殖加快、侵袭能力增强; CDH13表达减少是膀胱癌发生发展的一个重要促进因素。     

膀胱癌组织中CDH13的表达及临床意义

目的 探讨CDH13在膀胱癌组织中的表达和临床意义.方法 应用免疫组织化学染色法检测CDH13在23例正常膀胱黏膜和71例原发性膀胱移行细胞癌组织中的表达,并结合膀胱癌临床病理资料进行统计学分析.结果 膀胱癌组织中CDH13的表达明显低于正常膀胱黏膜,两组相比差异有统计学意义(P＜0.01);在膀胱移行细胞癌组织中CDH13表达减少与患者年龄、性别、肿瘤数目和肿瘤形态无关(P＞0.05),但是与肿瘤的生长、分化不良以及侵袭密切相关(P＜0.05).结论 CDH13表达减少是膀胱癌发生发展的一个重要促进因素,并有可能成为膀胱癌治疗的新靶点.     

雌激素受体α对膀胱癌细胞增殖和转移影响的实验研究

目的 探讨雌激素受体α(ERα)对膀胱癌细胞增殖和侵袭力的影响机制. 方法 建立ERα过表达的膀胱癌细胞T24ERα模型,对照组为膀胱癌细胞株T24V空质粒组.应用四甲基偶氮唑比色法检测细胞生长情况,流式细胞技术检测细胞凋亡情况,Transwell和细胞划痕实验检测膀胱癌细胞的侵袭能力,蛋白质印迹法检测ERα调节膀胱癌细胞增殖和侵袭能力的信号通路. 结果 与空质粒对照组相比,实验组在96 h和144 h细胞抑制率分别为18.85％、37.21％,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).实验组细胞凋亡率为(18.93±1.41)％,对照组为(9.91±1.08)％,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).实验组穿越基质胶的细胞比例为(10.00±2.00)％,显著低于对照组(26.00±3.61)％,差异有统计学意义(P＜0.05).免疫印迹显示与对照组相比,T24ERα细胞内整合素β1、磷酸化FAK、磷酸化Src和Src蛋白表达明显减低. 结论 ERα通过下调整合素β1-FAK/Src信号通路抑制膀胱癌细胞的生长和转移,同时促进膀胱癌细胞的凋亡.     

MTUS2-AS2在膀胱癌组织中的表达及对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)MTUS2-AS2在膀胱癌组织中的表达及其对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响。方法:荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测63例膀胱癌组织和癌旁组织、膀胱癌细胞系(BIU-87、J82、T24、5637)和正常膀胱上皮细胞系SV-HUC-1中的MTUS2-AS2表达。以MTUS2-...     

ABCC3在膀胱癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨膀胱癌组织中ABCC3的表达及临床意义.方法 选取116例病理确诊为膀胱癌的标本作为观察组,26例正常癌旁组织作为对照组.采用免疫组织化学方法和实时荧光定量PCR方法对膀胱癌组织和正常癌旁组织中ABCC3蛋白表达水平和mRNA水平进行检测.根据ABCC3表达情况将膀胱癌患者分为低表达组和高表达组,分析ABCC3表达水平和临床病理特征及预后的关系.结果 膀胱癌组织中ABCC3蛋白或mRNA表达水平较癌旁组织均显著升高(P ＜0.0001).观察组中ABCC3高表达患者66例,低表达患者50例.ABCC3表达水平与肿瘤大小(P =0.019)、病理N分期(P =0.026)和病理T分期(P =0.018)显著相关.Kaplan-Meier生存分析表明,ABCC3高表达组总体生存期显著低于低表达组(P =0.0098).结论 膀胱癌中ABCC3蛋白及mRNA表达明显上调.ABCC3表达水平与临床病理特征和膀胱癌患者的预后密切相关,ABCC3有望成为膀胱癌的生物标志物和潜在的治疗靶点.     

Clusterin在膀胱癌细胞中的表达及作用机制

目的：探讨抗细胞凋亡因子Clusterin在膀胱癌EJ细胞中的表达及抗凋亡机制。方法：应用免疫细胞化学染色检测Clusterin在EJ细胞中的表达,应用3‘末端脱氧核苷酰转移酶介导生物素标记法（TUNEL）检测Clusterin对EJ细胞的抗凋亡作用。结果：Clusterin在EJ细胞中有明显的阳性表达。细胞外加入Clusterin后,EJ细胞胸浆内染色加深,呈颗粒状,为强阳性染色。提示细胞外加入小剂量Clusterin可以明显抑制MMC诱导的EJ细胞凋亡作用。结论：Clusterin在细胞外可以通过细胞膜进入细胞浆内发挥抗凋亡作用。检测Clusterin的表达特性有助于临床评估膀胱癌复发、耐药等生物学特性。     

TRPM7在膀胱癌细胞增殖与凋亡中的调控作用

目的 探讨薄荷醇受体7（transient receptorpotential melastatin 7,TRPM7）在膀胱癌细胞株T24细胞增殖与凋亡中的调控作用及分子机制.方法 采用RT-PCR及Western blot检测T24细胞株中TRPM7 mRNA及蛋白的表达;分别采用通道阻滞剂及基因沉默的方法阻断TRPM7离子通道的功能,MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞周期分布及细胞凋亡率,Western blot检测Cdk4、Cdk6及Cyto C的表达.结果 RT-PCR及Western blot证实T24细胞株中存在TRPM7 mRNA及蛋白的表达;采用基因沉默及通道阻滞剂阻断TRPM7的功能后,T24细胞存活率分别下降了56.48％和54.87％,处于G0/G1期的细胞随阻滞剂浓度增加而显著增加,细胞凋亡率亦随之增加并呈浓度依赖性,与对照组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）.Western blot显示阻断TRPM7后,T24细胞Cdk4、Cdk6的表达减少,而Cyto C的表达增加.结论 TRPM7可促进T24细胞增殖,抑制细胞凋亡.这一过程可能通过调节Cdk4、Cdk6及Cyto C的表达来实现.阻断TRPM7的功能,能够抑制T24细胞增殖,促进细胞凋亡,可能为临床治疗膀胱癌提供新的靶点.     

粘蛋白在膀胱癌诊断中的应用现状

膀胱癌是泌尿系高度恶性的肿瘤,其不易早期诊断,临床患者多为进展期或晚期,故手术切除率低,预后差.膀胱癌的发生、发展、侵袭、转移是一个极其复杂的多环节过程,而细胞粘附分子功能异常在侵袭、转移过程中起着重要作用.本文就近年来相关粘蛋白在膀胱癌中的表达作一综述.     

Cip／Kip家族与膀胱癌

cip／Kip家族是一类细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂，主要对细胞周期起负性调控作用，被认为是一类抑癌基因。其中p21、p27、p57的表达与膀胱癌的发生发展密切相关。它们在膀胱癌中的表达有助于评价膀胱癌的分期和分级，有助于膀胱癌的预后判断。     

慢病毒介导的Clusterin基因沉默抑制膀胱癌EJ细胞增殖及转移

目的探讨慢病毒介导的Clusterin(CLU)基因沉默的RNA干扰效果及其对膀胱癌EJ细胞增殖和转移的影响。方法构建靶向CLU基因的慢病毒干扰载体,用Westernblot检测其对膀胱尿路上皮癌细胞株EJ的干扰效果,用MTT、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验等方法分别检测CLU沉默后膀胱癌EJ细胞在增殖、侵袭和转移等方面的细胞生物学改变。结果靶向CLU基因的慢病毒干扰载体感染膀胱癌EJ细胞后,CLU基因在蛋白水平的表达明显下降。EJ细胞的增殖、侵袭和转移能力均受到抑制。结论 CLU慢病毒干扰载体可有效沉默膀胱癌EJ细胞内源性CLU基因,抑制膀胱癌EJ细胞的增殖、侵袭和转移。     

转染CXCR7重组质粒对膀胱癌5637细胞株增殖和侵袭的影响

目的 探讨转染趋化因子受体CXCR7对膀胱癌细胞株5637增殖和凋亡的影响.方法 构建CXCR7表达质粒转染膀胱癌5637细胞,并通过四甲基偶氮唑蓝盐比色法(MTT)实验和Transwell小室实验与未转染组进行比较.结果 成功构建了CXCR7慢病毒表达载体.与空质粒组相比,转染CXCR7重组质粒能促进膀胱癌5637细胞中CXCR7的表达,通过MTT表明转染重组质粒组加强细胞的增殖能力和Transwell法检测表明穿过的细胞数显著增加,高表达CXCR7能够促进5637细胞的迁移能力.结论 CXCR7的高表达能提高膀胱癌细胞的增殖和侵袭能力,提示CXCR7与膀胱癌的发生、发展有关.     

长链非编码RNA母系表达基因3通过调控PTEN抑制膀胱尿路上皮癌细胞增殖活性的分子研究

目的 探究膀胱尿路上皮癌中长链非编码RNA（lncRNA） 母系表达基因3（MEG3）的表达情况以及MEG3调控膀胱尿路上皮癌细胞增殖活性的分子机制。方法 通过实时荧光定量PCR检测膀胱尿路上皮癌组织及癌旁正常组织中lncRNA MEG3的表达水平;通过Western blot检测过表达lncRNA MEG3后T24细胞内第10号染色体同源丢失性磷酸酶一张力蛋白基因（PTEN）蛋白水平;CCK8试剂盒检测细胞活性。结果 MEG3的RNA水平在膀胱尿路上皮癌组织中表达显著下调（P<0.01）,PTEN的表达水平也明显降低（P<0.01）。T24中过表达MEG3后,PTEN水平上调,细胞活性降低（P<0.01）;而过表达MEG3并给予PTEN抑制剂时细胞活性则上升。结论 过表达lncRNA MEG3可通过上调PTEN抑制人膀胱尿路上皮癌T24细胞的细胞增殖活性,有可能成为临床治疗的潜在靶点。     

5-Aza-dc对膀胱癌ScaBer细胞CDH13基因甲基化状态和蛋白表达以及细胞增殖迁移侵袭的影响

目的 探讨去甲基化药物5-Aza-dc对膀胱癌ScaBer细胞CDH13基因甲基化状态和蛋白表达以及细胞增殖迁移侵袭的影响.方法 以膀胱癌ScaBer细胞为研究对象,分为5-Aza-dc处理组和对照组.应用5-Aza-dc与ScaBer细胞共同孵育后,用MSP检测CDH13基因甲基化状态、western blot检测CDH13的表达水平、MTT法检测细胞增殖、划痕实验检测细胞迁移能力、Transwell法检测细胞侵袭能力.结果 5-Aza-dc与ScaBer细胞共同孵育后CDH13基因甲基化状态得到逆转,与对照组相比CDH13蛋白表达明显增加(P＜ 0.05);实验组细胞增殖能力下降,迁移和侵袭能力减弱,与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 5-Aza-dc可逆转CDH13基因的甲基化状态并使其蛋白表达增加,CDH13表达增加后细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显减弱,CDH13有可能成为膀胱癌治疗的新的靶点.     

细胞外信号调节激酶激酶5在膀胱尿路上皮癌中的表达及与其预后的相关性

目的 检测细胞外信号调节激酶激酶5（MEK5）在膀胱尿路上皮癌（BUC）中的表达情况,并探讨与其预后的相关性。方法 选取2016年1月至2017年12月本院收治的113例膀胱癌患者的临床资料,术中收集癌灶组织113例,癌旁组织70例,记录患者性别、年龄、肿瘤数目、肿瘤大小、病理分级、临床分期、淋巴结转移等信息。采用免疫组织化学法检测组织中MEK5表达情况,比较癌灶组织与癌旁组织MEK5表达的差异,并分析其与BUC患者临床病理特征的关系;采用乘积极限法（Kaplan-Meier）分析BUC患者24个月的预后状况,并采用Log Rank检验进行显著性比较;采用Cox模型分析BUC患者不良预后的影响因素。结果 与癌旁组织相比,癌灶组织的MEK5阳性表达率较高（P<0.05）;BUC组织中MEK5表达与性别、年龄、肿瘤数目、肿瘤大小均无相关性（均P>0.05）,与病理分级、临床分期、淋巴结转移均有相关性（均P<0.05）;与MEK5阴性表达相比,MEK5阳性表达的终点事件发生率较高（39.13% vs. 68.66%,P=0.002）,无进展生存期较低（21.512个月vs. 19.294个月,P=0.001）;MEK5阳性表达、肿瘤直径≥3 cm、高级别病理分级、T2～T4期、伴淋巴结转移均是影响BUC患者预后的独立危险因素（P<0.05）。结论 BUC患者癌灶组织中MEK5阳性表达率较高,与患者临床病理特征密切相关,可为评估患者病情及预后提供临床参考依据。     

硒结合蛋白在膀胱癌中的表达及临床意义

目的 探讨硒结合蛋白-1(Selenium binding protein 1,SBP1)在不同膀胱组织中的表达情况及其临床意义.方法 运用Western blot法检测膀胱癌组织、膀胱黏膜良性病变组织及正常膀胱黏膜组织中的SBP1的表达,并分析其表达差异性.结果 SBP1在膀胱癌组织中的表达明显低于膀胱黏膜良性病变组织及正常膀胱黏膜(P＜0.05),且浅表性膀胱癌组织表达阳性率高于浸润性膀胱癌,无淋巴结转移的膀胱癌组织表达阳性率高于具有淋巴结转移的膀胱癌组织.结论 SBP1在膀胱癌组织中表达下调,膀胱癌的发生、进展可能与SBP1的表达抑制有关.     

PBK/TOPK表达对膀胱癌BIU-87细胞株增殖及迁移的影响

目的 探讨PBK/TOPK在膀胱癌中的表达及其表达对BIU-87细胞株增殖及迁移的影响。方法 采用QRT-PCR及Western blot检测3例配对膀胱癌及癌旁正常组织中PBK/TOPK的表达。随后,对膀胱癌BIU-87细胞株中PBK/TOPK的表达分别干扰及过表达,通过CCK-8实验检测细胞的增殖,Transwell实验检测细胞的迁移能力。结果 结果一致表明PBK/TOPK在膀胱癌中的表达明显高于癌旁正常组织(P<0.05)。干扰PBK/TOPK表达后,BIU-87细胞的增殖及迁移能力下降(P<0.05) ;而PBK/TOPK过表达后,BIU-87细胞的增殖及迁移能力增强(P<0.05) 。结论 PBK/TOPK高表达于膀胱癌,有助于膀胱癌细胞的增殖及迁移。     

CSTB、A-FABP在膀胱癌诊断与预后的价值

目的 分析CSTB、A-FABP在膀胱癌诊断和预后的意义。方法 选取2014年1月至2016年7月在本院进行手术、病理证实的膀胱癌患者45例、良性膀胱病变患者88例,检测膀胱癌样本癌组织、癌旁组织、良性膀胱病变组织中CSTB、A-FABP表达水平。评价CSTB、A-FABP在鉴别诊断膀胱癌的效用。对比膀胱癌进展对象（2年内转移、复发、肿瘤死亡）以及未进展对象组织中CSTB、A-FABP表达水平。结果 癌组织、癌旁组织、良性病变对象组织中CSTB、A-FABP表达水平差异有统计学意义（P<0．05）。CSTB、A-FABP作为诊断标准（任意一项为阳性）,鉴别诊断膀胱癌与良性病变的灵敏度为84．4%、特异度为90．9%、阳性预测值82．6%、阴性预测值92．0%、符合率88．7%。2年内转移、复发、肿瘤死亡的患者共30例,无转移、复发、死亡的患者共15例,膀胱癌进展对象CSTB、A FABP表达量高于未进展对象,差异有统计学意义（P<0．05）。结论 CSTB、A-FABP在膀胱癌诊断、预后预测中均有一定的临床价值。