补肾舒脊颗粒含药血清对人骨髓间充质干细胞Wnt5a、β-catenin mRNA及蛋白表达的影响

目的探讨补肾舒脊颗粒延缓异位骨化的可能作用机制。方法体外培养人骨髓间充质干细胞(BMSCs)分为空白组、模型组、对照组及中药高、中、低剂量组。空白组加入基础培养基(3.8 ml)+5%正常大鼠血清(0.2 ml);模型组加入诱导培养基(4.8 ml)+5%正常大鼠血清(0.2 ml);西药组加入诱导培养基(3.8 ml)+5%洛索洛芬钠含药血清(0.2 ml);中药高、中、低剂量组分别加入诱导培养基(3.8 ml)+5%补肾舒脊颗粒含药血清(0.2 ml)。28天后通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹试验(Western blot)检测Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA及蛋白表达。结果与空白组比较,模型组Wnt5a、β-catenin蛋白及mRNA表达均升高(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,对照组和中药各剂量组Wnt5a、β-catenin蛋白及mRNA表达均降低(P<0.05或P<0.01);与对照组比较,中药高剂量组Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA表达降低,中药中剂量组Wnt5a、β-catenin蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01);与中药低、中剂量组比较,中药高剂量组Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA表达降低(P<0.05或P<0.01)。与中药低剂量组比较,中药中剂量组Wnt5a蛋白表达降低,中药高剂量组β-catenin蛋白表达升高(P<0.05)。结论补肾舒脊颗粒可能通过Wnt/β-catenin信号通路抑制Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA及蛋白的表达,从而起到延缓强直性脊柱炎异位骨化的作用。     

桃红四物汤对光老化小鼠皮肤组织中MMP-12、Smad-2mRNA、Smad-3、TIMP-1 mRNA表达的实验研究

目的:研究桃红四物汤对光老化小鼠皮肤组织中基质金属蛋白酶-12(MMP-12)、Smad-2、Smad-3及金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)mRNA含量的影响。方法:将60只小鼠分为6组,每组10只,空白对照组、模型对照组、阳性对照组(VE组)和中药低、中、高剂量组,对模型对照组、阳性对照组(VE组)和中药低、中、高剂量组制备光老化模型,空白对照组正常饲养。空白对照组和模型对照组给生理盐水,高、中、低剂量组给相应剂量药液,阳性对照组(VE组)给予维生素E滴剂,于造模前30 min灌胃。造模完成后,采用RT-PCR法检测皮肤组织中MMP-12、Smad-2、Smad-3、TIMP-1 mRNA的含量。结果:空白对照组皮肤组织中MMP-12mRNA的表达处于低水平;与空白对照组比较,模型对照组的MMP-12 mRNA表达水平显著上调,Smad-2 mRNA、Smad-3 mRNA和TIMP-1 mRNA表达水平显著下调(P0.01);与模型对照组比较,中药高、中、低剂量组MMP-12 mRNA表达水平均出现不同程度的下调(P0.01),Smad-2 mRNA表达水平显著上调(P0.01),中药中高剂量组Smad-3 mRNA表达水平显著上调(P0.05),而中药低剂量组差异不具有统计学意义,中药各剂量组TIMP-1 mRNA表达水平显著上调,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:桃红四物汤在皮肤光老化过程中具有保护作用。     

益肾填精、补钙壮骨中药复方对骨形成蛋白-4诱导成骨信号转导机制的调控作用

目的研究益肾填精、补钙壮骨中药复方对骨形成蛋白-4（BMP-4）诱导成骨信号转导机制的调控作用。方法将雌性Wistar大鼠随机分为7组：正常组、模型空白组、牡蛎钙补肾中药复方低剂量组、牡蛎钙补肾中药复方中剂量组、牡蛎钙补肾中药复方高剂量组、骨疏康颗粒组、牡蛎碳酸钙咀嚼片组。采用切除大鼠双侧卵巢的方法复制绝经后骨质疏松症模型,应用益肾填精、补钙壮骨中药复方防治12周后进行取材及实验指标检测：用双能X线骨密度仪检测股骨骨密度;用逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）检测大鼠骨组织BMP-4和Smad5、6 mRNA表达。结果与模型空白组比较,中药复方各剂量组股骨骨密度显著升高（P〈0.01）;骨组织BMP-4、Smad5 mRNA表达水平明显升高（P〈0.01）,Smad6 mRNA表达水平明显降低（P〈0.01）。结论益肾填精、补钙壮骨中药复方可明显上调BMP-4和Smad5 mRNA表达,下调Smad6 mRNA表达。     

补肾中药对去势大鼠肾组织中BMP-4的调控作用

目的:研究补肾中药对去势大鼠肾组织中骨形成蛋白-4(BMP-4)的mRNA表达的影响。方法:将雌性大鼠随机分为7组。低剂量组给予补肾中药复方,每天0.7 g/kg;中剂量组给予补肾中药复方,每天2.1 g/kg;高剂量组给予补肾中药复方,每天6.3 g/kg;骨疏康组给予骨疏康颗粒,每天2.1 g/kg;牡蛎碳酸钙组给予牡蛎碳酸钙咀嚼片,每天0.006 3 g/kg。每天灌胃1次,各组给药容积为100g体重/mL。正常组、模型组每天灌同体积的生理盐水。灌胃12周后取材并进行指标检测:用RT-PCR法和Western法检测大鼠肾组织中BMP-4的mRNA和蛋白表达。结果:大鼠肾组织可以在基因、蛋白水平表达BMP-4,绝经后骨质疏松症的发生与肾组织中BMP-4的mRNA表达的变化有关。结论:补肾中药可明显上调肾中BMP-4的蛋白表达,这可能是其防治绝经后骨质疏松症的机制之一。     

骨碎补总黄酮对大鼠胫骨牵张末期BMP-2与Smad-1表达的影响

目的:探讨骨碎补总黄酮干预下BMP-2与Smad-1在大鼠胫骨牵张成骨末期中的表达。方法:40只大鼠建立大鼠胫骨牵张成骨模型,随机分成4组,分别为对照组、中药组、阻遏剂组及阻遏剂加中药组,每组10只。所有大鼠于牵张第20天时给予拍片评估,处死,取标本,HE染色评价成骨质量,用免疫组化分析各组BMP-2与Smad-1的表达。结果:中药组BMP-2与Smad-1的表达最高(P0.05),阻遏剂加中药组明显高于阻遏剂组(P0.05)。结论:BMP-2与Smad-1的表达在牵张成骨期间对成骨有重要促进作用,补肾法可以促进大鼠胫骨牵张末期BMP-2与Smad-1的表达。     

黑逍遥散对阿尔茨海默病大鼠海马基因表达谱的影响

目的观察黑逍遥散对Aβ25-35诱导阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)大鼠模型海马基因表达谱的影响。方法选择雌性SD大鼠,以海马注射Aβ25-35淀粉样蛋白建立AD模型,并设立假手术组、模型组、西药组及中药高、中、低剂量组,每组14只。大鼠造模7天后连续灌胃[3 m L/(kg·d)]28天,假手术组与模型组给予生理盐水,西药组给予石杉碱甲片水溶液[0.02 mg/(kg·d)],中药高、中、低剂量组分别给予黑逍遥散水煎液[17.00、8.50、4.25 g/(kg·d)]。灌胃结束后处死大鼠解剖取得大鼠海马组织,并提取组织RNA,利用大鼠基因表达谱芯片筛选差异表达的基因,而后对获得的部分剂量依赖性变化的差异表达基因进行qRT-PCR验证。结果与假手术组比较,模型组583个基因表达上调,579个下调,wisp1、crebbp、igfbp-1、znf483、zfp37及zic4 mRNA表达升高,casq2、bcl-2 mRNA表达降低(P0.05)。与模型组比较,中药高、中、低剂量组276个基因表达上调,170个下调,其中71个基因剂量依赖性上调表达,70个基因剂量依赖性下调表达,西药组igfbp-1、znf483、zfp37及zic4 mRNA降低,casq2、bcl-2 mRNA升高(P0.01);中药高剂量组wisp1、crebbp、igfbp-1、znf483、zfp37及zic4降低(P0.01),casq2、bcl-2 mRNA升高(P0.01);中药中剂量组crebbp、igfbp-1、znf483、zfp37及zic4降低(P0.01,P0.05),casq2、bcl-2 mRNA升高(P0.01,P0.05);中药低剂量组igfbp-1、znf483、zfp37及zic4 mRNA降低(P0.01)。与中药高剂量组比较,中药中剂量组crebbp、zfp37、zic4 mRNA升高(P0.01),igfbp-1、bcl-2 mRNA降低(P0.01,P0.05);中药低剂量组crebbp、znf483、zfp37 mRNA升高(P0.01,P0.05),igfbp-1、bcl-2、zic4 mRNA降低(P0.01)。与中药中剂量组比较,中药低剂量组casq2、bcl-2、zic4 mRNA降低(P0.01,P0.05)。结论黑逍遥散可通过调控zfp37、znf483、zic4表达影响AD发生;通过抑制wnt信号通路相关基因wisp-1、crebbp、igfbp-1、casq2的表达而影响Aβ代谢和Tau蛋白异常磷酸化。     

补肾温阳化瘀方对子宫内膜异位症模型小鼠BK/BKB1R、PGF2α水平的影响

目的探讨补肾温阳化瘀方干预子宫内膜异位症痛经的作用机制。方法将75只BALB/c雌性小鼠随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组与西药组,每组15只。除假手术组外,其余各组小鼠均采用手术移植法复制子宫内膜异位症痛经模型。造模同时中药高、低剂量组分别每日予补肾温阳化瘀方61.67、15.42g/kg和戊酸雌二醇0.5 mg/kg,西药组每周2次予孕三烯酮0.4 mg/kg和戊酸雌二醇0.5mg/kg。于造模12天腹腔注射缩宫素后观察各组小鼠扭体反应,测量异位灶体积,检测小鼠血清血管舒缓激肽(BK)、前列腺素F2α(PGF2α)含量,免疫组化法和western blotting法检测子宫和异位灶缓激肽B1受体(BKB1R)蛋白表达,RT-PCR法检测子宫和异位灶BKB1R mRNA的表达。结果造模第12天,除假手术组外,其余各组小鼠均成功诱发扭体反应并见异位灶。与模型组比较,中药高剂量组、中药低剂量组与西药组扭体潜伏期均明显延长、扭体次数显著减少、异位灶体积减小(P0.05或P0.01)。与模型组比较,中药高剂量组、中药低剂量组、西药组血清BK、PGF2α含量显著下降,子宫及异位灶BKB1R蛋白及其mRNA表达显著降低(P0.01),且中药高剂量组子宫内膜异位灶BKB1R mRNA明显低于西药组(P0.01)。结论补肾温阳化瘀方能有效防治子宫内膜异位症,其机制可能与降低血清BK及PGF2α含量、抑制BKB1R蛋白及其mRNA的表达有关。     

不同浓度补肾通络方对膝骨关节炎大鼠OPG/RANKL系统mRNA的影响

目的:观察不同浓度补肾通络方对膝骨关节炎大鼠模型膝关节软骨组织OPG/RANKL系统的影响,分析本方对KOA骨破坏/重建的作用机制。方法:采用膝关节腔内注射木瓜蛋白酶溶液法复制KOA模型,36只Wistar大鼠采用随机数字表法分为6组,分别为正常组、模型组、西药组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组,观察不同浓度补肾通络方对KOA大鼠膝关节软骨组织OPG/RANKL系统mRNA表达水平的影响。结果:软骨OPG的mRNA水平是在模型组中含量最低(P0.05),正常组中含量最高(P0.05),中药中剂量组含量接近正常组,而在低剂量组中表达最少,且中剂量组与高剂量组之间差异无统计学意义(P0.05)。RANKL的mRNA表达情况是模型组最高(P0.05),正常组最低(P0.05),不同浓度的中药对其影响不同,但中药高、中、低三个剂量组之间比较,差异无统计学意义(P0.05)。二者的比值变化趋势与OPG相类似,以模型组最小,正常组最大,随着中药浓度的升高,其比值逐渐增加,且中剂量组与高剂量组之间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:补肾通络方能够提高KOA大鼠软骨OPG的mRNA表达水平,降低RANKL水平,具有双向调节OPG/RANKL轴的作用。既可促进成骨,又可抑制或延缓破骨,维持KOA大鼠模型中OB/OC活动的平衡,改善骨质代谢水平,缓解KOA病情进一步进展。     

益气养血方对膝骨关节炎模型大鼠软骨BMP-2、BMP-4表达的影响

目的研究益气养血方对膝骨关节炎模型大鼠软骨BMP-2、BMP-4蛋白及mRNA表达的影响。方法 105只SD雌性大鼠随机分为7个组:空白对照组、假手术组、模型组、阳性对照组(双氯芬酸钠肠溶片混悬液4 mg·kg~(-1)·d~(-1))、益气养血方低(1.89 g·kg~(-1)·d~(-1))、中(3.78 g·kg~(-1)·d~(-1))、高(7.56 g·kg~(-1)·d~(-1))剂量组,每组15只。空白对照组不予任何处理,假手术组切开关节囊后缝合,其余各组均采用改良Hulth法构建大鼠膝骨关节炎模型。用药处理8周后取右膝关节软骨进行HE染色及病理评分,应用免疫组化法检测模型组及益气养血方中剂量组软骨组织中BMP-2、BMP-4蛋白的表达应用PCR法测定BMP-2、BMP-4 mRNA水平。结果与模型组相比,益气养血方各组及阳性药物组对关节软骨病理损伤(P 0.05,P 0.01)有保护作用;益气养血方中、高剂量组病理评分(P 0.05,P 0.01)与软骨组织中BMP-2、BMP-4mRNA的表达水平低于阳性组(P 0.05,P 0.01)。与模型组对比,益气养血方中剂量组BMP-2、BMP-4的蛋白表达降低。结论益气养血方通过抑制BMP-2、BMP-4mRNA和蛋白的表达而对大鼠软骨组织有保护作用。     

益气消癥法中药对雌激素诱导子宫肌瘤模型豚鼠ADM及其基因表达的影响

目的:探讨益气消癥法中药对雌激素诱导子宫肌瘤模型豚鼠子宫组织肾上腺髓质素(ADM)蛋白及其基因表达的影响。方法:将去势豚鼠随机分为模型组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组及西药组(米非司酮),并以正常组作对照。通过去势加皮下注射雌二醇(E2)建立子宫肌瘤模型,通过免疫组化法检测ADM蛋白表达,半定量RT-PCR法检测ADM mRNA的表达。结果:豚鼠子宫肌组织ADM蛋白及其mRNA表达,模型组显著高于其它各组(P0.01);中药高剂量组显著低于中药中剂量、低剂量组及西药组(P0.01),中药高剂量组与正常组比较,差异无显著性意义(P0.05)。结论:益气消癥法中药降调模型豚鼠子宫组织ADM及其mRNA表达,是其治疗子宫肌瘤的作用机制之一。     

六君子合旋覆代赭汤对反流性食管炎大鼠食管Cajal间质细胞及干细胞因子/c-kit通道的影响

目的研究六君子合旋覆代赭汤对反流性食管炎(reflux esophagitis,RE)大鼠食管Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)及干细胞因子(stem cell factor,SCF)/c-kit通道的影响。方法采用幽门半结扎+前胃结扎+大黄灌胃法建立RE脾虚证大鼠模型,造模成功35只Wistar大鼠随机分为模型组、西药组、中药高、中、低剂量组共5组,每组7只,另设正常组10只。西药组予以雷贝拉唑+莫沙比利混悬液灌胃;中药高、中、低剂量3组分别给予六君子合旋覆代赭汤高、中、低剂量灌胃;连续给药14天,1 mL/只,1次/天;正常组以及模型组予以等量生理盐水灌胃。第15天取大鼠下段食管组织,利用透射电镜观察ICC超微结构、 Western blot法检测c-kit及SCF蛋白含量以及RT-PCR法检测c-kit和SCF mRNA相对表达量。结果与模型组比较,各治疗组ICC细胞形态结构改善,与周围细胞之间缝隙连接较紧密。与正常组比较,模型组c-kit、SCF蛋白含量及c-kit mRNA、SCF mRNA相对表达水平显著降低(P0.01);与模型组比较,各治疗组c-kit、SCF蛋白含量均升高(P0.05,P0.01),中药低剂量组c-kit mRNA、SCF mRNA相对表达水平比较,差异无统计学意义(P0.05),其余各治疗组均较模型组显著升高(P0.01);中药高、中剂量两组间c-kit、SCF蛋白含量及c-kit mRNA、SCF mRNA相对表达水平比较,差异无统计学意义(P0.05),但中药高剂量组c-kit、SCF蛋白含量及c-kit mRNA、SCF mRNA相对表达水平明显高于低剂量组(P0.05,P0.01)。结论六君子合旋覆代赭汤通过促进c-kit、SCF mRNA及其蛋白的表达,能够使受损的ICC恢复正常。     

补肾助孕方对LPD模型大鼠卵巢SOD-2、GPX-1、P53表达水平的影响

目的研究补肾助孕方对由米非司酮诱导的(Luteal phase defect,LPD)模型大鼠卵巢SOD-2、GPX-1、P53表达水平的影响,探讨补肾助孕方治疗LPD的机制。方法 50只雌性育龄期SD大鼠按随机数字表法分配到空白组、米非司酮组、阳性药地屈孕酮组、补肾助孕方低剂量及高剂量治疗组5组,每组10只,分组造模给药。分别采用qPCR法与Western Blot法检测各组大鼠卵巢线粒体超氧化物歧化酶(SOD-2)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx-1)及P53的mRNA表达以及蛋白表达水平。结果与空白组相比较,米非司酮组SOD-2、GPX-1蛋白、mRNA表达水平下降(P0.01),P53蛋白、mRNA表达水平明显上升(P0.05);与米非司酮组相比,补肾助孕方低剂量、高剂量治疗组GPX-1、SOD-2蛋白及mRNA表达均显著上升(P0.05);阳性药地屈孕酮组SOD-2、GPX-1蛋白表达较米非司酮组明显升高(P0.05),但SOD-2mRNA、GPX-1mRNA表达与米非司酮组相比未见明显差异;阳性药地屈孕酮组与补肾助孕方低剂量治疗组P53蛋白及mRNA表达较米非司酮组明显下降(P0.05);而补肾助孕方高剂量治疗组P53mRNA表达未见明显差异(P0.05)。结论补肾助孕方可能通过提高LPD模型大鼠卵巢组织抗氧化能力,缓解大鼠卵巢组织凋亡水平,达到治疗LPD的目的。     

基于miR-221介导的细胞自噬探讨补肾温阳化瘀方治疗肾阳虚血瘀型子宫内膜异位症的作用机制

目的：探讨补肾温阳化瘀方治疗大鼠肾阳虚血瘀型子宫内膜异位症（EMs）的疗效及可能的作用机理。方法：将100只实验大鼠随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组和西药组,每组20只,肾阳虚血瘀组EMs造模成功后分别给予补肾温阳化瘀方高、低剂量及孕三烯酮灌胃,假手术组和模型组纯净水灌胃,连续3周。Western blot检测Beclin-1、P62蛋白表达;RT-PCR检测miR-221及Beclin-1、P62 mRNA水平。结果：与假手术组比较,模型组在位内膜的Beclin-1蛋白及mRNA水平显著升高（P<0.01,P<0.05）,P62蛋白及mRNA水平显著下降（P<0.01,P<0.05）,miR-221水平显著升高（P<0.01）。与模型组比较,中药高、低剂量组在位内膜及异位灶的Beclin-1蛋白及mRNA水平显著下降（P<0.05）,P62蛋白及mRNA水平显著升高（P<0.01,P<0.05）,miR-221水平显著下降（P<0.01,P<0.05）。miR-221与Beclin-1 mRNA呈现正相关...     

糖皮质激素诱导肾虚骨质疏松症大鼠骨组织中BMP6/BMP7mRAN及蛋白表达的影响

目的:研究糖皮质激素性骨质疏松症大鼠骨组织中BMP6/BMP7的mRNA和蛋白表达,揭示糖皮质激素骨质疏松症的发病机理,阐述纳米钙补肾中药的调节作用机制。方法:用糖皮质激素注射的方法复制骨质疏松症模型,用纳米钙及具有益肾填精、补钙壮骨作用的补肾中药高、低剂量对实验大鼠治疗8周,以骨疏康颗粒、盖天力钙片作为阳性对照组,正常大鼠和模型空白组为空白对照组。用PCR法、Western印迹法检测骨质疏松症大鼠骨组织中BMP6/BMP7mRNA和蛋白表达。结果:正常大鼠骨组织可以在基因、蛋白水平表达BMP6及BMP7,模空组大鼠骨组织中的BMP6/BMP7 mRNA和蛋白表达水平明显的下降。纳米钙补肾中药高、低剂量组、盖天力组、骨疏康组,用药8周后,与模空组相比较,均可上调骨组织中BMP6/BMP7 mRNA和蛋白的表达水平。结论:纳米钙补肾中药通过调控大鼠骨组织中BMP6/BMP7 mRNA和蛋白表达,抑制骨吸收,促进骨形成,从而对糖皮质激素性骨质疏松症有一定的防治作用。     

补肾活血中药对薄型子宫内膜大鼠子宫内膜干细胞标志物的影响

目的探讨补肾活血中药对薄型子宫内膜大鼠子宫内膜干细胞标志物的影响。方法取处于动情期的雌性大鼠36只随机分为正常对照组、模型组、补佳乐组以及补肾活血中药高、中、低剂量组。除正常对照组外,其余各组大鼠建立肾虚血瘀薄型子宫内膜模型。正常对照组灌服蒸馏水,模型组建立模型后灌服蒸馏水,补佳乐组建立模型后灌服补佳乐0.3 mg/(kg·d),补肾活血中药高、中、低剂量组建立模型后分别灌服补肾活血中药8.64、4.32、2.16 mg/kg。经过3个动情周期后,处死大鼠,取材。免疫组织化学检测活化β-catenin蛋白的表达、RT-PRC检测Oct4基因表达以及Wertern blot法检测ABCG2蛋白的表达。结果 1)活化β-catenin蛋白的表达:模型组较对照组极显著降低(P0.001),给药后各组β-catenin不同程度增加,低剂量组较模型组有显著性差异(P0.05),中剂量组、高剂量组、补佳乐组与模型组有极显著性差异(P0.001)。2)Oct4基因的表达:模型组较对照组极显著降低(P0.001),给药后各组OCT4表达量不同程度增加,其中低剂量、中剂量与模型组无显著性差异,高剂量与模型组有极显著性差异(P0.001),补佳乐组与模型组有显著性差异(P0.05)。3)ABCG2蛋白的表达:模型组较对照组极显著降低(P0.001),给药后各组ABCG2表达量不同程度增加,其中低剂量与模型组无显著性差异,中剂量组与模型组有显著性差异(P0.05),高剂量、补佳乐组与模型组有极显著性差异(P0.001)。结论补肾活血中药可以不同程度的增加β-catenin蛋白、OCT4基因及ABCG2蛋白的表达。     

丁香降气方对反流性食管炎大鼠IL-23/IL-17炎症轴的影响

目的观察丁香降气方对反流性食管炎大鼠IL-23/IL-17炎症轴水平的影响。方法将40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药组及西药组,每组10只。除正常组外均行贲门肌切开术加幽门半结扎术制备反流性食管炎模型,并分别给予相应干预措施。光镜下观察各组大鼠食管组织形态学变化,ELISA法及RT-PCR法检测IL-23 mRNA、IL-17 mRNA、IL-17蛋白的表达。结果与正常组比较,各组食管黏膜均有不同程度炎症表现,但中药组较西药组轻微(P0.05)。与正常组比较,模型组IL-17蛋白、IL-23mRNA及IL-17 mRNA含量明显升高(P0.05)。与模型组比较,中药组IL-17蛋白、IL-17 mRNA、IL-23 mRNA降低(P0.05),西药组IL-23 mRNA降低(P0.05)。与西药组比较,中药组IL-17蛋白含量降低、IL-17 mRNA表达下降(P0.05)。中药组IL-17蛋白含量与正常组比较差异无统计学意义(P0.05)。中药组、西药组IL-23 mRNA表达与正常组比较差异无统计学意义(P0.05);同时中药组与西药组IL-23 mRNA表达比较差异无统计学意义(P0.05)。结论丁香降气方能有效改善反流性食管炎大鼠的食管黏膜炎症,其对IL-23/IL-17炎症轴的调控可能是其作用机制之一。     

祛风解痉方药对哮喘模型小鼠气道高反应性及气道炎症的影响

目的探讨祛风解痉方药对哮喘模型小鼠气道高反应性及气道炎症的影响。方法以卵清蛋白滴鼻的方法建立哮喘小鼠模型,以祛风解痉方药进行干预,比较祛风解痉方药对哮喘模型小鼠肺脏组织病理学及气道高反应的干预效果。结果与空白对照组相比,模型组的Smith评分显著升高(P0.05)。与模型组相比,中药低剂量组的Smith评分无显著性差异(P0.05);而中药中剂量组、中药高剂量组以及阳性药物组的Smith评分显著降低(P0.05)。在同一乙酰胆碱浓度下,与正常对照组相比,模型组的气道阻力显著升高(P0.05);与模型组相比,高剂量中药组和阳性对照组的气道阻力显著降低(P0.05)。与模型组相比,中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组以及阳性对照组的Vγ1 mRNA表达量显著降低(P0.05)、Vγ4 mRNA表达量显著增加(P0.05)。结论祛风解痉方药可改善哮喘小鼠模型气道高反应性,这与其抑制气道炎症及降低γδT细胞的Vγ1 mRNA表达量、增加Vγ4 mRNA表达量相关。     

补肾活血方对大鼠骨折模型的愈合作用及对BMP-2、VEGF及TGF-β1表达的影响

目的观察补肾活血方对大鼠骨折模型的愈合作用及对骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、血管内皮生长因子(VEGF)及转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。方法将60只SPF级雄性SD骨折模型大鼠随机分为模型组、中药组和阳性组,模型组给予0.9%氯化钠注射液灌胃,中药组给予补肾活血方灌胃,阳性组给予伤科接骨片灌胃。分别于2周和4周后比较各组大鼠骨组织HE染色、血液流变学指标、ELISA法检测血清炎症因子表达水平和BMP-2、VEGF及转化生长因子β1表达水平,RT-PCR检测BMP-2、VEGF及转化生长因子β1mRNA表达水平。结果模型组骨组织可见破裂、不完整的软骨、纤维性骨痂、炎性细胞浸润、血管生成增多,少量骨小梁形成,大量成骨细胞和成软骨细胞,干预后中药组和阳性组炎性细胞减少,软骨形态有所恢复,纤维性骨痂、软骨细胞减少。干预后中药组和阳性组血浆黏度、全血黏度高切和红细胞聚集指数明显低于模型组,且第4周,中药组显著低于阳性组(P 0.05)。干预后中药组和阳性组血清IL-6和TNF-α水平明显低于模型组,IL-10水平明显高于模型组,且第4周,中药组显著低于阳性组(P 0.05)。干预后中药组和阳性组血清BMP-2、VEGF和TGF-β1及其骨组织mRNA水平明显高于模型组,中药组明显高于阳性组,第4周中药组和阳性组血清BMP-2和TGF-β1及其骨组织mRNA水平明显低于第2周,血清VEGF及其骨组织mRNA水平明显高于第2周(P 0.05)。结论补肾活血方可促进大鼠骨折模型的愈合,其机制可能与改善血液流变学指标,减轻炎症反应,提高BMP-2、VEGF和TGF-β1水平表达有关。     

温经化瘀止痛法对寒凝血瘀证痛经大鼠Th17、Treg细胞分化及其细胞因子表达的影响

目的观察温经化瘀止痛法对寒凝血瘀证原发性痛经大鼠Th17、Treg细胞分化及其特征性细胞因子(IL-17A、TGF-β)表达的影响,探讨温经化瘀止痛法治疗寒凝血瘀证原发性痛经的免疫机制。方法将50只大鼠随机分为空白组、模型组、西药组、中药高剂量组和中药低剂量组。除空白组外,通过寒冷刺激法联合苯甲酸雌二醇和缩宫素建立寒凝血瘀证原发性痛经大鼠模型。从造模第7天开始,分别给予中药、布洛芬和蒸馏水治疗。检测各组Th17、Treg细胞比例、IL-17A、TGF-β含量及IL-17A、TGF-βmRNA表达水平。结果与空白组比较,模型组Th17细胞比例、IL-17A含量、IL-17A mRNA表达和IL-17A/TGF-β比值均升高(P0.05,P0.01);Treg细胞比例、TGF-β含量和TGF-βmRNA表达降低(P0.01)。与模型组比较,西药组和中药低剂量组Th17细胞比例降低,中药高、低剂量组IL-17A含量降低,中药高剂量组IL-17A mRNA表达降低(P0.05,P0.01);各治疗组Treg细胞比例、TGF-β含量和TGF-βmRNA表达均升高,IL-17A/TGF-β比值降低(P0.01)。中药两组间比较,中药低剂量组调节Th17、Treg细胞比例和降低IL-17A含量优于中药高剂量组(P0.01);中药高剂量组升高TGF-β含量、降低IL-17A mRNA表达优于中药低剂量组(P0.01)。结论温经化瘀止痛法调节Th17、Treg细胞比例及IL-17A、TGF-β表达可能是其治疗寒凝血瘀证PD的免疫机制之一。     

益气补肾实验方对自然流产模型小鼠母-胎界面和脾脏组织IL-2、IL-4表达的研究

目的:观察益气补肾实验方对自然流产模型小鼠母-胎界面和脾脏组织IL-2、IL-4的表达情况。方法:将雌性CBA/J与雄性DBA/2以2∶1合笼交配,建立自然流产模型。将CBA孕鼠随机分为5组:阴性对照组(生理盐水组)、阳性对照组(环孢素组)、中药组(高、中、低剂量中药组)。孕鼠于妊娠第14 d处死,取脾脏和蜕膜、胎盘组织,用ELISA法测母-胎界面及脾脏IL-2、IL-4蛋白含量。结果 (1)在母-胎界面中,与阴性对照组相比,各治疗组IL-2的表达均降低(P0.05),IL-4的表达均升高(P0.05);各治疗组中,高剂量组与环孢素组、中剂量组与低剂量组IL-2、IL-4的表达分别比较均无明显差异(P0.05),高剂量组、环孢素组IL-2的表达较中剂量组、低剂量组低(P0.05),IL-4的表达较中剂量组、低剂量组高(P0.05)。(2)在脾脏组织中,与阴性对照组相比,各治疗组IL-2的表达均降低(P0.05),IL-4的表达均升高(P0.05);各治疗组IL-2的表达比较均无明显差异(P0.05),高剂量组、环孢素组、低剂量组IL-4的表达均无明显差异(P0.05),三者的表达均较中剂量组高(P0.05)。结论:益气补肾实验方可以上调自然流产模型小鼠母-胎界面与脾脏组织IL-4的表达及下调IL-2的表达,有助于妊娠时免疫耐受状态的维持。