人子宫内膜癌单克隆抗体的制备及鉴定

1　实验资料人子宫内膜腺癌细胞ＡＮ3ＣＡ来自中国典型培养物保藏中心 .培养基及牛血清购自Ｇｉｂｃｏ公司 ;ＨＲＰ酶标抗体及ＡＢＣ试剂盒购自Ｚｙｍｅｄ公司 ;ＢＡＬＢ/ｃ小鼠购自中国医学科学院实验动物中心 .把人子宫内膜腺癌细胞ＡＮ3ＣＡ与Ｆｒｅｕｎｄ佐剂混合后免疫 8ｗｋ龄ＢＡＬＢ/ｃ小鼠 .加强免疫 4次 .用聚乙二醇 (Ｍｒ 4 0 0 0 ,Ｍｅｒｅｋ) ,按常规方法将免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞ＳＰ2 / 0 Ａｇ8.6 35细胞融合 .杂交瘤细胞培养于 10 0ｍＬ·Ｌ-1牛血清 ＨＡＴ ＲＰＭＩ选择性培养基 .采用酶联免疫吸附实验 (ＥＬＩＳＡ)…     

癌基因H-ras在肝癌转移中作用初步研究

研究表明 ,癌基因Ｈ ｒａｓ与肿瘤转移有关。我们应用基因转移技术 ,研究了癌基因Ｈ ｒａｓ对肝癌细胞株ＳＭＭＣ 772 1细胞转移的影响 ,以探讨Ｈ ｒａｓ基因与肝癌转移行为的关系。1　材料与方法1 1　材料　　载体质粒ＰＳＶ2 -ｎｅｏ及载有活化的Ｈ ｒａｓ基因的重组质粒ＰＳＶ2 ｎｅｏ ｒａｓ由上海复旦大学生物物理系赠 ,人肝癌细胞株ＳＭＭＣ 772 1由本所细胞室提供。磷酸钙转染试剂盒购自Ｐｒｏｍｅｇａ公司。ＤＡＣＤ ｐ2 1ｒａｓ抗体购自Ｓｉｇｍａ公司 ,它可特异性识别ｐ2 1Ｈ ｒａｓＣ末端 12 6～ 14 0氨基酸区域ｃⅣａｓｅ抗体 …     

应用消减免疫法制备抗肝癌单克隆抗体

1　材料和方法1.1　材料　 1实验动物 :BAL B/c雌性小鼠 8wk龄 ,体质量18～ 2 0 g,购自本校实验动物中心 ;2组织细胞 :正常成人新鲜肝组织 ,肝癌组织取自本校外科手术标本 ,部分组织以中性福尔马林固定 ,低温石蜡包埋切片 ,4℃保存备用 .Sp2 /0细胞 ,肝癌细胞株 SMMC- 772 1,HHCC,He PG2由本室保存 ;3主要试剂 :HT,HAT选择培养基 RPMI16 40培养基购自Sigma公司 ,环磷酰胺注射液系连云港德瑞制药有限公司产品 ,Envision购自美国 DAKO公司 .1.2　方法　 1正常成人肝组织于 2 0 0目镍网中研磨后 ,无菌生理盐水悬浮制成肝细胞悬液 …     

胚胎干细胞形成拟胚体的几个影响因素

胚胎干细胞 (ｅｍｂｒｙｏｎｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌｓ,ＥＳｃｅｌｌｓ)来源于囊胚的内细胞团 ,在体外长期培养 ,能保持高度未分化状态[1] 。胚胎干细胞体外悬浮培养 ,可形成含内胚层、中胚层、外胚层的拟胚体 (ｅｍｂｒｙｏｉｄｂｏｄｉｅｓ,ＥＢｓ) [1,2 ] 。应用ＥＢｓ模拟体内环境研究胚胎发育和定向诱导 ,首先要解决的问题是形成足量的ＥＢｓ。本文以小鼠的胚胎干细胞系ＥＳ Ｄ3为例 ,探讨有效形成ＥＢｓ的几个影响因素。1　材料与方法1.1　材料　ＥＳ Ｄ3由中山大学北校区实验动物中心陈系古教授提供。胚胎成纤维细胞取自孕 12 .5ｄ昆明鼠的鼠胚。胎牛血清分别购自Ｈｙｃｌｏｎｅ公司和杭州四季青     

哮喘大鼠淋巴细胞亚群失衡以及糖皮质激素和雷公藤对其影响

我们采用酶联免疫斑点法在单个细胞水平上测定细胞内细胞因子的产生 ,研究Ｔ辅助淋巴细胞亚群 (ＴＨ)ＴＨ2 细胞和ＴＨ1细胞平衡的变化 ,以探讨ＴＨ 失衡与哮喘发病的关系。一、材料与方法1 主要试剂与药品 :卵白蛋白、莫能菌素、佛波纯酯(ＴＰＡ)、依诺霉素购自美国Ｓｉｇｍａ公司 ;链霉亲和素 碱性磷酸酶复合物 (ＡＰＡＡＰ复合物 )购自军事医学科学院 ;小鼠抗大鼠ＩＦＮ γ和ＩＬ 4单克隆抗体购自英国Ｓｅｒｏｃｔ公司 ;生物素标记羊抗小鼠抗体购自美国ＰｈａｒＭｉｎｇｅｎ公司。2 动物分组 :雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 40只 ,体重 2 5 0～…     

三种大枣多糖促进小鼠脾细胞增殖作用的比较

本文比较大枣粗多糖及两种大枣纯化多糖的促小鼠僻细胞增殖作用强度,并分析大枣多糖的构效关系信息。１材料与方法大枣果实粗多糖（以下简称为粗多糖）,淡黄色结晶;大枣中性多糖（以下简称为中性多糖）,为易溶于水的白色粉末;大枣酸性多糖（以下简称为酸性多糖）;淡黄色粉末,易溶于水。ＲＰＭＩ－１６４０培养基购自ＧｉｂＣＯ公司,实验前,另加１０％小牛血清、２５ｍＭＨｅｐｅｓ等。ＴｈｉａｚｏｌｌＢｌｕｅ（ＭＴＴ）购自Ｓｉｇｍａ公司。ＢＡＬＢ／Ｃ、Ｃ５７ＢＬ／６ｊ纯系小鼠,雌雄兼用,体重１８－２２ｇ,由本校实验动物…     

奥曲肽对SGC-7901细胞中Bcl-2和Bax基因的调控作用

我们以前研究发现奥曲肽可诱导人胃癌细胞株ＳＧＣ 790 1细胞凋亡 ,但其作用机制目前国内外未见报道。为此 ,我们就奥曲肽对ＳＧＣ 790 1细胞中Ｂｃｌ 2和Ｂａｘ基因的调控作用进行了研究。1　材料与方法1.1　主要试剂及仪器　　奥曲肽由瑞士Ｓａｎｄｏｚ药厂惠赠 ,人胃癌细胞株ＳＧＣ 790 1由本科培养 ,逆转录试剂盒ＡｓｃｃｅｓｓＲＴ ＰＣＲＳｙｓｔｅｍ (Ａ12 5 0 )购自Ｐｒｏｍｅｇａ公司 ,ＴｒｉｐｕｒｅＴＭＩｓｏｌａｔｉｏｎＲｅａｇｅｎｔｋｉｔ购自德国宝灵曼公司 ,2 40 0型ＰＣＲ循环仪为美国Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ公司产品 ,…     

系膜增生性肾小球肾炎组织中TIMP-1mRNA及蛋白的表达

1　对象和方法1 1　对象　 16例系膜增生性肾小球肾炎 (ｍｅｓａｎｇｉｏｐｒｏ ｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｙｉｔｉｓ,ＭｓＰＧＮ)选自我科肾活检穿刺标本 ,根据系膜增生的程度 ,分为轻度组 7例 ;中度组 5例 ;重度组 4例。所有标本均制成 3μｍ厚的石蜡切片。1 2　免疫组化　采用免疫组化ＳＡＢＣ法。鼠抗人组织金属蛋白酶抑制因子 1(ｔｉｓｓｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｏｆｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ,ＴＩＭＰ 1)单克隆抗体 (购自美国ＳａｎｔａＣｒｕｚ公司 ) ,免疫组化试剂盒用ＳＡＢＣＫＩＴ(购自武汉博士…     

转化生长因子β对肝星状细胞基质分解素1及其抑制因子基因表达的调节

近来的研究表明 ,肝星状细胞 (ＨＳＣ)是肝脏中基质金属蛋白酶 (ＭＭＰ)及其抑制因子 (ＴＩＭＰ)的主要细胞来源。转化生长因子β(ＴＧＦβ)对其他组织细胞产生ＭＭＰ、ＴＩＭＰ有明显的调节作用 ,它是否调控肝星状细胞ＭＭＰ、ＴＩＭＰ的表达 ,对此目前尚鲜有报道。我们采用逆转录定量聚合酶链式反应(ＰＣＲ )方法对ＴＧＦβ调节肝星状细胞基质分解素 1(ｓｔｒｏｍｅｌｙｓｉｎ 1,ＭＭＰ3)、ＴＩＭＰ1基因表达的情况进行了研究 ,现报道如下。一、材料与方法1 材料 :(1)试剂 :ＴＧＦβ、ＤＭＥＭ培养基 ,购自美国Ｓｉｇｍａ公司 ;总ＲＮＡ提…     

鬼箭羽对糖尿病小鼠血糖及全血粘度的影响

鬼箭羽是卫矛科植物卫矛Ｅｕｏｎｙｍｕｓａｌａｔｕｓ(Ｔｈｕｎｂ.)Ｓｉｅｂ.的枝翅,具有破血、通经的功效,是临床常用的活血化瘀药,目前临床常用于糖尿病的治疗。为此,我们观察了鬼箭羽水煎液对糖尿病小鼠的血糖及全血粘度的影响,结果报告如下。1　材料1.1　动物昆明种小鼠,体重18～22ｇ,雌雄不拘,由南京中医药大学实验动物中心提供。1.2药物及试剂鬼箭羽购自南京药材公司(经本院潘扬副研究员鉴定为卫矛科植物卫矛的枝翅),常规水煎,浓缩至0.2ｇ/ｍＬ;四氧嘧啶(Ａｌｌｏｘａｎ),美国Ｓｉｇｍａ公司产品,批号:36Ｈ084。1.3仪器ＯｎｅＴｏｕ…     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

尿微量白蛋白检测在继发性肾脏疾病中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白（m-Alb）检测在继发性肾脏疾病中的临床意义。方法采用Beckman Immage全自动特种蛋白分析仪对糖尿病组、高血压组、心脏病组患者进行了m-Alb测定,同时与健康组结果作对比。结果m-Alb检测糖尿病组为3.7±5.26mg/dl,高血压组为7.5±8.18mg/dl,心脏病组为7.8±3.76mg/dl,健康组为0.66±0.48mg/dl,各试验组m-Alb增高百分率为糖尿病组48.9%,高血压组37.5%,心脏病组26.9%。结论尿蛋白阴性的糖尿病、高血压、心脏病患者进行m-Alb检测,可以监测病程的进展。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。