TRFIA全血降钙素原检测试剂盒的性能评价

目的评价时间分辨免疫荧光法(TRFIA)全血降钙素原(PCT)检测试剂盒的分析性能。方法采用AQT90FLEX免疫分析仪,以TRFIA检测全血PCT,评价该方法精密度、检测下限、功能敏感度、线性范围、干扰试验、携带污染率、方法比对和参考区间等性能指标;将其与罗氏cobas 6000电化学发光分析仪PCT检测试剂盒进行比较。结果 TRFIA批内变异系数(CV)小于5.5%,批间CV小于6.0%,检测下限为0.03ng/mL,功能敏感度为0.11ng/mL,线性范围0.072~100.000ng/mL,干扰物对PCT检测无明显影响(干扰小于或等于±10%),携带污染小于0.25ng/mL,参考区间为0.081~0.120ng/mL。其与罗氏cobas 6000电化学发光分析仪PCT检测试剂盒有良好的相关性(R2=0.995 3)。结论采用TRFIA的AQT90FLEX免疫分析仪PCT检测试剂盒敏感度高,精密度好,线性范围宽,与罗氏cobas 6000电化学发光分析仪PCT检测试剂盒有良好的相关性,快速便捷,能更好地适用临床即时检验。     

人血清层粘连蛋白直接化学发光免疫分析法的建立及评价

目的建立检测人血清层粘连蛋白(LN)的直接化学发光免疫分析法(CLIA),并对检测性能进行方法学评价。方法采用包被有抗人LN单抗的微米级磁珠和吖啶酯标记抗人LN单抗分别作为固相试剂和发光试剂,建立并优化定量检测人血清LN水平的CLIA法,评价该方法的线性范围、灵敏度、精密度和特异性等性能指标,并与市场上同方法学的LN检测试剂盒进行相关性比对分析。结果该方法线性范围为5.00~1 000.00ng/mL,检测灵敏度小于5.00ng/mL,血清平均回收率为97.60%,批内变异系数(CV)小于5.00%,批间CV小于8.00%,特异性、稳定性良好,与市场上同方法学的LN检测试剂盒具有较好相关性。结论建立的人血清LN直接化学发光免疫分析法能够满足临床检测需求。     

流式荧光法检测CEA、CYFRA21-1和NSE的应用评价

目的评价流式荧光法(FFA)在癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)检测中的应用价值。方法用FFA检测CEA、CYFRA21-1、NSE的精密度,确定FFA与电化学发光免疫分析法(ECLIA)检测3种标志物结果的相关性,建立两法3种标志物参考区间。对FFA检测CEA、CYFRA21-1和NSE准确性进行评价。结果 FFA检测CEA、CYFRA21-1、NSE批内变异系数(CV)均6%,批间CV均10%,检测CEA、CYFRA21-1和NSE的结果与ECLIA相关性良好(rCEA=0.974、rCYFRA21-1=0.929、rNSE=0.982)。以第95百分位数(P95)为参考区间上限,FFA:P95 CEA=3.62 ng/mL、P95 CYFRA21-1=2.44 ng/mL、P95 NSE=11.23 ng/mL;ECLIA法:P95 CEA=3.83 ng/mL、P95 CYFRA21-1=2.88 ng/mL、P95 NSE=14.85 ng/mL。以ECLIA为参考方法,FFA检测CEA、CYFRA21-1和NSE与该法的总符合率分别为95.1%、92.6%、93.7%。结论 FFA法检测CEA、CYFRA21-1和NSE准确性好,所需样本量少,可三种指标联合检测,检测速度快,成本低,有良好的应用价值。     

磁微粒吖啶酯化学发光法检测AMH的性能评估及成年女性AMH参考区间的建立

目的评价磁微粒吖啶酯化学发光法检测抗苗勒管激素(AMH)的性能,建立成年女性AMH的参考区间。方法依据美国临床试验室标准化协会(CLSI)相关文件对磁微粒吖啶酯化学发光法检测AMH的性能(空白限、检测限、定量限、精密度,线性范围)进行评价。采用线性回归分析和相对偏移评估电化学发光法与磁微粒吖啶酯化学发光法检测AMH的一致性。评估血清样本在不同保存条件下的稳定性及不同样本类型之间的差异。采用百分位数法建立成年女性AMH的参考区间。结果磁微粒吖啶酯化学发光法检测AMH的空白限为0.001 ng/mL、检出限为0.02 ng/mL、定量限为0.08 ng/mL,高、低值样本的重复性分别为1.6%、1.3%,批间精密度分别为2.1%、2.2%,总不精密度分别为3.1%、3.2%,线性范围为0.02~27.22 ng/mL。电化学发光法与磁微粒吖啶酯化学发光法检测AMH的相关性良好(r=0.9753)。血清和血浆的检测结果呈线性关系。血清样本在室温(20~25℃)条件下可稳定3 d,在4、-20、-80℃条件下可稳定7 d。20~24、25~29、30~34、35~39、40~44、45~49和≥50岁女性的AMH参考区间分别为1.20~10.21、1.14~9.17、0.55~8.18、0.25~7.02、0.07~4.59、0.01~2.11、<0.39 ng/mL。结论磁微粒吖啶酯化学发光法检测AMH具有良好的分析性能,建立的AMH参考区间可为临床诊治相关疾病提供依据。     

3种缺血修饰清蛋白试剂盒分析性能的验证试验

目的验证3种缺血修饰清蛋白(IMA)检测试剂盒的主要分析性能。方法在Olympus AU5800全自动生化分析仪上对上海艾康生物技术有限公司、浙江夸克生物科技有限公司和北京九强生物技术有限公司的比色法IMA试剂(试剂A、B、C)进行性能验证,参考美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP6-A、EP15-A、EP7-A文件和《WS/T 420-2013临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证》要求对3种试剂的精密度、线性范围、正确度、抗干扰能力进行评估。结果试剂A、B、C的批内变异系数(CV)分别为0.59%~0.82%,0.27%~0.54%,0.62%~0.69%,批间CV分别为0.98%~1.74%,0.99%~1.01%,0.71%~0.78%,均小于试剂盒声明的不精密度;线性范围分别为11~142U/mL(相关系数r~2=0.993)、10~120U/mL(r~2=0.996)、14~123U/mL(r~2=0.992),试剂A、B、C的线性范围均良好。当干扰物维生素C小于或等于10mg/dL,血红蛋白小于或等于200mg/dL,总胆红素小于或等于40 mg/dL,三酰甘油小于或等于500 mg/dL时,3种IMA试剂检测结果偏差均不超过±10%,对3种试剂无明显干扰。结论 3种IMA检测试剂盒均具有较高的精密度,可满足临床要求,但抗干扰能力存在一定的差异。     

新型血清CYFRA21-1检测电化学生物传感器的研制

目的构建一种用于检测细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)的高灵敏电化学生物传感器。方法合成三维石墨烯@金纳米粒子(3D-G@Au)复合材料,用其修饰玻碳电极,通过壳聚糖、戊二醛与抗CYFRA21-1抗体交联,构建用于检测CYFRA21-1的3D-G@Au的电化学生物传感器。对构建成功的3D-G@Au的电化学生物传感器的电化学性能及检测性能进行初步评价。结果循环伏安图显示裸玻碳电极、3D-G修饰玻碳电极和3D-G@Au修饰玻碳电极的氧化还原峰逐渐升高,提示3D-G@Au电化学生物传感器构建成功。传感器抗原-抗体相互作用的最佳温育时间为60 min,最佳孵育温度为35℃。采用3D-G@Au电化学生物传感器检测CYFRA21-1,线性范围为0.1～300.0 ng/mL,检测限为0.1 ng/mL(信噪比=3),10 mmol/L维生素C、10mmol/L多巴胺和10mmol/L尿酸对检测无干扰,重现性较好[相对标准偏差(RSD)分别为1.08%、3.11%],与化学发光法比较,RSD为1.96%～4.78%。制备好的3D-G@Au电化学生物传感器可在4℃条件下稳定30 d。结论构建的3D-G@Au电化学生物传感器可用于血清CYFRA21-1的检测。     

流式荧光发光法联合检测肺癌患者血清CEA、CYFRA21-1、CA125及NSE的性能评价

目的探讨流式荧光发光法(FFA)对肺癌患者血清中癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、癌胚抗原125(CA125)及神经元特异性烯醇化酶(NSE)检测的应用价值。方法用FFA法检测CEA、CYFRA21-1、CA125及NSE的精密度,确定流式荧光发光法(FFA)与电化学发光免疫分析法(ECLIA)检测4种标志物结果的相关性,验证FFA法的准确度及确定4种肿瘤标志物检测的检出限参考区间。对FFA法检测CEA、CYFRA21-1、CA125及NSE的准确性进行评价。结果 FFA法检测CEA、CYFRA21-1、CA125及NSE批内变异系数(CV)均10%,批间CV均13%,以第95百分位数(P95)为参考区间上限,FFA:P95CEA=5.00ng/mL、P95CYFRA21-1=3.3ng/mL、P95CA125=35U/mL;P95NSE=12.5ng/mL。以ECLIA为参考方法,FFA检测CEA、CYFRA21-1、CA125和NSE与该法的相关性良好((rCEA)=0.98917,(rCA125)=0.99523,(r CYFRA21-1)=0.99978,(rNSE)=0.99059)。结论 FFA法检测CEA、CYFRA21-1、CA125和NSE精密度高,重复性好,相关性高,可4种指标联合检测肺癌,检测速度快,成本低,对肺癌患者后期用药指导及疗效观察均有良好的应用价值。     

电化学发光法检测胃泌素释放肽前体的性能评价及临床应用评估

目的对电化学发光法检测胃泌素释放肽前体(ProGRP)的性能进行评价并初步评估其临床应用价值。方法选取127例肺癌患者[小细胞肺癌(SCLC)48例、非小细胞肺癌(NSCLC)79例]、40例肺部良性疾病患者、60例其他肿瘤患者、20例自身免疫性疾病患者及120名表观健康者(正常对照组),分别采用电化学发光法、化学发光微粒子免疫法和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清ProGRP水平,评价电化学发光法检测ProGRP的精密度、线性、正确度、参考区间以及3种方法检测结果的一致性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析ProGRP单项检测及与癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)联合检测诊断SCLC的性能,比较3种方法检测ProGRP诊断SCLC的效能。结果电化学发光法检测高、低水平ProGRP的批内精密度为0.8%和1.2%,批间精密度为0.9%和2.2%。高、低水平定值样本的回收率分别为99.86%和98.32%,线性范围为33.13~4 796.00 pg/mL,20名表观健康者ProGRP水平均在试剂盒提供的参考区间(0~69.2 pg/mL)内。Pearson相关分析显示电化学发光法、化学发光微粒子免疫法和ELISA的相关性良好,Bland-Altman偏差分析显示3种方法检测结果在低值区域一致性良好,但随着检测结果的增加,偏差逐渐增大。SCLC组ProGRP水平明显高于其他各组(P0.05),而其他组间差异均无统计学意义(P0.05)。ProGRP诊断SCLC的最佳临界值为66.65 pg/mL,敏感性为79.2%,特异性为95.3%;ProGRP联合NSE诊断SCLC的敏感性为83.3%、特异性为96.2%,诊断性能明显优于单项检测(P0.05),与4项指标联合检测的诊断性能比较,差异无统计学意义(P0.05)。电化学发光法、化学发光微粒子免疫法和ELISA检测ProGRP诊断SCLC的效能无差异(P0.05)。结论电化学发光法检测ProGRP的各项性能指标均符合检测要求。ProGRP作为一项辅助诊断SCLC的可靠指标,具有广阔的临床应用前景。     

人血清Kappa、Lambda轻链透射比浊法检测试剂的研制

目的建立人血清Kappa(KAP)、Lambda(LAM)轻链透射比浊分析方法。方法采用全自动日立生化分析仪,用自制透射比浊试剂检测临床血清标本,并对试剂的各项性能指标进行评价。结果KAP试剂盒的测定范围为0.75~12.00mg/mL,灵敏度为ΔA0.08/12.00mg/mL,准确度偏差5%,批内精密度(CV)5%、批间CV10%。样本中三酰甘油小于或等于5g/L、胆红素小于或等于600μmol/L、血红蛋白小于或等于5g/L、类风湿因子小于或等于600U/mL、抗坏血酸小于或等于0.3g/L时对检测结果无明显影响,自制试剂盒与进口罗氏试剂盒相关系数为0.999;LAM试剂盒的测定范围为0.50~8.00mg/mL,灵敏度为ΔA0.08/8.00mg/mL,准确度偏差5%,批内CV5%、批间CV10%。结论 KAP、LAM透射比浊试剂盒各项指标均达到临床检测要求,与罗氏同类试剂测定结果有较好的相关性,在临床上有极大的应用前景,可替代国外同类产品试剂盒。     

血清细胞角蛋白19片段对非小细胞肺癌的诊断价值

目的 探讨细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)对非小细胞肺癌(NSCLC)的临床诊断价值。方法 瑞士罗氏公司的Modular Analytics E170电化学发光分析仪检测1 296例健康个体(健康组),244例肺部良性疾病患者(良性疾病组),90例NSCLC患者(NSCLC组)的CYFRA21-1水平,并对结果进行统计学分析。结果 健康组中,不同性别受试者CYFRA21-1水平比较差异无统计学意义(P>0.05),>60岁组受试者CYFRA21-1水平高于18~40岁组、>40~60岁组。应用良性疾病组95%可信区间建立的界限值(cut-off值)为4.00ng/mL;应用NSCLC组与良性疾病组受试者工作特征曲线(ROC曲线)建立的cut-off值为4.70ng/mL,当cut-off值为4.70ng/mL时,CYFRA21-1检测NSCLC的敏感性为62.1%,特异性为92.6%。结论 CYFRA21-1对NSCLC的临床诊断cut-off值为4.70ng/mL。     

时间分辨荧光免疫法乙型肝炎病毒e抗原定量测定试剂盒的研制与性能评价

目的 对自研时间分辨荧光免疫法(TRFIA)乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)定量测定试剂盒进行性能评价.方法 2株单克隆抗体分别用于固相包被和铕标记,固相双抗体夹心二步分析法检测人血清HBeAg,并对自研试剂盒线性范围、精密度、分析灵敏度、特异度等进行评价,与对照试剂盒平行检测1 020例样本,检验结果采用线性回归分析,一致性采用Kappa检验.结果 自研试剂盒线性范围为0.60～160 NCU/mL,相关系数达0.99,批内和批间变异系数均小于10%,灵敏度达0.05 NCU/mL,检测国家标准物质或自制参考品的效价比为0.90～1.10,检测国家参考品符合国家的质量检定标准,37 ℃恒温箱烘烤6 d后检测性能无明显改变,与同类试剂检测结果线性相关系数达0.95,临床研究试验总符合率达100%,Kappa指数为1.结论 自研试剂盒精密度好、灵敏度高、准确性好、线性范围宽、符合率高,可取代对照试剂盒,值得推广应用.     

人骨钙素检测化学发光法的建立及性能评价

目的 建立一种灵敏的定量检测人骨钙素的方法。方法 采用磁微粒化学发光法定量检测人血清中的骨钙素含量,反应模式为双抗夹心法,生物素化捕获抗体,辣根过氧化物酶标记检测抗体与血清(校准品)及包被有链霉亲合素的磁微粒构成完整的分析系统。并对本方法进行条件优化、性能评估以及相关性分析。结果 建立的人骨钙素磁微粒化学发光法线性范围为0.46～280.25 ng/mL,空白限为0.23 ng/mL,重复性和期间精密度(CV)分别小于8%和10%,回收试验回收率在103%～108%之间;血红蛋白、总胆红素和三酰甘油对骨钙素检测无干扰作用;在120例临床血清样本中,该方法检测骨钙素结果和罗氏电化学发光法结果相关系数(r)为0.992。结论 建立的定量检测人骨钙素的磁微粒化学发光法精密度好、线性范围宽、灵敏度高,达到临床测定的需求。     

流式荧光技术检测血清胃蛋白酶原Ⅰ/Ⅱ方法学性能评价与应用评估

目的对基于流式荧光技术检测血清胃蛋白酶原(PG)Ⅰ/Ⅱ的方法学进行性能评价与临床评估。方法评价PGⅠ/Ⅱ定量测定试剂盒(流式荧光发光法)最低检测限、线性范围、精密度、回收率、抗干扰能力、Hook效应出现浓度、特异性,通过临床血清样本与Abbott公司化学发光法试剂盒进行方法比对,初步建立健康人群PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ比值的参考值范围。结果基于流式荧光技术的PGⅠ、PGⅡ定量检测试剂盒检测PGⅠ、PGⅡ检测低限分别为0.62 ng/mL、0.21 ng/mL。PGⅠ、PGⅡ线性范围上限分别可达到180 ng/mL、100 ng/mL。PGⅠ检测批内变异系数(CV)为2.72%~3.20%,室内CV为5.19%~5.74%。PGⅡ检测批内CV为3.47%~4.57%,室内CV为5.71%~7.43%。PGⅠ、PGⅡ的平均回收率分别为98.5%、91.7%。200 mg/mL三酰甘油、10 mg/mL胆红素、10 mg/mL Hb对各指标检测无显著影响。PGⅠ与PGⅡ分别在16 414ng/mL、7 281 ng/mL以下浓度未出现Hook效应。PGⅠ与PGⅡ检测间不存在彼此交叉的情况。与化学发光法进行方法学比对,存在线性关系。线性方程分别为PGⅠ:Y=0.968 4X+2.049 4,相关系数(r)=0.985 4;PGⅡ:Y=0.9736X+0.656,r=0.982 0。确定的健康人群PGⅠ与PGⅠ/PGⅡ比值第5百分位数分别为71.93 ng/mL和3.57;第1百分位数分别为54.04ng/mL和2.57。结论流式荧光技术可以实现PGⅠ、PGⅡ并行测试,方法学性能良好,能应用于临床检验并可有效提高检测效率。     

LIAISON全自动化学发光仪测定25-羟基维生素D分析性能评估

目的 对LIAISON全自动化学发光仪测定25-羟基维生素D的检测性能进行验证和评估,以确定是否满足临床检测要求.方法 依据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP5-A2文件评价精密度,依据EP17-A文件验证分析灵敏度和功能灵敏度,依据EP6-A文件评估线性范围和临床可报告范围,依据C28-A2文件验证参考区间.结果 精密度实验结果表明批内精密度为5.23%,总精密度为6.57%,在厂家提供的数据(批内精密度5.50%、总精密度12.90%)范围内,可以接受.灵敏度实验证实化学发光法测定25-羟基维生素D的分析灵敏度为2.5 ng/mL,功能灵敏度为3.0 ng/mL,与厂家提供的数据(仅提供功能灵敏度4.0 ng/mL)比较,差异无统计学意义,可以满足临床需要.线性实验结果表明线性范围为6～131 ng/mL,临床可报告范围为3～262 ng/mL,涵盖了健康者和绝大多数患者,可以满足临床需要.结论 LIAISON全自动化学发光仪测定25-羟基维生素D在精密度、分析灵敏度、功能灵敏度、线性范围、临床可报告范围等性能参数上均符合要求,可以应用于临床检测.     

尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白化学发光检测方法的建立及性能评价

目的建立定量检测尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的化学发光法并评价。方法以辣根过氧化物酶标记NGAL单抗、磁微粒包被NGAL单抗,基于化学发光平台,采用双抗体夹心法模式,建立尿液NGAL定量检测方法,并评价空白限、线性范围、精密度、干扰、回收率和方法学等指标。结果空白限为0.1 ng/mL,线性范围为10～1 500 ng/mL,分析内和分析间精密度(CV)均小于8%,血红蛋白100 mg/dL、三酰甘油3 000 mg/dL、胆红素50 mg/dL、抗坏血酸10 mg/dL、肌酐1 000 mg/dL、尿素12.5 g/dL干扰率小于10%;回收率为90.9%～103.1%;第95位百分位数法确定本方法参考区间为0～111.08 ng/mL;与Abbott NGAL检测试剂进行方法学对比,相关系数(r)为0.990 5,总符合率为96.1%。结论本研究建立的尿液NGAL定量检测方法性能良好,具有一定的临床应用价值。     

3种肌钙蛋白Ⅰ试剂在自动生化仪上的分析性能验证

目的对3种应用于自动生化分析仪的胶乳增强免疫比浊法检测血肌钙蛋白I(cTnI)试剂进行分析性能验证,并初步应用于临床。方法参考CLSI EP6-A、EP15-A、EP7-P方案对3种方法的精密度、线性范围、干扰因素(胆红素、血红蛋白、乳糜)进行评估,并与美国贝克曼库尔特公司生产的化学发光免疫分析仪及配套试剂进行比对。参考CLSI C28-A2方案对试剂A、B、C的参考范围进行验证,评估试剂A、B、C与贝克曼ACCESS2化学发光免疫分析仪判定cTnI异常的一致率。结果试剂A、B、C的CV批内、CV总均小于试剂盒声明不精密度,定量测定下限可分别达0.11、0.23、0.07ng/mL,基本满足检测要求,线性范围分别为0.12～26.3ng/mL(r=0.994),0.20～25.3mg/L(r=0.997),0.10～26.9mg/L(r=0.999),线性相关均良好。胆红素、血红蛋白、乳糜浊度分别不超过684μmol/L、3.88g/L及1240FTU时,对试剂A检测结果无显著干扰,试剂B、C后两项数值较试剂A高。乳糜血清标本高速离心后,试剂A、B、C测定cTnI浓度较离心前的平均偏倚分别为-7.31%、1.42%、1.02%。试剂A、B、C与ACCESS2化学发光免疫分析仪检测结果具有较好相关性和一致性。结论应用于自动生化分析仪的3种胶乳增强免疫比浊法测定cTnI试剂盒,具有较高的精密度和灵敏度,与ACCESS2化学发光免疫分析仪结果相关良好;可满足临床测试要求.但抗干扰能力存在差异,部分试剂参考范围也有待进一步验证。     

Axceed 260检测系统精密度和正确度性能验证

目的评价Axceed 260磁微粒全自动化学发光免疫分析系统测定前列腺特异抗原(PSA)、游离前列腺特异性抗原(fPSA)、甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)的精密度和正确度,以验证其厂家声明的检测系统性能。方法利用CLSI EP15-A3《用户对精密度的验证和偏倚的评估-批准指南第3版》对Axceed 260磁微粒全自动化学发光免疫分析仪进行一系列肿瘤标志物检测,分析其系统精密度和偏倚。以高、中、低3个水平浓度伯乐质控371、372、373作为精密度和正确度验证标本,采用Axceed260对4项肿瘤标志物检测项目进行测定,每份标本重复测定5次,持续5d,收集有效数据排除离群值,计算4项肿瘤标志物检测试剂盒的重复性、实验室内不精密度、正确度验证区间,并与厂家提供的指标比较,如果实验室数值低于厂商数值或精密度验证上限,则精密度验证通过,如果测量结果平均值在正确度验证区间内则正确度验证通过。结果在该实验条件下,Axceed 260磁微粒全自动化学发光免疫分析仪的精密度和偏倚与厂商声明的性能一致。测定PSA、fPSA、AFP、CEA 4个项目的371重复性分别为3.15%、4.21%、4.26%、2.20%,实验室内不精密度分别为3.15%、4.45%、4.26%、5.01%;测定372的重复性分别为4.95%、4.62%、5.64%、0.96%,实验室内不精密度分别为4.95%、5.07%、8.68%、1.70%;测定373的重复性分别为2.03%、2.10%、2.85%、0.89%,实验室内不精密度分别为2.29%、3.14%、4.05%、1.77%。与同厂家的对应指标(重复性6.25%,实验室内不精密度12.5%)相比精密度验证通过。正确度验证中,测定371时,PSA、fPSA、AFP、CEA的均值分别为0.83ng/mL、0.41ng/mL、2.48ng/mL、21.40ng/mL,偏倚验证区间分别是0.01~1.59ng/mL、0~0.95ng/mL、0.92~3.66ng/mL、14.42~23.38ng/mL;测定372时,PSA、fPSA、AFP、CEA的均值分别为3.19ng/mL、2.24ng/mL、15.8ng/mL、115.47ng/mL,偏倚验证区间分别是1.62~4.84ng/mL、0.72~3.12ng/mL、11.45~18.35ng/mL、104.51~125.49ng/mL;测定373时,PSA、fPSA、AFP、CEA的均值分别为18.0ng/mL、10.6ng/mL、34.7ng/mL、230.6ng/mL,偏倚验证区间分别是14.8~22.4ng/mL、8.74~14.46ng/mL、25.87~34.93ng/mL、229.61~260.39ng/mL;全部项目的测定结果均值均在验证区间内,通过正确度验证。结论运用CLSI EP15-A3标准指南评价Axceed 260磁微粒全自动化学发光免疫分析仪检测4项肿瘤标志物的精密度及正确度性能,均通过验证,EP15-A3提供了一种简便的精密度和正确度验证方案,可较好的应用于临床肿瘤标志物检测性能的验证中。     

IFCC促甲状腺激素国际溯源和检测一致性系列研究

目的考察迈瑞促甲状腺激素(TSH)测定试剂盒(化学发光免疫分析法)精密度、最低检测限、功能灵敏度、抗类似物干扰、抗内源性干扰和校准一致性等性能。确认各项性能均符合国际临床化学甲状腺功能检测标准化委员会(IFCC)促甲状腺激素一致性研究的基本要求。方法参照相关EP文件等性能评估指导,使用迈瑞全自动化学发光免疫检测系统CL2000i,对TSH试剂盒的最低检测限、功能灵敏度、线性、抗类似物干扰、抗内源性物质干扰、精密度以及校准一致性进行测试。结果最低检测限为0.001 5μIU/mL,功能灵敏度为0.013μIU/mL,在0~98.95μIU/mL范围内梯度稀释,线性相关系数r=0.999。终浓度500mIU/mL的促黄体生成素、500mIU/mL的促卵泡生成素及200 000mIU/mL的人绒毛膜促性腺激素分别加入TSH空白校准品(C_0)中,TSH测定结果均不大于0.2μIU/mL。三酰甘油(1 800mg/dL)、胆红素(10mg/dL)、血红蛋白(500mg/dL)或人血清清蛋白(10g/dL)对TSH测试结果的干扰介于-6.91%~8.60%。使用两个浓度水平的质控和3个浓度水平的血清样本测得TSH总不精密度介于3.24%~5.34%。使用两个浓度水平的质控测得校准一致性介于-6.58%~5.26%。结论迈瑞全自动化学发光免疫检测系统CL2000i测定TSH的基础性能均满足行业标准,具备进行IFCC国际溯源和检测一致性评估的条件。     

白细胞介素-6量子点荧光免疫层析法的建立及性能验证

目的 研发出快速检测白细胞介素(IL)-6的量子点荧光免疫层析法试剂盒.方法 通过量子点荧光材料标记IL-6抗体,研发出一种能快速定量检测IL-6浓度的量子点免疫荧光层析法试剂盒,验证其灵敏度、回收试验、精密度、特异度、稳定性及其与贝克曼化学发光IL-6检测试剂盒的相关性.结果 试剂盒线性范围为10～4000 pg/mL,试剂盒决定系数R2≥0.950;最低检出限为2 pg/mL;在低、中、高浓度范围内的回收率均值分别为95.68％、101.23％、104.45％;批内精密度的变异系数(CV)为2.21％～3.93％,批间精密度的CV为2.42％～5.36％;特异度试验中交叉反应率均小于0.1％.结论 该研究自制的试剂盒灵敏度、准确性、精密度、特异度及稳定性都较好,能够准确、快速地完成临床样品IL-6浓度的定量检测.     

电化学发光免疫分析仪检测TSH的性能验证

目的验证Roche Cobas e411电化学发光免疫分析仪的系统性能。方法以促甲状腺激素(TSH)检测为例,参考美国临床实验室标准化协会(NCCLS)文件,制定了一套实验方法验证方案,对方法的精密度、正确度、线性范围、分析灵敏度、干扰能力、参考范围等方面进行验证。结果批内不精密度(CV)1.44%～1.84%、批间CV2.01%～2.44%;正确度相对偏倚为4.60%～4.73%;分析灵敏度0.017μIU/mL;线性范围0.017～92.04μIU/mL;干扰:血红蛋白小于或等于24.00mg/mL、三酰甘油小于或等于4.2mg/mL、总胆红素小于或等于0.50mg/mL;参考范围0.27～4.21μIU/mL。结论 Roche Cobas e411精密度好、分析灵敏度高、线性范围宽、正确度高,其参考区间大致与厂家提供的一致;各项验证指标均符合厂家提供的要求,验证全部通过。