胰腺癌精脒免疫组织化学研究

胰腺癌精脒免疫组织化学研究贾兰玲，张宝庚，张丽红，贾心善，王景贵（中国医科大学肿瘤研究所）（中国医科大学病理教研室）（沈阳职工医学院）关键词多胺（精脒）；免疫组化；胰腺瘤１９８７年贾心善［１］首次建立了多胺免疫组织化学方法，进行了肺癌及癌旁组织的多胺...     

辛酸二环己胺急性亚慢性毒性实验研究

本文研究结果表明,辛酸二环己胺属中等毒物质,具有弱蓄积作用,对皮肤及粘膜有一定刺激及腐蚀作用,对肝、肾功能及血液系统无明显损害作用,但能干扰铜、锌微量元素代谢,血清锌含量随染毒剂量增高明显下降,血清铜含量随染毒剂量增高明显增加。     

精脒促进E.coli非特异性转录的研究

本文以ＥｃｏＲＩ酶切的质料ＰＢＲ３２２为模板，在体外转录系统 研究了精脒对Ｅ．ｃｏｌｉＲＮＡ聚合酶非异特转录活性的作用。     

多胺抑制剂CSD阻断实验性肺癌发生过程的研究

经气管灌注致癌物质(甲基胆蒽及二乙基亚硝胺)一段时间后,经食道灌注N—二环已胺磺酰氯(CSD),此抑癌组金地鼠71只没有发生肺癌;而单纯致癌组金地鼠72只中有8例产生肺癌。结果证明CSD有阻断癌变能力,为研制新的抗肿瘤药物提供了实验基础。     

肺癌患者与正常人尿液精脒含量的比较

目的探讨尿液精脒含量作为肺癌患者辅助诊断、预后、疗效评价指标的临床意义。方法采用聚酰胺薄层层析法测定尿液精脒含量。结果肺癌患者尿液游离精脒含量（１１１．２２±１０．８２ｍｇ）较正常人（１７．９３±１．６５ｍｇ）显著升高（Ｐ＜０．０１）。结论尿液精脒含量可作为肺癌患者辅助诊断、预后、疗效评价的指标。     

精脒与儿童体格生长关系的研究

采用丹酰氯荧光标记、聚酰胺薄层分析测定65名3～7岁健康儿童的红细胞精脒含量和体格生长。结果表明：红细胞精脒与健康儿童体重、身高绝对值和不同年龄别身高百分位无显著相关，但与健康儿童的不同年龄别体重百分位和不同身高别体重百分位显著相关，提示红细胞精脒含量的正常水平在健康儿童中与近期营养状况和生长速率有一定的相关作用。     

N—乙酸基—1,6—二己胺诱发癌细胞分开的研究

本试验旨在检测Ｎ－ａｃｅｔｙ１－１，６－ｄｉａｍｉ－ｎｏｈｅｘａｎｅ（ＡＤＡＨ）诱发癌细胞分化的作用，经经ＮＢＴ还原试验检测。结果显示，ＡＤＡＨ可以使７１．６％的ＨＬ－６０人早幼粒白血病细胞分化为成熟阶段的细胞。因此，ＡＤＡＨ可能有抑制人体肿瘤生长的作用。     

精脒对E.coliRNA聚合酶体外转录调节作用的研究

目的：在体外转录系统中研究精脒对Ｅ．ｃｏｌｉＲＮＡ聚合酶的调节作用。阐明精脒调节转录的作用环节。方法：以ＥｃｏＲＩ酶切的质粒ｐＵＲ２２２为模板进行体外转录，转录产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳和放射自显影进行测定。结果：０．５０～１０．００ｍｍｏｌ／Ｌ精脒对Ｅ．ｃｏｌｉＲＮＡ聚合酶体外特异性和非特异性转录活性均有明显的促进作用，两者相关关系非常显著（ｒ＝０．９４４，Ｐ＜０．００１）。结论：精脒在一定浓度范围内对转录有促进作用，精脒调节转录的作用环节可能在ＲＮＡ聚合酶     

2种烷基取代吖啶酮磺酰氯紫外荧光衍生剂的合成及其光谱性质

目的以吖啶酮为原料,合成N-甲基吖啶酮-3-磺酰氯(MASC)和N-乙基吖啶酮-3-磺酰氯(EASC)2种新型紫外荧光衍生剂。方法经N位上烷基化修饰和氯磺化合成MASC和EASC,用紫外、核磁共振、质谱等技术对其进行结构表征,并将MASC、EASC与衍生剂丹磺酰氯(DNS-Cl)的紫外吸收及荧光强度相比较。结果通过紫外、核磁共振、质谱等技术证明了二者即为目标化合物,EASC、MASC与DNS-Cl的摩尔吸光系数之比分别为UVEASC-257 nm/UVDNS-Cl-323 nm=7.57、UVMASC-257 nm/UVDNA-Cl-323 nm=7.75,荧光量子效率之比分别为Φf(EASC)/Φf(DNS-Cl)=4.70、Φf(EASC)/Φf(DNS-Cl)=5.42,与二乙胺衍生的衍生物荧光强度之比分别为If(EASC)/If(DNS-Cl)=97.82、If(MASC)/If(DNS-Cl)=103.38。结论EASC和MASC有较强的紫外吸收与荧光强度,有望用于含氨基类化合物的痕量测定。     

刺五加亚精胺合成酶基因的克隆及内生真菌对其表达的影响

目的 克隆刺五加亚精胺合成酶（spermidine synthase,SPDS）基因,并分析内生真菌对其表达的影响。方法 采用cDNA末端快速扩增（rapid amplification of cDNA ends,RACE）技术克隆刺五加SPDS基因全长cDNA序列。运用生物信息学方法对该基因进行分析。RT-PCR法检测内生真菌菌株P116-1a、P116-1b、P109-4和P312-1对SPDS基因表达的影响。结果 刺五加SPDS基因的cDNA全长为1 541 bp,开放阅读框长1 002 bp,编码333个氨基酸的蛋白,包含SPDS家族的基本结构和标志性序列。RT-PCR结果显示,内生真菌可显著提高刺五加SPDS基因的表达量（P＜0.05）,最大表达量出现在菌株P116-1b回接90 d时,是对照的2.06倍。结论 首次克隆了刺五加SPDS基因的cDNA全长序列,并证实内生真菌可显著提高刺五加SPDS基因的表达,为阐明内生真菌提高刺五加三萜皂苷量的机制及刺五加的抗逆性改良奠定了基础。     

D-氨基半乳糖盐酸盐溶液稳定性研究

目的 本文研究了Ｄ－氨基半乳糖盐酸盐溶液的化学稳定性,为该药物的制备、纯化以及实验动物肝细胞损伤模型用药提供必要的稳定性数据。方法 采用恒温加速实验,忱基半乳糖含量测定,研究不同ｐＨ条件下本品水溶液的稳定性,并与冰箱贮存样品比较。结果 实验表明,氨基半乳糖盐酸盐溶液ｐＨ值为３比较稳定,调ｐＨ值为７的本品水溶液不稳定,易分解,最多在５℃冰箱中保存５天,试样在加热情况下则迅速变色分解。结论 由于氨基己     

高效液相色谱法测定复方萘甲唑啉滴眼液中盐酸萘甲唑啉和盐酸苯海拉明的含量

目的建立HPLC测定复方萘甲唑啉滴眼液中盐酸萘甲唑啉和盐酸苯海拉明含量的检测方法。方法采用反相液相色谱和紫外检测(检测波长λ=230nm),色谱柱为HypersilODS柱(250mm×4. 6mm, 5μm);流动相是0. 05mol/L硫酸铵(硫酸液调pH至5. 0)∶甲醇(V∶V=30∶70)。结果当流动相的流速为0. 5mL/min时,盐酸萘甲唑啉和盐酸苯海拉明的流出时间分别为5. 5min和8. 0min,线性范围分别是3. 240 ~8. 790μg/mL、12. 89 ~27. 62μg/mL;平均回收率分别为99. 40%、99 82%;RSD分别为1. 03%、1. 33% (n=9)。结论本法简便,准确和选择性好,可用于复方萘甲唑啉滴眼液的质量控制。     

HPLC法测定鼻炎糖浆中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量

目的：建立高效液相色谱法测定鼻炎糖浆中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱含量的测定方法。方法采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱（4.6 mm ×250 mm,5μm）,乙腈-0.2％磷酸溶液（含0.2％三乙胺）（2：98）为流动相,流速：1.0 mL ·min-1,检测波长206 nm,柱温：25℃。结果盐酸麻黄碱进样量在0.124~1.86μg范围内与峰面积呈良好线性（r＝0.9999）,平均回收率为99.99％,RSD＝1.24％（n＝6）;盐酸伪麻黄碱进样量在0.1038~1.557μg范围内与峰面积呈良好线性（r＝0.9999）,平均回收率为99.33％,RSD＝1.93％（n＝6）。结论该方法准确、重复性好,可用于鼻炎糖浆中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的测定。     

HPLC法测定盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱中杂质

目的建立盐酸麻黄碱(E)和盐酸伪麻黄碱(PE)中杂质的高效液相色谱HPLC测定方法。方法用RPC18色谱柱,以20mmol/LKH2PO4水溶液-甲醇(96∶4)为流动相,检测波长为210nm,分析时间为20min。结果6种麻黄生物碱均达到基线分离;混合对照品连续进样6次,色谱峰面积RSD均小于1.0%;对照品质量浓度在选定范围内呈现良好的线性关系(R2>0.999);各成分最低检出限分别为:去甲基麻黄碱(NE)为0.05μg/mL,去甲基伪麻黄碱(NPE)为0.04μg/mL,E和PE为0.1μg/mL,甲基麻黄碱(ME)和甲基伪麻黄碱(MPE)为0.2μg/mL;各成分的加样回收率均大于97.1%;6个待测样品均被检测出不同程度的杂质。结论本方法分离度好、精密度高、专属性强、灵敏度高,可用于麻黄生物碱类药物中杂质成分的定性和定量测定。     

毛细管电泳法同时测定苯麻滴鼻液中2种组分含量

目的建立一种快速测定苯麻滴鼻剂中两种组分含量的方法。方法采用毛细管区带电泳分离模式,运行缓冲液为20 mmol.L-1磷酸缓冲液（pH 5.0）,检测波长204 nm,内标物为甲氧苄啶。结果盐酸苯海拉明在2.5-62.5μg.mL-1,盐酸麻黄碱在10-250μg.mL-1范围内线性关系良好（r=0.9999）,在75%-125%处方标示量范围内,回收率符合要求。结论毛细管电泳法可用于同时测定苯麻滴鼻液中盐酸苯海拉明和盐酸麻黄碱含量,方法准确可靠,操作简便易行。     

RP-HPLC法同时测定固肠止泻丸中盐酸小檗碱和盐酸巴马汀的含量

目的:建立固肠止泻丸中盐酸小檗碱和盐酸巴马汀的含量测定方法。方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱:Waters Symmetry C18柱(3.9mm×150mm,5μm);流动相:磷酸盐缓冲液[0.05mol/L磷酸二氢钾-0.05mol/L庚烷磺酸钠(1∶1),含0.2%三乙胺,并用磷酸调节pH值至3.0]-乙腈(70∶30);流速:1.0ml/min;检测波长:265nm。结果:盐酸小檗碱和盐酸巴马汀的线性范围分别为0.017020～0.136200mg/ml(r=0.9999)和0.008464～0.067710mg/ml(r=0.9998),平均回收率(n=9)分别为98.24%和98.31%。结论:本方法简便、灵敏、准确,可用于完善固肠止泻丸的质量控制。     

HPLC测定复方盐酸去氧肾上腺素喷鼻液中盐酸去氧肾上腺素、地塞米松磷酸钠和盐酸林可霉素的含量

 目的 建立一种同时测定复方盐酸去氧肾上腺素喷鼻液中盐酸去氧肾上腺素、地塞米松磷酸钠和盐酸林可霉素含量的HPLC方法。方法 采用Agilent C18（150 mm×4.6 mm,5 μm） 色谱柱,流动相：0.02 mol/L磷酸氢二铵：乙腈=75：25（V/V）;柱温30℃,流速1 mL/min,检测波长240 nm,外标法计算含量。结果 在该色谱条件下,盐酸去氧肾上腺素、地塞米松磷酸钠和盐酸林可霉素线性良好（r>0.999,n=5）,加样回收率为97%~103%（n=3）,RSD<2.0%（n=3）。8 h内可获得稳定的测量结果,测得样品含量合格,为标示量的97%~103%。结论 经方法学实验验证,该方法简便、快速,结果准确、可靠、重现性好。     

盐酸吡硫醇药理作用与临床应用

论述了盐酸吡硫醇对中枢神经递质和功能,能量代谢、脑血流和免疫功能的影响,并介绍了该药在治疗器质性精神障碍和痴呆、脑卒中、颅脑外伤、风湿性关节炎等临床方面的应用效果.     

HPLC法测定丁丙诺啡纳洛酮舌下片中两种主药的量

目的：建立梯度洗脱HPLC法同时测定丁丙诺啡纳洛酮舌下片中两种主药的量。方法：采用梯度洗脱,用Diamonsil C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱;以甲醇-乙腈-0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液（48∶32∶20）（用磷酸调pH 4.0）为流动相A,甲醇-乙腈-0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液（6∶4∶90）（用磷酸调pH 4.0）为流动相B;体积流量1.0 mL/min;检测波长为230 nm。结果：纳洛酮在5.0～30.0 μg/mL线性关系良好（r = 0.999 8）,回收率为99.68%（RSD＝0.92%）;丁丙诺啡在20.0～120.0 μg/mL线性关系良好（r = 0.999 9）,回收率为99.74%（RSD＝0.53%）。结论：采用梯度洗脱HPLC法同时测定丁丙诺啡纳洛酮舌下片中两主药的量,方法简便、灵敏、专属,重现性好,该方法可以监控药品质量。