2型糖尿病患者外周血有核细胞糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)基因表达研究

目的探讨糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）基因在2型糖尿病患者和健康人外周血有核细胞中表达水平的差异性及其对2型糖尿病发生机制的研究价值。方法设计GSK-3β基因引物,实时荧光RT—PCR相对定量法检测40例2型糖尿病患者和40例健康人PBMC内基因表达水平并分析其差异。结果2型糖尿病患者组GSK-3β的mRNA相对表达量为0．94±0．34,健康组为0．92±0．19,两者比较差异无明显统计学意义（P〉o．05）。结论在2型糖尿病患者外周血有核细胞中GSK-3β的基因相对表达量与健康人相比无明显差异。该结果尚待进一步通过联合检测和扩大样本量来确认。     

运动对胰岛素抵抗大鼠脂肪组织中糖原合成酶激酶3β表达的影响

目的 探讨运动对高脂饮食诱导的胰岛素抵抗大鼠脂肪组织中糖原合成酶激酶3B（GSK-3β）表达的影响。方法 将30只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为2组，其中正常对照组10只，给予常规饲料喂养，模型组20只，给予高脂饲料喂养。模型组大鼠经喂养4周后制成胰岛素抵抗模型，将其随机分为2个亚组（即胰岛素抵抗组和运动干预组），2个亚组继续给予高脂饲料喂养，同时运动干预组大鼠每周进行5d游泳运动，持续6周。采用Western—blot方法检测各组大鼠附睾脂肪组织中GSK-3β的表达；定期检测大鼠体重（BW）、空腹血糖（FPG）、血浆胰岛素（FINS）、血甘油三酯（TG）及胆固醇（TC）水平，并计算胰岛素敏感指数（ISI）。结果 各组大鼠经高脂饲料喂养4周后，与正常对照组比较，模型组大鼠BW、FPG、FINS、TC、TG均显著升高（P〈0．05或0．01），ISI则明显降低（P〈0．01），提示胰岛素抵抗模型诱导成功。经6周运动干预后，与胰岛素抵抗组比较，运动干预组大鼠脂肪组织GSK-3β表达显著下降（P〈0．05），与正常对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 运动可下调胰岛素抵抗大鼠脂肪组织GSK-3β的表达，促进葡萄糖的摄取及糖原合成，具有改善胰岛素抵抗功能。     

大肠癌组织中尿激酶型纤溶酶原激活剂和糖原合成酶激酶-3β磷酸化的表达及意义

目的检测大肠癌组织中尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA）和糖原合成酶激酶-3β磷酸化（P-GSK313）的表达并探讨其意义。方法选取2006年1月-2010年12月大肠癌手术切除标本78例,采用微波EliVision免疫组织化学法检测78例大肠癌、30例大肠腺瘤和20例正常大肠黏膜中uPA和P-GSK3β的表达。结果大肠癌组织中uPA和P．GSK3[]阳性表达定位于细胞质,其表达明显高于正常大肠黏膜组织和大肠腺瘤组织（P〈0．05）。UPA和P-GSK3J3阳性表达与组织分化程度、淋巴结转移、临床病理分期有关（P〈0．05）;两者间表达呈正相关（P〈0．05）。结论uPA和P—GSK3[3在大肠癌中呈高表达,且与大肠癌的发生、发展和转移密切相关。     

糖原合酶激酶-3β在阿尔茨海默病发病机制及治疗中作用的研究概况

阿尔茨海默病(AD)是最常见的,与年龄相关的老年性痴呆症,其主要病理组织学标志是老年斑和神经元纤维缠结。糖原合成激酶-3β(GSK-3β)是糖原合成的限速酶,其功能失调会影响神经元的多种生理活动,尤其与老年斑和神经元纤维缠结形成密切相关。笔者总结了GSK-3β在AD发生和发展过程中所发挥的作用及GSK-3β抑制剂治疗AD的研究现状。     

急性心肌梗死介入治疗患者糖原合成酶激酶-3β和心钠素前体肽的水平变化

目的:观察急性心肌梗死经皮冠状动脉内介入治疗患者血糖原合成酶激酶-3β及心钠素前体肽的水平变化。方法:分别应用PCR法、WB法和放射免疫法检测145例急性心肌梗死患者入院时和术后1,3,7 d及对照组的心钠素前体肽1-30,31-67,79-98和糖原合成酶激酶-3β水平。结果:急性心肌梗死组患者糖原合成酶激酶3β与心钠素前体胎水平较对照组明显升高。急性心肌梗死组患者术后糖原合成酶激酶-3βmRNA水平较术前明显升高,心钠素前体肽水平较术前显著升高,术后2周上述指标恢复术前水平以下。结论:急性心肌梗死介入治疗患者血糖原合成酶激酶-3β与心钠素前体肽水平呈先上升后下降的趋势。     

轻度认知功能障碍及老年性痴呆患者外周淋巴细胞糖原合成酶激酶-3的变化

目的探讨轻度认知功能障碍（MCI）及阿尔茨海默病（AD）患者外周淋巴细胞糖原合成酶激酶-3（GSK-3）的变化。 方法用放射性配体结合试验检测正常老年人（对照组）、MCI患者（MCI组）及AD患者（AD组）外周淋巴细胞GSK-3的活性,并用Western blot法检测GSK-3β Ser9位点的磷酸化水平及总GSK-3β表达。 结果AD组及MCI组GSK-3活性分别为（1.32±0.09）和（1.22±0.10）,明显高于对照组的（1.00±0.06）,差异有统计学意义（均P<0.01）;AD组及MCI组GSK-3β Ser9位点的磷酸化水平分别为（0.82±0.07）和（0.87±0.08）,明显低于对照组的（1.01±0.07）,差异有统计学意义（P <0.05或0.01）;AD组及MCI组总GSK-3β表达水平与对照组比较,差异无统计学意义（P&rt;0.05）。 结论MCI及AD患者外周淋巴细胞GSK-3的活性升高,可能对此类疾病的早期诊断有潜在的价值。     

运动对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌中糖原合成酶激酶-3表达的影响

目的 观察运动训练对高脂高糖饮食诱导的胰岛素抵抗模型大鼠骨骼肌中糖原合成酶激酶-3（GSK-3）表达的影响。方法 将30只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组和运动组，每组10只。模型组和运动组均喂以高糖高脂饲料，4周后运动组在继续高糖高脂饲料的基础上加以每周游泳5d，连续6周。实验结束后采用Western blot法检测各组大鼠骨骼肌中GSK-3的含量，定期检测其体重、血甘油三脂和胆固醇、空腹血糖和胰岛素水平，并计算胰岛素敏感指数。结果 模型组大鼠骨骼肌中GSK-3的含量较正常组增高70．20％（P〈0．01），游泳训练6周后大鼠骨骼肌中GSK-3的含量较模型组减少27．24％（P〈0．01），较正常组增高23．83％（P〈0．05）。结论 运动训练可降低胰岛素抵抗大鼠骨骼肌细胞GSK-3蛋白表达水平，从而加强葡萄糖的摄取和利用，改善胰岛素抵抗。     

舒血宁注射液干预急性心肌梗死介入治疗患者血浆糖原合成酶激酶3β水平的变化

目的:观察急性心肌梗死经皮冠脉内介入治疗患者血浆糖原合成酶激酶3β及脂质过氧化反应水平变化及舒血宁注射液的干预作用。方法:选取2004-11/2005-09在解放军总医院行急诊经皮冠脉内介入治疗的急性心肌梗死患者45例。随机数字表法分为舒血宁组23例,男15例,女8例,平均年龄(56.8±10.3)岁。在经皮冠脉内介入治疗基础上加用舒血宁注射液40mL静脉注射,1次/d,共7d。对照组22例,男13例,女9例;平均年龄(55.3±11.5)岁。行经皮冠脉内介入治疗,另取15例健康人血浆为正常对照,平均年龄(52.3±8.3)岁。分别应用ELISA法、分光光度计法、聚合酶链反应法和western blotting法,检测患者入院时及术后第1,3,7天的血浆糖原合成酶激酶3β、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、超氧化物歧化酶、丙二醛水平。结果:45例患者、15名正常人全部进入结果分析。①血浆糖原合成酶激酶3βmRNA及糖原合成酶激酶3β蛋白含量:舒血宁组和对照组患者入院时、术后1d较正常组升高;术后3d和7d舒血宁组低于对照组(3d:0.224±0.023比0.321±0.036,0.401±0.044比0.524±0.054;7d:0.186±0.021比0.245±0.033,0.154±0.025比0.215±0.022,P<0.01)。②血浆超氧化物歧化酶、丙二醛及肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平:舒血宁组和对照组患者入院时、术后1d血浆白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、丙二醛水平均高于正常组;术后3d和7d患者血浆白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、丙二醛水平显著降低,舒血宁组低于对照组,超氧化物歧化酶活性高于对照组。结论:心肌梗死经皮冠脉内介入治疗患者血浆糖原合成酶激酶3βmRNA及蛋白水平呈先上升后下降的趋势,舒血宁注射液能减轻再灌注损伤,具有心肌保护作用,该作用可能与血浆糖原合成酶激酶3βmRNA及蛋白调节有关。     

糖原合成酶激酶-3β介导心肌营养素-1对心肌细胞急性缺氧复氧损伤的作用

目的 研究心肌营养素-1(CT-1)对心肌细胞急性缺氧复氧损伤的作用及信号通路.方法 本研究在江西省分子医学重点实验室完成.用改良的方法培养出生1～3 d的Sprague-Dawley(SD)乳鼠心肌细胞,根据实验要求分为5组:(1)对照组;(2)缺氧复氧组;(3)缺氧复氧组+CT-1组;(4)缺氧复氧组+CT-1+LY294002组(PIK3/Akt阻断剂);(5)缺氧复氧组+CT-1+助溶剂DMSO组.CT-1的质量浓度为10ng/mL,缺氧3 h,复氧3 h.MTS法测定心肌细胞的存活率,四氯四乙基苯丙咪唑基羰化青碘化物(JC1)检测心肌细胞线粒体膜电位(△ψm),二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH CA)检测细胞活性氧(ROS),流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率.心肌细胞磷酸化糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)和PI3K蛋白检测用western blotting.以方差分析及q检验进行统计学分析.结果 缺氧复氧培养后心肌细胞凋亡率及细胞内ROS较对照组明显增加,而心肌细胞存活率显著降低,线粒体膜电位(△ψm)下降[(40.55±4.25)vs.(86.28±7.15),P<0.01];磷酸化的GSK-3β和PI3K蛋白稍有增加.而CT-1处理的心肌细胞,较缺氧复氧组心肌细胞存活率明显上升(87%),心肌细胞凋亡率及细胞内ROS显著减少,△ψm水平增加,磷酸化GSK-3β及PI3K蛋白水平明显增加.CT-1的作用能被PIK3/Akt阻断剂LY294002抑制,而助溶剂组则未观察到类似作用.结论 CT-1能保护缺氧复氧损伤的心肌细胞,且其作用依赖PI3K/GSK-3β信号通路的激活.     

抑制糖原合成酶激酶-3β对小鼠卒中后抑郁的作用及其机制研究

目的建立小鼠卒中后抑郁(PSD)模型,探究糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)抑制剂6-溴代靛玉红-3'-肟(BIO)对PSD的作用。方法将8～10周龄C57BL/6雄性小鼠54只用随机数表法分为正常对照组、束缚组、卒中组、PSD组、PSD+二甲基亚砜(DMSO)组和PSD+BIO组,每组9只。其中束缚组和PSD组通过束缚应激进行抑郁造模,卒中组以及PSD组进行脑卒中造模,PSD+BIO组和PSD+DMSO组在PSD组处理的基础上分别给予BIO和DMSO。通过强迫游泳实验和悬尾实验评估小鼠抑郁样行为的改变,通过实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测脑源性神经营养因子(Bdnf)以及抑炎因子甘露糖受体1(Mrc1)、促炎因子诱导型一氧化氮合酶(Inos)和白细胞介素-1β(IL-1β)等基因在脑内海马、前额叶、杏仁核中的表达水平变化。结果 PSD组相较束缚组、卒中组以及正常对照组出现明显抑郁倾向,并伴有脑内Bdnf表达量降低,说明造模成功,炎症因子IL-1β的表达量明显增高。给予GSK-3β抑制剂BIO后抑郁样行为有所改善,Bdnf脑内表达量升高,脑内IL-1β的表达量也有所降低。结论通过卒中联合束缚应激的方法成功构建PSD小鼠模型,而应用GSK-3β抑制剂BIO后有利于PSD的恢复,这种作用很有可能是通过改善脑内的炎症反应来实现的。     

急性心肌梗死介入治疗患者糖原合成酶激酶-3β和心钠素前体肽的水平变化及舒血宁的干预作用

目的观察急性心肌梗死(AMI)经皮冠状动脉内介入治疗(PCI)患者血液糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)及心钠素前体肽(ProANF)的水平变化及舒血宁注射液的干预作用。方法将45例AMI介入治疗患者随机分为治疗组(23例,在PCI治疗基础上加用舒血宁注射液40mL静脉注射,每天1次,共7d)和对照组(22例,PCI治疗),另取20例健康人血为正常对照。分别应用PCR法、WB法和放射免疫法检测患者入院时及术后1、3、7d的血液GSK-3β、ProANF1-30、ProANF31-67和ProANF79-98水平。结果治疗组和对照组患者入院、术后1dGSK-3β mRNA及蛋白水平较正常值明显升高,ProANF1-30、ProANF31-67和ProANF79-98水平显著升高,术后3d和7d治疗组各项指标均显著低于对照组。结论AMI介入治疗患者血液GSK-3β及ProANF水平呈先上升后下降的趋势,舒血宁注射液具有心肌保护作用,能减轻再灌注损伤。     

糖尿病肾病患者血清糖原合酶激酶-3β水平与尿微量白蛋白的相关性分析

目的分析糖尿病肾病患者血清糖原合酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)水平与尿微量白蛋白的相关性,以探究GSK-3β与糖尿病肾病发生发展的关系。方法选取2016年2月至2019年11月新乡医学院第一附属医院收治的117例2型糖尿病患者,根据24h尿白蛋白排泄量(urinary albumin excretion,UAE),将其分为尿白蛋白正常组(UAE<30mg/24h)46例、微量白蛋白尿组(30mg/24h≤UAE≤300mg/24h)39例及大量白蛋白尿组(UAE>300mg/24h)32例,另将同期在本院体检的42例健康志愿者作为对照组。收集各组的临床资料,采用免疫比浊法测定尿液中白蛋白含量,采用酶联免疫吸附法检测血清中GSK-3β水平。结果与对照组相比,尿白蛋白正常组、微量白蛋白尿组、大量白蛋白尿组血清GSK-3β水平显著升高(P<0.05);与尿白蛋白正常组相比,微量白蛋白尿组、大量白蛋白尿组血清GSK-3β水平显著升高(P<0.05);与微量白蛋白尿组相比,大量白蛋白尿组血清GSK-3β水平显著升高(P<0.05)。在2型糖尿病患者中,血清GSK-3β水平与糖化血红蛋白、总胆固醇、低密度脂蛋白、甘油三酯、血肌酐、血尿酸、UAE、病程呈正相关(P<0.05),与高密度脂蛋白呈负相关(P<0.05)。多元逐步线性回归分析结果显示,糖化血红蛋白、血肌酐、血尿酸、UAE影响GSK-3β水平的独立危险因素(P<0.05)。结论血清GSK-3β水平与2型糖尿病患者尿微量白蛋白呈正相关,并随糖尿病肾病的发生及疾病严重程度的加重而逐渐升高,临床监测血清GSK-3β水平变化对于早期发现糖尿病肾病具有重要意义。     

糖原合酶激酶3β抑制剂对前列腺癌细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的研究糖原合酶激酶3β（glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β）抑制剂抗前列腺癌细胞裸鼠移植瘤生长的效用。方法建立前列腺癌PC-3和LNCaP／Bcl-xl细胞株裸鼠移植瘤模型,观测GSK-3β抑制剂氯化锂（LiCl）及SB216763腹腔内给药后移植瘤重量及体积的变化。同时通过BrdU掺入的免疫组化染色探讨移植瘤的增殖状态,TUNEL染色比较对移植瘤细胞凋亡的影响。结果LiCl及SB216763均可明显抑制移植瘤生长（P〈0．05）。与对照组相比,LiCl给药组细胞BrdU标记明显降低（P〈0．05）,TUNEL染色差异无统计学意义。结论抑制GSK-3β活性可抑制前列腺癌裸鼠移植瘤细胞在体内的生长,其中LiCl可能通过干扰癌细胞DNA复制发挥作用。     

PBMC中磷酸二酯酶6C的表达水平与2型糖尿病及血糖血脂异常的关系

目的 本研究旨在探讨外周血单个核细胞(PBMC)中磷酸二酯酶6(PDE6)相关基因表达水平与2型糖尿病(T2D)和血糖血脂之间的关系。方法 通过GEO数据库获取肥胖、胰岛素抵抗(IR)、空腹血糖异常(IFG)和T2D的PBMC芯片中PDE6相关基因的mRNA表达数据,先采用meta分析筛选出潜在的T2D关键基因,再进行其与血糖血脂指标的相关分析以及在肥胖等人群中的差异分析。结果 本研究一共纳入8个PBMC芯片数据,共计155个研究对象。meta分析显示,与健康对照组相比,T2D组中的PDE6A、PDE6B、PDE6D、PDE6G和PDE6H的表达差异均无统计学意义(P>0.05),仅PDE6C下调表达呈差异有统计学意义(P<0.05),标准化均数差(SMD)和95%CI为-0.72(-1.24,-0.19),P<0.05。此外,FPG、HbA1c、TC和TG均与PDE6C呈负相关关系(Pearson相关系数依次为-0.835、-0.817、-0.759和-0.755,P<0.05)。差异分析显示,无论机体是否存在IR,与非肥胖者相比,肥胖者PDE6C表达仅呈上调...     

miR-155和miR-146a在2型糖尿病患者中的表达及临床意义

糖尿病是临床常见的代谢性疾病,在我国发病率为9.7%,其中2型糖尿病〉90%,病因及发病机制目前仍不完全清楚［1］。microRNA（miRNA）是近年来发现的能够在转录后水平调节基因表达的一类非蛋白编码小RNA 分子。miRNA的主要功能是调节与个体生长、发育、疾病发生过程有关的基因的表达,在包括糖尿病在内的多种疾病的发生和发展中发挥着重要作用［2,3］。本文检测2型糖尿病患者外周血单个核细胞miR-155和miR-146a的表达水平,同时探讨其临床意义。现报道如下。     

小剂量锂剂在糖尿病肾病中作用研究进展

糖尿病肾病是糖尿病患者的微血管并发症,发病率呈上升趋势,可导致终末期肾病,其发病机制尚不明确。糖尿病肾病患者肾组织糖原合成酶激酶3β的表达明显增高,动物实验表明锂剂可负向调控糖原合成酶激酶3β,可能是糖尿病肾病治疗的新方法。本文就小剂量锂剂在糖尿病肾病中肾脏保护作用的动物实验研究进展作一综述。     

瑞格列奈改善2型糖尿病患者胰岛β细胞功能的临床观察

目的：观察瑞格列奈对2型糖尿病患者胰岛β细胞功能的影响。方法：选择58例初诊未经降糖药物治疗的2型糖尿病患者．口服瑞格列奈（诺和龙）0．5～1.0mg／次，3次／d．共16周。测定治疗前后空腹血糖，餐后2h血糖，糖化血红蛋白及空腹血清胰岛素、计算胰岛β细胞功能指数及胰岛素抵抗指数。结果：58例经瑞格列奈治疗的患者其空腹血糖、餐后2h血糖、糖化血红蛋白均降低（P〈0.05）．空腹胰岛素水平亦略有降低．胰岛β细胞功能指数明显增加，胰岛素抵抗指数明显下降（P〈0.05）。结论：瑞格列奈可显著降低血糖．改善2型糖尿病患者胰岛β细胞功能，缓解胰岛素抵抗。     

胰岛素强化治疗对2型糖尿病患者胰岛β细胞功能的影响

<正>研究证明,胰岛β细胞功能受损在糖耐量异常阶段已经存在,以后β细胞的功能逐渐下降,糖耐量异常进一步发展为Ⅱ型糖尿病(T2DM),此时,胰岛β细胞的功能只有原来的50%,其后胰岛β细胞的功能逐渐衰竭至丧失[1]。为探讨胰岛β细胞的功能减低的T2DM患者短期胰岛素强化治疗后,空腹血糖、餐后血糖得到良好控制的同时,能否对胰岛β细胞的功能产生影响,我们对36例胰岛