1例HIV抗体强阳性标本引起的拖带阳性原因分析

目的观察全自动酶免检测系统进行ELISA检测时产生阳性拖带的原因。方法初试阳性标本再次将样管血和血辫血进行双孔复检，阳性标本送省疾病控制中心进行确认。结果使用全自动酶免分析系统时存在强阳性标本拖带现象。分析认为加样、洗板时的处理不当是造成拖带现象的主要原因。     

检测抗-HIV抗体时出现交叉污染分析

目的分析抗-HIV检测中出现的拖带污染现象。方法选用本地区无偿献血者血浆,用ELISA双抗原夹心法检测抗-HIV。结果同列连续4份标本初、复检阳性,双孔复试仍为阳性,重新采血样和血袋样本一起送市疾病预防控制中心确认,结果除D8对应标本阳性外,其余均为阴性。结论全自动酶免分析系统存在样本污染情况,定期用0．1N的HCI和NaOH切底冲洗和浸泡加样器管道,增加洗针液量可以有效避免标本污染。     

加样时标本被污染导致合格血报废一例

在血站实验室．全自动加样系统解决了大量标本加样和数据传输的问题．大大减轻了工作人员的工作强度和减少了人为误差。由于考虑检测成本问题．较多血站选择了永久性加样钢针．但永久性钢针存在的缺陷在使用过程中也渐渐显露出来．特别是存在加样拖带现象．成为工作人员急需解决的问题。我们在工作中就发现一例标本在加样时被HBsAg污染导致合格血液被报废的情况．现报告如下。     

永久性加样针造成标本交叉污染及其解决办法

目前,自动加样器在国内采供血机构的使用越来越普及,使用的自动加样器型号主要有ML ATPLUS、TECAN GENESIS RSP及DYNEX VI-VACE等。各实验室对全自动酶免分析系统的性能评价,主要集中反映为减轻工作人员劳动强度,提高工作效率和实验的灵敏度以及精密度等方面。本实验室在使用TECAN GENESIS RSP200型自动加样器时,发现由于使用永久性的加样针,可造成标本交叉污染,导致出现阳性拖带现象。为解决这一问题,笔和厂家技术人员共同探讨解决方法,取得了比较满意的结果。现以抗-HIV的检测为例报告如下。     

全自动加样仪使用一次性加样针的必要性

近年来,全自动加样仪在血站血液标本检测中被广泛应用,全自动加样仪避免了检验人员手工加样易出现的错加,漏加样本、试剂以及加样精度不够而导致的差错和误差,确保了加样的准确性,大大提高了血站检测工作的效率,得到检验人员充分认可。但日常工作中,我们发现使用永久性钢针会造成拖带现象的发生,拖带现象不但会造成假阳性,更可怕的是造成假阴性,引起输血传播疾病。为彻底解决拖带现象,我们建议全自动加样仪使用一次性加样针。     

梅毒螺旋体和乙肝表面抗原检测中阳性拖带现象与钩状效应的关系

目地探讨采用一步法检测梅毒螺旋体和乙肝表面抗原并发生阳性拖带现象时是否存在钩状效应。方法将出现阳性拖带现象的第一个阳性孔标本及反应板上其对应位置的前一个标本各34例分成I、Ⅱ两组,分别用一步法和二步法进行复检,并将一步法阴性而二步法阳性的标本进行倍比稀释后用一步法检测,直至检出阳性。结果复检后,I组34例标本有5例为阴性,Ⅱ组中有4例因钩状效应呈假阴性,并且这4例标本造成阳性拖带现象。结论采用酶联免疫反应（ELISA）一步法检测时可因钩状效应使强阳性标本漏检,如果用固定加样针加样还可能造成交叉污染使其后的标本出现阳性拖带。     

加样时标本被污染导致合格血报废一例

在血站实验室,全自动加样系统解决了大量标本加样和数据传输的问题,大大减轻了工作人员的工作强度和减少了人为误差.由于考虑检测成本问题,较多血站选择了永久性加样钢针,但永久性钢针存在的缺陷在使用过程中也渐渐显露出来,特别是存在加样拖带现象.成为工作人员急需解决的问题 [1-4].我们在工作中就发现一例标本在加样时被HBsAg污染导致合格血液被报废的情况,现报告如下.     

抗-HCV阳性标本隔批拖带引起S/CO值升高结果分析

<正>随着全自动加样设备在血液检测中的广泛应用,其加样导致的阳性拖带现象已引起高度关注。拖带现象即遇到含高浓度抗原或抗体的标本时,同一加样针会使其后相邻的多个样本出现不同程度的污染。拖带现象发生在同一块酶标板上,国内已有多篇报道[1～4]。我们在进行血液标本加样     

全自动酶联免疫分析仪检测乙肝核心抗体的加样质量控制

目的选择TECAN全自动酶联免疫分析仪检测乙肝核心抗体(HBcAb)的理想检测程序。方法对同一样本设置不同的加样方式、加样顺序,获得相应的数据,比较检测结果以确定理想检测程序。结果 TECAN全自动酶联免疫分析仪检测HBcAb,加样针存在拖带现象,可能造成标本污染,出现假阳性结果,或污染阴性对照,使CO值降低,造成假阴性结果。通过改进加样程序,减少携带概率,避免阴性对照污染,提高检测质量。结论用单独加样方式,先加阴阳对照再加标本的顺序为理想的检测程序。     

国产抗-HCV ELISA试剂在血液筛查中应用的效果评价

目的　对抗 HCV酶免国产试剂检测结果可疑及阳性标本进行确认检测以加强对抗 HCV筛查试剂的质量控制。方法　采用ELISA、重组免疫印迹分析 (recombinantimmunoblotassay ,RIBA)、逆转录 套式聚合酶链反应 (RT PCR)方法对 2 84份标本进行检测。结果　 2 84份标本中确认阳性标本 15 8份 ,确认阴性标本 119份 ,检测结果不确定 (单片段抗体阳性 )的标本 7份。国产试剂Ⅰ或国产试剂Ⅱ检测阳性的标本 2 2 2份 ,2种试剂检测结果差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　当 2种国产试剂对同一标本进行检测时结果不相符合的可以用分片段试剂进行进一步确认 ,以降低血液的报废率。     

国产抗-HCV ELISA试剂在血液筛查中应用的效果评价

目的对抗-HCV酶免国产试剂检测结果可疑及阳性标本进行确认检测以加强对抗-HCV筛查试剂的质量控制.方法采用ELISA、重组免疫印迹分析(recombinant immunoblot assay, RIBA)、逆转录-套式聚合酶链反应(RT-PCR)方法对284份标本进行检测.结果 284份标本中确认阳性标本158份,确认阴性标本119份,检测结果不确定(单片段抗体阳性)的标本7份.国产试剂Ⅰ或国产试剂Ⅱ检测阳性的标本222份,2种试剂检测结果差异有显著性(P<0.05).结论当2种国产试剂对同一标本进行检测时结果不相符合的可以用分片段试剂进行进一步确认,以降低血液的报废率.     

STAR加样器拖带污染情况分析及其解决办法

目前,国内STAR加样采用的针头有2种,一种是可反复使用的不锈钢加样针头(简称钢针),另一种是一次性的塑料针头.不锈钢加样针头可反复使用,节约成本,但可导致加样拖带污染后边的标本,而一次性的塑料针头虽没有拖带污染,但针头由于一次性使用,费用太高,两者各有优缺点,为此,我们利用本站2台STAR加样器,1台用一次性加样针头做初检,另1台用钢针做复检,通过大量标本同时进行常规检测,研究分析检测污染情况及解决拖带污染的方法,现报告如下.     

大连市血液中心血清学检测与核酸检测并行的效果观察

目的通过血清学检测和核酸检测并行的检测模式,全面合理评估血清学检测和核酸检测在降低输血相关感染风险中的相关性。方法对2010年12月2日～2011年7月7日共计30 561份献血者标本进行血清学检测(HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗体、梅毒特异性抗体、谷丙转氨酶及血型),同时进行HBV、HCV、HIV的3联检核酸定性检测以及HBV DNA阳性标本测定血清学乙肝5项,即HBsAg,抗-HBs,抗-HBc(总),HBeAg和抗-HBe。统计各项检测的检出率;将血清学检测HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗体酶免3项检测与核酸检测结果进行对比;分析HBV DNA阳性标本的血清学特点。结果 HBsAg、抗-HCV和HIV抗原/抗体3项检测处于灰区和灰区以下的不合格标本中无核酸检测阳性标本。单纯核酸阳性的检出率为0.07%,经鉴别,HBV DNA阳性17份,无HCVRNA和HIV RNA的检出。HBV DNA阳性标本的乙肝血清学以全阴模式居多。45份核酸酶免均不合格的标本中有29份获得鉴别,鉴别结果与酶免结果符合率为100%。核酸检测阴性而酶免检测双试剂阳性的标本有14份,HBsAg阳性6份,抗-HCV阳性8份,无HIV抗体/抗原阳性标本。结论核酸检测对于HBsAg(-)的HBV感染献血者的检出效果明显。核酸检测与血清学检测结果存在不一致,合理的解释和分析需要必要的献血者追踪和更进一步的实验室确证手段及完善的检测策略。     

样本检测结果假阳性8例

血站标本的全自动检测提高了检测效率和精确性，降低了经输血传播疾病的危险。但笔者在检测过程中发现，由于加样仪钢针的污染、酶免分析仪清洗单元的堵孔以及试剂盒灵敏度的不同，会造成样本检测结果的假阳性，现报告如下。     

全自动加样系统抗-HIV阳性样本拖带现象对试验的影响及其解决方案

RSP全自动加样系统使用固定加样针,当在抗-HIV等酶免试验中分配样本时,分配完阳性样本的加样针会使其后的多个样本出现不同程度的污染,引起假阳性结果,这就是通常说的拖带现象。云南省是我国艾滋病的高发地区,在工作中,我们经常遇到HIV阳性样本拖带现象,导致大量样本待查和试验     

核酸检测在筛查献血者乙型肝炎病毒中的应用

目的探讨核酸检测在献血筛查乙型肝炎病毒中的意义。方法采用2种酶联免疫吸附(ELISA)试剂对2011年1～12月在常州地区采集的无偿献血标本进行HBsAg检测,对酶免阴性、单试剂阳性标本做核酸检测。在核酸筛查阳性标本中,对核酸确认阳性但乙肝"二对半"检测均为阴性及核酸确认阴性的献血者进行追踪随访。结果 2011年共收集血液标本46 216份。核酸检测标本共17 220份,其中HBsAg酶免检测阴性标本17 215份,单试剂阳性标本5份;经核酸筛查HBV阳性26份,确认阳性20份,阳性检出率和确认阳性率分别为15.1/万和11.6/万,HBV ELISA漏检率为8.7/万。对符合条件的13份标本进行追踪检测,4例标本HBsAg阴性转阳性,2例标本HBV DNA追踪检测转阳性而HBsAg始终为阴性。结论血液筛查HBV,应用核酸检测可以提高检出灵敏度、缩短"窗口期",进一步提高血液安全。     

利用ELISA检测梅毒结果分析

目的 探讨酶免法(ELISA)在梅毒检测中的应用.方法 采用酶联免疫吸附试验和明胶颗粒凝集试验.结果 用两种方法检测标本400份,酶免法检测出阳性标本84份;用明胶颗粒凝集实验检测出阳性标本88份.结果 显示,酶免法与明胶颗粒凝集法的符合率为95.45%.结论 检测梅毒的酶免法敏感性、特异性与明胶颗粒凝集法的符合率高,可用于梅毒检测和筛查.     

BEP2000全自动酶免分析仪检测HbsAg结果不一致原因分析

目的分析BEP2000全自动酶免分析仪检测HBsAg结果不一致的原因。方法用两种不同试剂对标本（为本站采集的无偿献血者血液标本）用BEP2000全自动酶免分析仪进行HBsAg的检测，并对呈阳性或OD值在灰区范围内的标本重新离心，再用相同试剂，同一仪器同方法进行复检。结果两种试剂均出现不同程度的假阳性结果。结论含纤维蛋白的血液标本对ELISA法检测HBsAg容易造成假阳性结果。     

加样针污染致不同项目拖带情况分析

目的探讨不同项目、不同值域的拖带规律,为制订拖带克服措施和献血者(血液)保留淘汰策略提供依据。方法各个项目均用RSP100(4针型)全自动加样仪加样,用同样的冲洗程序和冲洗量进行加样针冲洗,用FAME16/20全自动酶免分析仪进行后处理,从第2列开始,以列为序,阳性孔后每间隔3孔有1孔有反应,取原标本和重采标本经手工加样复检阴性即纳入拖带污染统计。将阳性孔按S/CO值进行分组,对不同阈值造成拖带的情况进行评价。结果不同项目的拖带程度和频率有明显差异,抗-HIV项拖带最为严重,抗-HCV项次之,TP和HBsAg最低,拖带率随着S/CO值的升高而升高,当样本测定值在Cut off值的20倍以上时,抗-HIV项可有80%的样本发生拖带,抗-HCV项可有40%的样本发生拖带。结论加样针老化是造成拖带率逐年上升的主要原因,各项目拖带情况不一与样本的阳性程度、试剂灵敏度、加样量有关,拖带的预防应从做好仪器维护保养、加大加样针的洗涤时间和洗涤量、推广使用一次性加样针、献血前进行快速检测筛除阳性程度较高的标本等方面进行考虑。     

加样引起酶标板拖带及标本污染探讨

全自动加样器在国内血站系统的使用，避免了人为因素引起的漏加错加，使检测结果更加准确、可靠。但目前国内全自动加样器多采用永久性金属针连续加样，反复使用，尚无实现一人一针，当遇到高滴度的阳性标本耐，笔者发现可引起拖带污染，甚至样本的污染。