检测金黄色葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的两种方法比较

目的了解临床分离金葡菌的耐药性及诱导型克林霉素耐药的发生率,评价微量肉汤稀释法检测诱导型克林霉素耐药的临床应用价值。方法 VITEK-2微生物分析系统及K-B法药敏试验对临床分离菌株进行鉴定和药物敏感性测定;红霉素和克林霉素双纸片扩散法和微量肉汤稀释法检测诱导型克林霉素耐药,并比较检测结果。结果受试的23种抗菌药物中,耐药率大于50.0%的药物品种达14种。其中,对青霉素和氨苄西林的耐药率最高,均为97.0%;其次对红霉素和四环素的耐药率分别为71.7%和68.7%;对替考拉宁、万古霉素和利奈唑胺的敏感率最高,均为100%;其次对呋喃妥因、氯霉素和磺胺甲口恶唑-甲氧苄啶的敏感率分别为95.0%、93.9%和88.9%。MRSA和MSSA各为63株(63.6%)和36株(36.4%)。对红霉素耐药和克林霉素敏感的菌株共10株,且D试验均为阳性,占所有菌株的10.1%。所有D试验阳性菌株微量肉汤稀释法也均为阳性,两者符合率为100%。结论临床分离金葡菌多重耐药现象十分严重。D试验和微量肉汤稀释法均可用于检测金葡菌诱导型克林霉素耐药。     

葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的检测

许多临床微生物实验室采用仪器或肉汤微量稀释法进行抗生素敏感试验。这两种方法能检测大多数抗生素耐药机制，但是不断增加的葡萄球菌诱导型克林霉素耐药（MLSBi）用标准的药敏试验方法不能检测。大环内酯类耐药的葡萄球菌由于核糖体靶位被修饰，影响大环内酯类和克林霉素的活性，被称为大环内酯类-林可霉素-链阳霉素B（MLSb）交叉耐药。其编码基因是ermA或ermC。克林霉素结构型耐药可通过标准的药敏试验检测，而MLSb常规方法不能检测。将MLSb和含有msrA基因大环内酯类耐药克林霉素敏感的葡萄球菌区分开来有重要意义。     

葡萄球菌克林霉素耐药状况分析及微稀释法诱导表型检测方法评价

目的评估葡萄球菌克林霉素耐药状况,评价微稀释法检测诱导型克林霉素耐药的临床应用价值。方法葡萄球菌进行菌种鉴定,采用双纸片扩散法和微稀释法检测诱导型克林霉素耐药,分析克林霉素耐药分布,比较评价诱导型耐药检测方法。结果 159株葡萄球菌中,克林霉素的直接耐药率为33.3%(53/159),敏感率为22.60%(35/159);红霉素耐药、克林霉素敏感率为44.6%(71/159),其中克林霉素诱导型耐药率为25.8%(41/159)。甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)克林霉素总耐药率高达94.4%。金黄色葡萄球菌克林霉素总耐药率(包括诱导型耐药菌株)、红霉素耐药、克林霉素敏感中克林霉素诱导型耐药率均明显高于凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)(49/71 vs.45/88,χ2=4.483,P<0.05;21/23 vs.20/48,χ2=13.733,P<0.001),MRSA克林霉素总耐药率高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)(17/18 vs.32/53,χ2=5.786,P<0.05),而甲氧西林耐药凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)与甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌(MSCNS)克林霉素总耐药率比较差异未见统计学意义(P>0.05)。双纸片扩散法和微稀释法检测诱导型克林霉素耐药两种方法符合率100%,一致性检验:Kappa=1.000,P<0.001。结论葡萄球菌克林霉素总耐药率及诱导型耐药率均很高,特别是金黄色葡萄球菌,提示常规微生物检验工作中必须进行克林霉素诱导试验,笔者推荐采用微稀释法参与药敏自动化检测,快速排除克林霉素潜在性耐药,为指导临床正确使用抗生素提供参考,减少临床克林霉素治疗失败。     

葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的检测及分析

近年来葡萄球菌对大环内酯类抗生素的耐药率呈明显上升趋势,且不断出现克林霉素体外敏感而临床治疗无效的病例。我们对临床分离的葡萄球菌进行了D-试验检测,以了解诱导型克林霉素耐药的发生情况。报告如下。     

葡萄球菌对克林霉素诱导型耐药的检测及分析

葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药率呈明显上升趋势,且出现诱导型克林霉素耐药的菌株。我们对临床分离到的葡萄球菌进行了红霉素、克林霉素耐药性的检测,报告如下。1材料和方法1．1菌株试验菌株为本院2003-2005年临床分离到的金黄色葡萄球菌(SA)153株,凝固酶阴性葡萄球菌(CNS) 137株。所有菌株均经Vitek细菌分析仪鉴定确认。纸片法药敏试验的质控菌株为ATCC25923金黄色葡萄球菌。1．2仪器与试剂35℃恒温箱,Vitek细菌分析仪、GPI细菌鉴定卡(生物梅里埃公司),红霉素药敏纸片(15μg)、克林霉素药敏纸片(2μg),M-H琼脂(Oxoid)公司。1．3药敏试验按2004 NCCLS中的D-试验的规程操作。     

葡萄球菌中诱导型克林霉素耐药株的检测及分析

目的用克林霉素诱导耐药实验（D实验）调查湖南沅陵县南方医院葡萄球菌中诱导型克林霉素耐药菌株的发生率,以期为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法应用TDR半自动微生物分析系统及VITEK一2全自动微生物分析系统对临床分离葡萄球菌进行鉴定及药敏分析,按照美国临床实验室标准化委员会（CLSL／NCCLS2011版）标准进行D试验。结果临床收集的104株对红霉素耐药而对克林霉素敏感葡萄球菌标本中有55株（52．88％）产生诱导型耐药,其中在MRSA中为77．78％,高于MssA（61．90％）和CONS（22．85％）。结论临床标本中分离出的对红霉素耐药而对克林霉素敏感的葡萄球菌在进行常规药敏实验的同时,应开展D实验检测葡萄球菌对克林霉素的耐药性,可帮助临床医生正确的选用大环内酯类、林克酰胺类、链阳霉素B类抗生素。     

克林霉素诱导型耐药葡萄球菌的检测与分析

目的了解本地区葡萄球菌诱导型克林霉素的耐药率。方法用K-B琼脂扩散法检测葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药性,用D-试验检测克林霉素诱导型耐药。结果61株耐红霉素的金黄色葡萄球菌对克林霉素耐药40株,敏感21株,其中克林霉素诱导型耐药8株;106株耐红霉素的凝固酶阴性的葡萄球菌(CNS)对克林霉素耐药62株,敏感44株,其中克林霉素诱导型耐药27株。结论对克林霉素敏感的菌株,应加做D-试验以免造成错误判断导致临床治疗失败。     

220株金黄色葡萄球菌中红霉素对克林霉素诱导耐药分析

目的 探讨金黄色葡萄球菌红霉素对克林霉素诱导耐药的发生率,指导临床合理用药。方法 采用K-B纸片方法和NCCLS推荐的D-试验方法分别检测金黄色葡萄球菌红霉素对克林霉素诱导耐药的发生率及耐药情况。结果 220株金黄色葡萄球菌,MRSA占52.73%,MSSA占47.27%,红霉素和克林霉素同时耐药的比例分别为25.00%和35.58%,红霉素和克林霉素同时敏感的比例分别为19.83%和22.11%,erm基因介导诱导型耐药的比例分别为55.17%和25.00%。与MSSA相比,在MRSA中,红霉素诱导型耐药发生率更高(χ2=20.65,P<0.01)。结论 金黄色葡萄球菌诱导克林霉素耐药的发生率处于非常高的水平,临床细菌室应对红霉素耐药而克林霉素敏感或中介的金黄色葡萄球进行诱导耐药试验,以保证克林霉素药物敏感试验的准确性,指导临床医生合理使用抗菌药物。     

金黄色葡萄球菌对红霉素和克林霉素诱导耐药分析

目的探讨金黄色葡萄球菌临床分离株对红霉素和克林霉素的耐药性,检测红霉素对克林霉素诱导耐药的发生率。方法采用美国临床实验室标准化研究所（CLSI）推荐的纸片扩散法,检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）以及金黄色葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药性,并以双纸片法（即D试验）分析红霉素对克林霉素诱导耐药表型。结果金黄色葡萄球菌中MRSA占77.2%。金黄色葡萄球菌对红霉素及克林霉素同时耐药菌株占62.4%,红霉素耐药而克林霉素敏感菌株占21.5%。红霉素耐药而克林霉素敏感的MRSA和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）中D试验阳性分别为72.0%和57.1%。D试验阳性占红霉素耐药而克林霉素敏感金黄色葡萄球菌的68.8%。结论临床微生物实验室应常规开展D试验,检测金黄色葡萄球菌中红霉素对克林霉素的诱导耐药性,以指导临床医师合理选用大环内酯类、林可酰胺类抗菌药物。     

葡萄球菌克林霉素诱导型耐药的研究

目的了解葡萄球菌临床分离株克林霉素诱导型耐药的分布情况,指导临床合理使用抗生素。方法用美国BD公司Phoenix-100型全自动细菌鉴定药敏系统鉴定细菌及做药敏试验,用美国临床实验室标准化委员会标准克林霉素诱导耐药试验检测红霉素对克林霉素的诱导耐药。结果在159株红霉素耐药、克林霉素敏感或中介的葡萄球菌中,克林霉素诱导耐药比例为52.8%,其中金黄色葡萄球菌(SUA)48株,凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)111株,克林霉素诱导耐药率SUA组为75.0%,CNS组为38.7%,差异有统计学意义(P<0.01)。耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)56株,甲氧西林敏感葡萄球菌(MSS)103株。克林霉素诱导耐药率MRS组为87.5%,MSS组为34.0%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论临床分离葡萄球菌克林霉素诱导型耐药比较常见,建议临床微生物室应常规做克林霉素诱导耐药试验。     

凝固酶阴性葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的检测与分析

目的了解本地区凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)对红霉素及克林霉素的耐药性和克林霉素诱导型耐药的发生率,分析红霉素耐药CNS对大环内酯类抗菌药物的耐药机制。方法用双纸片扩散法检测280株CNS对红霉素和克林霉素的耐药性,用D试验检测红霉素对克林霉素的诱导耐药率。结果280株CNS中,红霉素敏感且克林霉素敏感株占15.7%,红霉素耐药且克林霉素耐药株占37.5%,红霉素耐药且克林霉素敏感株占46.8%;红霉素耐药且克林霉素敏感的CNS中,诱导型克林霉素耐药的检出率为57.3%,其中甲氧西林耐药CNS(MRCNS)和甲氧西林敏感CNS(MSCNS)中的检出率分别为56.8%和66.7%,两者差异无统计学意义。结论临床微生物实验室应加强CNS中诱导型克林霉素耐药的检测,以指导临床合理使用抗菌药物。     

凝固酶阴性葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的检测与分析

目的了解本地区凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）对红霉素及克林霉素的耐药性和克林霉素诱导型耐药的发生率,分析红霉素耐药CNS对大环内酯类抗菌药物的耐药机制。方法用双纸片扩散法检测280株CNS对红霉素和克林霉素的耐药性,用D试验检测红霉素对克林霉素的诱导耐药率。结果280株CNS中,红霉素敏感且克林霉素敏感株占15．7％,红霉素耐药且克林霉素耐药株占37．5％,红霉素耐药且克林霉素敏感株占46．8％;红霉素耐药且克林霉素敏感的CNS中,诱导型克林霉素耐药的检出率为57．3％,其中甲氧西林耐药CNS（MRCNS）和甲氧西林敏感CNS（MSCNS）中的检出率分别为56．8％和66．7％,两者差异无统计学意义。结论临床微生物实验室应加强CNS中诱导型克林霉素耐药的检测,以指导临床合理使用抗菌药物。     

可诱导型克林霉素耐药的葡萄球菌检测及耐药性调查

目的了解可诱导型克林霉素耐药的葡萄球菌的耐药状况及发生率。方法用常规的方法对2005年1月至2007年12月临床各种标本进行培养及分离，Vitek-2全自动微生物鉴定仪进行鉴定及药物的敏感性试验检测，诱导型克林霉素耐药采用双纸片法进行检测。结果750株葡萄球菌中可诱导型克林霉素耐药的葡萄球菌有92株，占12．3％，387株金黄色葡萄球菌中有321株为红霉素耐药，其中235株为持续型克林霉素耐药，34株为可诱导型克林霉素耐药，占8．8％（34／387）；363株凝固酶阴性葡萄球菌中有294株为红霉素耐药，其中224株为持续性耐药，58株为可诱导型克林霉素耐药，占16．0％（58／363）。92株可诱导型克林霉素耐药的葡萄球菌对万古霉素、替考拉宁、磷霉素、喹努普汀／达福普汀、褐霉素及利奈唑烷均敏感，对其他抗生素存在不同程度耐药。结论临床微生物实验室应加强可诱导克林霉素耐药的检测，以指导临床合理使用林可霉素类抗生素。     

双纸片法检测葡萄球菌中可诱导的克林霉素耐药

目的了解我院葡萄球菌对常用抗菌药物的耐药性及可诱导克林霉素耐药发生率。方法Kirby-Bauer法检测2004年5—7月我院268株葡萄球菌对14种抗菌药物的耐药性，双纸片法检测可诱导克林霉素耐药。结果替考拉宁和万古霉素抗菌活性最强，136株金黄色葡萄球菌中有124株为红霉素耐药，其中115株为持续性克林霉素耐药，7株为可诱导性克林霉素耐药。132株凝固酶阴性葡萄球菌中有106株为红霉素耐药，其中67株为持续性耐药，16株为可诱导性克林霉素耐药。结论临床微生物实验室须加强可诱导克林霉素耐药的检测，以指导临床合理使用抗生素。     

双纸片法测定葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的实验研究

大环内酯类、林克酰胺类和链阳菌素类B（macrolide,lincosamide and stretogramin B, MLSB）抗生素是广泛应用于治疗葡萄球菌及链球菌等细菌感染的抗菌药物,尤其是克林霉素和链阳菌素类常用来治疗严重的葡萄球菌等细菌感染并作为对青霉素过敏的首选替代药物.现大环内酯类药物已呈较高的耐药率,如能及时、准确地检测和报告诱导型 MLSB 的存在,可排除克林霉素潜在性耐药的威胁.本研究采用双纸片扩散法对金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌进行诱导型耐药的实验研究及临床实用价值探讨.     

金黄色葡萄球菌对克林霉素的诱导性耐药研究和分析

目的了解金黄色葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药情况及对克林霉素诱导性耐药的发生率。方法K-B法检测金黄色葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药性,头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）,D-试验检测克林霉素诱导型耐药。结果240株金黄色葡萄球菌,MRSA占55％,红霉素和克林霉素耐药率分别为74．2％、55．4％,二者同时耐药（结构NMLSB耐药）的菌株占55．4％,240株金黄色葡萄球菌D-试验阳性占所检测菌株的14．2％;45株红霉素耐药而克林霉素敏感金黄色葡萄球菌D-试验结果：阳性率为75．6％。结论金黄色葡萄球菌诱导克林霉素耐药的发生率处于相对较高水平,临床细菌室应重视D-试验以指导临床合理选择抗生素。     

146例金黄色葡萄球菌中红霉素对克林霉素诱导耐药分析

目的了解金黄色葡萄球菌(SA)对红霉素和克林霉素的耐药性,检测红霉素对克林霉素诱导耐药的发生率及诱导耐药基因。方法采用美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐的纸片扩散法,用头孢西丁纸片检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)并以红霉素、克林霉素双纸片法(D试验)分析红霉素对克林霉素诱导耐药表型,用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因。结果 146株SA中MRSA占57.5%。SA对红霉素及克林霉素同时耐药的有82株,占56.2%,红霉素耐药而克林霉素敏感或中介的有34株,其中D试验阳性26株,红霉素诱导克林霉素耐药率76.5%。红霉素耐药而克林霉素敏感或中介的MRSA和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)中D试验阳性分别为80.0%和71.4%。克林霉素耐药菌株主要由erm基因决定,结构型耐药菌株主要耐药基因为ermA,诱导型耐药菌株的主要耐药基因为ermC。结论临床微生物实验室应加强对SA中克林霉素诱导耐药的检测,以指导临床医师合理选用大环内酯类、林可酰胺类抗菌药物。     

耐红霉素葡萄球菌对克林霉素诱导型耐药的检测

目的：了解117医院临床分离的葡萄球菌对克林霉素诱导型耐药的发生率，帮助临床医师正确选择药物。方法：采用K—B纸片琼脂扩散法检测葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药性，按照CLSI／NCCLS推荐的D-试验方法检测克林霉素诱导型耐药。结果：133株受试葡萄球菌对红霉素和克林霉素耐药菌株数分别为66（占49．6％）和43（占33．3％），66株耐红霉素葡萄球菌中有20株（其中金黄色葡萄球菌10株、表皮葡萄球菌9株、腐生葡萄球菌1株）。为克林霉素诱导型耐药株，占红霉素耐药株的30．3％。在红霉素耐药金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌中，克林霉素诱导型耐药的检出率分别达38．5％和25％。对红霉素和克林霉素同时敏感或克林霉素耐药株中，未检到克林霉素诱导型耐药株。结论：对红霉素耐药克林霉素敏感葡萄球菌应进行D试验，报告克林霉素诱导耐药性结果，以便临床正确选择药物。     

葡萄球菌中克林霉素诱导型耐药检测及敏感性试验分析

目的通过调查临床分离的葡萄球菌对克林霉素的耐药性,指导临床合理使用克林霉素。方法对医院2007年1月至2008年7月分离的葡萄球菌进行克林霉素、红霉素药敏试验和克林霉素敏感性试验（D-试验）的数据进行回顾性分析。结果分离到229株金黄色葡萄球菌、136株表皮葡萄球菌、171株溶血葡萄球菌、25株其他葡萄球菌,其对克林霉素的耐药情况分别是：金黄色葡萄球菌71．6％（164／229）、表皮葡萄球菌66．9％（91／229）、溶血葡萄球菌66．1％（113／J71）、其他葡萄球菌60．0％（15／25）。其中D-试验阳性的金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、其他葡萄球菌分别有48株、29株、17株、2株,阳性率分别是67．6％、54．7％、41．5％、40．0％;D-试验阳性甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌分别有29株、19株,阳性率分别是76．3％、59．6％;甲氧西林耐药凝固酶阴性葡萄球菌和甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌分别有37株、11株,阳性率分别是54．4％、35．5％。结论葡萄球菌对克林霉素耐药率高,D-试验阳性率高,检测葡萄球菌时要常规做克林霉素的敏感性试验和D-试验。     

用微量肉汤稀释法检测葡萄球菌诱导克林霉素耐药的状况

目的调查微量肉汤稀释法单个孔内红霉素和克林霉素结合诱导葡萄球菌对克林霉素耐药的能力,为仪器自动化检测提供依据。方法以D-试验结果作为“金标准”。红霉素／克林霉素在微量稀释板孔内有4种组合,浓度分别为4／0．5、6／1、8／1．5、0．5／2μg/mL,35℃24h孵育,孔内有菌生长为诱导耐药阳性。菌株鉴定用API Staph。结果4／0．5、6／1、8／1．5μg/mL3种红霉素／克林霉素联合浓度与“金标准”符合率分别为100．0％、99．0％和100．0％,其中D-试验阳性2株、克林霉素最低抑菌浓度（MIC）为2μg／mL的凝固酶阴性葡萄球菌在联合浓度为6／1μg／mL时孔内无菌生长。当联合浓度为0．5／2μg／mL时,与“金标准”符合率较低。结论4／0．5、6／1、8／1．5μg／mL3种红霉素／克林霉素联合浓度均可用于自动化仪器检测诱导克林霉素耐药。