用半巢居PCR检测无创性标本诊断卡氏肺孢子虫肺炎的实验研究

目的 无创性诊断卡氏肺孢子虫肺炎。方法 采用一对半引物半巢居DHFR-PCR检测实验大鼠无创性标本-支气管液、血液及活检标本-肺及肝脏组织中的卡氏肺孢子虫DNA。结果 从59只经病理学检查证实的卡氏肺孢子虫肺炎大鼠中采集到的上述四种标本,卡氏肺孢子虫DNA的半巢居DHFR-FCR检出率分别为72．7％(32／44)、37．3％(22／59)、94．9％(56／59)和36．4％(8／22),而DHFR-PCR的检出率则仅为25％、13．6％、71．2％和9．1％。12只低感染度(0-1级)PEP大鼠的无刨性标本中卡氏肺孢子虫DNA的检出率由0提高至41．7％。正常鼠标本及各种病原体对照的半巢居DHFR-PER均为阴性。结论 用半巢居DHFR-PCR无创性地诊断大鼠卡氏肺孢子虫肺炎具有敏感、特异、省时、省力等优点;本研究在血和肝脏中检出卡氏肺孢子虫DNA,揭示在卡氏肺孢子虫肺炎大鼠模型中存在虫血症和肺外卡氏肺孢子虫感染。     

卡氏肺孢子虫检测方法的改良

目的:为快速诊断卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)提供改良的病原学检查方法。方法:取PCP大鼠模型肺组织印片,分别作姬氏、刘-姬氏复合染色。结果:刘-姬氏复合染色示卡氏肺孢子虫包囊内有4￣8个紫红色囊内小体,囊内部结构鲜明、清晰可辨、背景对比度好。结论:刘-姬氏复合染色法结果清晰、对比性好、特异性强、简便快速。     

肾移植术后并发卡氏肺孢子虫肺炎（附4例报告）

目的:探讨肾移植术后并发卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)的早期诊断和治疗。方法:综合分析我院2018年3月～2019年3月间肾移植术后并发PCP者4例。其发病时间均在术后3～6个月内,初始症状均为发热、伴有呼吸困难和干咳。用深部诱导痰法检测病原体,口服联黄甲氧苄啶片治疗,疗程大于2周,并辅以对症支持治疗。结果:4例患者痰液分析均检测出卡氏肺孢子虫,经治疗临床症状消失,胸部CT等检查恢复正常。所有患者随访3～5个月,无卡氏肺孢子虫肺炎复发。结论:对于肾移植术后早期(3～6个月),出现发热、呼吸困难、干咳等临床表现者,应高度怀疑PCP,深部诱导痰检测法是早期诊断PCP的有效手段,尽早治疗是PCP治愈的关键。     

卡氏肺孢子虫肺炎肺泡微环境的改变及其在发病中的作用

<正>卡氏肺孢子虫肺炎(Pneumocystis Carinii Pneumo-nia,PCP)是免疫抑制宿主主要的呼吸系统感染性并发症和死亡原因.其发病和预后取决于卡氏肺孢子虫(PC)毒力及宿主防御之间的平衡.近年来,PCP发病机制的研究揭示了宿主与病原体之间复杂的相互作用,而肺泡微环境的改变在PCP的发病中具有较大的作用和影响.1 PCP肺泡微环境的结构改变PCP特征性病理改变表现为肺泡内大量泡沫状渗出物.在糖皮质激素诱导的大鼠PCP模型中,渗出物的量随PC负荷增加而增加.渗出物中含有表面活性磷脂、血清蛋白质、粘蛋白、表面活性蛋白.近年,用兔多克     

蒿甲醚治疗卡氏肺孢子虫肺炎大鼠及其对IL-2的影响

目的探讨蒿甲醚对卡氏肺孢子虫肺炎大鼠IL-2的影响。方法给SD大鼠皮下注射地塞米松磷酸钠建立卡氏肺孢子虫肺炎动物模型,治疗组给予蒿甲醚治疗。放免法和酶免法分别检测血清和支气管肺泡灌洗液中IL-2水平。结果和感染对照组比较,蒿甲醚治疗组大鼠症状显著改善,肺印片中卡氏肺孢子虫包囊数目显著减少,肺组织炎症明显减轻,血清和肺泡灌洗液中IL-2水平分别为3.13+0.29 ng/ml和294.44+65.64 pg/ml,与感染组5.63+0.67 ng/ml和594.80+102.20pg/ml相比明显降低,有显著性差异(p<0.01)。结论蒿甲醚具有一定抗大鼠卡氏肺孢子虫肺炎作用,能够降低PCP大鼠IL-2。     

肺孢子肺炎大鼠模型及诊断方法的实验研究

目的：为了便捷地建立肺孢子虫肺炎动物模型及优选其实验诊断方法。方法：给大鼠皮下注射醋酸泼尼松龙,同时用全价颗粒及加入四环素的饮水喂饲,建立卡氏肺孢子虫肺炎动物模型,以支气管肺光灌洗物涂片、肺印片和肺组织病理切片进行实验诊断。结果：从大鼠体内检测到卡氏肺孢子虫仅需３周时间,与传统方法比较要提早２～３周。支气管肺泡灌洗物涂片法阳性率为９４％。结论：本研究不但饲喂方法简便,而且能较快地获取动物模型和原虫标本,故具有实用价值。支气管肺泡灌洗物涂片法可作为临床首选实验诊断方法。     

大鼠脾脏微量元素变化与卡氏肺孢子虫感染关系的研究

目的探讨卡氏肺孢子虫(PC)感染对大鼠脾脏中微量元素的影响。方法51只大鼠随机分为实验组和对照组。实验组每只大鼠皮下注射地塞米松2mg/次,每周2次。8周后陆续将大鼠处死,取肺组织用吉氏-瑞氏复染法检测卡氏肺孢子虫。再取脾脏,用原子吸收分光光度计测定每只大鼠微量元素含量。结果吉氏-瑞氏复染法实验组大鼠PC阳性率为51.2%,对照组未检出卡氏肺孢子虫。与对照组相比较,PC阳性组脾脏中Zn 、Mg 的含量(29.72μg/g干重、147.05μg/g干重)低于对照组(37.59μg/g干重、181.90μg/g干重,P<0.05),Cu 、Fe 、Ca 的含量(7.34μg/g干重、1052.50μg/g干重、317.21μg/g干重)变化不明显。结论卡氏肺孢子虫感染组大鼠脾脏中Zn 、Mg 含量降低,Cu 、Fe 、Ca 含量无显著性变化,提示卡氏肺孢子虫感染对脾脏微量元素变化起到一定的作用。     

大蒜素对卡氏肺孢子虫肺炎预防作用的实验研究

目的观察大蒜素对大鼠卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)的预防效果。方法地塞米松连续肌肉注射Wistar大鼠,建立大鼠肺孢子虫肺炎动物模型。于模型诱导第3周起给予大蒜素治疗,剂量10mg/(kg·d),连续5d,后腿肌肉深部注射,以后每隔2周重复治疗一次,第10周末剖杀,同时设复方新诺明预防对照组和PCP模型对照组。以各组大鼠肺重、肺重/体重比值、Pc感染率、肺印片中每100个油镜视野肺孢子虫包囊均数等指标考核疗效。结果大蒜素预防组大鼠肺重(1.89±0.28)、肺重/体重比值(0.94±0.12)、Pc感染率(73.33%)、肺印片中每100个油镜视野肺孢子虫包囊均数(15.39±10.46)均明显低于PCP模型对照组(P<0.05或P<0.01),而与复方新诺明预防对照组无显著性差异(P>0.05)。结论大蒜素对实验大鼠卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)有一定的预防和保护作用,预防效果与复方新诺明接近。     

肺孢子肺炎大鼠模型及诊断方法的实验研究

目的 :为了便捷地建立肺孢子虫肺炎动物模型及优选其实验诊断方法。方法 :给大鼠皮下注射醋酸泼尼松龙 ,同时用全价颗粒饲料及加入四环素的饮水喂饲 ,建立卡氏肺孢子虫肺炎动物模型 ,以支气管肺泡灌洗物涂片、肺印片和肺组织病理切片进行实验诊断。结果 :从大鼠体内检测到卡氏肺孢子虫仅需 3周时间 ,与传统方法比较要提早 2～ 3周。支气管肺泡灌洗物涂片法阳性率为 94%。结论 :本研究不但饲喂方法简便 ,而且能较快地获取动物模型和原虫标本 ,故具有实用价值。支气管肺泡灌洗物涂片法可作为临床首选实验诊断方法。     

艾滋病（三）机会性感染的治疗

对于严重免疫功能抑制的患者 ,机会性感染的治疗和预防仍然非常重要。　　 卡氏肺孢子虫肺炎　　目前 ,未经有效预防的艾滋病毒 (ＨＩＶ)感染者或新近诊断有合并症的晚期患者 ,通常最易感染卡氏肺孢子虫肺炎 (ＰＣＰ)。对于定期医疗监护下的患者 ,如果临床检测怀疑患卡氏肺孢子虫肺炎 ,就需作出早期诊断。诊断越晚 ,病情越重 ,治疗效果越差。诊断方法包括吸入雾化盐溶液诱导排痰 ,而不必使用支气管镜检查 ,但检查痰液的诊断敏感性较低。支气管肺泡灌洗法可以避免经支气管肺活检以及由此引发的肺出血和气胸等并发症。运动血氧定量法和放射性…     

卡氏肺孢子虫性肺炎的动物模型建立及病原学观察

[目的 ]为开展卡氏肺孢子虫的病原学形态观察、生物学特性以及药物治疗的研究 ,建立卡氏肺孢子虫肺炎的实验大鼠模型 .[方法 ]给SD实验大鼠皮下注射醋酸可的松后 ,制作肺组织印片 ,采用姬氏染色、肺印片六亚甲基四胺银染色 ,用油镜观察 .[结果 ]第 4周包囊检出率为 6 7% (4 / 6 ) ,第 5周为89% (8/ 9) ,第 6周为 10 0 % (9/ 9) ,总检出率为 75 % (2 1/ 2 8) ,且随用药时间的延长 ,其感染程度也逐渐加重 .对照组均未检出包囊 .[结论 ]建立了卡氏肺孢子虫性肺炎的实验动物模型 ,并进行了病原学观察     

老年卡氏肺孢子菌肺炎的诊断和治疗

目的提高对老年人群患卡氏肺孢子菌肺炎(PCP)的诊治和认识。方法对二例老年PCP患者的诊断和治疗经过进行总结和讨论。结果二例老年PCP患者经临床体格检查、影像学检查和痰标本涂片姬姆萨(或甲紫色蓝)染色查到卡氏肺孢子菌(PC)或PCR( )而获诊。一例PCP患者选用复方磺胺甲口恶唑(SMZco)治愈,另一例初用SMZco后因为发生不良反应而改用卡泊芬净治愈。结论PCP是在老年肺癌或长期住院机械通气患者易患的机会性感染,通过痰标本PCR检测阳性或痰涂片染色查到PC而确诊,应与其他肺炎做鉴别诊断。PCP治疗首选SMZco,当SMZco发生不良反应或者失败时可改用卡泊芬净治疗。     

肺孢子菌肺炎19例临床分析

目的回顾性分析首都医科大学附属北京朝阳医院住院肺孢子菌肺炎(pneumocystis pneumon ia,PCP)患者的临床表现,探讨导致PCP的高危因素与诊断治疗和预防措施。方法回顾分析2004年4月至2008年9月19例PCP患者的临床资料。结果26.3%(5/19)的PCP患者有获得性免疫缺陷综合征;73.4%(14/19)的病例患有基础疾病。19例患者中男性12例、女性7例,平均年龄41.53±9.22岁。起病急骤7例,起病缓慢12例。11例患者肺呼吸音正常或稍粗,6例患者肺底闻及局限湿啰音,2例患者肺底闻及爆裂音(考虑与肺纤维化有关)。胸部影像学主要表现为弥漫性网状阴影、片絮影、斑片影。7例患者痰或支气管肺泡灌洗液六胺银染色找到包囊,1例支气管镜肺活检(TBLB)六胺银染色找到包囊,7例患者痰或支气管肺泡灌洗液聚合酶链反应(PCR)阳性检出PC病原体的特异性基因片段和结合临床特征而诊断,其余4例为临床诊断。100%患者服用复方磺胺甲基异恶唑片(TMP-SMZco)和84.2%(16/19)患者合并肾上腺糖皮质激素治疗,14例存活,5例死亡,其中3例死于多脏器功能衰竭,2例死于急性呼吸窘迫综合征。结论随着HIV感染越来越多,现代医学技术的发展,如器官移植肿瘤放化疗及免疫抑制剂的应用等,PCP在临床上已不属于少见病。因其临床表现无明显特异性,病死率较高,应引起临床高度重视,尤其对高危人群应考虑使用预防性治疗。     

支气管镜肺活检在肺泡蛋白沉积症中的诊断价值

目的：评价支气管镜肺活检(transbronchial lung biopsy,TBLB)在肺泡蛋白沉积症(pulmonary alveolar proteinosis,PAP)中的诊断价值和限度。方法：对2006年6月至2012年12月在中南大学湘雅二医院住院、资料完整的 TBLB病理确诊和非TBLB诊断的PAP 25例及TBLB病理误诊为PAP 4例进行回顾性分析。结果：25例PAP患者中,14例 一次TBLB病理确诊[一次TBLB阳性率为56%(14/25)],一次TBLB阴性病例中6例再次TBLB确诊[二次TBLB阳性率为 24%(6/25)],总阳性率为80%(20/25),总阴性率为20%(5/25)。其中,5例经典型CT表现及支气管肺泡灌洗液检查确 诊,并经全肺灌洗证实;而同期TBLB病理检查将其他疾病误诊为PAP者4例。结论：TBLB是很好的诊断方法,但一 次TBLB阴性不能排除PAP,条件允许可重复进行;临床和CT表现典型结合肺泡灌洗液检查阳性可作为临床诊断依 据;不典型的病例需进行TBLB。     

肾移植术后并发卡氏肺孢子虫病活检的病理学研究

报告肾移植术后５例并发卡氏肺孢子虫肺炎。采用纤维支气管镜活检，分别对印片及组织进行银染和ＨＥ染色。病变为上皮细胞脱落，有时增生呈立方状；炎症反应；各种类型渗出物（包括泡沫状渗出物、泡沫细胞团及絮状蛋白渗出物）等３种改变。重点讨论了本病的组织病理学特征，并对不典型病变形成机理加以讨论。     

卡氏肺孢子虫小鼠动物模型的研究

目的：建立卡氏肺孢子虫小鼠动物模型。方法：昆明小鼠１６只，每次皮下注射醋酸可的松１～２ｍｇ，每周２次，诱发小鼠卡氏肺孢子虫肺炎模型。结果：用药５周肺印片即可检出卡氏肺孢子虫包囊，８周后大部分小鼠可检出，总检出率为６８．７５％。姬氏染色肺印片可查见成熟包囊、未成熟包囊，形态典型，是显示肺印片中包囊的可靠方法。ＧＭＳ染色是显示肺组织石蜡切片中包囊的可靠方法。结论：提示小鼠可能是建立卡氏肺孢子虫动物模型的理想动物     

老年气管切开患者罹患卡氏肺孢子虫肺炎的临床分析

目的提高临床对非人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者罹患卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)的认识。方法对5例长期住院的老年气管切开患者感染PCP的临床资料进行回顾性分析。结果5例患者平均90岁,有多种严重基础疾病,平均住院时间为548d,均反复发生肺部感染并因呼吸衰竭而开放气道,长期大量使用广谱抗生素,发病时均有发热(37.3～39.0°)及肺部感染的临床表现;X线胸片示肺内有纹理增加或新出现的浸润影;痰涂片找卡氏肺孢子虫(PC)及PCR查PC均阳性;乳酸脱氢酶(LDH)为91～489U/ml;血清HIV检测阴性;在应用原治疗的基础上加用复方磺胺甲恶唑(SMZco)治疗后有效,5例复查痰涂片找PC及PCR查PC均阴性;在治愈后1～6个月,2例又出现PCP。结论老年人伴有多种严重基础疾病,其机体免疫功能降低,长期反复使用广谱抗生素,气道开放,即使无HIV的感染,也有可能发生PCP。     

卡氏肺孢子虫肺炎大鼠炎症反应及肺损伤研究

为研究卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)大鼠炎症反应及肺损伤,通过皮下注射8～12周醋酸可的松免疫抑制诱导建立Sprague-Dawley大鼠PCP模型.将大鼠分为四组,Ⅰ组正常对照(n=6),为未用药的健康大鼠;Ⅱ组阴性对照(n=6),为无肺部感染的大鼠;Ⅲ组细菌性肺炎(n=11);Ⅳ组PCP(n=14).计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中的细胞数并行分类,测定总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)含量及碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)及Ⅳ型胶原酶(MMP-2、MMP-9)活性.比较PCP及细菌性肺炎其炎症反应及肺损伤的差别.PCP其BALF中细胞总数较阴性对照组增加(P《0.01),但低于细菌性肺炎组.PCP其BALF中白蛋白(622.5±484.0μg/ml)较阴性对照组增加(35.8±16.2 μg/ml,P《0.01).PCP其BALF中ALP及LDH活性(分别为217.0±81.4 U/L,20.8±8.2U/dl)也高于阴性对照组(P《0.01).PCP大鼠BALF中Ⅳ型胶原酶活性增加(P《0.001).PCP炎症发应不同于细菌性肺炎.在PCP,肺泡毛细血管膜通透性明显增加,存在明显肺损伤.     

地塞米松诱发大鼠卡氏肺孢子虫肺炎实验研究

目的 在地塞米松磷酸钠诱导下建立大鼠卡氏肺孢子虫肺炎的动物模型。方法 将40只雌性SD大鼠随机分为实验组和对照组,前者皮下注射地塞米松磷酸钠,1mg/次,2次/w;后者不做任何处理。观察两组大鼠的发病情况,并每隔3周两组各取5只动物进行病原学检查。结果 实验组大鼠第6周开始发病,肺印片、支气管肺泡灌洗液沉渣中查到卡氏肺孢子虫包囊及滋养体;对照组大鼠无异常表现,病原学检查阴性。结论 在地塞米松磷酸钠诱导下可成功建立大鼠卡氏肺孢子虫肺炎动物模型。     

瑞香素治疗大鼠肺孢子虫肺炎的实验研究

目的观察瑞香素对大鼠肺孢子虫肺炎(PCP)的治疗效果。方法皮下注射醋酸泼尼松龙建立PCP大鼠模型。将受试大鼠随机分为正常对照组(A)、未治疗对照组(B)、TMP-SMZ对照组(C)、瑞香素治疗组(D)和青蒿素对照组(E)5组。各组从第7周开始灌服相应药物5d,停药后观察1周,用肺质量/体质量比和肺组织虫荷量考核疗效。结果PCP大鼠6周内的病死率为16.7%;满6周者抽样进行病原、病理检查证实均已成功诱导PCP。A、B、C、D、E组受试大鼠的平均肺质量/体质量比分别为0.75、1.05、0.77、0.77和0.85,B~E4组受试大鼠肺组织虫荷量分别为1490、74、339和219个/mg。统计学分析显示,经瑞香素治疗的大鼠平均肺质量/体质量比、肺虫荷量均明显低于未治疗对照组(分别为P<0.05和P<0.01),效果虽不如TMP-SMZ,但与青蒿素疗效相似(P>0.05)。结论瑞香素对大鼠PCP有显著疗效,效果与青蒿素接近。