金标免疫渗滤法快速检测幽门螺杆菌血清抗体351例分析

幽门螺杆菌 (Ｈｐ)感染与慢性胃炎、消化性溃疡甚至胃癌均密切相关。实验诊断Ｈｐ感染的技术目前已日臻完善和准确。近年出现的金标免疫渗滤法[1] (ＤＩＧＦＡ)是以胶体金为标记物的快速斑点免疫结合试验。具有敏感性、非创伤性、操作简单等特点。我院 2 0 0 1年 1— 6月用此方法检测了 35 1例门诊及住院患者 ,报告如下。1　资料与方法1.1病例选择　 35 1例均为经我院胃镜确诊为慢性胃炎和溃疡病患者 ,在检查胃镜时均进行快速尿素酶试验 ,术后抽血做金标免疫渗滤法。采用浙江省医学科学院研制Ｈｐ金标免疫诊断试剂盒 ,其组成如下 :　　抗原 …     

检测幽门螺杆菌抗体的金标免疫渗滤法的建立及应用

以幽门螺杆菌尿素酶为抗原,金标记抗人IgG为显示剂,建立了检测抗幽门螺杆菌抗体的金标免疫渗滤法(DIGFA)。以本法对150例慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者(患者组),98例健康成人(成人组)和90例儿童(儿童组)进行血清幽门螺杆菌IgG抗体测定。结果表明,患者组抗体检出率为72.6％。与快速尿素酶法相比,两者符合率为92％。诊断敏感性为92.4％,特异性为90.6％。不同人群抗体的阳性率以患者组最高,成人组次之,儿童组最低,提示该法具有较高的敏感性和特异性,可用于临床检测和人群流行病学调查。     

检测幽门螺杆菌抗体的金标免疫滤法的建立及应用

以幽门螺杆菌尿素酶为抗原，金标记抗人ＩｇＧ为显示剂，建立了检测抗幽门螺杆菌抗体的金标免疫渗滤法。以本法对１５０例慢性胃炎，消化性溃疡患者，９８例健康成人和９０例儿童进行血清幽门螺杆菌ＩｇＧ抗体测定。结果表明，患者组抗体检出率为７２．６％，与快速纱酶法相比，两者符合率为９２％，诊断敏感性为９２．４％，特 性为９０．６％。     

尿液抗幽门螺杆菌抗体的检测

目的 :建立检测尿液中抗幽门螺杆菌 (HP)抗体的方法 ,并评价其临床实用性。　方法 :应用酶标记免疫吸附测定技术检测 10 2例患者尿液、唾液和血清抗HPIgG ,根据快速尿素酶试验、HP选择性分离培养和组织切片H E染色确定其HP感染状态。　结果 :尿液、唾液和血清三种标本诊断方法的敏感性、特异性、准确性分别为 96 .7%、87.1%、93.5 % ;93.5 %、83.9%、90 .3%和 95 .2 %、93.5 %、94.6 %。　结论 :以上三种标本诊断方法依据准确性评优排序 ,应是尿液方法 >血清方法 >唾液方法 ;检测尿抗HPIgG方法因其准确、简便、易行 ,应用于流行病学调查尤为可取     

尿液抗幽门螺杆菌抗体检测的临床意义

目的:评估尿液抗幽门螺杆菌(Hp)抗体检测对Hp感染的诊断及根治后疗效判断的应用价值.方法:应用ELISA法检测215例消化内科门诊患者的尿液抗Hp抗体,并以13C呼气试验(13C-UBT)为"金标准"进行双盲对比.结果:215例患者尿Hp抗体阳性99例,总阳性率为46.0%;13C-UBT阳性96例,阳性率为44.7%.尿Hp抗体结果与13C-UBT相符180例,符合率83.7%;不符35例,其中19例尿Hp抗体阳性而13C-UBT阴性,16例尿Hp抗体阴性而13C-UBT阳性.以13CUBT为标准,尿液抗体检测的敏感性为85.7%,特异性为93.6%,阳性预测率78.5%,阴性预测率89.3%,准确性为84.5%.Hp根治后1个月13C-UBT转阴率为76.7%,尿液抗Hp抗体转阴率为50.0%.结论:尿液抗Hp抗体检测是一种方便、价格低廉、非侵入性诊断Hp感染的方法,适合对Hp感染患者的筛选、普查和儿童患者,在一定程度上可监测疗效.     

应用纯化抗原检测尿液和血清抗幽门螺杆菌抗体的比较

目的 :对幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)感染患者尿液和血清抗Hp抗体进行比较研究 ,探讨尿液抗Hp抗体检测的临床意义。方法 :分别以多株Hp超声上清、重组Hp热休克蛋白A亚单位 (rHspA)纯品和重组Hp热休克蛋白尿素酶B亚单位 (rUreB)纯品混合物为抗原 ,采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)方法对 12 6例患者的尿液抗HpIgG和血清抗HpIgG、抗HpIgA同时进行检测。结果 :使用rHspA和rUreB混合纯品进行检测 ,其特异性和敏感性明显优于Hp超声上清。诊断Hp感染的优劣顺序为 :血清IgG、尿液IgG、血清IgA。结论 :尿液的抗体检测可用于Hp感染诊断 ,尤其是尿液抗HpIgG是一个诊断Hp感染的敏感、特异指标。     

应用纯化抗原检测尿液和血清抗幽门螺杆菌抗体的比较

目的:对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染患者尿液和血清抗Hp抗体进行比较研究,探讨尿液抗Hp抗体检测的临床意义.方法:分别以多株Hp超声上清、重组Hp热休克蛋白A亚单位(rHspA)纯品和重组Hp热休克蛋白尿素酶B亚单位(rUreB)纯品混合物为抗原,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对126例患者的尿液抗HpIgG和血清抗HpIgG、抗HpIgA同时进行检测.结果:使用rHspA和rUreB混合纯品进行检测,其特异性和敏感性明显优于Hp超声上清.诊断Hp感染的优劣顺序为:血清IgG、尿液IgG、血清IgA.结论:尿液的抗体检测可用于Hp感染诊断,尤其是尿液抗HpIgG是一个诊断Hp感染的敏感、特异指标.     

金标免疫渗滤法检测抗角质蛋白抗体在类风湿性关节炎诊断中的意义

目的　采用金标免疫渗滤法检测抗角质蛋白抗体 (AKA) ,探讨其在类风湿性关节炎 (RA)诊断中的意义。方法　采用盐析法提取大鼠食管角质蛋白抗原 ,将抗原包被在硝酸纤维素膜上 ,干燥后装入金标免疫渗滤板 ;采用金标免疫渗滤法检测AKA。结果　RA患者中AKA阳性率为 3 6% ( 3 1/ 86) ,SLE患者中阳性率为 6% ( 3 / 48) ,RA患者阳性率与SLE或其他组比较差异有显著性 (P <0 0 1)。血清 1∶1稀释时特异性为 91% ,1∶2稀释时特异性为 96% ,1∶4稀释时特异性为 10 0 %。结论　金标免疫渗滤法检测AKA ,虽然灵敏度低 ,但特异性高 ,该法简便、快速 ,不需要特殊仪器     

金标免疫渗滤法检测猫狗血清中抗肺吸虫IgG

目的探索简易、快速的猫、狗肺吸虫病免疫诊断方法。方法以肺吸虫成虫可溶性抗原点样于固相硝酸纤维素膜上,以胶体金-protein A为检测标记物,采用自行设计的渗滤装置,检测猫、狗血清中抗肺吸虫IgG抗体。结果检测7份肺吸虫感染猫血清和6份感染狗血清均为阳性,检测25份健康猫血清和27份健康狗血清均为阴性。结论金标免疫渗滤法快速检测猫、狗血清中肺吸虫特异性IgG,不仅操作简便、快速,结果判读容易,不需特殊仪器设备,而且敏感特异,有潜在的诊断价值,值得进一步开发应用。     

金标渗滤法测定囊虫特异性抗体试剂盒的研制

目的 研制简易、快速、准确的囊虫病诊断试剂盒,并对其诊断价值进行考核评价。方法 以猪囊尾蚴的囊液粗提液为检测用抗原,以胶体金标记的金黄色葡萄球菌蛋白A（SPA）为探针,采用自行设计的渗滤装置制备金标渗滤法（DIGFA）检测试剂盒。检测不同病人血清中囊虫特异性IgG抗体,并以囊虫IgG抗体ELISA检测试剂盒考核其敏感性和特异性。结果 用金标试剂盒检测58人份囊虫病患者血清和100人份健康者血清,其敏感性为98.3％（57/58）;特异性为100％（100/100）。用该试剂盒检测25人份包虫病患者血清,6份呈弱阳性,交叉反应率为24％;检测30人份血吸虫病人血清,10人份肺吸虫病人血清,10人份肠道线虫病人血清,均无交叉反应。与ELISA试剂盒检测结果比较,符合率为98．7％,无显著性差异（χ^2=0．0545,P〉0．05）。结论 金标渗滤法快速检测囊虫特异性抗体试剂盒敏感性高、特异性强,可与ELISA法相媲美,且操作更为简便、快速,结果判读容易,特别适合临床检测和现场查病。     

金标免疫渗滤法检测斯氏狸殖吸虫病患者血清IgM的评价

目的为寻求简便、可靠的方法,用于斯氏狸殖吸虫病早期诊断及疗效考核。方法建立检测斯氏狸殖吸虫病患者血清IgM抗体的金标免疫渗滤法(DIGFA),并对53例患者在治疗前和治疗后血清中特异抗体水平的动态变化进行研究。结果斯氏狸殖吸虫病患者经有效药物治疗后3个月、6个月、1年、1．5年连续采血,经DIGFA检测连续观察的结果表明,IgM抗体出现较早,阴转较为明显和迅速,治疗后3个月的阴转率就达47．2％(25／53),1年的阴转率可达86．8％(46／53);而IgG抗体则出现较晚,阴转缓慢,治疗后1．5年的阴转率仅为15．1％(8／53)。结论DIGFA检测斯氏狸殖吸虫病患者血清IgM抗体可作为早期诊断及疗效考核的有效方法。     

免疫印迹法检测幽门螺杆菌抗体效果评价

目的：评价新型血型学免疫印迹法检测胃幽门螺杆菌抗体的价值。方法：采用免疫印迹血清方法对例因消化不良胃镜检查患者血清HP蛋白抗体检测，其结果与快速尿素酶（RUT）和细菌培养的结果进行比较分析。结果：260例患者的血清中HP感染的阳性率为68．8％，其敏感性为96．6％、特异性为89．3％、阳性预测值为95．0％、阴性预测值为92．6％，与快速尿素酶试验（RUT）T和细菌培养结果相比无显著性差异（P〉0．05）。结论：①免疫印迹血清方法诊断检测幽门螺杆菌抗体，具有较高的敏感性及特异性，并且该方法简单易行，是一种非侵入性的方法；②该方法可作为临床消化病人的初筛检查诊断，并适用于大规模流行病学调查，具有良好的应用前景；③通过检测CagA、VacA可及时指导临床治疗。     

胃癌高发区14岁及以下儿童幽门螺杆菌感染及细胞毒素相关蛋白A阳性幽门螺杆菌感染的检测分析

目的　对胃癌高发区 (西安地区 )≤ 1 4岁儿童进行幽门螺杆菌 (Hp)感染及细胞毒素相关蛋白A(CagA)阳性Hp感染的血清学检测 ,以了解各年龄段Hp的感染率及CagA阳性Hp的感染率。 方法　采用斑点金免疫渗滤法检测末梢血清中抗Hp尿素酶IgG及抗Hp -CagA -IgG ,共检测 1 4 1 5人 ,其中市区儿童 791人 ,市郊儿童 62 4人。 结果　小儿Hp感染并非逐龄连续性增高 ,但总体趋势是随年龄的增加而增高 ,≤ 4岁Hp的感染率在市郊明显高于市区 ;在Hp感染者中 ,市区及市郊小儿CagA阳性Hp感染率分别为2 9.60 %～ 55 .0 0 %及 2 3 .53 %～ 58.33 % ,≤ 4岁CagA阳性Hp感染率分别 37.50 %～ 55 .0 0 %及 2 3 .53 %～ 58.33 %。统计学分析两地间差异无显著性 (P >0 .0 5)。结论　本地区小儿CagA感染菌株可能为相同的Hp菌株感染 ,本地区消化性溃疡及胃癌高发可能与CagA阳性Hp菌株感染有密切关系。重视儿童期CagA阳性Hp感染的血清流行病学研究 ,对减少成年消化疾病发病率 ,提高民族健康素质具有深远的意义。     

金标免疫渗滤法检测卫氏并殖吸虫循环抗原的研究

目的：建立一种快速，简便，检测卫氏并殖吸虫病患者血清循环抗原（CAg)的新方法。方法：对抗体夹心金标免疫渗滤法（DAS－DIGFA）以抗卫氏并殖吸虫成虫多克隆抗体为包被抗体，加待检血清后再加免疫金标的抗卫并殖吸虫成虫单克隆抗体，阳性者出现红色斑点，结果：用DAS－DIGFA检测59例卫氏并殖吸虫病患者清，其阳性率为96．6％（57／59）；检测正常人血清20例，肺结核病患者血清20例，丝虫病患者血清27例，囊虫病患者血清20例和血吸虫病者血清26例，除1例血吸虫病患者血清阳性外，余均为阴性，特异性为99．1％（112／113）。结论：DAS－DIGFA是一种快速，简便，敏感和特异的检测卫氏并殖吸虫病患者血清中循环抗原的新方法。     

幽门螺杆菌粪便抗原检测在儿童中的应用价值研究

目的：幽门螺杆菌粪便抗原（Helicobacter pylori stool antigen，HpSA）检测诊断儿童Hp感染的应用价值进行探讨。方法：以快速尿素酶、组织学和细菌培养作为诊断的Hp的金标准（快速尿素酶试验、组织学和细菌培养其中2项阳性判定为Hp阳性，细菌培养1项为阳性也判定为Bp阳性），采用ELISA法检测40例因上消化道症状接受胃镜检查患儿的HpSA，评价HpSA检测诊断儿童Hp感染的敏感性、特异性。同时在29例患儿中以^13C-UBT作对照，评价HpSA检测诊断Hp感染的准确性。结果：在40例患儿中，HpSA检测的敏感性、特异性和准确性分别94.44%，90.91%和92.50%；在29例患儿中以^13C-UBT作标准，HpSA检测诊断Hp感染敏感性、特异性和准确性分别为91.67%，88.23%和89.66%。结论：HpSA检测是一种方便、简单、准确的诊断儿童Hp感染的方法。     

应用免疫印迹法检测血清中幽门螺杆菌抗体的价值评价

目的:评价应用免疫印迹法检测血清中幽门螺杆菌(Hp)抗体的价值。方法:应用免疫印迹血清学方法对120例患者血清中Hp蛋白抗体进行检测,其结果与细菌培养和Giemsa染色的结果进行比较分析。结果:应用免疫印迹法检测120例患者的血清标本中Hp感染的阳性率为57.5%(69/120),该方法的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为95.3%、85.7%、88.4%、94.1%,准确性为90.8%,与细菌培养和Giemsa染色结果相比无显著性差异(χ2=1.45,P>0.05)。结论:应用免疫印迹法检测血清中Hp抗体诊断Hp感染是一种高敏感性、特异性、准确易行的非侵入性的方法。该方法可用于大规模流行病学调查和临床消化病人Hp感染毒性的检查初筛,具有良好的应用价值和前景。     

免疫印迹法检测血清幽门螺杆菌抗体的应用价值

目的评价免疫印迹法检测幽门螺杆菌（H.pylori）抗体的临床性能,探讨免疫印迹法检测血清幽门螺杆菌抗体和免疫学分型的临床意义。方法应用免疫印迹法检测360例上消化道疾病患者和20名无消化道疾病的健康志愿者血清幽门螺杆菌空泡毒素（VacA）、细胞毒素（CagA）和尿素酶（Urea）等抗体。根据幽门螺杆菌抗体的表达进行幽门螺杆菌Ⅰ型（毒力型）和Ⅱ型（非毒力型）免疫学分型,并结合14C-UBT尿素呼气试验进行分析。结果免疫印迹法诊断幽门螺杆菌感染的敏感性为96.7%,特异性为40.4%。免疫印迹法检出该组幽门螺杆菌抗体阳性率为81.7%。其中幽门螺杆菌Ⅰ型阳性率（53.7%）高于对照组（25.0%）,而Ⅱ型阳性率（28.0%）低于对照组（50.0%）。结论免疫印迹法检测血清幽门螺杆菌抗体在幽门螺杆菌的流行病学调查、血清学诊断和免疫学分型等方面具有独特的应用价值。     

儿童幽门螺杆菌感染研究进展

幽门螺杆菌（H．pylori，Hp）感染可导致慢性活动性胃炎、消化性溃疡、胃癌等消化道疾病，近年来研究表明，许多胃肠外疾病与Hp感染也有明显关系。而儿童是Hp感染的早期阶段，50％的成人Hp相关疾病是在儿童期感染了Hp造成的。因此，进一步深入研究儿童Hp感染的流行病学特点、发病机制、诊断及治疗是非常必要的。现将近年来的研究进展情况综述如下。     

幽门螺杆菌尿素酶抗体检测的临床应用评价

目的 对幽门螺杆菌（Hp）尿素酶抗体检测试剂盒（胶体金法）检测幽门螺杆菌感染的特异性、敏感性进行临床评价.方法 随机选取50例有反复腹痛或伴有恶心、呕吐等上消化道症状,4周内未经治疗或已停服抗生素、铋剂、H2受体拮抗剂和质子泵抑制剂等对Hp检测有影响药物的门诊、住院患者.同时予14C-尿素呼气试验和血清学抗体检测尿素酶抗体.以14C-尿素呼气试验的结果为金标准,与胶体金法的检测结果相比较.结果 胶体金法的检测结果与14C-尿素呼气试验无统计学差异（x2=0.67,P＞0.05）,灵敏度达84.62％,特异度为91.67％,总符合率88％.结论 胶体金尿素酶抗体检测操作简便、快捷,具有较高的灵敏度和特异性,可以用作幽门螺杆菌感染患者的筛查试验.