反相高效液相色谱法测定猪血浆中异丙酚浓度

异丙酚是一种新型的静脉麻醉药．因其有起效快、时效短、苏醒迅速、副作用少等特点。欧、美国家20世纪80年代已开始应用。近年我国临床也越来越广泛应用于静脉麻醉，利用大动物实验了解异丙酚在大动物体内的药时变化规律。不同合并用药之间代谢的相互影响，以及不同临床治疗干预对药物浓度和药动学的影响。很多实验目前在人体还未曾被证明是安全的，因而大动物实验对于临床上更好地应用异丙酚提供理论依据有着重要的意义。目前国内外测定血浆中异丙酚的药物浓度采用的方法有气相色谱、液相色谱、     

pH值对异丙酚甲醇溶液及人血浆荧光性质的影响

目的：考察异丙酚在不同pH值下的荧光性质,寻找检测异丙酚的最佳pH值。方法：用缓冲溶液将异丙酚甲醇溶液及人血浆pH调至1～13（共20余个不同的pH）,用荧光分光光度法（发射波长λex=279nm,激发波长λem=300nm）测定在不同pH下的荧光强度。结果：pH条件不同,对异丙酚甲醇溶液及人血浆的荧光性质均有影响,选择偏碱性条件检测异丙酚较好。结论：为使药物的检测更准确、灵敏,需在检测过程中调节样品溶液的pH至最佳范围。     

改良微量荧光分光光谱法测定卵巢癌细胞内阿 …

目的：测量卵巢癌ＳＫＯＶ３亲本和耐药细胞内阿霉素聚集量。方法：采用一种简单敏感的改良荧光分光光谱法。结果：虽然耐药细胞株ＳＫＯＶ３／ＡＤＭ内阿霉素聚集量经维拉帕米作用后能显著增加，但仍低于亲本细胞ＳＫＯＶ３。结论本法快速、方便 ，在肿瘤细胞多药耐药机理及逆转剂研究中具有实用价值。     

高效液相色谱法测定人血浆中异丙酚的浓度

1材料和方法 1．1仪器 Waters高效液相色谱系统（2695型输液泵系统，2487紫外检测器系统，Millennium32工作站）；旋涡混合器；离心机。     

抗癫痫药物的血浆浓度测定

作者采用高效液相色谱法同时测定多种抗癞痫药物在人血浆中的浓度。测定药物有朴痫酮、苯巴比妥、苯妥英、卡马西平和10.11一环氧化卡马西平。用于研究抗癫痫药物配伍用药后体内各药物动力学的变化及临床治疗药物的监测工作。色谱条件:ODS-C18柱,紫外检测波长210nm,流动相为甲醇和水的等体积混合溶液,流速为1.0ml/min,内标为苯乙酮。本文采用相对校正因子来控制多批样本测定质量,用t检验判断药物测定的稳定性,证明本法稳定,重复性好,灵敏度高等优点。     

改良微量荧光分光光谱法测定卵巢癌细胞内阿霉素聚集量

目的 :测量卵巢癌SKOV3 亲本和耐药细胞内阿霉素聚集量。方法 :采用一种简单敏感的改良荧光分光光谱法。结果 :虽然耐药细胞株SKOV3/ADM内阿霉素聚集量经维拉帕米作用后能显著增加 ,但仍然低于亲本细胞SKOV3。结论 :本法快速、方便 ,在肿瘤细胞多药耐药机理及逆转剂研究中具有实用价值。     

人血清中血红蛋白的分子荧光光谱法测定

目的:建立人血清中血红蛋白(hemoglobin,Hb)含量的分子荧光光谱测定方法.方法:在酸性条件下,利用铈(Cerium,Ce)(IV)的强氧化性町将Hb肽链上的色氨酸和酪氨酸残基氧化生成新的强荧光产物的原理,来定量测定血清中Hb含量.结果:分子荧光光谱法的线性范围是1×10-7～8×10-7mol/L,检出限为1×10-9mol/L,加标网收率为96.80%～102.20%.工作曲线的相关系数为0.999 4.结论:该法快捷、灵敏、成本低,结果满意.     

高效液相色谱法测定异丙酚血浆药物浓度

目的建立测定血浆异丙酚浓度的方法。方法应用反相高效液相色谱技术，血浆样本经环己烷提取，以麝香草酚为内标，以乙腈-水（3：2）为流动相，流速1．2ml／min，柱温30℃，进样30μl，经Supelco Discovery C18柱分离后，荧光检测，λex=276nm，λcm=310nm。结果血浆异丙酚浓度测定：浓度范围为16～10000ng／ml（r=0．9995）。高、中、低3个浓度的回收率分别为97．6％、97．4％和101．7％，n=5；日间RSD分别为2．45％、3．15％和4．76％，n=5。日内RSD分别为2．82％、5．48％和4．17％。结论本方法快速、准确、灵敏，可用于血浆异丙酚浓度的测定。     

高效液相色谱荧光检测法测定人体内血浆中美托洛尔的浓度

目的建立测定人血浆中美托洛尔的HPLC法。方法色谱柱为Kromasil,C18柱（5μm,150×4.6mm）,流动相为水相（含0.63%四甲基乙二胺及0.52%磷酸）：乙腈=74：26,v;Ex：277nm,Em：299nm。流速：1.0mL·min^-1。结果美托洛尔在1.700～108.530mg×L^-1检测浓度范围内呈良好线型关系（r^2=0.9995）。高、中、低3种浓度的日内、日间RSD〈15%,平均回收率分别为102.93%,100.22%,101.29%。结论该方法操作简便、快速,适用于临床美托洛尔的血药浓度监测及其药动学研究。     

荧光探针包被法测定血浆硫化氢浓度

目的：在荧光探针的基础上建立一种简易的方法来检测血液中的硫化氢（hydrogen sulfide, H2S）。方法：将荧光探针包被到96孔板上,冷藏待用。用饱和硫酸铵沉淀血浆或血清中的蛋白,离心后所得的上清液分别加到含包被探针和不含包被探针的微孔中, 37 ℃避光孵育2 h,然后使用分光光度计（波长λEx/λEm 340/445 nm）读取微孔的荧光值,计算包被有探针和相应无探针微孔的荧光差值,根据标准曲线浓度计算出血液中H2S的浓度。结果：灵敏度和特异性测试表明,此方法检测灵敏度下限可以达到0.3 μmol/L,血液中其他成分甚至其他含硫活性成分和含硫氨基酸等对此方法影响甚微。应用此方法检测188名健康成年志愿者的血清H2S浓度［（12.1±3.5） μmol/L,95%CI: 4.6~19.8 μmol/L］,所得结果呈正态分布（单样本K-S检验, P>0.1）。对30名高血压患者和22名相匹配的健康志愿者血清H2S浓度检测表明,前者H2S浓度低于后者［(3.52±1.49) μmol/L vs. (10.23±2.76) μmol/L］,差异具有统计学意义(配对样本t检验, t=9.937,P<0.001)。检测雄性Wistar大鼠血清［（19.66±2.32） μmol/L］和血浆［（18.67±2.07） μmol/L］以及动脉血［（19.34±0.51） μmol/L］和静脉血［（18.99±0.50） μmol/L］中的H2S浓度,结果表明雄性Wistar大鼠血清和血浆以及动脉血和静脉血两者差异都没有统计学意义(重复测量的方差分析,P=0.38)。样品的重复性检测稳定性较好(两因素方差分析,P>0.05)。结论：此方法对检测血液中的H2S具有简单、高灵敏度、特异性和可重复性等优点,出结果快,可适用于大样本的高通量检测,满足实验室基础研究及临床一次性大样本H2S浓度检测的需求。     

荧光分光光度法测定血清潘生丁浓度

潘生丁是临床上较常使用的抗血栓药物,有报道其半衰期为(11·6±2·2)h,且在体内有一定的蓄积作用[1]。因此,要合理给药获取最佳治疗效果,就必须通过测定血药浓度,调整给药剂量来完成。过去多采用液相色谱法测定血浆中的潘生丁含量,但操作较复杂。本文探讨用荧光分光法测定血清潘生丁浓度,该法操作简便,适用于临床血药浓度监测。1材料与方法1.1仪器岛津RF-540荧光光度计(日本),SPM—10A数字酸度计(浙江萧山仪器厂),氯仿(上海化工厂、分析纯),1 mol/L盐酸溶液(重蒸馏水配制),潘生丁对照品(上海第六制药厂)。1.2供试品溶液的制备精密称取潘…     

高效液相色谱—荧光检测法测定血浆总同型半胱氨酸浓度

OBJECTIVE: To establish a high-performance liquid chromatography (HPLC) assay with an internal standard for determining plasma total homocysteine. METHODS: The Hcy-mixed disulfides or protein bound Hcy in the plasma were reduced with TCEP. Subsequently, the thiol-compounds in the samples were derivatized with a thiol-specific fluorogenic reagent, SBD-F. The derivate was then separated and detected by HPLC with fluorometric detection. RESULTS: The detection limit was 0.625 mumol.L-1; the rate of recovery was 98.87%; the intra-assay coefficient of variation (CV) was less than 5.5%; and the inter-assay CV was less than 9.0%. CONCLUSION: The method presented in this paper is simple, sensitive, precise, and stable.     

血浆还原型谷胱甘肽荧光测定改良法

本法系在Cohn和Lyle的荧光分光光度法的基础上,以10％三氯醋酸代替25％HPO_3在常温(18～30℃)下去蛋白,并以pH8.3磷酸盐缓冲液代替pH8.0的该液。本法的重复性试验和回收试验结果满意,最低检出限为25ng/ml,标准曲线至少在2.5μg/ml内呈线性。用本法测定39例健康献血员,血浆GSH值为15.125±3.383μmol/L,男女性别无明显差异。本法灵敏、准确可靠、操作简单、标本用量少。     

高效液相色谱-荧光法检测脑脊液的异丙酚浓度

目的：建立测定脑脊液异丙酚浓度的方法。方法：应用反相高效液相色谱技术，脑脊液样品经高速离心（12500r／min）3min，0．45μm滤膜过滤，以甲醇-水（80：20）流动相，流速1ml／min，柱温30℃，进样量20μl。经Supelco Discovery C18柱分离后，荧光检测，λex=276nm，λem=310nm。结果：脑脊液异丙酚浓度测定线性范围为5～200ng／ml（r=0．9994）。高、中、低3个浓度的回收率分别为101．29／6、99．8％、98．8％；日间RSD分别为1．55％、1．73％、6．01％；日内RSD分别为1．69％、2．37％、8．60％。最低检测浓度为2ng／ml。结论：该方法快速、准确、灵敏，可用于脑脊液异丙酚浓度的测定。     

异丙酚药代动力学和血药浓度监测

应用荧光光谱法测定人体血浆中异丙酚浓度以及一次静脉给药后人体内药代动力学参数。在含不同量异丙酚的人体血浆中加入磷酸缓冲液及环已烷／正丁醇，振摇、离心后取上清液测荧光强度（发射波３１０ｎｍ，激发波２６５ｎｍ）。结果表明异丙酚投入量（０．０５～１５μｇ）与测得的荧光强度间有良好的线性关系（ｒ＝０．９９９７）。提示异丙酚在人体代谢过程中符合药代动学三室模型。该方法灵敏度高，线性范围大，操作简便，专一性好，可用于临床异丙酚血药浓度监测。     

高效液相色谱法测定血浆中环磷酰胺浓度

目的：建立血浆中环磷酰胺浓度的高效液相色谱测定法。方法：样品经甲醇沉淀蛋白，离心后取上清液直接进样。色谱柱：Shim-pack CLC-ODS柱（150mm×6mm，5μm）；流动相：甲醇-水（1：1v／v）；流速：1．0ml/min；检测波长：325nm。异环磷酰胺为内标。结果：环磷酰胺最低检出量为5mg／L，平均回收率为96.4％±2．31％。结论：本方法简易、快捷、准确，适用于临床血药监测。     

改良反相高效液相色谱法测定血清中异丙酚浓度

目的创建一种新型反相高效液相色谱-荧光法测定血清中异丙酚浓度,为临床上快速准确的监测异丙酚血药浓度提供科学实用的检测手段。方法应用20%高氯酸沉淀血清样品后,混匀离心取上清液50μL进样分析。分析柱为DiamonsilC18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(90∶10)(冰醋酸调pH=4.0),流速1.0mL/min,荧光激发波长为276nm,发射波长为310nm。柱温为室温。结果当测定浓度范围为0.05-10μg/mL时,异丙酚与内标麝香草酚的峰面积之比与浓度呈良好的线性关系(r=0.9975),最低检出浓度50ng/mL,日内与日间精密度在4.78-6.59之间,明显小于15%。结论改良反相高效液相色谱法测定人血清异丙酚浓度具有准确高效、灵敏快捷等特点,适用于科研和临床异丙酚血药浓度的监测。R